脑脊液蛋白质质谱在非小细胞肺癌脑转移诊断中的应用

目的本研究旨在分析非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移患者、非肿瘤患者和早期NSCLC无脑转移患者脑脊液的蛋白质谱,找出差异蛋白峰,建立NSCLC脑转移的蛋白质谱诊断模型。方法收集上述三组患者的脑脊液标本各29例、23例和10例,采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)进行检测,Biomarker Wizard软件统计分析三组样本的蛋白质峰,Biomarker patterns软件的决策树模型进行差异蛋白峰的比较和判别,建立分类决策树诊断模型,评价其诊断和应用价值。结果脑转移组与早期无脑转移组有5个显著差异性表达蛋白质峰,运用m/z8698.00、1215.32和1245.70蛋白质峰将两组样本分开,诊断模型的灵敏度100%(29/29),特异度为100%(10/10)。早期无脑转移组与非肿瘤组结果有5个显著差异性表达蛋白峰,应用m/z6050.00蛋白峰可以把无脑转移组和非肿瘤组分开,诊断模型的灵敏度为90.00%(9/10),特异度为78.26%(18/23)。结论采用SELDI技术可以发现三组患者的脑脊液存在显著差异表达蛋白质峰,利用这些差异蛋白质建立的蛋白质谱分类决策树状诊断模...     

联合磁性微球和基质辅助的激光解吸/离子化-飞行时间质谱筛选肾细胞癌血清差异蛋白

目的 采用联合磁性微球和基质辅助的激光解吸/离子化-飞行时间(MALDI-TOF-MS)技术筛选肾细胞癌患者血清差异蛋白峰.方法 采用弱阳离子磁性微球从99份血清标本(肾细胞癌62份,肾脏良性占位病变37份)捕获血清蛋白,MALDI-TOF-MS质谱仪检测蛋白峰,Biomarker Wizard 3.1和Biomarker Patterns Software 5.0分析数据,以47例肾细胞癌及26例肾脏良性占位病变标本建立肾细胞癌诊断模型,15例肾细胞癌和11例肾脏良性占位病变标本进行盲法验证.结果 发现7个蛋白峰具有统计学差异(P＜0.05),以质荷比2945.35、15340.8、6984.51、5819.23的4个蛋白峰建立肾细胞癌诊断模型,该模型区分肾细胞癌与肾脏良性占位病变的敏感性为83.0%,特异性为84.6%;盲法验证,该模型诊断肾细胞癌的敏感性为80.0%,特异性为81.8%.结论 采用磁性微球与MALDI-TOF-MS技术可以检测肾细胞癌血清中的差异蛋白峰,并建立敏感性、特异性较高的肾细胞癌诊断模型.     

血清蛋白指纹图谱检测对儿童支原体肺炎早期诊断的研究

目的 用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术和蛋白质芯片技术检测儿童支原体肺炎(MPP)和非MPP患者血清蛋白指纹图谱,探讨基于人工神经网络的的蛋白指纹图谱诊断模型对儿童MPP早期诊断的价值.方法 用SELDI-TOF-MS技术和蛋白质芯片技术测定2014年11月—2016年6月该院儿科住院的130例血清标本的蛋白指纹图谱,其中MPP 68例,非MPP 62例.将测定的血清蛋白指纹图谱建立人工神经网络预测模型,用随机抽取的75例标本(MPP 40例,非MPP 35例)作为训练组,进行训练与交叉验证,另外55例标本(MPP 28例,非MPP 27例)作为测试组,进行盲法验证该模型.结果 利用从75例训练组得出的基于人工神经网络的由M∕Z为4094.91、4650.51、5825.38、6031.77、7862.79、10122.04组成的MPP血清蛋白指纹图谱决策树诊断模型,对MPP诊断的敏感性95.00%(38∕40),特异性为88.57%(31∕35),阳性率为92.00%(69∕75),ROC曲线下面积为0.975,利用测试组的55例标本对模型进行验证,结果显示,对MPP诊断的敏感性89.29%(25∕28),特异性为96.30%(26∕27),阳性率为92.27%(51∕55).结论 该研究建立的支原体肺炎蛋白指纹图谱诊断模型对支原体肺炎的检测时间短,诊断准确率高,有助于诊断支原体肺炎.     

