非酒精性脂肪肝小鼠肝内PPARα与Bax的表达及脂代谢变化

以高脂饮食诱导小鼠建立非酒精性脂肪肝模型,通过检测肥胖抵抗型非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠肝内PPARα及Bax基因的表达及脂肪酸氧化代谢的水平,初步探讨非酒精性脂肪肝小鼠体内脂代谢变化的分子生物学机制。结果显示,与空白对照组相比,高脂模型组中小鼠体重下降,但肝湿重及肝指数却明显上升,肝脏内PPARα基因表达受抑制,脂质代谢能力减弱,且NAFLD小鼠中PPARα基因的表达随着脂肪肝的病变程度而变化;Bax基因在高脂饮食组中表达量上调,肝细胞凋亡水平上升。说明非酒精性脂肪肝小鼠体内PPARα基因表达减少而Bax基因表达上调,肝脏脂肪病变加重,从而引起脂肪酸代谢水平的下降,增加脂质的异位沉积,增强了肝细胞的凋亡。     

脂肪肝小鼠的肝脏脂质代谢相关基因表达特征分析

目的 分析ob/ob肥胖小鼠脂肪肝中脂质代谢相关基因的表达特征.方法 18周龄雄性ob/ob及其同窝对照小鼠各4只,禁食16h后处死.检测小鼠体质量、肝脏湿质量/体质量、肝脏三酰甘油(TG)水平;用H-E和油红O染色观察肝脏的形态结构和脂质沉积情况;用实时荧光定量PCR方法检测肝脏脂质代谢相关基因的mRNA表达情况.结果 Ob/ob小鼠体质量、肝脏湿质量/体质量和肝脏组织TG水平均高于对照小鼠(P＜0.05),H-E和油红O染色显示ob/ob小鼠发生肝脏脂质沉积;肝脏脂肪酸转位酶(CD36)、脂肪酸结合蛋白1(FABP1)、脂肪酸合酶(FASN)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、极长链脂肪酸延长酶6(ELOVL6)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)等mRNA表达水平在ob/ob小鼠肝脏均高于对照小鼠(P＜0.05),而过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)、软脂酸辅酶A氧化酶1(ACOX1)、载脂蛋白B(ApoB)和微粒体TG转移蛋白(MTP) mRNA在两组小鼠肝脏中的mRNA表达水平差异无统计学意义.结论 Ob/ob小鼠肝脏的脂肪酸摄取和从头合成相关基因的mRNA表达水平升高,而脂肪酸氧化及脂质向肝外转运的相关基因的mRNA表达水平无明显改变.     

亚慢性暴露壬基酚诱发大鼠非酒精性脂肪肝的研究

目的 探讨连续90 d灌胃壬基酚(NP)能否诱发非酒精性脂肪肝(NAFLD).方法 48只雄性SD大鼠分成4组,即对照组,低、中、高剂量组,NP剂量分别为0、20、60、180mg·kg-1·d-1,每组平均分为常规饮食、高脂饮食两个亚组.空腹灌胃NP 90 d,期间每周称量1次体质量,第60天行肝脏彩超观察.第90天全自动生化分析仪检测肝功、血脂,高效液相色谱仪检测肝脏中NP的浓度.结果 各剂量常规饮食组与对照组比较,低、中、高剂量组三酰甘油(TG)降低(P＞0.05),天门冬酸氨基转移酶(AST)升高(P＜0.05),低、高剂量组丙氨酸氨基转移酶(ALT)降低(P＜0.05),低密度脂蛋白(LDL)减低(P＜0.05),对照组及低、中剂量组未出现脂肪肝,高剂量组1/2的动物出现脂肪肝.各剂量高脂饮食组与对照比较,低、中、高剂量组、TG升高(P＜0.05),ALT降低(P＜0.05),AST升高(P＜0.05),HDL升高(P＜0.05),高剂量组总胆固醇(TC)升高(P＜0.05),高脂饮食组被选部分动物中,低、中剂量组1/2的动物出现了脂肪肝,高剂量组则全部出现脂肪肝病变.与对照组比较,低、中、高剂量组大鼠肝脏NP浓度升高(P＜0.05),肝脏NP浓度与染毒剂量的存在秩相关rs常规饮食=0.942,rs高庸饮食=0,481(P＜0.05).结论 亚慢性染暴露NP是导致NAFLD的危险因素之一,增加了NAFLD的发病风险.     

