哮喘中外周血单个核细胞白细胞介素5表达及意义研究

该文研究了哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞（ＥＯＳ）在外周血及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的变化,用ＲＴ－ＰＣＲ半定量测定了外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及支气管组织白细胞介素５（ＩＬ－５）ｍＲＮＡ表达量。结晶显示哮喘豚鼠ＥＯＳ及ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达量均较对照组及地塞米松干预组显著升高,ＰＢＭＣ中ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达量与支这组织ＩＬ－５表达及外周血ＥＯＳ计数成正相关。提示哮喘豚鼠ＰＢＭＣ、ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达     

中药咳喘落对哮喘大鼠肺组织白细胞介素-4,5mRNA影响及相关性研究

目的探讨中药咳喘落拮抗支气管哮喘气道变应性炎症作用的分子机理。方法采用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法半定量地分析了哮喘大鼠肺组织 ＩＬ－４ ｍＲＮＡ和 ＩＬ－５ ｍＲＮＡ表达水平的变化及二者的相关性。结果哮喘时大鼠肺组织中 ＩＬ－４ ｍＲＮＡ与 ＩＬ－５ ｍＲＮＡ表达均增强,其相对表达量分别为 ０．４４２±０．０５２和０．６００±０．２２０,显著高于空白对照组（Ｐ＜０．０１）,经大剂量咳喘落治疗后,其表达同时显著降低（Ｐ＜０．０１）,治疗前后ＩＬ－４ｍＲＮＡ和ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达水平分别呈显著正相关（ｒ＝０．７７２,０．８６８,Ｐ＜０．０１）。但小剂量咳喘落只对ＩＬ－４ｍＲＮＡ有下调作用（Ｐ＜０．０５）。结论咳喘落能够同时降低哮喘大鼠肺组织中ＩＬ－４和ＩＬ－５基因转录,减少其生物合成,进而抑制嗜酸性粒细胞的聚集、活化,发挥其抗气道炎症的作用。     

地塞米松和环孢菌素A对IL-4、IL-5合成的抑制作用

为研究淋巴细胞在哮喘发病中的作用及地塞米松（Ｄｅｘ）、环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）治疗哮喘的机理,用ＥＬＩＳＡ法检测哮喘患者和对照组的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）在植物血凝素刺激下合成白细胞介素４（ＩＬ－４）、白细胞介素５（ＩＬ－５）水平,以及Ｄｅｘ和ＣｓＡ对哮喘患者的ＰＢＭＣ合成ＩＬ－４、ＩＬ－５的抑制作用。结果表明,哮喘组的ＩＬ－４、ＩＬ－５水平较对照组高（Ｐ＜０．０５）;１０－６ｍｏｌ／Ｌ的Ｄｅｘ和ＣｓＡ均能抑制哮喘组ＰＢＭＣ合成ＩＬ－４、ＩＬ－５,增大药物浓度至２×１０－６、３×１０－６ｍｏｌ／Ｌ时,ＣｓＡ对ＩＬ－５合成的抑制作用逐步增强;Ｄｅｘ对ＩＬ－５合成的抑制作用较ＣｓＡ强（Ｐ＜０．０５）。提示糖皮质激素和ＣｓＡ抑制ＩＬ－４、ＩＬ－５的合成是其治疗哮喘的机理之一。     

IL—1α,IL—1β基因mRNA表面与肺癌阴虚证的研究

本文以肺癌手术后肺组织标本为材料，用ＲＴ－ＰＣＲ为实验方法，初步观察了肺癌病人肺组织中ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－１Ｒａ基因ｍＲＮＡ表达与阴虚证之间的关系。选择２１例肺癌病人为对象，分为肺癌无阴虚组和肺癌阴虚组。结果表明肺癌阴虚组肺组织ＩＬ－１β基因ｍＲＮＡ表达水平有高于肺癌无阴虚组的趋势，但差异无统计学意义（Ｐ〉０．０５）；肺癌阴虚组肺组织ＩＬ－１β／ＩＬ－Ｒａ基因ｍＲＮＡ表达水平比值高于肺癌     

