自噬与间充质干细胞对肿瘤的影响及相互关系的研究进展

随着肿瘤研究的逐步深入,非肿瘤细胞及肿瘤微环境在肿瘤发生、发展中的作用正被科研工作者广泛关注。自噬与肿瘤的发生、发展、诊断、治疗以及预后均存在着密切联系,自噬增强或减弱对不同类型的肿瘤也具有不同的作用,或促进肿瘤发展或抑制其生长。而自噬是否可被调节、囊泡的形成机制以及在靶向治疗中的作用仍有待进一步研究。此外对于间充质干细胞(MSCs)研究表明,肿瘤细胞释放的细胞因子、酶类等可诱导MSCs向肿瘤原发灶迁移;同时与早期炎症微环境和肿瘤微环境共同作用还与肿瘤微环境相互作用;MSCs本身可发生恶变,并通过多种信号通路与肿瘤细胞互相作用,在不同的肿瘤或者不同的作用条件下即可表现出促进肿瘤细胞生长的作用,也可抑制其生长,然而具体的机制仍未明确。     

骨髓间质干细胞在结直肠肿瘤微环境中的作用

骨髓间质干细胞(MSCs)是由中胚层发育而来的一类成体干细胞,存在于全身结缔组织和器官间质中,属于骨髓非造血干细胞,具有干细胞的一般特性,即自我更新以及多向分化能力。MSCs能够促进结直肠肿瘤的生长。在肿瘤条件下,骨髓中的MSCs随血运迁至肿瘤微环境,参与肿瘤的构建过程。MSCs促进肿瘤侵袭的机制是复杂的,包括MSCs转化为肿瘤相关纤维母细胞参与肿瘤间质的形成以及MSCs对微环境的调节作用。MSCs在结直肠癌靶向治疗策略中的应用前景是广阔的,通过不断的研究,将为MSCs在临床中的安全应用提供新的理论依据。     

间充质干细胞归巢的研究进展

间充质干细胞(MSCs)被认为是最有希望用于治疗多种疾病的一种非造血组织的多能干细胞,但是其靶向组织器官归巢率偏低,影响了其作为干细胞疗法的效果。许多研究发现,MSCs归巢过程的机制(包括参与的分子,如趋化因子及其受体和黏附分子等)与白细胞向炎性组织的归巢过程十分相似。随之,根据上述机制,通过MSCs移植前预处理,MSCs归巢率有所提高,从而在一定程度上提高了MSCs疗法的效果。进一步深入研究MSCs归巢过程的相关机制可能是从根本上改善MSCs疗法疗效的切入点,进而扩展其治疗谱。     

间充质干细胞实现心肌修复:机遇与挑战

间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是一类存在多种组织内的成体干细胞,主要来源于骨髓、脂肪组织和脐带血。随着对MSCs分离、培养、鉴定的程序化、标准化,使其成为实现心肌修复的理想种子细胞。MSCs植入受损心肌后可分泌多种生物活性物质,抑制心肌重构、促进新生血管形成。然而MSCs体内存活时间短、有形成肿瘤风险,使其尚未大规模应用于临床。为提高MSCs的治疗潜能、保障其治疗安全,基因修饰、药物诱导、生物工程等多种方法从基础走向了临床,使MSCs成为实现心肌修复的优质资源,为心肌梗死、终末阶段心力衰竭带来新的曙光。     

EpCAM与肿瘤关系的研究进展

上皮细胞黏附分子(EpCAM)具有加快细胞周期、促进细胞增殖、分化、迁移以及免疫逃逸等多种生物学功能。基于EpCAM特异性单抗的新技术和新药物能够高效、准确并特异地杀灭肿瘤细胞。最近研究表明,EpCAM可作为肿瘤干细胞研究的筛选标志,与其他共标志细胞具有自我更新、强致瘤性及遗传稳定性等特性。因此,EpCAM作为一种新型肿瘤标志物,不仅用于肿瘤的早期诊断、治疗及预后判断,而且可用于肿瘤干细胞理论研究,为肿瘤干细胞分子生物学的研究奠定基础。     

盐霉素抗肿瘤机制的相关研究进展

肿瘤干细胞(CSCs)是一群存在于肿瘤细胞中的亚群,具有自我更新和产生新的不同分化程度的肿瘤细胞。干细胞亚群的存在使得肿瘤可以逃避化疗药物、靶向治疗药物以及放射治疗等治疗手段的杀伤作用,也是肿瘤复发和转移的重要原因之一。盐霉素是由白色链霉菌发酵产生的属于聚醚类的一元羧酸,近年来研究发现盐霉素能高效杀死多种肿瘤干细胞,并对多种肿瘤有明显的抑制作用,是一种很有开发潜力的抗肿瘤药物。其作用机制可能与诱导肿瘤干细胞凋亡与抑制有关。     

间充质干细胞促进肿瘤发生发展的机制研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一类起源于中胚层的成体干细胞,因具有良好的增殖能力、低免疫原性、靶向归巢肿瘤等特性,且易于体外分离培养和基因修饰改造,已成为肿瘤生物学研究的热点.研究表明MSCs具有促进肿瘤生长、增殖、转移和介导化疗耐药等作用,可以考虑作为抗肿瘤治疗的靶点.本文综述了MSCs促进肿瘤发生发展过的相关机制,为寻找潜在的治疗靶点提供参考依据.     