青蒿琥酯对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏TLR4及MyD88表达的影响

目的 观察青蒿琥酯对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝脏Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子S8(MyD88)和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)表达的影响.方法 70只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、青蒿琥酯高[60 mg/(kg·d)]、中[30 mg/(kg ·d)]、低[15 mg/(kg·d)]剂量组.采用高脂饲料构建NAFLD小鼠动物模型,于给药后12周末处死,观察肝脏病理变化,酶法检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,RT-PCR法检测肝组织TLR4、MyD88、PI3K mRNA表达.结果 各青蒿琥酯剂量组小鼠血清TG、TC和ALT水平比模型组显著降低,肝脏脂肪变性明显减轻,肝组织TLR4、MyD88及PI3K表达量也显著降低(P＜0.01,P＜0.05).与正常对照组相比,模型组肝组织TLR4、MyD88及PI3K表达量显著升高(P＜0.01),且三者有相同的变化趋势.结论 TLR4/MyD88及其下游PI3 K/AKT通路可能在NAFLD发病中起重要作用.青蒿琥酯可通过降低TLR4、MyD88、PI3K mRNA表达,减轻NAFLD小鼠肝脏脂肪变性程度,降低血脂,改善肝功能指标.     

荷叶生物碱对非酒精性脂肪肝肝脏脂质沉积的影响

目的 研究荷叶生物碱对小鼠非酒精性脂肪肝肝脏甘油三酯(TG)及胆固醇(TC)的影响.方法 以复方高脂饮食结合5%四氯化碳腹腔注射建立非酒精性脂肪肝小鼠模型,造模第14d,将36只模型鼠随机分为模型组,阳性对照组(易善复150 mg/kg),荷叶生物碱治疗组(100 mg/kg).另随机选取12只同周龄小鼠为正常对照组.分别观察荷叶生物碱对非酒精性脂肪肝小鼠的脂肪变性及肝脏TC、TG含量的影响.结果 荷叶生物碱治疗42d后,小鼠肝组织脂肪变性程度改善(P＜0.05),肝脏TC、TG含量降低(P＜0.05).结论 荷叶生物碱具有治疗小鼠非酒精性脂肪肝的作用,其作用机制与降低肝脏TC、TG水平有关.     

线粒体靶向小分子IR-61改善小鼠非酒精性脂肪肝

目的 探讨线粒体靶向七甲川花菁类荧光小分子IR-61对小鼠非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的治疗效果.方法 通过喂养高脂饲料建立NAFLD小鼠模型,腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)或IR-61,治疗18周后,取肝脏组织切片HE常规染色,显微镜下观察,采用酶比色法检测肝脏和血清甘油三酯(triglyceride,TG)含量,Real-time PCR和Western blot法检测固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl-CoA carboxylase-1,ACC1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor-α,PPARα)和肉毒碱棕榈酰转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase-1,CPT1)的mRNA及蛋白表达水平.结果 IR-61可降低高脂诱导的小鼠肝脏TG含量增加,抑制SREBP-1c、ACC1过度表达;同时增加肝脏PPARα、CPT1的表达(P ＜0.05);IR-61可明显改善小鼠肝脏的脂肪沉积.结论 IR-61通过抑制高脂诱导的脂肪合成代谢过度增强,促进肝脏脂肪酸氧化,减少肝脏甘油三酯沉积,从而改善非酒精性脂肪肝.     

