血清miR-103可作为乳腺癌潜在的诊断标记物

摘要：目的探究血清miR-103在乳腺浸润性癌患者中表达的诊断价值及其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法搜集50例首
治的乳腺癌患者的血清及相应的石蜡包埋组织和50例正常女性的血清作为对照,从血清中提取总RNA,运用荧光定量PCR的
技术检测miR-103在乳腺癌和正常人血清中的表达情况。运用SPSS16.0软件行t检验、ANOVA、χ2检验、秩和检验及MedCalc
软件进行受试者工作特征曲线（ROC）分析。结果与对照组相比,miR-103在乳腺癌患者血清中表达量显著上调（P<0.01）,血清
中miR-103 上调的相对表达量与乳腺癌临床分期(P<0.05)、淋巴结转移（P<0.05）相关。miR-103 所得ROC 曲线下面积为
84.3%,区别乳腺癌和正常人的敏感性和特异性分别为84%、70%。结论血清miR-103可作为乳腺癌一项潜在的诊断标记物,
并对乳腺癌的临床病理特征具有提示作用。
     

全血中miR-155与乳腺癌的关系研究

目的探讨全血中miR-155与乳腺癌临床病理特征之间的关系。方法收集2010年12月至2011年4月淮安市第一人民医院甲状腺乳腺外科符合入选条件的65例女性（乳腺癌47例,非乳腺癌18例）的血液标本,提取全血中总RNA,通过荧光实时定量PCR的方法,检测全血中miR-155表达水平,分析其与乳腺癌临床病理特征问的关系。结果乳腺癌患者全血中的miR．155的表达水平与非乳腺癌患者相比上调,差异有统计学意义（P〈0．05）;与淋巴结转移阴性的乳腺癌患者相比,淋巴结转移阳性的乳腺癌患者全血中miR-155的表达水平上调,差异有统计学意义（P〈0．05）;与Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌患者相比,Ⅲ期乳腺癌患者全血中miR-155的表达水平上调,差异有统计学意义（P〈0．05）;与T1乳腺癌相比,他和T3乳腺癌患者中miR-155表达上调,差异有统计学意义（P〈0．05）;与ER、PR阴性的乳腺癌相比,ER、PR阳性的患者全血中miR-155表达水平下调,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论全血中miR-155的表达水平与乳腺癌的临床病理特征相关,全血中的miRNA有望成为新一代的乳腺癌的肿瘤标志物。     

miR-195在乳腺癌患者血浆中的表达及其临床意义

目的：探讨mtR-195在乳腺浸润性导管癌患者术前、术后2周血浆中的表达及其与乳腺癌临床病理特征的相关性。方法：以miR-16为内参,采用茎环RT-qPCR方法检测48例术前、术后2周乳腺浸润性导管癌患者及35例健康对照者血浆中miR-195的表达,并分析其表达与乳腺浸润性导管癌临床病理指标的关系。结果：乳腺浸润性导管癌患者血浆中miR-195的表达较健康对照者明显升高（P〈0．05）,术后2周表达明显降低至健康对照者水平。ROC曲线显示,血浆miR-195评价乳腺浸润性导管癌的敏感性和特异性可达94．4％和68．8％。与临床特征相关性分析统计未见血浆miR-195表达与乳腺浸润性导管癌肿块大小、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体-2（Her-2）状态及淋巴结转移状态等临床病理特征有明显相关（P〉0．05）。结论：血浆中miR-195的异常表达可作为乳腺癌诊断的新的肿瘤标志物。     

