WT1、PRAME和ERG基因在儿童急性白血病中的表达

目的 研究肾母细胞瘤基因(WT1)、黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)和ETS相关基因(ERG)在儿童急性白血病(AL)中的表达特点,并分析其在白血病微小残留病灶(MRD)监测中的意义.方法 收集92份AL标本(84例患儿),其中初发标本28份,包括急性淋巴细胞白血病(ALL)标本18份,急性髓系白血病(AML)标本10份;AL完全缓解标本63份,包括ALL标本45份,AML标本18份;AL复发标本1份.采用Real-time PCR法检测AL患者骨髓中WTI、PRAME和ERG mRNA的相对表达量,并以同期住院的10例非恶性血液病患儿为对照.结果 AL初发组患儿的WT1、PRAME和ERG mRNA相对表达量均显著高于缓解组和对照组(P＜0.05),但缓解组和对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);AML初发组的PRAME mRNA相对表达量显著高于ALL初发组(P＜0.05).28例初发组WT1、PRAME和ERG mRNA的阳性表达率分别为82.4％、92.9％和64.3％,三者间比较差异有统计学意义(P＜0.05);三种基因联合检测的阳性率为100％.跟踪15例AL初发患者,诱导化疗缓解后三种基因的相对表达量均显著低于诱导化疗前(P＜0.05).1例复发患者初发时三种基因均呈阳性表达,缓解后转为阴性,复发时又变为阳性.结论 与非白血病患者相比,WTI、PRAME和ERG mRNA在AL初发患者的骨髓中高度表达,三种基因联合检测可提高阳性率.AL患者的WT1、PRAME、ERG mRNA表达水平与疾病状态相关,适用于MRD的监测.     

WT1基因、TGF-β_1在急性白血病患者中表达及其临床意义

目的探讨WT1基因、TGF-β1在急性白血病患者中表达及其临床意义。方法入选2008年8月-2010年12月来我院就诊的急性髓系白血病初发（AML组）、经治疗完全缓解的急性髓系白血病患者（AML-CR组）和非恶性血液病组（对照组）各30例,分别采用实时RT-PCR和ELISA检测三组患者骨髓中WT1基因、TGF-β1表达情况,并分析二者之间的相关性。结果分析显示,AML组和AML-CR组WT1 mRNA表达显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;AML组WT1 mRNA表达高于AML-CR组,差异有统计学意义（P〈0.05）;AML组TGF-β1mRNA和TGF-β1蛋白显著低于AML-CR组、对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;而AML-CR组与对照组之间的差异无统计学意义（P〉0.05）。Pearson相关分析显示,对照组和AML-CR组中WT1基因、TGF-β1表达不存在相关性（P〉0.05）;而在AML组中,WT1基因、TGF-β1存在明显的线性负相关（r=0.724,P〈0.05）。结论急性白血病患者存在WT1基因高表达、TGF-β1低表达状态,并且二者存在一定的负相关,同时检测两种指标在白血病患者临床治疗和预后评价上具有一定的临床价值。     

PRAME与WT1基因在急性白血病患者中的表达及临床意义

目的 探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）PRAME（preferentially expressed antigen of melanoma）与WT1（Wilms’tumor）基因的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测54例AL患者PRAMEmRNA和WT1 mRNA的表达水平，并将两者检测结果进行比较。结果PRAME阳性表达率：ANLL为41．9％，ALL为38．5％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；WT1阳性表达率：ANLL为48．4％，ALL为46．2％，两组比较无显著性差异（P〉0．05）；而完全缓解组（complete remission，CR）及对照组PRAME和WT1的表达均阴性；有效组PRAME和WT1的表达水平显著低于无效组（P〈0．01）；对1例PRAME阳性和10例PRAME、WT1均阳性的患者进行随访，7例经化疗后PRAME表达水平不降，4例复发患者PRAME再次升高均早于临床复发，其中2例WT1的波动与PRAME同步，2例临床复发时才升高。结论与WT1基因一样，PRAME基因是急性白血病的一个重要标记基因，动态检测PRAME的表达水平可在一定程度上了解疾病的状态和体内白血病细胞的总负荷量，对AL患者的化学治疗、预后判断及监测微小残留病灶、防治复发有一定的意义。     

急性白血病患者JAK家族基因的表达及临床意义

目的 探讨不同时期急性白血病(AL)细胞中JAKs基因的表达情况及其临床意义.方法 将入选患者分为初治组、复发组、完全缓解组(CR组)和正常对照组(NC组),RT-PCR方法检测AL患者和正常对照者骨髓MNC中JAKI～3和TYK2mRNA的表达.结果 (1)AL患者JAK2、JAK3、TYK2 mRNA平均表达水平较CR组和NC组差异有统计学意义(P＜0.05).初治AL患者JAK1mRNA表达水平较NC组略增高,但差异无统计学(P＞0.05),复发AL患者JAK1 mRNA表达水平较NC组差异有统计学意义(P＜0.05);(2)TYK2阳性组的AL患者缓解率较TYK2阴性患者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 JAK家族基因在白血病患者的高表达可能在白血病的发生发展中起重要作用.急性髓性白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)在激活JAK/STAT信号传导通路的方式有所不同.     