食管癌血清差异蛋白质组测定结果分析

目的 用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)寻找食管癌(EC)患者血清中差异蛋白质组,并建立诊断模型,为其广泛用于临床诊断积累数据资料.方法 用SELDI芯片检测食管癌及其相关人群的血清,Biomarker Wizard Software软件筛选出差异蛋白,选择具有显著差异的蛋白质组建立人工神经网络诊断模型,经盲法验证后使用SPSS软件分析各个差异蛋白以及联合人工神经网络技术后的诊断效率,并鉴定相关蛋白.结果 筛选出显著差异(P<0.01)的蛋白质组如下:在食管癌患者血清中表达增高蛋白组[(5 017.6±4.89)、(7 458.5±6.49)、(7 908.1±7.80)、(8 111±8.45)、(8 577±7.80)kD],表达降低蛋白组[(7 748.3±9.10)、(5 890.9±7.32)、(4 213.8±5.93)kD].差异蛋白质组建立食管癌人工神经网络筛查模型和诊断模型,其灵敏度和特异性超过90%,盲法验证的效果好;人工神经网络预测输出值构成的ROC曲线下面积分别为81.6%和82.1%,经查阅数据库鉴定发现两种蛋白质.结论 血清蛋白质谱指纹图结合人工神经网络技术进行蛋白质组学数据挖掘所建模型诊断价值较大,与临床诊断符合程度良好.     

血清蛋白质指纹图谱诊断模型在肾癌中的应用

目的 检测肾癌患者血清蛋白质,筛选特异的蛋白质标记物,构建用于肾癌早期诊断的血清蛋白质指纹图谱模型.方法 应用蛋白质芯片CM10及表面增强激光解吸/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术测定168例血清标本(其中肾癌53例,肾良性占位性病变47例,健康志愿者68例)的蛋白质质谱,用随机抽取的118例标本(肾癌38例,肾良性占位病变30例,健康志愿者50例)作为训练组,应用支持向量机进行训练和交叉验证,建立肾癌诊断模型;其余50例标本进行盲法验证.结果 利用质荷比分别为5350、4100、3446、5027和6115的5个蛋白峰建立区分肾癌和正常人的诊断模型,其敏感性为94.74%,特异性为92%.盲法验证显示敏感性为93.33%,特异性为88.89%.区分肾癌和肾良性占位病变的诊断模型,敏感性为92.11%,特异性为90%.区分透明细胞癌和其他病理类型的肾癌的诊断模型对透明细胞癌的判别率为92.84%,对其他病理类型的肾癌的判别率为81.82%.结论 表面增强激光解吸电离/飞行时间质谱技术结合支持向量机建立肾癌血清蛋白质指纹图谱模型对诊断肾癌具有较高的敏感性与特异性.     

应用血清蛋白质指纹谱鉴别结直肠癌与其他恶性肿瘤

目的 建立结直肠癌与其他恶性肿瘤的血清蛋白质指纹谱鉴别诊断模型.方法 收集血清标本235份,其中结直肠癌58例,乳腺癌、胃癌、食管癌、肝癌、肺癌及肾癌各15例,结直肠良性病30例及正常人57例组成建模组,应用表面增强激光解吸/电离飞行时间质谱检测其蛋白质指纹谱.用Biomarker Patterns软件分析结直肠癌与其他恶性肿瘤患者血清中的差异蛋白后,建立结直肠癌鉴别诊断最优分类树模型.再从同期住院或健康体检人群中随机抽取以上诸病种及正常人血清标本各10例组成测试组,盲法验证该模型对结直肠癌的鉴别诊断效能.结果 成功建立了由16种蛋白组成的结直肠癌鉴别诊断最优分类树模型.测试模式下对结直肠癌的鉴别诊断准确率83.8%.灵敏度和总特异性分别为86.2%和83.1%.盲法验证显示,预测总准确率为74.4%.结论 应用血清蛋白质指纹谱技术建立的结直肠癌与其他恶性肿瘤的鉴别诊断模型具有较高的敏感性与特异性,值得进一步研究.     

