可移植性小鼠组织细胞肉瘤侵袭与转移模型的建立

将小鼠可移植性组织细胞肉瘤ＬⅡ分别接种在近交系６１５小鼠的胁部皮下、后肢肌肉和爪垫皮下组织内，取全肺和各部位淋巴结进行组织学检查，观察肿瘤自发转移率及转移程度。胁部皮下与后肢肌肉移植组待荷瘤小鼠自然死亡，平均存活时间分别为３９．３、２７．９ｄ，淋巴结转移率分别为９５．７％和１００％，肺转移率均为１００％。爪垫皮下移植组在肿瘤接种后１、３、５、１０、２０、３０和４０ｄ处死荷瘤小鼠，早期淋巴结转移出现在肿瘤接种后第１０天，至第３０天时形成肺转移瘤。局部侵袭达Ⅲ～Ⅳ级时才发生肿瘤转移，肺转移出现时间晚于淋巴转移。结果表明，ＬⅡ瘤株具有淋巴道合并血道转移的特性，是研究肿瘤侵袭和转移的理想实验肿瘤模型。     

L_Ⅱ瘤细胞爪垫皮下移植后侵袭和转移关系的动态观察

本实验用小鼠可移植性组织细胞型淋巴瘤ＬⅡ接种于近交系６１５小鼠右后爪垫皮下，按肿瘤生长过程和宿主荷瘤时间分期分批处死动物，用组织学方法将肿瘤生长和发展过程分为潜伏期、侵袭期和转移期，以了解侵袭和转移之间的关系．动态观察发现，肿瘤移植后的第３天，移植局部侵表达Ⅱ级；第５天达Ⅲ级，第１０天达Ⅳ级，并出现引流淋巴结肿瘤转移；第３０天则出现肺转移，此时局部侵袭和淋巴结转移都已达Ⅳ级。本实验结果证实，肿瘤的局部侵袭程度与肿瘤转移发生的时间、转移程度之间存在一定的联系。该结果对肿瘤侵袭和转移机理的研究有一定的意义。     

小鼠可移植性瘤株前胃癌爪垫皮下移植后侵袭程度和转移间关系的观察(论著摘要)

利用本组建立的可移植性瘤株小鼠前胃癌(FC)母系第139代,在近交系615小鼠爪垫皮下移植后,于4个不同间隔时间观察瘤细胞在局部侵袭及在肺和淋巴结内转移的情况.实验用近交系615小鼠32只,每只小鼠于右后肢爪垫皮下接种7.5×10~5个瘤细胞.实验分为4组,每组8只小鼠,分别于移植后第3、6,10和13 d分批处死动物,于小鼠肺、淋巴结及荷瘤后下肢取材,石蜡包埋.切片,HE染色,进行组织学观察.观察结果:移植后3d组,皮下肿瘤侵袭均为Ⅰ级(8/8),癌细胞开始增殖并向周围侵袭,间有核分     

小鼠网织细胞肉瘤L_Ⅱ移植到近交系小鼠后生长特性和转移规律观察

小鼠网织细胞肉瘤L_(11)1964年在远交群昆明(km)小鼠建株后,已传代和冻存近30年。本实验将L_(11)实体瘤分别移植到近交系615小鼠皮下和腹腔内,接种成活率为100％,无自发消退现象,肿瘤的组织学结构和细胞形态仍保持了原L_(11)瘤株的特点,其生长特征为:(1)皮下移植组:荷瘤小鼠寿命21～63d,平均寿命39.3d,中间存活时间39d;淋巴道转移率为95.7％,肺转移率为60.9％,肿瘤移植后21d首先出现肺转移,最早于第28d发现淋巴结转移。(2)腹腔内移植组:荷瘤小鼠寿命9～15d,平均寿命13.1d,中间存活时间13d,有2只动物出现肺转移,但未见到浅表淋巴结转移。     

