Skp2和p27在子宫颈鳞状上皮内瘤变过程中的表达

目的：探讨宫颈鳞状上皮内瘤变（CIN）、宫颈鳞癌组织中Skp2和p27的表达及相关性。方法：免疫组化二步法检测60例宫颈鳞状上皮内瘤变（CINI、CINⅡ、CINⅢ各20例）、50例宫颈浸润癌中Skp2和p27的表达,20例正常宫颈组织做对照。结果：S期激酶相关蛋白2（S-phase Kinase-associated Protein2。Skp2）促进泛素介导的细胞周期素依赖激酶抑制剂p27蛋白降解,研究发现Skp2过表达参与细胞转化和肿瘤的形成。①Skp2蛋白表达CINⅡ明显高于CINI和正常宫颈组织（P〈0．05）;CINI和正常宫颈组织中差异无统计学意义（P〉0．05）;CINⅢ明显高于CINⅡ（P〈0．05）;宫颈浸润鳞癌明显高于CINⅢ（P〈0．05）。p27蛋白表达CINI与在正常宫颈组织中差异无统计学意义（P〉0．05）,CINⅡ明显低于正常宫颈组织和CINI（P〈0．05）,CINⅢ明显低于CINⅡ（P〈0．01）。宫颈浸润癌明显低于CINⅢ（P〈0．01）。②宫颈癌Skp2与p27蛋白表达呈负相关。③宫颈浸润癌的Skp2蛋白表达和分化程度、淋巴结转移、临床分期呈正相关。结论：Skp2和p27蛋白可能参与宫颈癌的发生及转移,并与分化程度和临床分期有关。检测Skp2和p27蛋白表达对早期诊断宫颈鳞癌、确定肿瘤恶性程度及预后有重要作用。     

宫颈腺癌中HPV感染与Skp2、p27^kip1蛋白表达的研究

目的 探讨S期激酶相关蛋白2（Skp2）和细胞周期调控因子p27^kip1在宫颈腺癌发生发展中的作用，分析高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染与Skp2、p27^kip1蛋白表达关系。方法 采用组织微阵列技术结合原位杂交和免疫组化（二步法）检测HPV16／18DNA和Skp2、p27^kip1蛋白在86例宫颈腺癌和24例慢性宫颈炎组织中的表达。结果 宫颈腺癌组HPV16／18DNA与Skp2蛋白阳性表达率分别为65．1％和68．6％，均显著高于慢性宫颈炎组（P〈0．01）。p27^kip1蛋白在宫颈腺癌组中的阳性表达率为55．8％，明显低于慢性宫颈炎组（P〈0.05）。HPV16／18感染与宫颈腺癌病理分级和组织学类型无明显相关性，但与Skp2表达里正相关（P〈0．05），与p27^kip1表达呈负相关（P〈0．05）。Skp2表达与宫颈腺癌的病理分级有关，G2、G3组阳性表达率均明显高于G1组（P〈0．05）。Skp2和p27^kip1表达与宫颈腺癌组织学类型有明显相关性。结论 宫颈康癌的发生与HPV16／18感染及Skp2、p27^kip1蛋白的表达异常相关，三者协同作用导致宫颈腺癌恶性发展。     

P27、SKP2在肝细胞肝癌中的表达及相关性研究

目的 研究靶蛋白P27和SKP2蛋白在肝细胞肝癌组织中的表达及与肝细胞肝癌各项临床病理指标的关系。方法 用免疫组化二步法检测P27和SKP2蛋自在48例肝细胞肝癌、20例肝硬化及16例正常肝组织中的表达。结果 48例肝癌组织中P27的阳性表达率（45．8％）显著低于肝硬化组织（80．0％）和正常肝组织（75．0％）。P27阳性表达与组织分化程度（P〈0．01）、转移（P〈0．05）、肿瘤大小（P〈0．05）密切相关。48例肝癌组织中的SKP2的阳性表达率（33．3％）显著高于肝硬化组织（阴性表达）和正常肝组织（阴性表达）,SKP2在肝细胞肝癌中的表达与组织分化程度（P〈0．01）、转移（P（0．05）密切相关。肝细胞癌中SKP2的表达与P27表达呈负相关（r=-0．562,P〈0．01）。结论 肝细胞肝癌中SKP2的表达与P27的降解有关,P27的低表达可能与肝细胞肝癌的发生发展有关。SKP2的表达提示预后不良。     