IL-17A基因敲除减轻脂多糖诱导的脂肪肝小鼠肝脏炎症性损伤及其机制

目的 在长程高脂膳食诱导的脂肪肝小鼠中,探讨白介素17A(interleukin 17A,IL-17A)基因缺陷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肝损伤的作用及其可能的机制.方法 利用IL-17A基因敲除小鼠构建脂肪肝急性损伤模型,通过检测血浆中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)评估肝脏损伤情况,通过检测血浆中3种主要炎症因子TNF-α、IL-1β以及IL-6评估机体炎症水平,通过肝脏病理形态观测肝脏组织炎症细胞浸润和肝细胞损伤情况.通过对肝脏组织表达mRNA进行转录组学分析,寻找IL-17A基因敲除在高脂膳食(high fat diet,HF)+LPS诱导的肝损伤中的发挥作用的相关分子信号机制.结果 在高脂膳食喂养辅之以一次性LPS刺激下,IL-17A基因敲除(gene knockout,KO)小鼠血浆中的ALT及AST水平显著降低(P＜0.05);KO小鼠血浆中炎症因子水平显著降低(P＜0.05),肝脏组织中浸润的炎症细胞显著减少(P＜0.05).肝脏转录组学分析结果显示,刺激后,KO小鼠下调的938个基因主要富集于氧化应激(P＜0.01)、过氧化氢代谢途径(P＜0.01)以及谷胱甘肽代谢途径(P＜0.01).Real-time PCR检测发现KO小鼠肝脏中与过氧化氢代谢相关的CAT、GPX1、IDH1、IDH2以及ME1基因的mRNA水平显著升高.同时,肝脏的氧化应激水平显著降低(P＜0.05).TUNEL检测进一步检测结果显示,KO小鼠肝脏凋亡细胞数量显著减少(P＜0.01).结论 IL-17A基因敲除可能通过促进过氧化氢代谢减轻LPS诱导的脂肪肝小鼠急性炎症性肝损伤.     

瘦素及其肝脏受体在大鼠NAFLD形成过程中的变化及意义

目的 探讨瘦素及瘦素受体在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)发病机制中的可能作用.方法 Wistern 雄性大鼠36只,体重在(200±20)g/只,随机分为高脂饮食组(F组)与正常对照组(C组).以高脂饮食喂养12周,建立NAFLD大鼠模型,基础饮食为对照组.高脂饮食组设4、8、12周3个时相点.动态观察大鼠体重变化,放射免疫法检测大鼠血清瘦素浓度,光镜下观察肝脏脂肪变情况,并进行脂肪变分度及炎症分级, 免疫组织化学法观察瘦素受体在正常大鼠肝脏及非酒精性脂肪肝形成过程中的表达变化,Western-Blot检测表达量.结果 F组肝脏体积显著＞C组(P＜0.05);F组的大鼠血清瘦素浓度显著高于正常对照组(P＜0.05),且随着脂肪变程度的加重,血清瘦素浓度有升高趋势;瘦素受体的表达在高脂饮食早期即有增加,且在肝脏的表达随着肝脏脂肪变的加重有增加趋势,尤其在重度脂肪肝肝细胞中表达明显.结论 血清瘦素浓度在大鼠NAFLD的形成中逐渐升高,瘦素受体在NAFLD形成过程中在肝脏表达上调,瘦素及其受体可能参与了NAFLD肝脏能量代谢紊乱的发生.     

松果菊苷通过调控SIRT1/PGC-1α信号通路改善肥胖糖尿病小鼠肝损伤

目的 探讨松果菊苷(ECH)通过调控SIRT1和PGC-1α及其下游因子表达水平在改善肥胖糖尿病小鼠(db/db小鼠)肝损伤中的作用。方法 20只8周龄db/db小鼠采用数字表法随机分为糖尿病模型组(db/db组,0.9%氯化钠注射液灌胃,n=10)和松果菊苷治疗组(db/db+ECH组,松果菊苷灌胃,n=10)。8周龄db/m小鼠(db/m组,生理盐水灌胃,n=9),为正常对照组。每天给药1次,共处理10周。观察一般情况,监测各组小鼠体质量和血糖、计算肝质量指数,检测血清中ALT、AST、TG、TC、HDL-C、LDL-C水平; HE染色和油红O染色观察肝脏病理学改变和脂质沉积;Western blot法检测肝脏SIRT1、PGC-1α、PPARα、CPT1蛋白质表达量;RT-PCR法检测肝脏SIRT1、PGC-1α mRNA表达。结果 糖尿病肝损伤主要表现为非酒精性脂肪肝(NAFLD),与正常对照组比较,糖尿病模型组肝质量指数和血糖增加,肝脏组织细胞气球样变性,脂滴沉积,炎性细胞浸润,血清中ALT、AST、TG、TC、LDL-C水平升高,HDL-C降低,SIRT1、PGC-1α蛋白质和mRNA表达水平降低,PPARα、CPT1蛋白质表达降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与糖尿病对照组比较,松果菊苷治疗组小鼠一般情况改善,糖尿病模型组肝质量指数和血糖降低,肝脏组织脂质沉积和细胞坏死减轻,血清中ALT、AST、TG、TC、LDL-C水平降低,HDL-C增加,SIRT1、PGC-1α蛋白质和mRNA表达水平上调, PPARα、CPT1蛋白质表达上调,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 松果菊苷可延缓肥胖糖尿病所致的肝损伤的发生, 其机制与上调肝SIRT1/PGC-1α通路及其下游因子表达水平有关。     