应用蛋白质指纹图谱建立炎性和非炎性早产诊断模型

目的 建立炎症早产和非炎症早产血清蛋白质组诊断模型.探讨应用蛋白质指纹技术进行早产的早期预警并区分炎症早产.方法 从2008至2010年在解放军第三○六医院住院分娩的产妇中挑选250例作为研究对象,根据人选条件和分娩后胎盘胎膜的病理结果,分5组每组50例:炎症早产组,非炎症早产组,盲法验证组和炎症足月产组;用正常足月产组做对照.各组标本50例,共250例.应用SELDI-TOF-MS蛋白质指纹技术和生物信息学方法,建立炎症和非炎症早产诊断模型并经过盲法验证和统计学分析;同时将炎症早产组和炎症足月产组建模所用差异蛋白进行比较分析.结果 炎症早产组与对照组质谱比较,得出36个差异蛋白,使用相对分子质量为1089、6635、2875、10 068、4405、4971、36 665、9713的标志蛋白建立模型.其特异度80.85％,敏感度84.44％,阳性预测值93.33％,阴性预测值46.67％;非炎症早产组共有15个差异蛋白,使用相对分子质量为3941、5808、6858、4289的标志蛋白建模,其特异性75.68％,敏感性64.44％,阳性预测值80.00％,阴性预测值66.67％.诊断炎症早产和诊断炎症足月产所用的模型比较得知,两者所用的差异蛋白完全不同.结论 应用血清蛋白质组诊断模型预测早产,能够将炎症早产和非炎症早产加以区分,具有指导个性化治疗的临床应用前景.炎症早产和炎症足月产的诊断模型完全不同,推测在妊娠的不同时期,绒毛膜羊膜炎所导致的相关蛋白质的表达不同.     

大肠癌SELDI—TOF—MS蛋白质组图谱的分析

目的:筛选并建立大肠癌血清蛋白质组图谱的诊断模型并探究其临床价值.方法: 将102例血清标本(大肠癌53例,正常对照49例)随机分成训练组75例,测试组27例.用CM10蛋白芯片及SELDI-TOF-MS技术对训练组75例血清标本(大肠癌37例,正常对照38例)进行蛋白质组图谱检测,经留一法交叉验证后建立诊断模型,并对测试组27例未知的血清进行血清蛋白质谱测定,盲法验证该模型.结果: 通过ZUCI-蛋白芯片数据分析系统软件包运算,用6个质荷比峰(3 951.147 3、4 364.486 5、5 926.628 6、8 103.635 6、8 964.429 9、11 709.016 8 m/z)建立了大肠癌蛋白质组图谱诊断模型,经过交叉验证其准确度96.00%,灵敏度94.59%,特异度97.37%,阳性预测值97.22%.经盲法验证该方法的检出率为81.25%,排除率为100%.结论: 本组建立的诊断模型可以有效区分大肠癌和非癌正常人,为大肠癌的诊断与筛查提供了一条崭新途径.     

99mTc-MIBI脑SPECT对脑胶质瘤的诊断价值

目的探讨~(99m)Tc-MIBI脑显像对脑胶质瘤的诊断价值。方法对59例脑胶质瘤患者、9例正常人、6例脑脓肿患者进行~(99m)Tc-MIBI脑SPECT显像。判断病灶有无异常摄取并根据感兴趣区(ROI)计算肿瘤/非肿瘤比值(T/NT),计算~(99m)Tc-MIBI脑显像对脑胶质瘤诊断的灵敏度、特异性、准确率。T/NT比值在胶质瘤、脑脓肿及正常组之间的比较采用t检验。结果59例脑胶质瘤患者中,51例显像为阳性,诊断灵敏度86.4%、特异性66.7%、准确率82.4%。15例非胶质瘤受检者有5例阳性。脑胶质瘤组T/NT比值为2.6±1.2,明显高于正常组的1.1±0.2(t=3.6199,P<0.001)和脑脓肿组的1.5±0.5(t=2.1327,P<0.05)。结论用~(99m)Tc-MIBI脑SPECT诊断脑胶质瘤灵敏度高,可以有效地鉴别良恶性病变。99m     