大鼠TCF4和ΔTCF4重组腺病毒载体的构建和鉴定

目的：构建腺病毒表达载体Ad-TCF4和Ad-ΔTCF4（缺失了β-catenin结合位点）,并初步鉴定其在间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）中的表达,为进一步研究Wnt/β-catenin信号通路在MSCs中的功能以及应用MSCs进行干细胞移植和基因治疗奠定基础。方法：以MSCs的cDNA为模板,扩增TCF4和ΔTCF4基因,将基因序列定向克隆至穿梭质粒载体pShuttle-CMV后,转化含pAdEasy-1的BJ5183感受态细胞进行同源重组,获得重组腺病毒载体Ad-TCF4和Ad-ΔTCF4。PCR以及PacⅠ酶切鉴定后,Ad-TCF4和Ad-ΔTCF4转染QBI-293A进行包装和扩增。检测重组载体的病毒滴度以及感染MSCs的最适病毒复数（multiplicity of infection,MOI）,并探讨Ad-TCF4和Ad-ΔTCF4在MSCs中的表达以及对迁移的影响。结果：成功构建Ad-TCF4和Ad-ΔTCF4,病毒滴度分别为1.1×107pfu/mL和1.3×107pfu/mL,150 MOI病毒感染MSCs的效率达到90%以上;蛋白质印迹和TOPFlash/FOPFlash报告基因检测显示TCF4在MSCs中表达增加,并具有调节下游靶基因转录的活性;Boyden小室迁移实验发现感染Ad-ΔTCF4能显著抑制MSCs向LiCl的迁移能力,而感染Ad-TCF4并不能提高MSCs的迁移能力。结论：成功构建Ad-TCF4和Ad-ΔTCF4,能高效感染MSCs并正确表达。     

间充质干细胞双向调节肿瘤疾病

间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是具有强大增殖能力和多向分化潜在能力的祖细胞,根据来源不同,可以分为骨髓间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、脐带间充质干细胞和脂肪间充质干细胞。MSCs有望成为用于细胞治疗和促进组织修复的候选细胞。然而,MSCs 在某些情况下对肿瘤细胞的促进作用也不能忽视。该文回顾近年来关于MSCs 双向调节肿瘤细胞的文献,从中探究引起肿瘤细胞的增殖,迁移,侵袭产生抑制或者促进作用机制和规律,为科学合理地开展MSCs 的临床试验提供参考。     

间充质干细胞归巢的研究进展

间充质干细胞(MSCs)被认为是最有希望治疗多种疾病的一种非造血组织的多能干细胞,具有多向分化潜能,已被证明在临床应用中具有很大的潜能,但是其向靶组织器官归巢率低,且MSCs归巢后的分布和分化直接影响其应用。因此,进一步明确MSCs的归巢机制及归巢的影响因素有助于将MSCs更好地用于临床治疗。     

基于间充质干细胞的小分子化学药物肿瘤靶向递送系统研究进展

近年来,大量研究通过细胞内化或细胞膜结合的方式将生物大分子或小分子化学药物负载于间充质干细胞（MSC）上,利用其天然的肿瘤归巢特性实现药物的靶向递送,继而通过在靶部位药物的释放或基因表达,达到肿瘤治疗的目的。基因修饰MSC的研究较为成熟,而递送小分子化学药物的研究起步较晚。本文从MSC肿瘤迁移机制、细胞注射后体内分布特点入手,总结了MSC在小分子化学药物肿瘤靶向递送中的研究;同时介绍了MSC与原型药物、载药纳米粒构建的复合系统的载药、释药过程,展望了该系统遇到的挑战和应用前景。     