H5N1禽流感病毒感染小鼠和两种灵长类动物的肺组织病理学比较

目的 采用体内综合筛选的方法 建立B16黑色素瘤小鼠高转移模型和相应细胞系,为系统性研究肿瘤转移机制和临床肿瘤治疗提供动物模型.方法 首先将小鼠黑色素瘤B16移植于T、B、NK免疫细胞缺陷的BNX小鼠皮下,通过皮下移植→肺转移→皮下移植→肺转移的体内循环筛选方法 筛选.在前三代筛选过程中,肿瘤直径达1.5 cm时切除皮下瘤,延长小鼠寿命以获得明显肺转移灶.在后三代体内筛选过程中,待小鼠自然濒死时,剖解获得肺转移灶.共通过体内筛选的方法 筛选六代,建立高转移细胞系.同时进行肿瘤的生长和转移情况观察、病理组织学、细胞生长曲线测定、流式细胞术分析、染色体分析和细胞侵袭基底膜实验.结果 BNX小鼠切瘤筛选3代后肺转移率达80%,转移程度达 ,转移天数平均达 45 d.直接皮下筛选第一代转移程度和转移率有所下降,但三代后,转移率也达到91.7% (11/12),转移程度也达到 ,转移天数缩短至35 d.病理组织学、细胞生长曲线、流式细胞术和染色体分析等结果 表明与黑色素瘤生物学特性相似.结论 本研究建立了一个肺转移率高、转移特性稳定、直观性好、操作简便的小鼠黑色素瘤B16自发高转移模型及相应的细胞系,为探讨肿瘤转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的动物模型.     

黑色素瘤小鼠高转移模型体内筛选和细胞的建立

目的 采用体内综合筛选的方法 建立B16黑色素瘤小鼠高转移模型和相应细胞系,为系统性研究肿瘤转移机制和临床肿瘤治疗提供动物模型.方法 首先将小鼠黑色素瘤B16移植于T、B、NK免疫细胞缺陷的BNX小鼠皮下,通过皮下移植→肺转移→皮下移植→肺转移的体内循环筛选方法 筛选.在前三代筛选过程中,肿瘤直径达1.5 cm时切除皮下瘤,延长小鼠寿命以获得明显肺转移灶.在后三代体内筛选过程中,待小鼠自然濒死时,剖解获得肺转移灶.共通过体内筛选的方法 筛选六代,建立高转移细胞系.同时进行肿瘤的生长和转移情况观察、病理组织学、细胞生长曲线测定、流式细胞术分析、染色体分析和细胞侵袭基底膜实验.结果 BNX小鼠切瘤筛选3代后肺转移率达80%,转移程度达 ,转移天数平均达 45 d.直接皮下筛选第一代转移程度和转移率有所下降,但三代后,转移率也达到91.7% (11/12),转移程度也达到 ,转移天数缩短至35 d.病理组织学、细胞生长曲线、流式细胞术和染色体分析等结果 表明与黑色素瘤生物学特性相似.结论 本研究建立了一个肺转移率高、转移特性稳定、直观性好、操作简便的小鼠黑色素瘤B16自发高转移模型及相应的细胞系,为探讨肿瘤转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的动物模型.     

放射性32P-磷酸铬胶体治疗H22移植瘤的实验研究

目的：探讨不同剂量的^32P-磷酸铬(Cr^32PO4)胶体局部注射对小鼠H22移植瘤和区域淋巴结转移灶的治疗作用。方法：建立小鼠H22移植瘤模型14d后分别给予高、中、低剂量的Cr^32PO4胶体瘤体局部注射，观察Cr^32PO4胶体的治疗作用及对肿瘤组织和细胞的形态学影响。结果：不同剂量Cr^32PO4胶体注射后瘤体局部依次出现红肿、表面苍白、囊性变，水肿消退后爪垫坏死。光镜下瘤体癌细胞呈多边形，大小不一，核大，可见病理分裂像并侵袭达肌层，同侧腘窝和腹股沟淋巴结均出现淋巴结结构破坏，呈现大量癌细胞浸润。治疗早期瘤体和腘窝淋巴结转移灶呈现局灶性坏死，后期移植瘤和淋巴结转移灶肿瘤组织完全坏死，结构破坏，并可见出血灶。电镜下，治疗早期淋巴结转移灶和瘤体中癌细胞线粒体空化，内质网和细胞器少见。治疗后期细胞结构消失，呈现大量细胞碎片、脂肪滴和空泡。结论：Cr^32PO4胶体局部给药对肿瘤组织和邻近的淋巴结转移灶具有明显的杀伤作用。     

一株伴有自发肺、肝转移的BALB/c小鼠可移植性乳腺癌(MA-901)动物模型(简报)

本模型用本所发现的BALB/c小鼠自发性乳腺癌作瘤源,同源小鼠作宿主,连续皮下移植传代,目前已达21代.从移植第1代起,即出现自发肺、肝转移,其转移比数为3/3.移植第9代的连续动态病理切片观察表明,移植后11d即可见肺转移,而肝转移多发生在20d左右,30d以后肺、肝转移率均理高达100％.该肿瘤以血道转移为主;亦可见淋巴转移,92例中3例伴有淋巴转移.此外,移植肿瘤后第11天开始,宿主脾脏出现进行性肿大,巨脾症是本模型的重要特征之一.     