急性白血病患儿血清铁指标变化的临床探讨

目的探讨白血病患儿血清铁指标的变化,了解白血病患儿铁代谢状况.方法血清铁蛋白(SF)测定采用化学发光法;转铁蛋白(TF)测定采用比浊法;血清铁(SI)测定采用火焰法.结果(1)SF在急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓性白血病(AML)初治组显著高于正常对照组(P＜0.01);经4周化疗完全缓解组ALL、AML与初治组无显著差异(P＞0.05),ALL长期缓解组接近正常(P＞0.05),AML缓解前后SF高于ALL(P＜0.05). (2)ALL、AML初治组TF显著低于正常对照组(P＜0.01),ALL与AML之间无显著差异(P＞0.05),经4周化疗完全缓解组ALL、AML与初治组无显著差异(P＞0.05);ALL长期缓解组与正常对照组无差别(P＞0.05).(3)ALL、AML及缓解前后SI无明显变化.(4)上述各项指标与患者血红蛋白之间无显著相关关系.结论白血病患儿存在体内铁代谢紊乱,而不存在铁缺乏.     

荧光定量RT-PCR检测急性白血病患者外周血WT1基因的表达

目的　了解急性白血病患者外周血WT1基因的表达水平。方法　建立荧光定量RT -PCR方法 ,用PEABI 770 0PCR仪检测 114例急性白血病患者、2 6例非白血病患者和3 6例正常人外周血中WT1基因的表达水平。结果　 2 2例急性髓系白血病 (AML)和 15例急性淋巴细胞白血病 (ALL)初发患者WT1基因的表达量为 10 5～ 10 6拷贝 / μgRNA ,取得部分缓解的 2 6例AML和 19例ALL患者的表达水平为 10 2～ 10 4拷贝 / μgRNA ,而取得完全缓解的 17例AML和 13例ALL患者的表达水平为 0～ 10 2拷贝 / μgRNA。 结论　WT1基因在白血病外周血中有高水平的表达 ,可作为急性白血病疗效考核及监测微残留病的指标。     

PRAME基因在小儿急性白血病患者中的表达及其与预后的相关性

探讨小儿急性白血病(acute leukemia,AL)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)PRAME(preferentiallyexpressed antigen of melanoma)基因的表达及其与预后的相关性。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测95例AL患者PRAME mRNA的表达水平,并将检测结果进行分析。结果 PRAME阳性表达率:ANLL为60.0%,ALL为56.9%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05),而完全缓解组(complete remission,CR)及对照组PRAME均阴性;在ANLL中,以M3、M2、M4亚型的阳性检出率较高,分别为75.0%、62.5%、60.0%;有效组PRAME的表达水平显著低于无效组(P<0.01);对8例初治时PRAME高表达患儿进行随访,化疗CR后均转阴,分别在CR后6个月～1年的不同时间内复发,其中5例PRAME再次升高早于临床复发,3例在临床复发时再次升高。结论 PRAME基因是小儿急性白血病的一个重要标记基因,动态检测PRAME的表达水平可在一定程度上了解疾病的状态和体内白血病细胞的总负荷量,对小儿AL患者的化学治疗、预后判断及监测微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)、防治复发有一定的意义。     

WT1基因在急性白血病患者骨髓细胞中的表达及其临床意义

目的研究WT1基因在急性白血病（AL）患者骨髓细胞中的表达及其临床意义。方法采用实时定量RT-PCR方法动态检测92例初治AL患者WT1基因的表达。结果初治AML各亚型中M5基因表达阳性率最高,为91.7%,其WT1基因中位表达水平最高,达1308.6,显著高于其他亚型,差异有统计学意义（P〈0.05）;初治ALL各亚型（L1,L2,L3）之间WT1基因表达阳性率及中位表达水平差异无统计学意义（P〉0.05）;AL患者中,WT1基因表达阳性组CR率显著低于阴性组,阳性组缓解后半年内复发率显著高于阴性组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;初治组、复发组及未缓解组AL患者骨髓细胞WT1基因中位表达水平明显高于完全缓解组和对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论WT1基因在AL患者骨髓细胞中表达水平可作为临床评估疾病的发生发展、判断预后及检测微小残留病（MRD）的指标。     