哮喘大鼠肺泡灌洗液中IL—5和PLA2的变化与支气管上皮IC …

目的：探讨白细胞介素－５（ＩＬ－５）、磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）及细胞间粘附分子（ＩＣＡＭ－１）在哮喘气道炎症细胞浸润中的作用及其相互关系。方法：采用卵蛋白等致敏大鼠哮喘模型,观察支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＩＬ－５、ＰＬＡ２含量的变化,以及二者与ＩＣＡＭ－１表达之间的关系。结果：与对照组比哮喘组ＢＡＬＦ中ＩＬ－５含量和ＰＬＡ２活性显著增高,尤其是ＩＬ－５增高更显著;支气管上皮细胞ＩＣＡＭ－１的表达     

脐血单个核细胞IL—12和IFN—γ表达的观察

本文探讨新生和脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）白细胞介素１２（ＩＬ－１２）和γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）基因表达水平；观察重组ＩＬ－１２地ＣＢＭＣＩＦＮγ基因表达的影响。采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ＿ＰＣＲ）测定８例新生儿ＣＢＭＣＩＬ－１２ｐ４９ＲＮＡ和ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达，用ＥＬＩＳＡ法测新一儿ＣＢＭＣ细胞培养上清液中ＩＦＮ－γ浓度。结果显示：新生儿ＣＢＭＣ一外受刺激后表达的Ｉ国２ｐ４０ｍＲＮＡ、Ｉ     

益喘平口服抑制卵蛋白致敏小鼠肺组织IL-4与IL-5的表达

通过原位杂交技术测定了卵蛋白［ＯＶＡ Ａｌ（ＯＨ）３］致敏Ｃ５７ＢＬ／６小鼠肺组织中ＩＬ ４、ＩＬ ５的表达，探讨中药益喘平治疗变态反应和哮喘的机理。结果：益喘平组的ＩＬ ４ｍＲＮＡ＋、ＩＬ ５ｍＲＮＡ＋细胞数（２９．２±７．１及３９．１±１０．５）均明显低于卵蛋白激发组（４６．４±８．９及６４．８±１３．７，Ｐ均＜０．０１）。提示益喘平可抑制小鼠肺组织ＩＬ ４、ＩＬ ５的表达，从而起到预防和治疗哮喘的作用。     

地塞米松和环孢素菌A对IL—4,IL—5合成的抑制作用

为研究淋巴细胞在哮喘发病中的作用及地塞主松（Ｄｅｘ）、环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）治疗哮喘的机理,用ＥＬＩＳＡ法检测哮喘患者和对照组的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）在植物血凝素刺激下合成白细胞介素４（ＩＬ－４）、白细胞介素５（ＩＬ－５）,以及Ｄｅｘ和ＣｓＡ对哮喘患者的ＰＢＭＣ合成ＩＬ－４、ＩＬ－５的抑制作用。结果表明,哮喘组的ＩＬ－４、ＩＬ－５水平较对照组高（Ｐ〈０．０５）;１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ的Ｄｅｘ和Ｃ     

IL—12对新生IFN—γ产生的影响

白细胞介素１２（ＩＬ－１２）是一种重要的细胞因子，由单核／巨噬细胞，Ｂ细胞产生，诱导Ｔ细胞和ＮＫ细胞产生γ干扰素（ＩＦＮ－γ）在细胞免疫反应发挥多种作用，新生儿产生ＩＬ－１２的能力鲜见报道，本用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测８例新生儿脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）ＩＬ－１２Ｐ４０ｍＲＮＡ和ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达，及ＥＬＩＳＡ法新生儿ＣＢＭＣ培养上清ＩＦＮ－γ浓度；并观察重组ＩＬ－１２     

慢性乙型肝炎的IL-2mRNA和IL-6mRNA水平的研究

目的 从ｍＲＮＡ水平探讨白细胞介素２、６（ＩＬ－２、ＩＬ－６）在慢性乙型肝炎发病机制中的作用。方法 收集慢性迁延性乙肝炎（ＣＰＨ）、慢性活动性乙型肝炎（ＣＡＨ）患者以及接种乙肝疫苗的青少年和正常人的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）,以ＨＢａｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ以及植物血凝素（ＰＨＡ）刺激后,提取其总ＲＮＡ,采用半定量核酸杂交技术,检测经刺激后的ＰＢＭＣ表达的ＩＬ－２ｍＲＮＡ、Ｉｌ－６ｍＲＮＡ水平。结果     