615小鼠可移植性乳癌Ca761不同途径转移能力初步探讨

本文将第215代Ca761脚掌移植的同一小鼠所产生的腘窝或腹股沟淋巴结与肺转移瘤分别移植于两组健康小鼠脚掌,同时取第215代Ca761腋部皮下移植的肺转移瘤移植于第三组健康小鼠,如此循环5代以上,获得Ca761-FL、Ca761-FP、Ca76l-AP三个亚株。对照实验表明:淋巴结转移率,Ca761-FL高于Ca761-FP。肺转移率,Ca761-FP高于Ca761-FL。结果显示Ca761肿瘤细胞向淋巴道与血道转移途径的选择与瘤细胞本身生物学性质有关。此外,Ca761-AP_7脚掌移植组淋巴结转移高于Ca761-AP_7腋下移植组,提示移植部位对转移途径的选择有影响。本实验早期及晚期带瘤小鼠的肺和淋巴结转移灶可同时或单独出现,提示瘤细胞可自移植部位分别进入淋巴道或血道。转移早期,肺转移为肺泡间隔型和胸膜下型的微小病灶;晚期,肺泡间隔型和胸膜下型的病灶增大,并出现支气管肺动脉支周围转移灶。提示经血道到肺的转移瘤也可穿出肺泡壁毛细血管进入淋巴循环。     

小鼠Lewis肺癌原位模型的建立

目的 利用Matrigel与Lewis制备细胞混悬液注射于小鼠左肺内,建立小鼠Lewis肺癌原位模型,评价其肿瘤生长情况、转移情况,以期建立更稳定、更接近于人肺癌生长情况的小鼠肺癌原位模型。方法 将处于对数生长期的Lewis肺癌细胞混悬于Matrigel中,接种于C57BL/6近交系小鼠左肺内。分别于第4,7,10,13,16天各处死5只小鼠,观察其局部成瘤率、肿瘤生长情况、中位生存期及肿瘤转移情况,并对各阶段小鼠行肺部,肝脏,肾脏,脾脏病理切片检查。结果 术后第7天解剖的5只小鼠中,3只小鼠肺上可见小的瘤结节形成,其余2只肺上未见肉眼成瘤,行病理HE染色检查在显微镜下可见2只小鼠肺脏有小的瘤结节形成。术后第10天以后处死的所有小鼠肺上均有肉眼成瘤,术后第13天,所有小鼠肺原位成瘤并伴有血性胸腔积液、胸腔内转移。术后第25天,有1只小鼠出现上述转移的同时还出现了心包膜转移及肾脏远处转移。5只小鼠生存期分别为17d、20d、22d、22d、25d,小鼠中位生存期为21.2d（17-25d）。成瘤率100%。结论 利用Matrigel法成功建立小鼠Lewis肺癌原位模型,稳定性好,成瘤率高,并具有远处转移的特性,更接近于人肺癌的发生、发展过程,故此方法有进一步推广的价值。     

津白Ⅱ小鼠自发乳癌（ⅥTA_2MA－891）高自发肺转移模型

本模型获自我组１只３４８日龄雌性津白Ⅱ小鼠右侧第五乳腺处一肿物。病理切片检查为乳腺腺癌，属于Ｄｕｎｎ（１９５９）分类之Ｂ型。用本组同源小鼠（ｉｓｏｇｅｎｅｉｃｍｉｃｅ）皮下移植已传到２７代。连续皮下移植成瘤率为１００％，未见自然消退；潜伏期４～７ｄ；肺转移瘤结多发而密集；最早转移时间，肉眼观察为接种后第３５天，镜检为第１０天。肺自发转移率，１１～２０代为１００％。皮下移植瘤、肺转移瘤之病理组织结构及其癌细胞形态与其原发瘤近似。带瘤鼠濒死时其皮下移植瘤体积平均值为４．９３ｃｍ３。７种抗癌药对皮下移植瘤抑制率，氟尿嘧啶为２９．７５％（Ｐ＜０．０５）、塞替派为４４．８８％（Ｐ＜０．０１）、环磷酰胺９５．３１％（Ｐ＜０．０１）、平阳霉素９６．７５％（Ｐ＜０．０１），其它三药抑制率均不足３０％。对肺转移瘤抑制率，平阳霉素为４２．５４％（Ｐ＜０．０１），余不足３０％。     

