人参皂苷Rg1对脊髓压迫损伤模型大鼠病灶中促凋亡/抗凋亡平衡的影响

目的:研究人参皂苷Rg1对脊髓压迫损伤型大鼠病灶中促凋亡/抗凋亡平衡的影响。方法:选择Wistar大鼠作为实验动物,随机分为假手术组、压迫损伤组、人参皂苷组,建立脊髓压迫损伤模型后给予10mg/kg的人参皂苷Rg1腹腔注射干预。干预后14d,收集伤部位的脊髓组织并检测促凋亡基因、抗凋亡基因、凋亡相关信号通路基因的mRNA表达量。结果:压迫损伤组大鼠脊髓组织中Bcl-2、Bclxl、NAIP、Survivin、ERK1/2、p38MAPK、JNK、STAT3、STAT5的mRNA表达量均显著低于假手术组,Bax、caspase-3、caspase-9、caspase-12的mRNA表达量均显著高于假手术组(P<0.05);人参皂苷组大鼠脊髓组织中Bcl-2、Bcl-xl、NAIP、Survivin、ERK1/2、p38MAPK、JNK、STAT3、STAT5的mRNA表达量均显著高于压迫损伤组,Bax、caspase-3、caspase-9、caspase-12的mRNA表达量均显著低于压迫损伤组(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1对脊髓压迫损伤模型大鼠病灶中促凋亡/抗凋亡的平衡具有调节作用。     

人参皂苷Rg1对β淀粉样蛋白诱导细胞凋亡的影响

目的 探讨人参皂苷Rg1对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导细胞凋亡的影响及其机制.方法 利用中国仓鼠卵巢瘤细胞系(CHO)采用MTY方法筛选人参皂苷Rgl抗Aβ细胞毒性的有效浓度.通过转染突变型(M146L)PS1基因的CHO细胞(PS1M146L),利用免疫荧光染色、蛋白质免疫印迹方法,探讨人参皂苷Rg1对PS1M146L细胞中Aβ42和凋亡效应基因半胱氨酸蛋白水解酶(caspase-3)活性蛋白表达的影响,通过脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测,观察人参皂苷Rg1对Aβ促细胞凋亡的影响.结果 加用25、50、100 μmol/L人参皂苷Rg1的CHO细胞活性明显高于未加用组(均P＜0.05).在转染突变型PS1M146L的CHO细胞中,加用人参皂苷Rg1作用24 h后早期细胞凋亡数(10.11.11±0.76)较未加用组(15.01±1.46)少,差异有统计学意义(P＜0.05);同时Aβ42和caspase-3活性片段的蛋白质表达量较未加用组细胞亦不同程度降低(均P＜0.05).结论 人参皂苷Rg1可能通过降低Aβ42生成和降低caspase-3蛋白质表达抑制Aβ诱导的细胞凋亡.     

人参皂苷Rgl对兔膝骨性关节炎关节软骨细胞凋亡的影响

目的:观察人参皂苷Rgl对兔膝骨性关节炎关节软骨细胞凋亡的影响,并分析作用机制。方法:50只健康普通级新西兰雄性大白兔,分成正常组,模型组,人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余4组兔采用左后肢管型石膏伸直位固定法制备兔膝骨性关节炎模型。从造模第2天开始进行药物干预。人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予人参皂苷Rg1 5 mg·kg~(-1)、10 mg·kg~(-1)、20 mg·kg~(-1)灌胃给药,正常组及模型组予以等剂量生理盐水(5 m L·kg~(-1))灌胃,每周3次,共6周。干预结束后在麻醉下用空气栓塞法处死所有实验兔,取负重面关节软骨,采用RT-PCR技术检测细胞凋亡关键调控因子Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达情况; Western-blot技术检测Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达情况;原位末端标记(Tunel)法观察软骨细胞凋亡率。结果:模型组Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达明显高于正常组(P 0. 01);人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组显著低于模型组(P 0. 05或P 0. 01)。模型组Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显低于正常组(P 0. 01);人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组显著低于模型组(P 0. 05或P 0. 01)。Tunel法检测显示,人参皂苷Rg1低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率显著低于模型组(P 0. 01);人参皂苷Rg1中剂量组、高剂量组凋亡率低于低剂量组(P 0. 05或P 0. 01)。结论:伸直位管型石膏固定法造模6周,可成功建立类似临床所见的人类骨关节炎模型。一定剂量人参皂苷Rg1对软骨组织有着积极的保护作用,可通过调控软骨细胞凋亡关键因子Bax/Bcl-2表达比例、下调Caspase-3的表达有效抑制软骨细胞过度凋亡,避免软骨组织进行性破坏。     

