基于Cyclin D1基因敲减探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的机理

目的验证Cyclin D1及其下游信号蛋白对成骨细胞增殖的调控作用,探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法培养成骨样细胞株UMR-106,运用CRISPR/Cas9技术敲减Cyclin D1基因后,将细胞分为基因敲减+生理盐水组(组1)、基因敲减+健骨颗粒组(组2)、病毒空载体细胞(组3,阴性对照)。未行基因敲减的细胞分为正常细胞+生理盐水组(组4)和正常细胞+健骨颗粒组(组5)。分别用生理盐水血清或健骨颗粒含药血清干预各组细胞24、48、72 h,通过CCK8法检测细胞增殖情况,利用Real time PCR检测Cyclin D1、Cyclin E、CDK 2、CDK 4、Rb及E2F-1基因的表达水平。结果经Western-bolt检测表明基因敲减的成骨细胞Cyclin D1蛋白表达明显下降。CCK8法检测结果显示,与组4相比,组5增殖速度变快(P0. 05),组3增殖速度无差异(P0. 05),组1和组2增殖速度均减慢(P0. 05);与组5相比,组2增殖速度减慢(P0. 01);与组1相比,组2增殖速度无统计学意义(P0. 05)。Real time PCR检测结果显示,与组4相比,组5 Cyclin D1、CDK2、CDK4、Cyclin E、Rb及E2F-1 mRNA的表达明显增高(P0. 05或P0. 01),组3表达无统计学意义(P0. 05),组1和组2表达明显降低(P0. 05或P0. 01);与组5相比,组2增殖速度减慢(P0. 01);与组1相比,组2无统计学意义(P0. 05)。结论 Cyclin D1及其下游信号蛋白是调控成骨细胞增殖的关键因素;健骨颗粒可以通过调节Cyclin D1及其下游信号蛋白促进成骨细胞增殖。     

宣威地区与非宣威地区肺癌患者临床流行病学特征及病理类型特点分析

目的:分析宣威地区与非宣威地区的肺癌临床流行病学与病理特征。方法:以云南省肿瘤医院（昆明医科大学第三附属医院）2015年3月至2015年5月手术治疗的肺癌患者为研究对象，共295例，收集患者相关信息。将其分为宣威地区、非宣威地区进行统计。对患者的临床资料进行回顾性分析，包含病理类型、年龄、性别、吸烟史等。结果:宣威地区、非宣威地区肺癌患者男女比例为1.19∶1和1.69∶1。宣威地区患者平均年龄为［53.41±8.74(34~85)］岁，中位年龄53岁。非宣威地区肺癌患者平均年龄为［58.68±8.63(38~78)］岁，中位年龄59岁。宣威地区肺癌高发年龄为40~59岁段。宣威地区I期肺癌患者占比、T1期肺癌患者占比、N0期肺癌患者占比均高于非宣威地区。宣威地区男性腺癌鳞癌比远高于非宣威地区，差异有显著统计学意义。结论:宣威地区女性肺癌发病率更高，发病年龄更趋年轻化，腺癌比例高，吸烟与宣威地区男性腺癌高发关系不密切。     

腹腔镜技术较开腹术治疗右半结肠癌的疗效比较及入路探讨

目的比较腹腔镜技术较开腹术治疗右半结肠癌的疗效及入路选择探讨。 方法回顾性分析2015年6月至2017年4月接受手术治疗的97例右半结肠癌患者资料,根据术式不同分为开腹组(32例,开腹手术)、传统组(35例,侧方入路的腹腔镜根治术)和SMA组(30例,动脉优先入路的腹腔镜根治术)。采用SPSS 23.0统计分析软件,围术期相关指标等计量资料以( ±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析;并发症总发生率比较采用χ²检验;累积生存率比较应用Log-Rank检验,均采用双侧检验。P<0.05为差异有统计学意义。 结果与传统组和SMA组相比,开腹组手术时间较短,术后排气时间、住院时间较长,术中出血量较多,差异均有统计学意义(P<0.05)。传统组手术时间、术后排气时间、住院时间与SMA组比较,差异均不明显(P>0.05);SMA组淋巴结清扫数量、阳性淋巴结清扫数量比开腹组、传统组多,术中出血量比开腹组、传统组少(P<0.05)。术后并发症总发生率开腹组为28.1%,传统组为8.6%,SMA组为6.7%,三组比较开腹组>传统组>SMA组(P<0.05)。术后3年生存率开腹组为65.6%,传统组为65.7%,SMA组为70.0%,三组差异无统计学意义(P>0.05)。 结论腹腔镜技术应用于治疗右半结肠癌可减少对机体的创伤,有利于术后恢复,同时以动脉优先入路可增加淋巴结清扫范围。     