不同配比麻杏甘石汤对哮喘大鼠Th1／Th2类细胞因子分泌的影响

目的：观察不同配比麻杏甘石汤对哮喘大鼠Th1/Th2类细胞因子分泌的影响。方法：选取Wistar大鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、麻杏甘石汤1高剂量组（简称麻1组）、麻杏甘石汤2高剂量组（简称麻2组）。观察不同配比麻杏甘石汤对哮喘大鼠BALF中IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值比较、外周血中IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值比较、肺组织中IFN-γ、IL-4和内参照激动蛋白cDNA扩增后半定量和电泳结果的影响。结果：与哮喘模型组比较,不同配比的麻杏甘石汤组大鼠BAIF和外周血中IL-4水平下降（P〈0.05,P〈0.01）,效果与地塞米松组相似（P〉0.05）、IL-4/IFN-γ比值也相应降低,IFN-γ水平升高。麻杏甘石汤组大鼠RT-PCR结果显示,IFN-γmRNA表达水平明显高于地塞米松组的IFN-γmRNA（P〈0.05）,而地塞米松组IL-4 mRNA与正常组相比表达减少（P〈0.05）,与哮喘组相比IL-4 mRNA的表达明显减少（P〈0.01）。IFN-γmRNA的表达与正常组相比表达无明显差异（P〉0.05）,与麻杏甘石汤组相比IFN-γmRNA的表达明显减少（P〈0.01）。麻1、2高剂量组间比较无显著差异（P〉0.05）。结论：不同配比麻杏甘石汤可能通过抑制IL-4水平及提高IFN-γ水平,使Thl/Th2失衡得到一定程度的纠正,从而控制气道炎症,减缓哮喘发作。不同配比比较无显著差异（P〉0.05）。     

类风湿关节炎患者TH17细胞及其相关细胞因子的表达及临床意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者TH17细胞及其相关细胞因子的表达及临床意义.方法 收集大连医科大学附属第一医院门诊RA初治活动期患者的外周血标本32例为活动期RA组,健康献血者30例为健康对照组,所有受试者清晨空腹坐位肘静脉采血.应用酶联免疫吸附法(ELISA)及反转录PCR(RT-PCR)法,分别检测外周血血清中IL-17水平和外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17mRNA表达水平;将PBMC一组不加刺激,另一组用佛波酯(50 ng/mL)和离子霉素(1μg/mL)刺激4h后,流式细胞仪检测TH17细胞数量.结果 活动期RA患者血清IL-17水平(15.76 ±0.62) pg/mL与健康对照组(8.67±0.12) pg/mL比较,差异有显著性意义(P＜0.05).活动期RA患者PBMC的IL-17mRNA表达水平(1.94±0.46)与健康对照组(0.84±0.16)比较,差异有显著性意义(P＜0.05).RA组血清IL-17水平与mRNA表达水平呈正相关(r=0.70,P＜0.05),且与疾病活动程度(DAS28)评分呈正相关(r=0.99,P＜0.05).活动期RA患者外周血TH17细胞比例(2.50±0.54)％与健康对照组(0.03±0.00)％比较,差异有显著性意义(P＜0.05).但刺激组(3.23±0.05)％与无刺激组(2.50±0.54)％比较,差异无显著性意义(P＞0.05).RA患者组TH17细胞数量与疾病活动程度(DAS28)评分呈正相关(r=0.96,P＜0.05).结论 活动期RA患者TH17细胞及其主要效应性细胞因子IL-17在细胞、蛋白和基因表达水平上均明显升高并与疾病活动程度呈正相关,对临床制定治疗方案、判断疗效有指导意义.     

不同剂量地塞米松对脓毒症小鼠肺组织糖皮质激素受体-α表达及肺损伤的影响

目的 观察不同剂量地塞米松(Dex)对脓毒症小鼠急性肺脏损伤的影响。方法 92只雄性昆明种小鼠随机分为假手术组(12只)、脓毒症组(20只)及Dex干预组(生理剂量组、应激剂量组和大剂量组,各20只)。采用盲肠结扎穿孔术复制脓毒症模型。术后24h时观察肺组织病理学改变,免疫组织化学法检测肺组织中糖皮质激素受体-α(GR-α)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测肺组织中GR-α 和NF-κB mRNA的表达,酶联免疫吸附法测定血浆中TNF-α、IL-1β水平。 结果①与脓毒症组相比,Dex干预组肺损伤均有所减轻,但仅其中的生理剂量组和应激剂量组明显减轻(P均＜0.05)。②生理剂量组和应激剂量组肺组织GR-α蛋白的表达均高于脓毒症组(P均＜0.05)。③生理剂量组和应激剂量组肺组织GR-α mRNA表达水平高于脓毒症组和大剂量组(P＜0.05);Dex干预组肺组织NF-κB mRNA表达与脓毒症组相比,差异无统计学意义(P＞0.05 )。④生理剂量组和应激剂量组血浆TNF-α、IL-1β含量低于脓毒症组和大剂量组(P＜0.05)。结论 在脓毒症小鼠模型中,生理剂量和应激剂量Dex均可上调肺组织GR-α的表达,减轻炎症反应与肺损伤程度,其作用均明显优于大剂量Dex。     