人参皂苷Rg1 对阿霉素引起的血管内皮细胞 损伤的作用及机制研究

目的 探讨人参皂苷Rg1 对阿霉素损伤后血管内皮细胞的作用及其机制。方法 该研究分为 正常组、阿霉素组（0.5μg/ml）、阿霉素+Rg1 组（0.5μg/ml 阿霉素+200μg/ml Rg1）。通过MTT 法、划 痕及小管形成实验检测人参皂苷Rg1 对阿霉素损伤后血管内皮细胞增殖、迁移及小管形成的影响。通过 Hochst33342 染色和流式细胞术检测人参皂苷Rg1 对阿霉素损伤后血管内皮细胞凋亡的影响。采用Western blotting 检测人参皂苷Rg1 对阿霉素损伤后血管内皮细胞Bcl-2、p-Akt、p-ERK 及p-eNOS 蛋白表达的影 响。结果 与正常组比较,阿霉素组细胞活性降低（P <0.05）;与阿霉素组比较,阿霉素+Rg1 组能提高血管 内皮细胞的细胞活性（P <0.05）。与阿霉素组比较,阿霉素+Rg1 组能够改善血管内皮细胞的迁移及小管形 成状态（P <0.05）。与阿霉素组比较,阿霉素+Rg1 组减少阿霉素引起的细胞凋亡（P <0.05）。与阿霉素组比较, 阿霉素+Rg1 组阿霉素损伤后血管内皮细胞NO 升高（P <0.05）,ROS 减少（P <0.05）。阿霉素组Bcl-2、 p-ERK、p-Akt 及p-eNOS 蛋白相对表达量较正常组低（P <0.05）,阿霉素+Rg1 组较阿霉素组高（P <0.05）。 结论 人参皂苷Rg1 可减轻阿霉素引起的血管内皮细胞损伤,从而为人参皂苷Rg1 治疗阿霉素引起的心脏损 伤提供新的靶点。     

人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞凋亡及Bcl-2/bax基因mRNA表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响及对凋亡相关基因的作用。方法培养人宫颈癌Hela细胞,用不同浓度Rg3进行干预,用Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪方法定量检测细胞的凋亡及细胞周期的变化,用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2/bax表达。结果 Rg3对Hela细胞增殖的抑制率随作用时间的延长和药物浓度的增加而增加;Rg3作用后Hela细胞出现了典型的凋亡形态学变化,可见凋亡小体;不同浓度的Rg3处理细胞48 h后,流式细胞术(FCM)显示细胞的凋亡呈剂量依赖性;同时细胞被阻断在G2/M期,细胞周期发生明显改变;Rg3作用后的Hela细胞的凋亡相关基因Bcl-2表达降低,bax基因表达升高。结论 Rg3能抑制Hela细胞增殖,诱导其凋亡,且Rg3诱导Hela细胞凋亡是通过下调Bc1-2表达和上调bax表达,而达到抗肿瘤的作用。     

人参皂苷Rg3调控ERK通路抑制Lewis小鼠肺癌生长的研究

目的:通过人参皂苷Rg3对Lewis肺癌小鼠模型及其细胞模型的抑制研究,探讨ERK信号通路及相关基因在抗肿瘤中的作用。方法:建立Lewis肺癌小鼠荷瘤动物模型,通过口饲法给予定量人参皂苷,连续3周,处死动物后,比较各组荷瘤小鼠肿瘤体积。含药动物血清作用于Lewis肺癌细胞,MTT法检测各组细胞抑制效率。Realtime-PCR法检测荷瘤鼠Dusp6,Bax,Bcl-2基因表达变化,Western blot法检测荷瘤鼠ERK,p-ERK蛋白表达变化。结果:人参皂苷Rg3对Lewis肺癌细胞及荷瘤小鼠的肿瘤生长均有明显抑制作用（P <0.01）。Western blot显示ERK在Rg3处理组中的表达明显比对照组低,Realtime-PCR结果显示,在动物肿瘤标本中,Dusp6,Bax基因药物处理组比对照组高表达（P <0.01）,Bcl-2基因药物处理组比对照组低表达（P <0.01）。结论:人参皂苷Rg3在Lewis肺癌体内外模型中具有一定的肿瘤抑制效果,ERK信号通路及Dusp6基因与Rg3的抑制作用有关,Rg3诱导的细胞凋亡也参与了抗肿瘤的作用。     