Skp2、P27和CyclinE在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨宫颈浸润癌组织中Skp2、p27和CyclinE的表达及相关性，以及与临床病理因素和预后的关系。方法采用免疫组化二步法检测70例宫颈癌中Skp2、p27和CyclinE的表达，并分析三者的表达与宫颈癌临床病理因素及预后的关系，同时探讨三者在宫颈癌中表达的相关性。结果①Skp2和CyclinE在宫颈癌中的阳性表达率分别为57．1％和64．3％，并随着肿瘤分化程度的降低表达增高（P〈0．05），与浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移显著相关（P〈0.05），与年龄、临床分期、癌灶大小无关（P〉0．05）。两者的高表达5年生存期明显低于其低表达（P〈0．05）。P27在宫颈癌中的阳性表达情况与以上两者相反。②Skp2、CyclinE和P27呈负相关（P〈0．01）；Skp2和CyclinE呈正相关（P〈0．01）。结论Skp2和CyclinE蛋白高表达可能是宫颈组织恶变的重要生物学标志，Skp2、CyclinE高表达，伴P27低表达提示肿瘤的高侵袭性及不良预后。     

组织芯片检测甲状腺转录因子-1蛋白在肺癌细胞核中表达的定量研究

目的 揭示甲状腺转录因子-1（TTF-1）蛋白在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、人胚胎肺泡上皮细胞、肺癌原发灶及淋巴结转移灶中的表达特点及规律。方法 用组织微阵列技术构建包含20例正常成人肺组织、15例胚胎肺组织、100例肺癌原发灶及其相应的55例淋巴结转移灶的765点阵的石蜡组织芯片。用免疫组化SP法检测该芯片中TTF-1蛋白的表达。用Leica Q500MC图像分析系统定量测试组织芯片上TTF-1蛋白的表达强度。结果 胚胎肺泡上皮细胞核TTF-1阳性单位（PU）值小于正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）；不同类型肺癌癌细胞核TTF-1的PU值均小于胚胎肺泡上皮细胞和正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）；肺腺癌和肺小细胞癌癌细胞核TTF-1的PU值均大于肺鳞癌和肺大细胞癌癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0、001）；肺鳞癌癌细胞核TTF-1的PU值大于肺大细胞癌癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）。肺的腺癌、鳞癌和大细胞癌淋巴结转移灶中癌细胞核TTF-1的PU值均大于其癌原发灶癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001，P〈0．001，P〈0．05）；肺小细胞癌淋巴结转移灶癌细胞核TTF-1的PU值与其原发灶癌细胞核TTF-1的PU值基本相同（P〉0．05）。有淋巴结转移的肺癌原发灶癌细胞核TTF-1的PU值大于无淋巴结转移的肺癌原发灶癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）；癌细胞胞核TTF-1的PU值与肺癌大体类型、分化程度和患者性别无关（P〉0．05）；TNMⅡ-Ⅳ期癌细胞胞核TTF-1的PU值大于Ⅰ期（P〈0．001）。结论 TTF-1的表达量在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、胚胎肺泡上皮细胞和肺癌细胞核中的表达具有差异性并依次减少；肺癌细胞核TTF-1的表达具有癌组织类型差异性，腺癌和小细胞癌相对较高，鳞癌和大细胞癌极少；TTF-1胞核高表达的肺癌易发生转移，TTF-1胞核高表达的肺的腺癌、鳞癌和大细胞癌癌细胞为具有明显转移能力的肺癌细胞的重要标志之一。     