组胺H4受体在变应性鼻炎中的表达及临床意义

【目的】 探讨新型组胺H4受体(H4R)在变应性鼻炎(AR)中的表达及临床意义&#65377;【方法】 变应性鼻炎(AR)组73例,正常对照(N)组30例,用Western蛋白印迹法(Western blot)及实时定量荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)检测两组对象外周血单个核细胞(PBMC)中H4R的蛋白及基因表达&#65377;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测AR组患者外周血血清白细胞介素4(IL-4)及白细胞介素12(IL-12)的含量,分析H4R mRNA表达含量与IL-4&#65380;IL-12以及二者比值的关系&#65377;【结果】 AR患者PBMC中H4R的蛋白表达和mRNA表达都显著高于正常对照组&#65377;AR患者H4R的mRNA表达量与IL-4的表达呈正相关(r = 0.71,P < 0.01),与IL-12的表达呈负相关(r = -0.50,P < 0.01),与IL-4/IL-12比值亦有显著的相关性(r = 0.75,P < 0.01)&#65377;【结论】 H4R的表达与AR的发病有相关关系,AR患者H4R的表达升高可能参与了Th1/Th2平衡失调的免疫过程&#65377;     

射干麻黄汤对哮喘豚鼠气道EOS凋亡、IL-5mRNA及IL-10mRNA表达的影响

目的 探讨中药射干麻黄汤对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平、白细胞介素(IL)-5mRNA及IL-10mRNA表达水平的影响.方法 40只健康雄性Hartley系豚鼠随机分为射干麻黄汤组、地塞米松组、哮喘组和正常对照组.采用原位末端标记技术(TUNEL)、荧光酶标记法和RT-PCR技术检测BALF中EOS凋亡、ECP水平、IL-5mRNA及IL-10mRNA表达水平.结果 射干麻黄汤组BALF中的EOS明显较哮喘组低,EOS凋亡率明显较哮喘组高(P＜0.01); ECP水平明显较哮喘组低(P＜0.05);IL-5mRNA水平明显较哮喘组低,IL-10mRNA水平明显较哮喘组高(P＜0.05).结论 射干麻黄汤可以通过减少IL-5mRNA的表达,增加IL-10mRNA的表达有效抑制哮喘豚鼠气道EOS的上升,增加EOS的凋亡;降低ECP水平.     

地塞米松对PI3K／Akt途径及哮喘大鼠气道炎症的调控

目的研究大鼠支气管哮喘（简称哮喘）模型PI3K／Akt信号转导途径与Th1／Th2的关系,探讨地塞米松对PI3K／Akt信号转导途径及大鼠气道炎症的调控。方法取SPF级雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组、渥曼宁青霉素组,每组8只。以卵白蛋白（OVA）致敏和激发建立大鼠哮喘模型。酶联免疫吸附试验（ELISA）测定BALF中IL-4、IL-12含量;免疫组化MaxvisionTM法测定肺组织中P—Akt蛋白的表达量并观察其表达位置;Western blot测定肺组织匀浆中P—Akt蛋白的含量;并对各检测指标进行组间比较分析。结果（1）与对照组比较,其他3组大鼠IL-4含量显著增高、IL-12含量显著降低（均P〈0.01）;而且地塞米松组及渥曼宁青霉素组IL-4含量显著低于哮喘组、IL-12含量明显高于哮喘组（P〈0.05或0．01）。（2）与对照组比较,其他3组大鼠P—Akt蛋白相对表达量及光密度值均显著增高（均P〈0.01）;而且地塞米松组及渥曼宁青霉素组P—Akt蛋白相对表达量及光密度值均显著低于哮喘组（均P〈0.01）.（3）肺组织中P—Akt蛋白含量与IL-4含量呈显著正相关（r=0．918,P〈001）,与IL-12含量呈显著负相关（r=-0．868,P〈0.01）.结论哮喘大鼠模型中出现了PI3K—Akt通路的激活,其Th1/Th2失衡可能与P13K／Akt通路的激活有关。糖皮质激素可能通过抑制PI3K／Akt通路,改善Th1/Th2失衡,从而减轻哮喘气道炎症。     