人参皂苷Rg1对力竭运动后大鼠骨骼肌Bax/Bcl-2表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对力竭运动后大鼠骨骼肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法选用成年SD大鼠30只,随机等分为正常组、模型组和人参皂苷Rg1组(50 mg/kg·d-1)3组,人参皂苷Rg1组和模型组大鼠进行电动跑台训练直至力竭,每天1次。连续训练30 d后,3组动物麻醉,颈椎脱臼处死后,取左侧股四头肌制备成细胞悬液,采用AnnexinV-FITC流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并通过RT-PCR法和Western Blot法分别检测Bax和Bcl-2的mRNA及蛋白表达。结果与模型组比较,人参皂苷Rg1组骨骼肌细胞凋亡率显著降低(P0.05);骨骼肌细胞Bax的mRNA及蛋白表达明显下调,Bcl-2的mRNA及蛋白表达明显升高。结论人参皂苷Rg1对力竭运动后大鼠骨骼肌细胞具有抗凋亡作用,其作用可能与其调节Bax和Bcl-2的表达有关。     

人参皂苷Rg1抑制NLRP3/Caspase-1通路抵抗肾纤维化的作用研究

目的：通过体内外实验探讨人参皂苷Rg1对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK2纤维化细胞株中炎症及其抗纤维化的机制。方法：将HK2细胞诱导分组为对照组、纤维化模型组（2 ng/mL的TGF-β1诱导纤维化）、低剂量人参皂苷Rg1治疗组（2 ng/mL的TGF-β1+15μg/mL人参皂苷Rg1）、高剂量人参皂苷Rg1治疗组（2 ng/mL的TGF-β1+45μg/mL人参皂苷Rg1）;Western印迹及免疫荧光检测结缔组织生长因子（CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（Col-1）表达水平；Western印迹检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)表达水平；透射电镜检测细胞焦亡水平。动物研究将大鼠诱导分为对照组、模型组（单侧输尿管梗阻）、低剂量人参皂苷Rg1治疗组（单侧输尿管梗阻大鼠+50 mg/kg人参皂苷Rg1）、高剂量人参皂苷Rg1治疗组（单侧输尿管梗阻大鼠+100 mg/kg人参皂苷Rg1）;Western印迹检测肾组织中蛋白表达水平；苏木精-伊红（HE）及Masson检测肾脏病理...     

人参皂苷Rg1对6-OHDA所致MES23.5神经细胞损伤的保护作用

目的 探讨人参皂苷Rg1对6-羟基多巴胺(6-OHDA) 所致MES23.5神经细胞损伤的保护作用.方法 MES23.5细胞常规培养,观察人参皂苷Rg1预处理对6-OHDA毒性作用的影响,MTT法观察细胞存活率,实时荧光半定量反转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)观察酪氨酸羟化酶(TH)和Bcl-2基因的表达情况.结果 6-OHDA 可剂量依赖性地损伤MES23.5细胞(F=71.24,P<0.01),人参皂苷Rg1预处理可对抗6-OHDA的毒性作用(F=14.63,P<0.01);6-OHDA可明显降低TH和Bcl-2基因的表达,人参皂苷Rg1预处理可明显逆转上述改变(F=9.80、15.34,P<0.01).结论 人参皂苷Rg1可明显对抗6-OHDA对MES23.5神经细胞的损伤,其作用机制可能与抗凋亡有关.     

人参皂苷Rg3对急性髓细胞性白血病THP-1、HL-60细胞的干预作用

目的:探讨人参皂苷Rg3对急性髓细胞性白血病的干预机制。方法:体外培养急性单核细胞性白血病细胞系(THP-1)、急髓白血病M3细胞系(HL-60),采用人参皂苷Rg3对细胞系进行干预,采用MTS法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法分析相关蛋白表达。结果:人参皂苷Rg3对THP-1、HL-60细胞均有不同程度的抑制生长效果,IC50分别为3.5、3.02 g·L~(-1)。人参皂苷Rg3作用24 h、48 h均可抑制急性髓细胞性白血病细胞增殖,且抑制作用与药物剂量呈依赖关系;人参皂苷Rg3对THP-1以及HL-60细胞的凋亡可起到诱导作用,细胞凋亡会随药物浓度升高而增加,且干预时间延长同样会增加细胞凋亡率,细胞凋亡率呈现时间、剂量依赖性。在作用48 h后,凋亡相关因子PARP出现了降解分裂条带,THP-1出现了Caspase-8条带轻度减弱,HL-60细胞出现了p-Akt明显减弱。结论:人参皂苷Rg3可以对Caspase-8及PARP相关蛋白的表达以及凋亡过程起到激活作用,使p-Akt表达水平降低,从而对肿瘤细胞的增殖以及凋亡起到抑制以及诱导作用。     