肝细胞癌组织中泛素、P27蛋白表达及两者与临床病理分级的关系

目的研究人肝细胞癌组织中泛素（ubiquitin）蛋白表达对P27蛋白表达的影响,及两者与肝细胞癌不同病理分级的关系及临床意义。方法采用免疫组织化学法结合蛋白免疫印迹技术,分别检测人肝细胞癌组织不同病理分级中泛素、P27蛋白的表达情况,分析人肝细胞癌组织中泛素、P27蛋白的不同表达情况与临床病理分级之间的相关性。结果肝细胞癌组织中均有泛素、P27蛋白的表达,泛素蛋白定位于细胞核及细胞质,其表达量随分化程度降低反而增高（P〈0．05）,P27蛋白主要定位于细胞核,其表达量随分化程度降低而降低（P〈0．05）。泛素和P27蛋白的表达与病理分级有明显的相关性（P〈0．05）。结论泛素蛋白高表达在P27蛋白降解过程中发挥重要作用,并与肝细胞癌的恶性程度、疾病进展有密切的关系。     

Skp2反义寡核苷酸对胃癌细胞SGC-7901生长增殖的影响

目的：研究S期激酶相关蛋白2反义寡核苷酸（Skp2 antisense oligodeoxynucleotide，Skp2 ASODN）对胃癌细胞SGC-7901生长增殖的影响及其可能机制。方法：采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000 Reagent包裹Skp2寡核苷酸（ODNs）转染SGC-7901细胞，通过显微镜和MTT实验观察细胞的生长和增殖情况；应用流式细胞术检测细胞周期；应用逆转录聚合酶链反应检测Skp2、P27mRNA表达变化；应用Western blot法检测Skp2蛋白及其底物p27蛋白表达变化。结果：Skp2ASODN对SGC-7901细胞的生长和增殖产生浓度依赖性抑制效应，且各组细胞的抑制率均在48h达到最高峰，其中200nmol／LASODN在48h对细胞的抑制率为42．4％，P〈0．01。200nmol／LASODN组细胞周期发生改变，S期细胞所占比例明显高于正常对照组细胞，P〈0．05。在200nmol／L浓度下，ASODN组Skp2mRNA和蛋白表达水平均低于正常对照组和Skp2无义寡核苷酸（Skp2 nonsense oligodeoxynucleotide，Skp2NSODN）组，P〈0．05；而p27mRNA表达未发生变化，但其蛋白水平明显高于正常对照组和NSODN组，P〈0．05。结论：Skp2ASODN能抑制SGC-7901细胞生长和增殖，这种抑制作用主要是通过干预泛素-蛋白酶体途径影响细胞周期而实现的。     

急性白血病细胞周期调节因子的表达及意义

目的 研究急性白血病患者骨髓细胞周期调控因子细胞S期激酶相关蛋白(Skp2)、P27、周期蛋白(cyclin) E 和Cyclin A1的表达及其临床意义.方法 将60例白血病患者分为初发组(n=41),复发组(n=9),完全缓解组(n=10),将非恶性血液病患者作为对照组(n=10).采用免疫细胞化学方法检测骨髓细胞Skp2、P27、Cyclin E 和Cyclin A1的表达,分析其表达与化疗疗效的关系.结果 急性白血病初发组及复发组Skp2、Cyclin E和Cyclin A1表达明显高于完全缓解组及对照组(P＜0.05),P27在初发组、完全缓解组及对照组的表达差异无统计学意义(P＞0.05),在复发组的表达较其他3组低(P＜0.05).急性白血病患者骨髓细胞Skp2、P27、Cyclin E和Cyclin A1阳性表达与患者年龄、性别、外周血乳酸脱氢酶水平无相关性(P＞0.05);Skp2与外周血白细胞计数呈正相关(P＜0.05);Skp2与完全缓解率呈负相关(P＜0.05),P27与其呈正相关(P＜0.05).Skp2和P27的比值比分别是0.076和6.842.结论 Skp2和P27可能是影响急性白血病化疗完全缓解率的独立预后因素.     