血清miR-141和miR-195-5p在乳腺癌早期诊断中的临床意义

 目的 观察血清miR-141和miR-195-5p在乳腺癌早期诊断中的临床意义。方法 选择2015年1月至2018年6月在复旦大学附属华山医院经病理确诊的乳腺癌患者126例,作为乳腺癌组;选择同期在我院活组织检测为乳房良性病变的患者和健康体检者,分别作为良性病变组（75例）和对照组（45例）。用qRT-PCR法检测各组血清miR-141和miR-195-5p水平。并用miR-141和miR-195-5p质粒转染到人乳腺癌细胞MX-1中,观察其增殖和迁移能力。观察各组血清miR-141和miR-195-5p水平变化,乳腺癌患者术后血清miR-141和miR-195-5p水平变化,乳腺癌患者血清miR-141和miR-195-5p水平与临床指标的相关性,及其诊断乳腺癌的灵敏度和特异性。结果 乳腺癌组血清miR-141水平显著高于良性病变组和健康对照组（P<0.01）,良性病变组血清miR-141水平高于健康对照组（P<0.01）;乳腺癌组血清miR-195-5p水平明显低于良性病变组和健康对照组（P<0.01）,良性病变组血清miR-195-5p水平较健康对照组明显降低（P<0.01）,手术后乳腺癌组和乳腺良性病变组血清miR-141水平较手术前明显降低（P<0.01）,而miR-195-5p水平较手术前明显升高（P<0.01）。乳腺癌患者血清miR-141和miR-195-5p水平与年龄和肿瘤直径无明显相关性,而与淋巴结转移、雌激素受体（estrogen receptor,ER）、孕激素受体（progesteron receptor,PR）、人类表皮因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2,HER-2）、TNM分期、分子分型和组织分型有明显相关性（P<0.01）,多元线性回归分析显示血清miR-141和miR-195-5p表达水平与淋巴结转移、PR、TNM分期和分子分型呈线性相关（P<0.05）。MX-1细胞转染miR-141和miR-195-5p质粒后,miR-141促进MX-1细胞的增殖和迁移能力（P<0.01）,而miR-195-5p抑制MX-1细胞的增殖和迁移能力（P<0.01）。在乳腺癌诊断方面,联合检测的灵敏度为88.1%,特异性为92.0%,AUC为0.964,明显优于单个指标miR-141（Z=3.413,P<0.01）和miR-195-5p（Z=3.426,P<0.01）,而血清miR-141和miR-195-5p的AUC相比较差异无统计学意义。结论 miR-141和miR-195-5p参与乳腺癌疾病的发生发展过程,与乳腺癌细胞增殖和迁移密切相关,在乳腺癌早期诊断中具有重要的临床意义。     

血清microRNA-4286 表达与胃癌临床 病理特征的关系及其临床意义

目的 探讨胃癌患者血清microRNA-4286（miR-4286）的表达水平与胃癌临床病理特征的关 系,分析其对胃癌的临床诊断效能及意义。方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应检测健康体检者（对照组） 和胃癌患者（胃癌组）血清miR-4286 的表达,分析miR-4286 的表达量与胃癌临床病理特征的关系;通过 受试者工作特征曲线和危险分数分析法评估miR-4286 对胃癌的诊断效能;通过电化学发光免疫分析法检测 血清肿瘤标志物CEA、CA19-9 和CA72-4 的表达。结果 胃癌组患者血清中miR-4286 表达量高于对照祖 （P <0.05）。miR-4286 的表达水平与胃癌患者的临床分期、淋巴结转移及远处转移等无关（P >0.05）,与肿 瘤细胞分化程度有关（P <0.05）。两组血清中CEA、CA19-9 表达量比较,差异无统计学意义（P >0.05）,胃 癌组CA72-4 表达量较对照组升高（P <0.05）。miR-4286 诊断胃癌的曲线下面积为0.727,特异性和阳性预 测值分别为90% 和0.872,高于肿瘤标志物CA72-4。结论 miR-4286 在胃癌血清中高表达,其表达水平与 病理分化程度有关,可能成为胃癌临床诊断的潜在指标。     

microRNA-21在乳腺浸润性导管癌患者血清中的表达及临床意义

目的 通过测定microRNA-21在试验组（乳腺浸润性导管癌女性患者组）及对照组（正常女性组）血清中的表达情况;分析这两组血清中microRNA-21表达的差别,并分析乳腺癌组与其临床病理特征之间的关联.方法 通过PCR检测45例乳腺癌和45例正常女性血清中microRNA-21的表达,分析其表达的差异及其与临床病理资料（肿瘤的TNM分期、肿瘤的大小、淋巴结的转移、激素受体状况等）的关系.结果 血清中microRNA-21在乳腺癌女性患者组的相对表达量高于正常对照组血清中的相对表达量,microRNA-21在乳腺癌女性患者组的表达明显上调,microRNA-21在乳腺癌女性患者组的相对表达与患者的年龄、女性的月经状态等均无关,与肿瘤的分期、腋窝有无淋巴结转移情况等明显相关.结论 microRNA-21在乳腺癌女性患者组的相对表达量高于正常对照组血清中的表达,microRNA-21在乳腺癌的表达明显上调,检测其在血清中表达情况可能成为乳腺癌诊治、判断预后的一种新指标.     