携带TRAIL的骨髓间充质干细胞联合吉西他滨对人胰腺癌细胞Panc-1的杀伤作用

目的研究TRAIL基因修饰的骨髓间充质干细胞(MSC)联合吉西他滨对人胰腺癌细胞的杀伤作用。方法构建重组腺病毒Ad-CMV-TRAIL,体外转染人骨髓间充质干细胞。通过观察绿色荧光的表达强度,确定最佳转染条件。MTT法检测Ad-CMV-TRAIL转染对MSC细胞生长状态的影响。Transwell小室共培养携带TRAIL的MSC和胰腺癌细胞Panc-1,联合应用吉西他滨,AnnexinⅤ-FITC双标法检测凋亡的发生。Western blot法检测Caspase凋亡相关蛋白的表达变化。结果 Ad-CMV-TRAIL以MOI=10体外感染MSC 24h,显微镜下观察80%以上的MSC表达绿色荧光,转染组细胞高表达TRAIL。Ad-CMV-TRAIL转染之后的MSC仍然可以增殖,活力无明显改变。携带TRAIL的MSC与Panc-1细胞共培养之后,可诱导部分Panc-1细胞发生凋亡,凋亡率达(13.38±3.42)%。而携带TRAIL的MSC与Panc-1细胞共培养之后可以增强吉西他滨的杀伤效果,与单独吉西他滨处理组相比差异显著[(52.10±3.41)%vs.(29.68±1.71)%,P=0.002]。Western blot检测结果显示MSC-TRAIL和吉西他滨共同处理可以诱导凋亡相关的Caspase-8和Caspase-3蛋白活化。结论 MSC可能作为TRAIL的肿瘤靶向载体在胰腺癌的治疗中发挥作用。     

基于DNA的纳米材料在肿瘤治疗领域的研究进展

肿瘤治疗药物通常存在水溶性差、靶向性低、稳定性差、不易被肿瘤细胞摄取等不足,开发一种理想的药物递送载体仍是肿瘤治疗领域亟待解决的重要问题。由于具有良好的序列可编程性、生物相容性和生物可降解性,基于DNA的纳米材料已被广泛用作肿瘤治疗的药物递送载体。大量研究表明,DNA纳米材料可以有效装载肿瘤治疗药物,实现肿瘤组织靶向递送、高效细胞摄取与刺激响应性药物释放。本文从DNA纳米技术的历史与发展入手,例举DNA纳米材料作为药物递送载体在化疗、基因治疗、免疫治疗和光动力疗法中的应用进展,并对其未来发展进行展望,以期为该领域其他研究工作者提供参考。     

成年SD鼠骨髓基质干细胞培养及向神经元样细胞定向分化的研究

目的 探讨体外培养、扩增骨髓基质干细胞的方法，诱导骨髓基质干细胞向神经元样细胞定向分化。方法 采用全骨髓法培养成年SD大鼠股骨骨髓基质干细胞。传至第5代，用全反式维甲酸诱导分化，于诱导后第5小时行神经细胞特异性抗原MAP-2和胶质细胞特异性抗原GFAP鉴定。结果 成年鼠骨髓基质干细胞经全反式维甲酸诱导30min后可见神经元样细胞出现，经MAP-2免疫组化鉴定阳性。结论 (1)骨髓基质干细胞在体外扩增迅速，纯化需时短。(2)骨髓基质干细胞在全反式维甲酸诱导下向神经元样细胞分化。     

超声联合PEI增强microRNA转染沉默survivin表达诱导细胞凋亡

细胞凋亡在肿瘤的发生和发展发挥了重要的作用。针对病灶诱导癌细胞凋亡是有吸引力的癌症治疗策略。 Survivin是哺乳动物的凋亡蛋白家族最小的成员,其上调可防止各种恶性肿瘤细胞凋亡。 Survivin的下调节可诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤血管生成。 微小RNA（miRNA）介导的RNA干扰可沉默Survivin的表达。然而,仍缺乏无创、组织特异的基因传递技术。同时,miRNA表达载体的利用率也受到基因传输技术的影响,尤其在体内,需要安全、有效的基因转染技术。成功的基因传输方法将产生新的、可行的抗癌治疗方法。超声空化是一种新的基因传递技术,其通过超声破坏微泡效应产生细胞膜上的微孔。结合我们以往的研究基础,我们推断,超声空化和聚乙烯亚胺（PEI）结合可介导miRNA的转染,靶向Survivin的miRNA可诱导细胞凋亡。通过这一非病毒技术的新技术,可导致严重的细胞凋亡,提供了有效和有针对性的基因传递可能是可行的,是一种新颖、可行的基因治疗方法。     

间充质干细胞的免疫调节功能

间充质干细胞(MSC)在支持造血细胞的成熟、分化和生存方面具有重要作用.最近研究发现,MSC具有免疫调节作用,能抑制树突状细胞(DC)成熟,并通过细胞-细胞接触的机制,抑制T淋巴细胞、B淋巴细胞及自然杀伤细胞(NK细胞)的功能,在自身免疫性疾病及肿瘤细胞免疫逃逸中至关重要.现正尝试将MSC用于抗急性移植物抗宿主病(aGVHD)及自身免疫性疾病的治疗.     