科学认识非酒精性脂肪肝

肝脏是内源性血脂和脂蛋白合成代谢的主要器官,脂肪肝是常见的慢性肝脏疾病之一。非酒精性脂肪肝(NAFLD)是一种无过量饮酒史,以肝实质细胞脂肪变性和脂肪蓄积为特征的临床病理综合征。高脂血症是NAFLD的一个高危因素,二者互为因果恶性循环关系。要减少非酒精性脂肪肝发病率、改善预后,我们就要对非酒精性脂肪肝与高脂血症的关系、非酒精性脂肪肝临床表现及治疗有科学认识。     

磷酸腺苷激活的蛋白激酶在慢性应激诱发小鼠非酒精性脂肪肝中的作用

目的 探讨磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)及其激动剂5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(AICAR)在慢性应激诱发小鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)中的作用.方法 建立小鼠慢性应激模型,设对照组、应激组、应激加AICAR给药组和AICAR给药组,每组6只.采用ELISA法检测小鼠血浆促炎性细胞因子(肿瘤坏死因子a,γ干扰素)浓度,采用自动生化分析仪检测小鼠血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆固醇、三酰甘油、游离脂肪酸的水平,采用苏木精-伊红染色和油红O染色检测肝细胞脂肪变性,采用蛋白质印迹法检测肝组织AMPK蛋白表达;然后用AICAR处理慢性应激小鼠并检测上述指标的变化.结果 慢性应激导致小鼠肝细胞脂肪变性,肝功能损害(ALT、AST水平升高,P＜0.01),血浆促炎性细胞因子浓度升高(P＜0.05),血浆游离脂肪酸水平升高(P＜0.01)以及肝组织AMPK蛋白表达降低(P＜0.01).AICAR改善了肝细胞脂肪变性,并缓解了上述指标的变化.结论 慢性应激可能通过AMPK信号通路诱发NAFLD,AMPK激动剂AICAR可缓解慢性应激导致的NAFLD.     

n-3多不饱和脂肪酸对大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用

目的 探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFA)对高脂诱导的Wister大鼠非酒精性脂肪性肝(NAFLD)的改善作用.方法 Wister雄性大鼠30只,分为正常组、模型组、n-3 PUFA组.采用高脂喂养建立NAFLD模型,实验20周后,每组抽出7只大鼠检测血清及肝脏总胆固醇(TG)及三酰甘油(TC);其余3只大鼠肝脏苏木精-伊红(HE)染色;应用实时定量PCR(Real timeqPCR)及Western blot检测肝脏组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA及蛋白水平.结果 模型组大鼠血清及肝脏TG、TC水平明显高于对照组(P＜0.01),加入n-3 PUFA后血清及肝脏的TG、TC水平明显下降(P＜0.05).HE染色能明显观察到模型组大鼠肝细胞脂肪变性,而n-3 PUFA有明显改善效果.模型组大鼠炎症分子MCP-1、iNOS、TNF-α基因表达水平明显高于对照组(P＜0.05),而n-3 PUFA组与模型组比较,MCP-1、iNOS、TNF-α炎症分子的表达水平明显下降(P＜0.05).结论 高脂喂养能引起大鼠肝脏严重的脂肪变性及炎性反应,而n-3 PUFA起明显的改善作用.     