MircoRNA-195在胃癌患者血清及组织中的表达水平及意义

目的  研究microRNA-195（miR-195）在患者血清及胃癌组织中的表达水平,并探讨其表达水平与胃癌临床病理的关系。方法  选取该院62例胃癌患者为研究组,同期来该院体检的36例健康人群为对照组,采用RT-PCR法检测两组人群血清中以及胃癌组织及对应癌旁组织中的miR-195的表达水平,并探讨miR-195与临床病理参数的相互关系。结果  研究组血清中miR-195的表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。miR-195在胃癌组织中的表达水平亦显著低于对应的癌旁组织,差异有统计学意义（P <0.05）;相关分析结果显示,miR-195的低表达与胃癌浸润深度、分化程度、临床分期及淋巴结转移相关,差异有统计学意义（P <0.05）,而与肿瘤部位均无相关（P >0.05）。结论  miR-195在胃癌患者中的低表达可能对胃癌的发生发展有一定的促进作用。

     

miR-7在肾癌中的表达及临床意义研究

目的检测肾细胞癌组织及相应癌旁正常组织中miR-7的表达,分析18达与临床病理特征之间的关系,为进一步研究miR-7在肾癌的发生发展中作用奠定基础。方法收集48例经手术切除的配对肾癌及癌旁组织标本,提取组织中总RNA,经逆转录获得cDNA,采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法检测标本中miR-7表达量,并通过统计学软件分析其表达量与患者临床病理特征之间的相关性。结果与相应癌旁组织相比,肾癌组织中miR-7表达量明显升高,其中34例（70.8%）肾癌标本miR-7表达上调,14例（29.2%）表达下调,差异有统计学意义（P〈0.05）。肾细胞癌中miR-7表达上调与患者年龄、性别、肾癌组织类型、TNM分期、AJCC临床分期无相关性（P〉0.05）。结论 miR-7在肾癌组织中明显高表达,提示其可能与肾癌的发生和发展相关,可能成为肾癌早期诊断、治疗乃至预后判断的新的生物标记物。     

miR-93在多囊卵巢综合征患者血清中的表达及临床意义

目的:探讨miR-93在多囊卵巢综合征（PCOS）患者血清中的表达及临床意义。方法:利用实时荧光定量PCR分别检测PCOS患者（25例）和正常对照（25例）血清中miR-93的相对表达量,并分析miR-93与PCOS临床特征（高雄激素血症、胰岛素抵抗）的关系;绘制 ROC曲线评价血清miR-93诊断PCOS的价值。结果:与对照组相比,miR-93在PCOS患者血清中的相对表达量明显升高（Z =7.614,P < 0.01）;体质指数（BMI）、空腹血糖（FBG）、血清总睾酮（TT）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）在PCOS患者中均升高（P < 0.05）。在对照组,血清miR-93的水平与TT、HOMA-IR的相关系数r值分别为0.03、0.39（均P > 0.05）;在PCOS组,血清miR-93的水平与TT、HOMA-IR的相关系数r值分别为0.33、0.28（均P > 0.05）。ROC曲线分析显示,血清miR-93用于诊断PCOS的曲线下面积为0.73,敏感度为70%,特异度为78%。结论:miR-93在PCOS患者血清中表达上调,可能与PCOS的发生发展相关,且用于诊断PCOS具有一定的价值。     