血清CA15-3检测在胶质瘤诊断中的价值

目的:探讨肿瘤标记物CA15-3(cancer antigen 15-3)在脑胶质瘤诊断中的价值。方法:采用双抗体夹心免疫酶联法(immunoenzymometric assay,IEMA)测定190名健康人、50例脑胶质瘤患者和25例颅内良性肿瘤患者血清中的CA15-3水平,并经秩和检验行统计学分析。结果:脑胶质瘤组血清CA15-3 水平高于健康对照组(u=6.2,P<0.01),且高度恶性脑胶质瘤组CA15-3水平明显高于低度恶性脑胶质瘤组(u=75.6,P<0.01),而颅内良性肿瘤组患者血清CA15-3水平与健康对照组无统计学差异(u=51.4,P> 0.05)。结论:血清CA15-3升高可作为早期诊断脑胶质瘤的重要参考指标,可用于脑胶质瘤与颅内良性肿瘤的鉴别诊断及脑胶质瘤恶性程度的判断。     

血清蛋白质组学在重症肌无力诊断中的应用

目的 应用血清蛋白质图谱分析,寻找有意义蛋白峰,建立重症肌无力(MG)的诊断模型,用于MG的诊断.方法 利用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)技术对56份MG患者术前血液标本和16份正常对照组血液标本进行蛋白质图谱分析,找寻出有差异蛋白峰.建立MG诊断模型并初步验证.结果 56例MG患者和16名正常对照蛋白质图谱分析中,能找到38个特异性差异蛋白峰.系统优化出M4168.94、M1122.57两个蛋白峰构建的MG诊断模型可将56例MG患者和16名正常对照进行正确分组.结论 用血清蛋白质图谱可筛选出与MG发病相关的蛋白峰,初步建立MG诊断模型,有望成为诊断MG的一种新方法.     

良性与恶性胆囊息肉样病变的计量鉴别

旨在建立胆囊息肉样病变（PLG）良恶性的鉴别方法．以提高PLG术前定性诊断的正确性。方法：对254例PLG的若干临床特征作分析．经数理统计处理．根据最大似然法的原理，建立PLG良恶性的计量鉴别法。结果：应用该法作回顾性与前瞻性验证，结果与病理检查的符合率分别达95．3％和97．1％，且全组无1例恶性PLG漏诊。结论：该法简便易行、快速可靠．可作为临床上PLG良恶性的一种鉴别方法。     

血清蛋白质质谱与支持向量机模型在胰腺癌检测上的应用

目的:为提高胰腺癌的早期检测率筛选新的标志物,应用蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术建立胰腺癌的血清蛋白质质谱模型。方法:用弱阳离子交换芯片(CM10)结合SELDI-TOF-MS技术检测了73例血清样本,其中31例胰腺癌,22例胰腺炎,20例健康人。用支持向量机方法建立胰腺癌和健康人以及胰腺癌和胰腺炎的辨别模型。结果:胰腺癌和健康人辨别模型用了3个蛋白质峰,辨别的敏感性和特异性均为100%,而胰腺癌和胰腺炎辨别模型用了5个蛋白质峰,辨别的特异性和敏感性分别为95.5%和93.5%。结论:SELDI-TOF-MS技术结合生物信息学方法检测胰腺癌具有较高的敏感性和特异性。     

血清CA125、HE4和哥本哈根指数在卵巢上皮性肿瘤良恶性鉴别诊断中的价值

目的 探讨基于治疗前血清CA125、HE4水平和年龄的哥本哈根指数在鉴别卵巢上皮性肿瘤良恶性中的应用价值.方法 回顾性分析2014年9月～2016年9月就诊于南方医科大学南方医院妇产科的208例卵巢上皮性肿瘤连续病例(良性108例+恶性100例),以手术病理诊断结果为金标准绘制ROC曲线,得出灵敏度和特异度,比较CA125、HE4、哥本哈根指数鉴别卵巢上皮性肿瘤良恶性的效能.结果 在总体人群、早期病例、晚期病例中,卵巢癌组CA125、HE4、哥本哈根指数预测值均高于良性肿瘤组,差异有统计学意义(P＜0.001);CA125、HE4、哥本哈根指数鉴别卵巢上皮性肿瘤良恶性的灵敏度依次是81.0％、86.0％、91.0％(总体人群),64.0％、68.0％、72.0％(早期病例),86.7％、92.0％、97.3％(晚期病例),特异度依次是88.0％、93.5％、96.3％.其中哥本哈根指数灵敏度、特异度均最高,HE4次之,CA125最低,两两相比,除在早期人群中的灵敏度外,余差异均有统计学意义(P＜0.001).结论 基于患者血清CA125、HE4值及年龄的哥本哈根指数较单独应用HE4或CA125具有更为良好的诊断效能,可用于卵巢上皮性肿瘤良恶性的鉴别诊断,提高卵巢癌早期诊断率.     