维生素D受体和脂联素基因多态性和非酒精性脂肪肝易感性临床关系研究

目的 探讨分析维生素D受体和脂联素基因多态性和非酒精性脂肪肝易感性临床关系.方法 选取102例非酒精性脂肪肝患者作为观察组,另选取100例健康志愿者作为对照组.对维生素D受体和脂联素基因多态性进行检测,比较两组维生素D受体和脂联素基因型分布和等位基因频率,并分析其和非酒精性脂肪肝易感性临床关系.结果 观察组维生素D受体BsmI位点、脂联素45和276位点基因型分布情况和对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);观察组维生素D受体BsmI位点B等位基因频率远远低于对照组,而前者维生素D受体 45-T和276-G等位基因频率均远远高于后者,两组间各项数据比较差异均有统计学意义(P＜0.05);多因素非条件Logistic回归分析显示,维生素D受体:bb基因型、脂联素45位点:TT 基因型以及丙氨酸转氨酶(ALT)、三酰甘油(TG)、合并高血压史、胰岛素指数(HOMA-IR)均为影响非酒精性脂肪肝患者的独立危险因素.结论 维生素D受体和脂联素不同位点基因型分布在非酒精性脂肪肝患者中存在明显异常,二者和其易感性存在紧密关联.     

赶黄草总黄酮对非酒精性脂肪肝小鼠肝功能和脂质代谢的影响

目的:探讨苗药赶黄草总黄酮对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠的作用。方法:取健康、合格KM小鼠,雌雄各半,分为正常对照组、模型对照组、非诺贝特组(33.3 mg/kg)、赶黄草总黄酮0.66、0.33 g/kg组和肝苏颗粒组(8.4 g/kg),灌胃给药,连续6 w,观察记录小鼠一般状态。给药结束后,取血清测定丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。结果:与正常组对照相比,模型对照组小鼠血清中的AST、ALT、TBIL、CHO、TG水平均显著升高(P0.05或P0.01),表明NAFLD模型制备成功。与模型组相比,赶黄草总黄酮0.66g/kg、0.33g/kg、肝苏颗粒和非诺贝特组明显降低血清中AST、ALT、TBIL、TG水平,显著升高HDL-C水平(P0.05或P0.01)。结论:赶黄草总黄酮对NAFLD小鼠具有保护作用。     

高脂联合地塞米松诱导小鼠急性脂肪肝模型的实验研究

目的 研究地塞米松配高糖高脂饲料导致小鼠急性脂肪肝模型对药物剂量与时间依存性特征,优化药物性脂肪肝模型的条件.方法 雄性昆明鼠分为对照组及高糖高脂饲料加腹腔注射地塞米松组,分3个时间点处死小鼠,检测小鼠体质量,肝质量,计算肝指数,检测血清及肝组织匀浆三酰甘油(TG),血清葡萄糖(GLU)含量,采用HE染色观察肝组织病理变化.肝组织提取总RNA反转录表达相关基因,肝组织提取总蛋白通过Westen Blot检测相关蛋白表达.结果 与对照组比较,地塞米松模型组7d后,血及肝匀浆TG增高,肝指数增大,病理切片显示,脂肪肝形成.反转录PCR显示脂肪代谢相关基因表达有明显改变.Western Blot显示沉默信息调节因子1(SIRT1)明显下降.但是,随着地塞米松用量减少,时间延长,脂肪肝相关指标降低,脂代谢基因PPAR、FOXO3、FXR逐渐回升,LXR逐渐下降,蛋白SIRT1逐渐回升.结论 高糖高脂饲料加地塞米松大剂量腹腔注射可以建立小鼠急性脂肪肝模型,并且模型的维持对地塞米松的剂量和用药时间有依存性,对于药物干预实验具有指导意义.     

Effect of high-fat diet on liver and placenta fatty infiltration in early onset preeclampsia-like mouse model

Background  Preeclampsia, especially early onset of preeclampsia (PE), is a common and serious disorder with high maternal and perinatal morbidity and mortality. Dietary factor is one of the most important factors which may affect the occurrence and development of the disease. The aim of this study is to investigate the effects of dietary factors on pathological changes of liver and placenta in preeclampsia-like mouse model by establishing the model at multiple stages of gestation.

Methods  Wild-type (WT) mice were injected subcutaneously with nitric oxide synthase (NOS) inhibitor L-arginine methyl ester (L-NAME, 50 mg×kg^–1×d^–1) to establish PE-like model (L-NAME group) at early-, mid-, and late- pregnant periods respectively; simultaneously, the control mice were injected with normal saline (NS group). All the groups were divided into subgroups, standard chow group (SC), and high-fat diet group (HF). ApoE^–/– pregnant mice served as a control group. Systolic blood pressure (SBP), urine protein, and histopathologic changes of placenta and liver in all groups were observed and statistically analyzed.