大肠癌患者血浆miR-106a的表达及意义

目的研究血浆miR-106a在大肠癌患者中的表达及其与临床病理特征的关系,分析其诊断价值。方法选取3例大肠癌组
织及配对正常粘膜组织进行miRNA芯片检测,筛选出大肠癌组织中异常表达的miRNA;收集50例首治的大肠癌患者的血浆标
本和47例健康志愿者的血浆作为对照,提取血浆中总RNA,运用荧光定量PCR方法检测miR-106a在大肠癌和正常人血浆中的
表达情况。同时收集患者术后7 d血浆标本40例,分析术前、术后miR-106a的表达变化。分析术前血浆miR-106a表达与临床
病理特征间的关系,并对受试者行ROC分析。结果miRNA芯片检测大肠癌组织中miR-106a的表达较正常粘膜明显增加;与
健康对照组相比,miR-106a在大肠癌患者血浆中表达量显著上调（P=0.012）,术后患者血浆miR-106a的表达较术前明显降低
（P<0.01）。术前血浆miR-106a的表达与大肠癌患者淋巴结转移、TNM分期及分化程度均无关（P>0.05)。miR-106a 所得ROC
曲线下面积为0.661(95% CI∶0.55~0.772),区别大肠癌和正常人的敏感性为62.3%,特异性为68.2%。结论血浆miR-106a在大
肠癌患者中表达上调,可能对大肠癌的诊断具有一定临床价值。
     

血清HIF-1α、组织P53表达水平对乳腺癌预后意义

目的探讨血清缺氧诱导因子-1（HIF-1）和组织P53的表达水平与乳腺癌预后的关系。方法悬浮芯片法检测117例乳腺原发浸润性导管癌、10例复发乳腺浸润性导管癌、20例乳腺良性肿瘤和31例正常人血清中HIF-1含量,并利用免疫组织化学检测其组织中P53蛋白的表达。结果原发、复发乳腺癌血清HIF-1和P53蛋白表达水平明显高于良性肿瘤和正常对照组（P〈0.01）,复发癌高于原发癌（P〈0.05）;血清HIF-1和组织P53蛋白水平在不同的病理学特征中差异有显著性（P〈0.05）;乳腺癌患者的HIF-1与P53表达水平呈正相关（r=0.544,=0.000）。结论血清HIF-1参与了乳腺浸润性导管癌的病理过程,是评估乳腺浸润性导管癌患者预后的重要指标。     

免疫PCR法检测乳腺癌患者血清p185抗体的临床价值

目的 以免疫PCR法来检测乳腺癌患者血清中的p185抗体,并研究血清p185抗体在乳腺癌血清学诊断、预后判断以及疗效判断中的临床价值.方法 选取2008年至2010年期间就诊的经病理确认手术切除乳腺癌患者60例,所有乳腺癌患者均在术后7～10天左右接受常规方案化疗.收集患者术前、术后并三次化疗结束后血清,同时收集健康体检者血清60份.利用本实验室建立的免疫PCR法分别检测样本的血清p185抗体,并分析血清p185抗体与患者肿块大小、临床分期、淋巴结转移情况、绝经状态、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的关系.用卡方检验同时分析检测p185抗体对乳腺癌不同化疗方案的疗效评判及与复发转移的关系.结果 乳腺癌患者血清p185抗体阳性率为30％（18/60）,明显高于非癌者（P＜0.01）;乳腺癌患者血清p185抗体与肿瘤大小（x2=11.428,P＜0.05）、临床分期（x2=9.965 8,P＜0.05）关系密切,但与绝经状态、雌激素受体状态（ER）、孕激素受体状态（PR）、淋巴结转移情况等因素均无关系（P＞0.05）.乳腺癌患者接受两种不同的化疗方案（CAF/CEF）治疗结束后血清p185抗体阳性表达二者之间无明显差异（x2 =0.051,P＞0.05）.乳腺癌患者血清p185抗体阳性患者复发转移率高于p185抗体阴性患者,二者之间有明显差异（x2=2.147,P＜0.05）.结论 免疫PCR法检测血清P185抗体可望为乳腺癌的早期诊断、复发转移的监测及预后判断提供了一种简单易行的方法.     