癌细胞侵袭和淋巴道转移过程中血液变学的观察

Mouse transplantable hepatoma (H22) was used as an experimental model for lymphatic metastasis. The tumor cells were transplanted subcutaneously into right footpads of inbred 615-strain mice. The hemorheological changes during invasion and lymphatic metastasis in mice were observed. The results of histological examination showed that tumor invasion was divided into early, middle and late invasive stages, and the metastasis was divided into early, middle, late and final metastasis periods. Tumor invasion began 3 days after tumor transplantation, and the late stage of invasion was found at 9 days. Metastasis began 6 days after transplantation; at 19 days metastasis to lymph nodes in the right side reached grade IV. Metastasis to lymph nodes in the left side appeared 14 days after tumor transplantation. In the early and middle invasive stages only plasma viscosity increased significantly, while other hemorheological values were unchanged. The blood viscosity and aggregation of red blood cells decreased significantly after the metastatic late stage. The hematocrit of red blood cells began to decrease in the final stage of metastasis, and in the meantime, the rigidity of red blood cells began to increase, while plasma viscosity showed no changes after the late metastatic stage. The results and mechanism of hemorheological changes are discussed.     

银耳孢糖增强肿瘤辐射效应的初步探讨

荷S_(180)肉瘤小鼠腹膜腔内注射银耳孢糖(TSP)200mg/kg·d×/d。在第3、5和7天注药后40分钟干荷瘤局部照射X射线5Gy。TSP和照射都能明显抑制肿瘤生长;二者合用的抑瘤率在停药后1、5、10天比照射组提高50.00％、32.52％、6.54%。TSP能提高荷瘤小鼠特別是受照鼠的脾重、脾有核细胞数和胸腺细胞~3H-TdR自发掺入率,并拮抗受照后NK细胞活性的下降。     

小鼠肝癌移植瘤及其淋巴管的研究

目的为探讨癌细胞淋巴道转移的机制,观察小鼠肝癌移植瘤淋巴管Podoplanin免疫组化及酶组化表达。方法取(H22)肝癌细胞株,接种于小鼠腹股沟部皮下,第20 d后处死动物,取肿瘤及瘤周组织。应用5’-核苷酸酶(5’-Nase)和碱性磷酸酶(ALPase)双重染色及podoplanin免疫组化染色法,观察肿瘤及瘤周组织淋巴管的分布。结果动物模型在接种20 d时可见明显肿块;癌周边区可见较多棕色的毛细淋巴管和淋巴管。淋巴管腔较大且饱满,管壁薄,形态不规则。结论移植瘤周边区淋巴管增多,推测癌细胞淋巴道转移与癌周淋巴管的密度和扩张相关。     

小鼠子宫颈癌转移模型及形态学研究

小鼠子宫颈癌(U_(14))移植于成年鼠。新生鼠的背部及爪垫皮下、腹腔。分别于第12h～38d处死行组织学及电镜检查。结果:(1)新生鼠皮下组在移植后第12h已见淋巴管中癌细胞栓,第42h肺泡壁毛细血管中见癌细胞栓,第2～3d肺组织已见明显的癌转移。提示新生鼠皮下移植是癌转移最迅速的动物模型。(2)癌在新生鼠皮下组织侵袭过程中未见明显潜伏期。(3)宿主年龄是癌浸润与转移的重要因素。(4)针吸细胞学检查对腹水癌病例并不安全。     

皮下S180移植肉瘤组织淋巴管的形态学观察

目的 观察S180小鼠皮下移植瘤组织淋巴管的形态学改变,为进一步研究肿瘤淋巴管转移机制提供形态学依据.方法 将小鼠S180腹水型瘤细胞接种于昆明小鼠左腋部皮下,20天后切取肿瘤及瘤周组织和对侧正常皮肤,分别用HE染色确认肿瘤,半薄切片筛选淋巴管并观察,超薄切片透射电镜观察淋巴管形态.结果 2周以上小鼠腋部可见明显肿块,致癌率达100%.移植瘤中心区液化坏死,无毛细淋巴管.周边区淋巴管检出率明显高于正常侧且管腔大,形态不规则,管壁薄.内皮细胞肿胀,高尔基体、粗面内质网及溶酶体等细胞器的形态有改变.结论 S180移植肉瘤中心区无淋巴管,瘤周边区淋巴管密度增多,管腔扩张,形态不规则,伴有内皮细胞损伤.     