人参皂苷对Aβ25-35蛋白诱导的老年性痴呆体外模型NG108-15神经元细胞凋亡的抑制作用

【目的】探讨在以NG108-15细胞作为神经元代表、β-淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导凋亡的阿尔茨海默病体外细胞模型中,人参皂苷Rg1保护神经元的作用及其机制。【方法】采用倒置显微镜观察细胞形态,结合流式细胞仪检测凋亡率,进行Aβ25-35造模浓度与时间的选择以及Rg1预处理最佳浓度时间的选择;在此基础上,采用荧光显微镜和数据处理系统(DMR)图像分析仪检测免疫细胞化学法标记的核因子-κB(NF-κB)的活性;采用免疫组化染色法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达;采用酶标光度计、半胱氨酸/天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)比色检测试剂盒检测caspase-3活性。【结果】20μmol/L Aβ25-35作用24 h可诱导NG108-15细胞凋亡,2μmol/L Rg1组的NF-κB活性与模型组比较显著性提高(P<0.01),Rg1预处理组Bcl-2表达呈阳性,且caspase-3活性较模型组显著性降低(P<0.01)。【结论】高浓度聚焦状的Aβ25-35可下调神经元内NF-κB的活性,诱导细胞凋亡,Rg1通过启动神经元中NF-κB的活化从而上调Bcl-2表达,抑制caspase-3活性而发挥保护神经元的作用。     

人参皂苷Rg1对Aβ1-40致AD模型大鼠行为学及caspase-3表达的影响

【目的】 观察人参皂苷Rg1对Aβ-淀粉样蛋白1-40致阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠学习记忆能力的影响及对caspase-3表达的调控作用,探究人参皂苷Rg1对海马CA1区神经元凋亡的防护作用。 【方法】 选取3个月龄健康SD大鼠75只,随机分为青年组、假手术组、模型组、人参皂苷Rg1干预组[模型+人参皂苷Rg1 20 mg/(kg·d)剂量组和模型+人参皂苷Rg1 40 mg/(kg·d)剂量组],每组15只。D-半乳糖50 mg/kg大鼠腹腔注射,连续注射6周后,依照Paxions《大鼠脑立体定位图谱》,在海马区注入凝聚态Aβ1-40溶液1 μL制作AD模型。造模成功后,人参皂苷Rg1干预组分别给予人参皂苷Rg1 20、40 mg/(kg·d)灌胃,其它三组以等量生理盐水灌胃(1次/d),连续30 d后利用Morris水迷宫观察人参皂苷Rg1对AD大鼠学习记忆能力的影响;断头取海马,应用H-E染色法观察海马CA1区病理学改变;应用RT-PCR、免疫组化(SABC)和蛋白质印迹法检测caspase-3基因及蛋白表达情况。 【结果】 (1)人参皂苷Rg1干预组大鼠的学习记忆成绩优于模型组(P<0.05);(2)模型组海马CA1区神经元排列欠规则,可见肿胀的细胞,出现核固缩,锥体细胞较少,可见凋亡小体。人参皂苷Rg1干预组可见细胞排列基本规则,明显坏死的锥体细胞较少;(3)与青年组比较,模型组大鼠海马组织caspase-3基因及蛋白表达明显增加(P<0.05);与模型组比较,Rg1干预组大鼠的caspase-3基因及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。 【结论】 人参皂苷Rg1通过抑制caspase-3的表达,从而抑制Aβ1-40致AD模型大鼠神经元凋亡,进而改善AD大鼠学习记忆能力,达到防治AD的目的。     

人参皂苷Rg1上调miR-298抑制胰腺癌肿瘤生长

目的 探讨人参皂苷Rg1对胰腺癌的影响及调控机制。方法 采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）检测0、2.5、5、10、20μmol/L人参皂苷Rg1对人胰腺癌细胞PANC-1细胞活力的影响,流式细胞术检测人参皂苷Rg1对PANC-1细胞凋亡的影响,Western blot检测人参皂苷Rg1对PANC-1细胞BCL-2相关X蛋白（BAX）和B淋巴细胞瘤-2蛋白（BCL2）表达的影响,Transwell实验检测人参皂苷Rg1对PANC-1细胞侵袭能力的影响,划痕实验检测人参皂苷Rg1对PANC-1细胞迁移能力的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人参皂苷Rg1对PANC-1细胞miR-298水平的影响;将胰腺癌细胞分为三组：对照组、人参皂苷Rg1组和人参皂苷Rg1+miR-298 inhibitor组,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测BAX和BCL2蛋白的表达;构建胰腺癌荷瘤小鼠,进行人参皂苷Rg1处理,观察瘤体组织大小和重量变化,Western...     