WT1基因在白血病患者中的表达及临床意义

目的 :探讨 WT1基因在白血病患者中的表达及其临床意义。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)方法测定 5 3例急性白血病、15例慢性粒细胞白血病、2 1名正常人的 WT1基因表达。结果 :5 3例急性白血病患者中 4 1例 WT1基因表达阳性 ,阳性率为 77.35 % ,其中急性髓系白血病 (AML )和急性淋巴细胞白血病 (AL L )阳性率分别为 80 .6 %和 72 .0 % ,两组相比差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;15例的慢性粒细胞白血病 (CML ) WT1基因表达阳性率为 4 6 .7% ,其中 7例急变期和加速期阳性率为 10 0 % ,8例慢性期阳性率为 0 %。 2 7例急性白血病完全缓解 (CR)患者中 2 2例 (81.5 % ) WT1基因表达转阴 ,4例复发患者 WT1基因表达再次升高。 2 1例正常人的 WT1基因表达阴性 ;RT- PCR检测 WT1基因灵敏度为 10 - 4水平。结论 :1WT1基因在各种类型白血病患者中均有表达 ,在正常人中不表达。 WT1的表达与白血病病程相关 ;2 WT1基因可作为检测MRD的标记性基因。 WT1基因的表达与白血病患者的化疗效果及预后密切相关。     

巢式PCR检测WT1在白血病患者中的表达及其临床意义

应用巢式逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）测定K562细胞株及75例白血病患者及10名正常人WT1基因的表达。并同时测定mdr1的表达。检测结果为K562细胞株高表达,急性髓性白血病（AML）30例中19例,急性淋巴细胞白血病（ALL）13例中10例,慢性粒细胞白血病（CML）共17例,其中加速及急变期3例、慢性期14例中8例,WT1表达为阳性,10例正常人及7例缓解期患者WT1表达均为阴性;且WT1阳性患者完全缓解率（CR）低于表达阴性者（分别为65％和88％,P＜0.05）。此结果说明WT1在白血病患者中高表达,可作为检测白血病微小残留病的标记基因,WT1的阳性表达者化疗后CR率低,且其与白血病的病程发展可能有关,WT1与mdr1无明显相关性。     

Solid and liquid state characterization of tetrahydrocurcumin using XRPD,FT-IR,DSC, TGA,LC-MS,GC-MS,and NMR and its biological activities

Tetrahydrocurcumin (THC) is one of the major metabolites of curcumin (CUR), an ancient bioactive natural polyphenolic compound. This research article describes both the solid and liquid state characterization of THC using advanced spectroscopic and thermo-analytical techniques. Anti-inflammatory, anti-oxidant, and neuroprotective activities of THC were investigated using in vitro cell lines. Liquid chromatography-mass spectrometry analysis revealed that our sample comprised 95.15% THC, 0.51% tetrahydrodemethoxycurcumin (THDC), 3.40% hexahydrocurcumin, and 0.94% octahydrocurcumin. Gas chromatography-mass spectrometry analysis indicated the presence of 96.68% THC and 3.32% THDC. THC in solution existed as keto-enol tautomers in three different forms at different retention time, but the enol form was found to be dominant, which was also supported by nuclear magnetic resonance analysis. THC was thermally stable up to 335.55 °C. THC exhibited more suppression of cytokines (TNF-α, IL-1β, and MIP-1α) than CUR in a concentration-dependent manner in mouse splenocytes, while NK-cell and phagocytosis activity was increased in macrophages. THC showed a significant reduction of free radicals (LPO) along with improved antioxidant enzymes (SOD and catalase) and increased free radical scavenging activity against ABTS⁺ radicals in HepG2 cells. THC displayed higher protection capability than CUR from oxidative stress and neuronal damage by improving cell viability against H₂O₂ induced HepG2 cells and MPP⁺ induced SH-SY5Y cells, respectively, in a concentration-dependent manner. Thus, a variation of the biological activities of THC might rely on its keto-enol form and the presence of other THC analogs as impurities. The present study could be advantageous for further research on THC for better understanding its physicochemical properties and biological variation.     

蝌蚪中铜、锌、镁、铁、钙含量测定

目的 :探讨蝌蚪的化学成分。方法 :用火焰原子吸收分光光度法测定蝌蚪中无机元素的含量。结果 :蝌蚪中的无机元素铜、锌、镁、铁、钙的质量分数分别为 :0 .0 72mg·g-1、0 .12 4mg·g-1、3.316mg·g-1、5 .776mg·g-1和31.5 1mg·g-1。结论 :蝌蚪中无机元素钙的含量很高     

试从《伤寒论》干姜附子汤方证谈中医药学的理法方药与剂工质效

依据<伤寒论>干姜附子汤方证,初步探讨了中医学的理、法、方、药与中药学的剂、工、质、效.认为干姜附子汤方证反映了中医时间医学的精华,提示了症状排除法的诊断方法 ,树立了应用小方的典范,引导了后世"火神派"的形成,指引着中药药剂学的研究思路,鞭策着中药的质量管理模式及疗效.认真学习干姜附子汤方证,对于继承仲景之学,探讨中医药学系统工程的关键问题,推动中医药学术与事业的发展,都有重要意义.