Results  In WT and apoE^–/– L-NAME subgroups, blood pressure and urine protein were significantly higher than those in all the gestational age matched NS groups (P <0.05). Compared to other groups, remarkable liver fatty infiltration and lipid storage in placenta were found in early- and mid-L-NAME subgroups in apoE^–/– mice (P <0.05), especially in the early- and mid-HF+L-NAME subgroups in apoE^–/– mice (P <0.05). More lipid storage droplets both in liver and placenta were found in ApoE^–/– mice than that of WT groups (P <0.05). Morphology histopathologic examination of placentas showed varying degrees of fibrinoid necrosis and villous interstitial edema in early- and mid-L-NAME both in HF and SC of apoE^–/– and WT subgroups compared to NS controls (P <0.05). But there was no significant difference between HF and SC subgroups (P >0.05), and no difference between apoE^–/–and WT groups (P >0.05).

Conclusions  Preeclampsia-like conditions could be induced by L-NAME in mice at different gestational stages. Both WT and apoE^–/– genotype mice with preeclampsia-like symptoms in early and mid stages of pregnancy presented lipid deposition in the placenta and hepatic fatty infiltration. To alter the environmental condition by feeding high-fat diet was harmful to the mother and the fetus. High-fat diet aggravated the impact of liver fatty infiltration at early and mid gestational stages especially in the apoE^–/– mouse model. These results further revealed the association between early-onset preeclampsia and the dysoxidation of fatty acids.

     

辣椒素对体外肝细胞脂质代谢的影响研究

目的 探讨辣椒素对脂肪变肝细胞内脂质沉积的影响及自噬表达情况,为脂肪性肝病防治的研究提供新的思路和靶点.方法 用油酸(40 μg/mL)诱导肝原代细胞LO2细胞株建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型.实验分为空白对照组、油酸组、辣椒素组[油酸+辣椒素(100 μmol/L)].油红O染色和三酰甘油试剂盒检测肝细胞内脂肪变程度;Western blot检测自噬体标记分子p62和LC3的表达水平并计算LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ比值.结果 40 μg/mL油酸处理LO2细胞24h后,油红O染色观察,油酸组肝细胞中可见大小不等的橘红色脂滴.而空白对照组无明显橘红色脂滴形成,油酸在体外成功建立NAFLD模型.与油酸组相比,辣椒素组肝细胞内三酰甘油水平显著降低(P＜0.05),脂滴明显减少,p62蛋白水平明显降低(P＜0.05),而LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显上调(P＜0.05).结论 在体外利用油酸诱导LO2细胞株建立NAFLD模型,辣椒素刺激NAFLD细胞,上调NAFLD细胞自噬水平,减少细胞内脂质沉积,但具体机制还需进一步研究.     

木犀草苷对小鼠非酒精性脂肪肝病的作用研究

目的 探讨木犀草苷对小鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的保护作用。 方法 将52只昆明小鼠随机分为对照组(11只)和模型组(41只),对照组给予标准饲料,模型组给予高脂饲料。喂养8周,对照组和模型组各随机取一只,经病理确认建模成功后,将模型组随机分为4组,NAFLD模型组、木犀草苷低[50 mg/(kg·d)]、中[100 mg/(kg·d)]、高[200 mg/(kg·d)]剂量组,每组10只。木犀草苷组给予相应木犀草苷量灌胃,对照组和NAFLD模型组给予等量生理盐水灌胃。4周后处死小鼠,测定血清甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、天冬氨酸氨基酶(AST)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,血清及肝组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)水平,肿瘤坏死因子(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平;并观察各组肝组织切片变化。 结果 与正常对照组比较,NAFLD模型组TG、TC、AST及ALT水平明显升高,血清及肝组织MDA、TNF-α及IL-6水平显著升高(均P<0.05),T-SOD、GSH水平明显下降(均P<0.05)。与NAFLD模型组比较,木犀草苷低、中、高剂量组TG、TC、AST及ALT水平明显下降(均P<0.05),血清及肝组织MDA、TNF-α及IL-6水平显著下降(均P<0.05),T-SOD、GSH水平明显升高(均P<0.05)。木犀草苷组脂肪变细胞数量较NAFLD模型组显著改善。 结论 木犀草苷减少非酒精性脂肪肝脂质的沉积,减轻氧化应激及炎症反应程度,对非酒精性脂肪肝具有较好的保护作用。