人参皂苷Rg1对异氟醚诱导caspase-3活化的影响

目的 探讨人参皂苷Rg1对异氟醚诱导caspase-3活化的影响及其机制。 方法 通过培养人神经胶质瘤细胞(H4 naïve cell)和稳定转染APP基因的细胞(H4-APP cell),给予25μmol/L人参皂苷Rg1预处理12h或者24h后接受异氟醚麻醉。采用蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡效应蛋白caspase-3活化程度,利用化学发光法检测5'-三磷酸腺苷(adenosine-5'-triphosphate,ATP)水平的变化,流式细胞仪观察线粒体通透性转运孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)的开放程度。 结果 给予25μmol/L人参皂苷Rg1预处理12h,H4 naïve细胞及H4-APP细胞的caspase-3活化程度,ATP水平及mPTP开放程度均与异氟醚处理组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。延长人参皂苷Rg1预处理时间至24h,H4 naïve细胞及H4-APP细胞的caspase-3活化程度,ATP水平及mPTP开放程度均与异氟醚处理组差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 人参皂苷Rg1可能通过保护线粒体功能降低异氟醚诱导caspase-3的活化程度。     

人参皂甙Rg1对氧化损伤兔晶状体上皮细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达影响

目的：观察人参皂甙Rg1对实验性氧化损伤兔晶状体上皮细胞（LEC）凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法：复制兔晶状体氧化损伤模型，同时加入终浓度为10μmol／L的人参皂甙Rg1共同孵育24h，取晶体前囊膜，采取免疫组化法，检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果：Bcl-2和Bax在正常兔晶体上皮细胞中均有表达，Bcl-2的表达远较Bax强；过氧化氢组Bcl-2的表达显著下调，Bax表达显著上调，Bcl-2和Bax比率下降；Rg1可明显上调Bcl-2的表达，下调Bax的表达，Bcl-2／Bax比率上升，Bcl-2改变幅度与牛磺酸比较有显著性差异（P〈0．05）。结论：氧化损伤诱导LEC凋亡和Rg1抑制LEC凋亡的分子机制可能与凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达有关。     

人参皂甙Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡的影响

目的 探讨人参皂甙Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞的诱凋亡作用及其对凋亡相关基因survivin的影响.方法 人肺鳞癌SK-MES-1细胞分为Rg3实验组、空白对照组和阳性对照组.阳性对照药物为三氧化二砷.流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率:免疫细胞化学法和RT-PCR法检测survivin蛋白和mRNA的表达.结果 不同浓度的人参皂甙Rg3处理SK-MES-1细胞48 h后,细胞凋亡率增加,作用呈剂量依赖关系.人参皂甙Rg3能够下调survivin蛋白和mRNA的表达,各实验组与宅白对照组间比较有统计学意义(P<0.05).结论 人参皂甙Rg3对人肺鳞癌SK-MES-1细胞具有诱导凋亡的作用,其机制可能与其抑制survivin基因的表达有关.     

人参皂甙20（R）-Rg3对人胶质瘤U87细胞凋亡的影响

目的探讨人参皂甙20（R）-Rg3对人胶质瘤U87细胞凋亡作用的影响。方法应用MTT法及流式细胞术观察不同浓度的Rg3对U87细胞凋亡的影响,采用细胞吖啶橙／溴乙锭荧光观察凋亡形态学改变,采用WesternBlot技术检测细胞Bcl2、Bax、p-Akt及tAkt蛋白表达。结果Rg3显著抑制U87细胞增殖,Rg3呈剂量依赖性诱导肿瘤细胞凋亡。不同浓度Rg3作用U87细胞24h,U87细胞中Bax表达逐渐增高,Bcl-2表达降低．Bax／Bcl-2呈浓度依赖性升高,细胞p-Akt蛋白表达降低,而t—Akt蛋白未见改变。结论Rg3通过抑制P13K／Akt信号转导通路中的Akt磷酸化,影响胶质瘤U87细胞系Bcl-2蛋白表达降低,促凋亡Bax蛋白表达增加,调控胶质瘤细胞的凋亡。     