中药咳喘落对实验性哮喘豚鼠ECP和sICAM-1的影响

探讨中药咳喘落对哮喘豚鼠可溶性细胞间粘附分子－１、嗜酸性粒细胞及其脱颗粒产物嗜酸性粒细胞阳离子蛋白等的影响,阐明咳喘落治疗哮喘抗气道应性炎症的作用机制。方法采用荧光酶标记法、双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法和密度梯度细胞分离分别测定了哮喘豚鼠血浆中ＥＣＰ、ｓＩＣＡＭ－１的含量和肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞分类计数。结果哮喘豚鼠血浆中ＥＣＰｓＩＣＡＭ－１的含量肺泡灌洗 细胞总数和低密度嗜酸性粒细胞数均显著高于正常     

槲皮素对支气管哮喘小鼠气道炎症的作用及机制研究

目的 研究槲皮素是否对支气管哮喘小鼠模型气道炎症具有抑制作用及可能的分子机制。方法 通过腹腔注射卵蛋白（OVA）致敏并行雾化激发复制小鼠支气管哮喘模型。将36只BALB/c雌性小鼠随机分为6组,分别为对照组（CON组）、哮喘模型组（OVA组）、槲皮素低剂量组（LOW组）、槲皮素中剂量组（MID组）、槲皮素高剂量组（HIGH组）剂量组、地塞米松阳性对照组（POS组）。对小鼠哮喘症状的程度进行评分;通过ELISA法检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）的上清液中白细胞介素-4（IL-4）和IL-5的水平;qRT-PCR检测肺组织miR-155的水平。结果 与CON组比较,OVA组小鼠的哮喘症状评分较高,IL-4、IL-5和miR-155表达水平上调（均P?<0.05）。与OVA组小鼠比较,随着槲皮素药物浓度的升高,槲皮素不同浓度组小鼠的哮喘症状评分下降,IL-4、IL-5和miR-155表达水平降低（均P?<0.05）。结论 槲皮素能改善支气管哮喘小鼠气道炎症,其机制可能与下调IL-4、IL-5和miR-155表达有关。     

新斯的明对百草枯中毒大鼠全身炎症反应和肺损伤的影响

目的 观察胆碱酯酶抑制剂——新斯的明对百草枯中毒大鼠全身炎症反应和肺损伤的影响.方法 96只SD大鼠随机分为3组(n=32).NES组:腹腔注射百草枯(paraquat,PQ)溶液20 mg/kg后2h腹腔注射新斯的明300 μg/kg;PQ组:腹腔注射等量PQ溶液后2h腹腔注射生理盐水300μg/kg;对照组:以等量生理盐水代替PQ溶液腹腔注射.在6、24、72h3个时间点观察大鼠血清及肺组织TNF-α、IL-6、IL-10变化;分批处死大鼠进行肺组织病理学观察以及测量肺湿/干质量(W/D);Real-Time PCR检测肺组织SOCS1、SOCS3 mRNA表达.结果 PQ染毒后,大鼠血清和肺组织TNF-α、IL-6、IL-10均显著升高,NES组在染毒后各时间点血清和肺组织TNF-α水平低于PQ组(P＜0.05),在染毒后24、72 h血清及肺组织IL-6水平低于PQ组(P＜0.05).染毒后各时间点NES组IL-1O水平高于PQ组(P＜0.05).染毒后72 h,病理学观察可见NES组大鼠肺损伤程度较PQ组轻.NES组24、72 h肺湿干质量比低于PQ组(P＜0.05).PQ染毒后各时间点SOCS1、SOCS3 mRNA表达水平高于对照组(P＜0.05).NES组SOCS3 mRNA表达水平高于PQ组,但SOCS1 mRNA表达水平与PQ组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 新斯的明能减轻PQ中毒大鼠的全身炎症反应和肺损伤程度,其机制可能涉及激活胆碱能抗炎途径