宫颈腺癌中HPV感染与Skp2、p27kip1蛋白表达的研究

目的探讨S期激酶相关蛋白2（Skp2）和细胞周期调控因子p27^kip1在宫颈腺癌发生发展中的作用，分析高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染与Skp2、p27^kip1，蛋白表达关系。方法采用组织微阵列技术结合原住杂交和免疫组化（二步法）检测HPV16／18DNA和Skp2、p27^kip1蛋白在86例宫颈腺癌和24例慢性宫颈炎组织中的表达。结果宫颈腺癌组HPV16／18DNA与Skp2蛋白阳性表达率分别为65．1％和68．6％，均显著高于慢性宫颈炎组（P〈O．01）。p27^kip1蛋白在宫颈腺癌组中的阳性表达率为55．8％，明显低于慢性宫颈炎组（P〈O．05）。HPV16／18感染与宫颈腺癌病理分级和组织学类型无明显相关性，但与Skp2表达呈正相关（P〈0．05），与p27单表达呈负相关（P〈O．05）。Skp2表达与宫颈腺癌的病理分级有关，G2、G3组阳性表达率均明显高于G，组（P〈O．05）。Skp2和p27^kip1表达与宫颈腺癌组织学类型有明显相关性。结论宫颈腺癌的发生与HPVl6／18感染及Skp2、p27^kip1蛋白的表达异常相关，三者协同作用导致宫颈腺癌恶性发展。     

Skp2和p27在甲状腺良恶性病变中的表达及临床意义

目的本研究探讨Skp2和p27蛋白在结节性甲状腺肿,桥本氏甲状腺炎,结节性甲状腺肿癌变和桥本氏甲状腺炎癌变组中的表达相互关系及意义。方法采用免疫组织化学方法检测19例结节性甲状腺肿、21例桥本氏甲状腺炎、23例结节性甲状腺肿癌变和18例桥本氏甲状腺炎癌变组中Skp2和p27蛋白的表达情况。结果 （1）结节性甲状腺肿癌变组和桥本氏甲状腺炎癌变组中Skp2蛋白的过度表达（82.6%,66.7%）和p27蛋白的低表达（39.1%,61.1%）相比结节性甲状腺肿（0%,89.5%）和桥本氏甲状腺炎（4.8%,100%）组织,差异有显著意义（P〈0.01）。（2）Skp2和p27在甲状腺乳头状癌组织中阳性表达率与患者年龄、性别、癌组织大小均无关（P〉0.05）。（3）在甲状腺乳头状癌中Skp2与p27的表达均呈负相关（r=-0.421,P〈0.01）。结论 （1）Skp2和p27可能参与结节性甲状腺肿癌变和桥本氏甲状腺炎癌变过程。（2）Skp2和p27可能成为良恶性甲状腺疾病的诊断指标。（3）甲状腺乳头状癌中p27可能为Skp2的下游基因,将为甲状腺乳头状癌的治疗开辟新的途径。     

肝细胞癌组织中Skp2的表达及与p27kip1、PCNA蛋白表达的关系

目的:探讨Skp2的表达在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用,及其与p27kip1(p27)和PCNA的关系。方法:收集76例HCC及癌旁组织,l0例肝血管瘤旁肝组织的临床病理档案资料,l0例HCC及癌旁肝新鲜组织,采用免疫组织化学方法及免疫印迹技术检测Skp2、p27及PCNA蛋白在这些组织中的表达。结果:免疫印迹结果显示:Skp2在HCC组织中的表达明显高于对应的癌旁肝组织。免疫组织化学结果显示HCC中Skp2的阳性率(24.08%)显著高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.001)。Skp2的表达与肝癌组织分化程度,血清AFP值及转移有关(P<0.05)。p27在正常肝组织和癌旁组织中的表达明显高于HCC组织(P<0.001)。HCC组织中PCNA蛋白的表达明显高于癌旁和正常组织(P<0.01)。HCC组织中Skp2的表达与p27呈负相关(P<0.001);与PCNA呈正相关(P<0.01)。结论:Skp2在HCC组织中表达是上调的,可能是通过作用于细胞周期调控蛋白p27,加速了对p27泛素化依赖的蛋白降解,使其表达及代谢发生异常。导致细胞周期失控并促进细胞异常增殖,从而参与了HCC的发生和发展。     