乙酰肝素酶和syndecan-1表达与脑胶质瘤恶性程度的关系

目的:检测脑胶质瘤组织中乙酰肝素酶和syndecan-1的表达水平,探讨它们和肿瘤级别的关系及作用机制。方法:采用荧光实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测乙酰肝素酶mRNA和syndecan-1 mRNA在40例脑胶质瘤组织和10例良性脑肿瘤组织中的表达水平,统计分析表达水平和肿瘤级别之间的关系。结果:在胶质瘤中,乙酰肝素酶的表达明显高于良性脑肿瘤(P<0.01),并且随着肿瘤的恶性程度增高,乙酰肝素酶的表达也明显增高(P<0.01),syndecan-1的表达明显低于良性脑肿瘤(P<0.01),并且随着肿瘤的恶性程度增高,syndecan-1的表达也明显降低(P<0.01)。乙酰肝素酶与syndecan-1在Ⅰ~Ⅱ级脑胶质瘤中表达均呈负相关关系(P<0.01),在Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤中表达均呈负相关关系(P<0.01),在各级胶质瘤中表达相关性的总体分析均显示负相关关系(P<0.01)。结论:乙酰肝素酶在脑胶质瘤组织中高表达,syndecan-1在脑胶质瘤中低表达,而且表达水平和恶性程度密切相关,它们的检测可以作为脑胶质瘤恶性程度判断的参考,为探讨脑胶质瘤的生物学行为、预后及治疗提供新的思路。     

11C-methionine and 18F-fluorodeoxyglucose positron emission tomography/CT in the evaluation of patients with suspected primary and residual/recurrent gliomas

Background  ¹⁸F-fluorodeoxyglucose (FDG) is the most widely used radiotracer in tumor imaging, but its use for brain gliomas and recurrence is limited by the high ¹⁸F-FDG uptake in normal brain tissue. ¹¹C-methionine (MET) has low uptake in the normal brain tissue, providing potential advantages over ¹⁸F-FDG. The aim of the study was to investigate the diagnostic value of ¹¹C-MET compared to ¹⁸F-FDG positron emission tomography and computed tomography (PET/CT) in patients with suspected primary and residual/recurrent gliomas.

Methods  Eighty paired PET/CT scans using ¹¹C-MET and ¹⁸F-FDG were performed on 44 newly diagnosed patients with suspected gliomas and 36 post-operative patients with suspected residual/recurrent tumors. PET/CT results were evaluated by visual and semiquantitative analysis. The sensitivity, specificity and accuracy for detection of gliomas and residual/recurrent tumors were calculated using visual analysis. Tumor to contralateral normal gray matter (T/G) ratio was calculated for semiquantitative analysis.

Results  Final pathology of the 44 newly diagnosed patients included 26 gliomas (14 high-grade and 12 low-grade tumors) and 18 non-glioma benign lesions. Residual/recurrent gliomas were verified in 28 patients and excluded in 8/36 post-operative patients by subsequent histopathologic examination and/or clinical follow-up for more than six months. The sensitivity, specificity and accuracy of ¹¹C-MET PET/CT were 88.5%, 83.3% and 86.4% for gliomas and 96.4%, 87.5% and 94.4% for residual/recurrent gliomas, respectively. The sensitivity, specificity and accuracy of ¹⁸F-FDG PET/CT were 50.0%, 88.9% and 65.9% for gliomas and 46.4%, 100.0% and 58.3% for residual/recurrent gliomas, respectively. ¹¹C-MET had a higher sensitivity than ¹⁸F-FDG (83.3% vs. 33.3%, P=0.031) in low-grade gliomas, but had no significant difference in sensitivity from ¹⁸F-FDG for high-grade gliomas (92.9% vs. 64.3%, P=0.219). ¹¹C-MET T/G uptake ratios in high-grade gliomas, low-grade gliomas and benign lesions were 1.94±0.53, 1.78±0.61 and 1.06±0.34, respectively. ¹⁸F-FDG T/G uptake ratios in high-grade gliomas, low-grade gliomas and benign lesions were 1.05±0.37, 0.66±0.14 and 0.63±0.17, respectively.