人肾上腺皮质癌裸鼠腹腔种植转移模型的建立及意义

目的：建立人肾上腺皮质癌裸鼠腹腔种植转移模型并探讨其生物学特性。方法：将1×10^6/mL体外培养的人肾上腺皮质癌SW-13细胞悬液接种于10只裸鼠腹腔内,分别于接种后第2、3周随机处死3只裸鼠,余下裸鼠于第4周全部处死取材。动态观察裸鼠体内成瘤及组织浸润转移情况,对肿瘤组织和可疑转移脏器进行病理形态学观察及免疫组化检测Ki67的表达。结果：10只裸鼠接种第8天于接种部位成瘤率100%,接种后3、4周裸鼠腹腔内均可见到转移瘤结节,以肠系膜最为显著,转移率均为100%,第4周时可见到2只裸鼠肾转移,1只裸鼠胰腺转移。镜下发现受侵犯的肠系膜淋巴结大部分被破坏,受累的肾、胰腺组织有明显肿瘤细胞浸润。SW-13细胞在体内外均高表达Ki67。结论：成功构建人肾上腺皮质癌裸鼠腹腔种植转移模型,为深入研究肾上腺皮质癌浸润转移机制及防治研究提供较为理想的动物模型。     

Relationship between invasion and metastasis of tumor cells.

This work was done to examine the relationship between invasion and metastasis of different types of tumor cells. Three kinds of tumor cells were studied: a mouse uterine cervix carcinoma (U14) with high metastatic potential; a human nasopharyngeal carcinoma (CNE-2Z) with high metastatic potential; and a human uterine cervix carcinoma (CC801) with low metastatic potential. CNE-2Z and CC801 were implanted subcutaneously in the footpads and subcapsularly in the testes of nude mice, respectively. U14 was implanted both in the footpads and subcapsularly in the testes of inbred 615-strain mice. With each of these animal models, the extent of tumor invasion could be divided into grades I-IV. The metastasis of tumor cells was found to depend upon: 1) the malignant characteristics of the tumor cells; 2) the degree of local invasion; 3) the presence of tumor cells in the lymphatic ducts and blood vessels; and 4) the organ specificity of metastatic development. Metastasis was most often found when invasion reached a high degree (grades III to IV).     

宫颈癌淋巴道转移模型的建立及Prox-1临床意义初探

目的 建立小鼠宫颈癌淋巴道转移模型,初步探讨Prox-1的临床意义.方法 将宫颈癌U27瘤株的单细胞悬液注入小鼠左爪垫,观察成瘤率、肿瘤生长及淋巴结转移情况.应用HE染色及CK免疫组化检测各级淋巴结中有无肿瘤转移;应用荧光定量PCR和Western blot检测肿瘤组织中VEGFR-3和Pmx-1在mRNA及蛋白水平的表达情况.结果 爪垫种植后成瘤率100%;淋巴结转移程度与接种时间显著相关;荧光定量PCR和Western blot结果显示,肿瘤组织中Prox-1 mRNA和蛋白在远处淋巴结转移组[(0.000 173±0.000 085),(0.108 7±0.049 9)]明显高于前哨淋巴结转移组[(0.000 058±0.000 022),(0.012 0±0.005 7)]及无淋巴结转移组[(0.000027±0.000 010),(0.003 8±0.001 4)],3组两两比较差异有统计学意义(P<0.05),而VEGFR-3的mRNA和蛋白在前哨淋巴结组分别为(0.000 147±0.000 066)和(0.123 6±0.054 8),与远处淋巴结转移组[(0.000 224±0.000 100),(0.160 7±0.075 3)]及无淋巴结转移组[(0.000 134±0.000044),(0.082 4±0.043 2)]比较均无显著性差异(P>0.05).结论 小鼠爪垫皮下注射可成功建立宫颈癌淋巴道转移模型;Prox-1是预测肿瘤淋巴结转移及抗肿瘤淋巴转移的敏感指标.