p27~(kip1)和Cyclin E在子宫内膜癌表达的临床病理意义

目的 :研究 p2 7kip1和 Cyclin E在子宫内膜癌组织的表达以及与临床病理参数的关系 ,探讨其在肿瘤发生、发展及预后的意义。方法 :采用免疫组化 S- P法检测 p2 7kip1和 Cyclin E在正常子宫内膜 ( 8例 )、子宫内膜不典型增生 ( 8例 )和子宫内膜癌 ( 5 2例 )组织中的表达。结果 :1 p2 7kip1和Cyclin E阳性表达主要定位于细胞核 ,与正常子宫内膜和内膜不典型增生组织相比 ,p2 7kip1在子宫内膜癌的表达明显下降 ,Cyclin E明显上升 ,差异具有显著性 ,在内膜癌中 p2 7kip1与 Cyclin E蛋白表达呈负相关 ( r=- 0 .30 2 6,P<0 .0 5 )。 2 p2 7kip1和 Cyclin E蛋白表达与内膜腺癌组织学分化程度和肿瘤肌层浸润程度或有无淋巴结转移有关 ,与病理类型无关 ;Cyclin E表达高低也与临床分期和 5年生存率有关。结论 :p2 7kip1表达降低和 (或 ) Cyclin E过度表达与子宫内膜癌的发生发展有关 ,Cyclin E可作为判定内膜癌预后的指标     

不同病变胆囊组织中P27kip1、CDK2、Cyclin E的表达及相关性研究

目的通过对胆囊结石、胆囊腺瘤性息肉及胆囊癌组织中细胞周期蛋白激酶抑制蛋白P27kip1、细胞周期蛋白依赖激酶CDK2、细胞周期素Cyclin E的表达及相关性研究,分析在3种胆囊病变组织中的表达与病理的关系,以探讨其与胆囊癌的发生、发展有关的可能因素.方法应用免疫组织化学的方法分析人类3组胆囊组织中的P27kip1、CDK2、Cyclin E的表达.结果P27kip1在胆囊癌的表达与CDK2的表达呈显著负相关(r=-0.949,P＜0.05);CDK2与Cyclin E的表达呈显著正相关(r=0.908,P＜0.01).胆囊癌中P27kip1的表达与Nevin病理分期呈显著负相关(r=-0.558,P＜0.01),而与患者的性别、年龄、分化及病理类型无明显关系(P＞0.05)P27kip1在胆囊癌与胆囊结石之间的表达差异有显著性(P＜0.01),胆囊结石与胆囊息肉之间的表达差异也有显著性(P＜0.01);CDK2、Cyclin E在胆囊癌与胆囊结石的表达差异有显著性(P＜0.01),胆囊结石与胆囊息肉之间的表达差异也有显著性(P＜0.05).结论胆囊癌中P27kip1、CDK2、Cyclin E基因出现异常表达,P27kip1的表达抑制及CDK2、Cyclin E的过度表达在胆囊癌的发生、发展过程中可能起促进作用.P27kip1、CDK2、Cyclin E并不能作为预测肿瘤发生,诊断早期肿瘤理想的指标;P27kip1的低表达是胆囊癌预后不良的预测指标之一,CDK2、Cyclin E作为单独的判断胆囊癌预后的指标尚缺乏足够的依据.     