Conclusions  ¹¹C-MET PET/CT is superior to ¹⁸F-FDG PET/CT in detecting and delineating gliomas and residual/recurrent tumors, especially low-grade gliomas and residual/recurrent lesions present in gray matter, but its role in non-invasive grading of the tumors is limited.

     

应用表面加强激光解吸电离飞行时间质谱方法检测喉鳞状细胞癌及淋巴结转移的血清蛋白质标志物

目的 应用表面加强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）方法筛选喉鳞癌（LSCC）血清蛋白质标志物,建立喉癌诊断预测模型。并检测喉癌淋巴结转移相关的血清蛋白标志物。方法收集252例血清标本,其中喉癌患者血清142例,正常对照110例。其中89例喉癌血清,30例有淋巴结转移的喉癌血清和65例正常对照为试验组,53例喉癌血清及45例正常对照为盲法验证组。应用弱阳离子交换芯片（WCX2）经SELDI-TOF-MS测定得到蛋白质谱,通过Biomarker Wizard和Biomarker Pattern（BIaS）软件分析喉癌和正常人血清的蛋白质谱差异,建立喉癌诊断预测模型并进行盲法验证。寻找喉癌转移相关蛋白标志物。结果 在质荷比（M／Z）2000～50000范围内,弱阳离子（WCX2）芯片共检测出18个差异蛋白峰,可以鉴别喉癌和正常对照。BIaS自动选用其中一个差异蛋白质峰（4176）建立决策树模型,灵敏性为86．52％,特异性为84．62％（32／36）。盲法验证的灵敏性为84．91％,特异性为82．22％。伴或不伴淋巴结转移的喉癌患者之间检测到14个差异蛋白峰。结论应用SELDI-TOF-MS方法可以从血清中筛选出喉癌及淋巴结转移相关的标志蛋白。建立的喉癌诊断预测模型可能对早期发现早期诊断喉癌具有重要的临床意义。     

99mTc(v)-DMS SPECT平面显像对卵巢癌诊断价值的研究

目的 探讨锝标记二巯基丁二酸钠（＾９９ｍＴｃ（ｖ）－ＤＭＳ）单光子发射计算机断层（ＳＰＥＣＴ）平面显像对卵巢癌的诊断价值。方法对３７例颖为卵巢癌的患者,静脉１次注射＾９９ｍＴｃ（ｖ）－ＤＭＳ,然后进行ＳＰＥＣＴ平面显像,观察病灶区放射性浓聚情况,并计算Ｔ／Ｂ比值,同时与手术病理结果对比。结果 ＳＰＥＣＴ平面显像对卵巢癌诊断的灵敏度、特异度和准确度分别是９１．３％、７１．４％和８３．８％;卵巢癌Ｔ／     

乳腺肿块的高频彩超征像与触诊径值的相关性研究

目的探讨乳腺肿块的高频彩超表现及与触诊径值之间的相关性在评判良恶性病变中的价值。方法回顾资料完整的79个乳腺肿块(良性46,恶性33)的高频彩超特征,并分析比较二维测值与触诊径值之间的差异程度在良恶性乳腺病变中的不同。结果乳腺良恶性病变不仅边界、形态、后方衰减、血流信号分级和阻力指数存在明显差异,触诊径值与二维测值之间的差异程度在良恶性组之间也有统计学意义(P0.05)。结论触诊径值大于二维测值是乳腺恶性病变的另一重要特征,与高频彩超结合有助于乳腺良恶性病变的鉴别。