间充质干细胞的肿瘤归巢特性及其肿瘤靶向治疗应用研究进展

间充质干细胞（MSC）具有受肿瘤组织或肿瘤微环境释放的多种趋化因子吸引而向肿瘤组织靶向归巢的天然属性,因此有望成为一种新型的活细胞传递载体用于抗肿瘤药物/基因的靶向递送。外源性MSC静脉注射后会首先在肺部被大量截留,经肺清除后向肿瘤组织归巢,可以通过增强趋化因子与MSC上受体的相互作用或改变注射方式减少MSC截留等方法改善MSC的肿瘤归巢效率。基于MSC的传递系统可用于靶向递送阿霉素、紫杉醇和吉西他滨等化疗药物,帮助解决化疗药物半衰期较短、肿瘤靶向性较差等问题。其次,MSC可以通过基因重组的方式有效保护和靶向递送肿瘤细胞杀伤基因、免疫系统调节基因等治疗基因,通过在肿瘤部位特异性表达治疗基因实现肿瘤抑制或杀伤作用。此外,MSC还可以作为细胞传递载体靶向递送诊疗药物,发挥肿瘤诊疗一体化的治疗作用。总之,基于MSC的细胞载体递送系统可实现化疗药物、治疗基因和诊疗药物的靶向递送并在多种类型的肿瘤靶向治疗中取得良好的疗效。相信随着这一细胞载体递送策略的不断改良和优化,基于MSC的靶向传递系统将为肿瘤靶向治疗提供一种新的传递策略和治疗选择。     

Enhancing microRNA transfection to inhibit survivin gene expression and induce apoptosis: could it be mediated by a novel combination of sonoporation and polyethylenimine?

Apoptosis is a physiologically essential mechanism of cell and plays an important role in reducing the development and progression of tumors. The appealing strategy for cancer therapy is to target the lesions that induce apoptosis in cancer cells. Survivin, the smallest member of the mammalian inhibitors of the apoptosis protein family, is upregulated in various malignancies to protect cells from apoptosis. Survivin knockdown could induce cancer cell apoptosis and inhibit tumor-angiogenesis. Survivin expression would be silenced by microRNA (miRNA)-mediated RNA interference. However, noninvasive and tissue-specific gene delivery techniques remain absent recently and the utilizations of miRNA expression vectors have been limited by inefficient delivery technique, especially in vivo. On the other hand, safe and promising technologies of gene transfection would be valuable in clinical gene therapy. Successful treatment of gene transfer method would lead to a new and readily available approach in the anticancer research. Sonoporation is an alternative technique of gene delivery that uses ultrasound targeted microbubble destruction to create pores in the cell membrane. Based on our previous studies, in this article, we postulated that the transfection of miRNA could be mediated by the combination of sonoporation and polyethylenimine (PEI) which was one of the most effective poly-cationic gene vectors and enhance the endocytosis of plasmids DNA and hypothesized that the gene silencing and apoptosis induction with miRNA targeting human Survivin would be improved by this novel technique. In our opinion, this novel combination of sonoporation and PEI could enhance targeted gene delivery effectively and might be a feasible, novel candidate for gene therapy.

     

脐带间充质干细胞对C57BL/6小鼠Lewis肺癌生长及转移的影响

目的 利用Lewis肺癌动物模型,探讨脐带来源的MSC对恶性肿瘤生长及其转移的影响。方法 将16只C57BL/6小鼠分别建立Lewis肺癌模型,随机分为对照组（NS组）和MSC组,每组8只,MSC组分别于接瘤后第7、12、17天时,尾静脉注射给予脐带MSC（1×106/只）,在第21天时处死全部荷瘤小鼠,观察瘤体生长情况及肺转移情况。结果 NS组和MSC榈钠骄鲋胤直鹞?.5875±1.04g、 4.155±1.13g,两组相比没有显著性差异（P>0.05）。NS组和MSC组的平均肺转移数分别为3.75±1.39个、1.13±1.13个,抑制转移率为70.0%,两组相比具有显著性差异（P<0.001）。结论 脐带来源的MSC对C57BL/6小鼠Lewis肺癌本身的生长无影响,但能够明显抑制肿瘤的转移。     

骨髓间充质干细胞和恶性肿瘤发生发展关系

骨髓间充质干细胞主要存在于骨髓中,具有多向风化能力,在致癌物作用下及体外培养时出现恶性转化,移植后存在潜在致瘤性,并影响肿瘤增殖、生长,具有肿瘤组织趋向性。骨髓间充质干细胞对恶性肿瘤的发生、发展起重要影响。其有望成为恶性肿瘤基因治疗的载体。