下调lncRNA-H19表达促进人瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡和自噬

目的 探讨下调长链非编码RNA-H19(lncRNA-H19)表达对人瘢痕疙瘩成纤维细胞系凋亡和自噬的影响,并初步探讨其作用机制。方法 取人类瘢痕成纤维细胞系(KFs)及健康人皮肤成纤维细胞系(HDFs),将KF细胞感染lncRNA-H19F低表达腺病毒(si-lncRNA-H19)及不含si-lncRNA-H19的空病毒载体(si-eGFP)。分为HDFs组、KF组、si-lncRNA-H19+KFs组、si-eGFP+KFs组;KFs细胞共感染si-lncRNA与mTOR过表达腺病毒(Ad-mTOR)及空载体(Ad-eGFP-m),分为KFs组、si-lncRNA-H19+Ad-mTOR组、si-eGFP+Ad-mTOR组、si-lncRNA-H19+Ad-eGFP组、si-eGFP+Ad-eGFP组。RT-qPCR检测lncRNA-H19表达;流式细胞测量术检测细胞凋亡率;透射电镜及吖啶橙(Ao)荧光染色观察自噬形成情况;免疫组化法检测自噬通路-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)阳性表达;Western blot检测凋亡及自噬相关蛋白表达。结果 与HDFs组比较,KFs组细胞lncRNA...     

认知行为干预对肺移植受者等待供肺期间身心状态的影响

目的探讨认知行为干预模式对肺移植受者等待供肺期间改善其身心状态的效果。方法将拟行肺移植受者50例按随机数字表法分为观察组和对照组各25例,对照组等待供肺期间按常规治疗和护理,观察组在此基础上实施认知行为干预。于患者入院时和干预后分别测定其心理和生理指标。结果干预后观察组患者疾病不确定感、焦虑和抑郁评分显著低于对照组(均P<0.01),患者收缩压、脉率和呼吸频率较对照组显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论认知行为干预可降低肺移植受者等待供肺期间的负性情绪,保持生命体征平稳,具有较好的可行性和有效性。     

重度子痫前期PIBF的表达及其与免疫耐受失衡的关系

目的：探讨重度子痫前期胎盘及外周血孕酮诱导封闭因子（PIBF）表达情况及其与免疫耐受失衡的关系。方法选取2012年1月~12月期间早发型重度子痫前期（EOPE）25例,晚发型重度子痫前期（LOPE）22例,对照组25例,收集产前外周血与产后胎盘。用免疫组织化学（SABC法）检测胎盘PIBF的表达及定位,ELISA试剂盒检测血清PIBF水平,流式细胞仪检测外周血中Th1和Th2细胞百分率,计算Th1/Th2比值。结果胎盘PIBF表达于蜕膜组织、合体滋养层细胞和部分绒毛滋养层细胞。血清PIBF水平在EOPE组为213.58±44.93 ng/ml,LOPE组为243.00±61.19 ng/ml,对照组为273.91±48.57 ng/ml。三组间血清PIBF含量、Th1/Th2比值和胎盘PIBF-IOD值差异均有统计学意义（P<0.05）。EOPE组和对照组相比,血清PIBF降低、胎盘PIBF表达量（PIBF-IOD）减少、外周血Th1/Th2比值增高（P<0.05）。重度子痫前期孕妇血清PIBF与胎盘PIBF-IOD呈正相关关系,与外周血Th1/Th2呈负相关关系（P<0.05）。但只有EOPE组血清PIBF与24h尿蛋白定量呈负相关关系（P<0.05）。结论 PIBF介导的免疫耐受失衡可能参与重度子痫前期发病机制。PIBF是妊娠诱发淋巴细胞分泌的免疫调节抑制因子及重度子痫前期的保护因素,有望成为新的治疗靶点。     

微棱形针刀疗法治疗枕神经卡压性头痛的观察和护理

选取符合诊断标准的枕神经卡压性头痛患者50例采用自行设计的微棱形针刀进行治疗和护理，结果痊愈42例、有效6例、无效2例。微棱形针刀适用于治疗枕神经卡压性头痛。