人参皂苷Rg1对多柔比星肾病大鼠足细胞nephrin的影响

目的足细胞的损伤是蛋白尿发生的主要机制,如何修复受损的足细胞已成为研究热点。文中观察人参皂苷Rg1对足细胞病变模型———多柔比星肾病模型的疗效及其对足细胞病变的影响。方法采用单次尾静脉注射盐酸多柔比星建立多柔比星肾病模型。SD大鼠分为空白对照组、模型组、人参皂苷Rg1高剂量组和低剂量组,分别在注射后第7、14、28天收集尿液标本,并处死大鼠,留取肾组织标本。检测24 h尿蛋白排泄量、血生化指标,行肾组织光镜和电镜观察肾小球病变和足突超微结果。采用定量学方法测定足突宽度。免疫组化观察足细胞裂孔膜分子nephrin表达和分布变化。结果人参皂苷Rg1低剂量组和高剂量组均能改善多柔比星肾病大鼠的肾病综合征状况。同时,人参皂苷Rg1低剂量组和高剂量组能明显改善足突融合,增加足细胞裂孔膜分子nephrin表达(P<0.05)。人参皂苷Rg1高剂量组在血生化、肾脏病理和足细胞nephrin的表达上比人参皂苷Rg1低剂量组的改善更加明显(P<0.05)。结论人参皂苷Rg1对多柔比星肾病模型有很好的保护作用,而且人参皂苷Rg1高剂量组比低剂量组治疗作用更明显。     

补肾及健脾复方对皮质酮大鼠T细胞凋亡信号相关基因群调控模式的对比研究

目的:探讨补肾及健脾复方对皮质酮大鼠T细胞凋亡信号相关基因表达的调控模式.方法:采用TUNEL标记的流式细胞技术,对皮质酮大鼠模型及各治疗组激活诱导的T细胞凋亡进行定量分析;采用荧光实时定量PCR技术对各组大鼠T细胞凋亡信号相关基因群mRNA表达水平进行定量与比较;采用分光光度法检测caspase-8、caspase-3的活性.结果:(1)与正常组相比,模型组T细胞凋亡百分率明显增高;右归饮组及补肾益寿胶囊组T细胞凋亡百分率与皮质酮模型组相比明显降低;四君子汤与模型组相比T细胞凋亡百分率无显著性差异.(2)模型组促凋亡的Fas、FasL、TNR1、Bax基因表达上调,抗凋亡的TNFR2、Bcl-2、cIAP1、cIAP2基因表达下调;两个补肾复方均可下调FasL、TNFR1 mRNA表达水平,并可上调Bcl-2、cIAPl、cIAP2 mRNA表达水平;四君子汤仅对Bcl-2,cIAP2 mRNA表达水平有显著上调作用.(3)模型组caspase-8、caspase-3活性显著增高,两个补肾复方均可降低caspase-8、caspase-3的活性,四君子汤对caspase-8、caspase-3的活性无显著下调作用.结论:两个补肾复方下调促凋亡基因FasL、TNFR1的转录,上调抗凋亡基因Bcl-2、cIAPl、cIAP2的转录,并且降低caspase-8、caspase-3的活性,从而降低皮质酮大鼠过度的T细胞凋亡,是补肾法特有的对皮质酮大鼠T细胞凋亡相关基因群的调控模式.     

人参皂苷Rg1、Rb1对体外培养膝软骨细胞凋亡的影响

目的观察人参皂苷Rg1、Rb1对体外培养软骨细胞,IL-1诱导软骨细胞凋亡的影响,并比较其对细胞影响的差异性。方法成功培养出软骨细胞后,进行人参皂苷影响细胞代谢浓度筛选,设人参皂苷Rg1不同浓度组、人参皂苷Rb1不同浓度组,MTT法检测人参皂苷对软骨细胞代谢的影响,选取其Rg1、Rb1合适浓度作为干预细胞凋亡浓度组,设立人参皂苷Rg1、Rb1组和对照组,IL-1诱导软骨细胞凋亡,流式细胞仪检测其凋亡数量和比例,透射电镜检测细胞凋亡形态和亚微结构。结果人参皂苷Rg1m、Rb1m组对软骨细胞调亡有明显的抑制作用,在抑制软骨细胞过度凋亡无明显差异。结论人参皂苷Rg1、Rb1能明显抑制软骨细胞过度的调亡,抑制膝骨性关节炎的发生、发展,为进一步在体实验提供理论基础。