Skp2和p27蛋白的表达与非小细胞肺癌的关系

目的：探讨Skp2和p27蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学S-P法检测Skp2和p27在115例NSCLC组织和正常支气管上皮细胞中的表达。结果：Skp2仅在肺癌组织中表达，且在吸烟者（P〈0．01）、鳞癌患者（P=0．03）和低分化患者（P=0．01）中过表达，而与患者的年龄、性别和病理分期无关。p27在正常支气管上皮细胞中均有表达，在肺癌组织中表达降低，但其表达仅与病理分期（P=0．02）有关；Skp2阳性表达的患者中p27表达明显降低（P=0．02）。结论：Skp2和p27的表达与NSCLC的发生和发展有一定的关系，在肺癌中二者之间可能存在某种相互作用机制。     

结直肠癌中Cks1, P27Kip1和Skp2蛋白的表达

目的:探讨Cks1在结直肠癌发生及其在Skp2调节P27Kip1降解过程中的作用. 方法:应用流式细胞术测定正常结直肠黏膜、结直肠腺瘤和结直肠癌组织中Cks1, P27Kip1和Skp2蛋白的表达. 结果:由正常结直肠黏膜、结直肠腺瘤到结直肠癌Cks1, Skp2表达呈上升趋势(P＜0.05),P27Kip1表达呈下降趋势(P＜0.05). 结直肠癌中Cks1, Skp2表达与P27Kip1表达呈负相关(r=-0.752, P＜0.05; r=-0.746, P＜0.05);Cks1与Skp2呈正相关(r=0.845, P＜0.05). 结直肠癌中Cks1的表达与肿瘤分化程度相关(P＜0.05),而与淋巴结转移及Dukes分期不相关(P＞0.05). 结论:Cks1可能参与了结直肠癌的发生;结直肠癌中Cks1可能参与了Skp2调节P27Kip1泛素化降解过程.     

Skp2和P27kip1蛋白在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理的关系

目的:研究S期激酶相关蛋白2(Skp2)与P27kip1在子宫内膜癌中的表达水平与临床病理特征的关系,探讨其在子宫内膜癌发生、发展过程中的作用。方法:采用免疫组化SP法检测42例子宫内膜癌组织和12例正常子宫内膜组织中Skp2和P27kip1的表达。结果:42例子宫内膜癌组织中Skp2的阳性表达率为30.95%(13/42),显著高于正常内膜组织0.00%(0/12)(P<0.01);P27kip1的阳性表达率为54.76%(23/42),低于正常内膜组织91.67%(11/12)(P<0.05);统计分析还显示:Skp2和P27kip1的表达与肿瘤的分化程度、FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05),且Skp2和P27kip1在子宫内膜癌中的表达存在负相关(rs=-0.38,P<0.01)。结论:Skp2和P27kip1在子宫内膜癌的发生、发展中有一定协同作用,对其研究可为子宫内膜癌的基因治疗和预后评估提供有益线索。     

宫颈鳞状细胞癌组织中Skp2与P27~（Kip1）的表达及其临床意义

目的探讨细胞S相激酶相关蛋白（Skp2）和P27Kip1在宫颈鳞状细胞癌（SCC）发生过程中的表达及二者关系。方法用免疫组化方法检测10例正常宫颈组织、43例宫颈上皮内瘤变（CIN）和34例SCC组织中Skp2、P27Kip1蛋白的表达,用RT-PCR法对34例新鲜SCC组织进行Skp2 mRNA表达的检测。结果Skp2 mRNA在SCC呈过表达;Skp2蛋白表达在SCC发生过程中呈增高趋势;Skp2蛋白阳性率与淋巴结转移有关（P〈0.05）;COX分析表明,Skp2是一个独立的预后参数。P27Kip1蛋白在正常宫颈中表达最高,随病变进展表达呈下降趋势;P27Kip1蛋白阳性率与淋巴结转移相关（P〈0.05）;Skp2与P27Kip1表达呈显著负相关（P〈0.01）。结论Skp2高表达和P27Kip1失活致细胞增殖周期失调在SCC发生过程中起重要作用,可作为SCC早期诊断、临床生物学行为和预后评价的新的参考指标。