精神分裂症患者血浆MicroRNA异常表达的对照研究

目的检测microRNA（miRNA或miR）在精神分裂症患者中的异常表达,探究miRNA能否作为精神分裂症的生物标记物。方法连续入组64例精神分裂症患者和64例配对正常对照,使用实时荧光定量RT—PCR技术检测病例组和对照组血浆10种miRNA（miR-30e、miR一34a、miR一181b、miR一195、miR一346、miR一432、miR一7、miR一132、miR一137andmiR一212）的相对表达水平。结果病例组血浆miR一30e、miR一18lb、miR一346、miR一34a和miR一7表达水平（2．99±1．59,2．29±0．77,4．24±1．51,9．94±1．52,11．08±2．24）较对照组（3．74±1．28,2．87±0．90,4．65±0．99,10．90±1．99,12．00±1．95）显著上调（P〈0．05—0．001）。ROC曲线分析显示,5种miRNA作为联合生物标记物对精神分裂症具有较高诊断价值（AUC为0．705,敏感度和特异度分别为34．5％和90．2％）;Logistic回归分析显示miR-181b具有最高相对危险度（OR=2．483）。结论miR一30e、miR一181b、miR一346、miR一34a和miR．7可能成为精神分裂症的联合生物标记物。     

尿液中miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p检测在前列腺癌中的诊断及临床意义

目的:建立尿液miRNA检测板,作为诊断前列腺癌（PC）的无创性生物标志物。方法:采用miRNAs芯片分析对照1组（6名）及PC1组（18例）中miRNAs表达,并进一步利用qRT-PCR对20名对照2组及59例PC2组（GS2 6组22例,GS2 7组19例,GS28组18例）尿液、血清标本进行差异基因的进一步验证。应用受试者工作特征（ROC）曲线分析组合诊断模型的准确真实性。结果:获得在PC1组中20个miRNAs差异表达谱,与对照1组相比,miRNA-24-3p及miRNA-222-3p显著表达下调（T=5.79、4.59,均P＜0.05）,用于PC诊断检测。在扩大样本量的PC患者尿液及血清样本中,根据GS分组的GS26、GS27及GS28组中,与对照2组相比,miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p表达水平也都显著下调（t=3.89,P＜0.05）,ROC分析联合诊断模型具有较高的准确度（曲线下面积为0.93,OR=1.37,95% CI:0.92~1.76,P＝0.02）。结论:在尿液、血清样本中建立了miRNA-24-3p联合miRNA-222-3p组合模型,可作为诊断PC的无创性生物标志物。     

乳腺浸润性导管癌中miR-125b的表达及其临床意义

目的：探讨miR-125b在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法：应用Realtime RT—PCR方法检测42例乳腺浸润性导管癌及癌旁非肿瘤乳腺组织中miR-125b的表达,分析miR-125b表达与乳腺癌常用的临床病理指标的关系。结果：miR-125b在癌组织中的表达低于非肿瘤组织,差异有显著性（P〈0．01）;miR-125b的表达与乳腺癌的淋巴结转移状态及Her-2的表达相关（P=0．019和P=0．033）,miR-125b的表达与年龄、肿块大小、临床病理分期及雌、孕激素状态未见显著相关性。结论：miR-125b在乳腺浸润性导管癌中的表达异常,可能和乳腺癌的侵袭转移等恶性生物学行为有关,有望成为判断乳腺癌预后的指标及治疗靶点。     

恶性肿瘤患者血清PA、TSGF检测及其临床意义

目的:探讨血清前清蛋白(prealbumin,PA)和肿瘤特异性生长因子(tumor specific growth factor,TSGF)对恶性肿瘤的诊断价值。方法:采用免疫比浊法和化学法分别检测169例恶性肿瘤患者、24例良性肿瘤患者血清PA、TSGF,并以30名健康体检者作对照。结果:良性肿瘤组血清PA高于健康对照组(P<0.01),而TSGF与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05);恶性肿瘤组血清PA (除肾癌患者外)与健康对照组比较均显著降低(P<0.01),TSGF均显著升高(P<0.01)。PA阳性率为72.19%,特异性为93.33%;TSGF阳性率为62.13%,特异性为86.67%;二者联合检测阳性率为79.88%。结论:恶性肿瘤患者血清PA、TSGF含量变化明显,联合检测有助于提高恶性肿瘤诊断的符合率。