A型肉毒毒素抑制大鼠变应性鼻炎鼻溢及VIP在鼻腔粘膜的免疫表达

目的: 确定A型肉毒毒素(BTX-A)对大鼠变应性鼻炎鼻溢是否具有治疗的作用,以及毒素使用前后血管活性肠肽(VIP)免疫表达和组织学改变. 方法: 卵清蛋白(Ovalbumin)致敏Wistar大鼠制作变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)动物模型,16只大鼠随机分为3组,即对照组(n=6);致敏组(n=10);致敏后A型肉毒毒素(BTX-A)用药组(n=5). 观察给予BTX-A前后大鼠鼻部症状和体征的变化. 采用组织学和免疫组织化学方法观察鼻腔粘膜形态学改变以及对VIP物质表达的影响. 结果: ①致敏组动物鼻分泌量明显增多. 组织学结果显示:致敏组鼻腔粘膜水肿、腺体增生、嗜酸性粒细胞增多. 免疫组织化学结果显示:致敏组腺体周围VIP纤维密集,呈束状. ②致敏后BTX-A用药组,鼻分泌量明显减少,致敏后BTX-A用药组与致敏组相比鼻分泌量差异有显著性(P﹤0.05),但鼻痒及喷嚏症状无明显改变. 组织学结果示:鼻粘膜上皮完整,腺体明显减少,腺管萎缩. 免疫组织化学结果示:致敏组动物致敏后 BTX-A 用药组腺体周围VIP纤维减少,未见束状VIP纤维. 结论: BTX-A能缓解变应性鼻炎流涕,VIP纤维密度和数量免疫阳性反应减少,能治疗变应性鼻炎的鼻溢症状.     

结扎大鼠颌下腺根部后其腺上皮的反应性变化

本文研究了大鼠颌下腺根部结扎后本腺体上皮成分的反应性变化。术后腺体明显萎缩,镜下观察腺体大部分上皮成分变性退化消失,但腺体周围部少量的腺泡及闰管上皮细胞出现脱分化和增生现象,增生的细胞先形成细胞团或索,然后逐渐分化成腺泡和导管。这种再生现象与大鼠颌下腺的组织发生过程基本相似。     

水浸束缚应激对大鼠下颌下腺内瘦素表达的影响

目的:观察应激状态下大鼠颌下腺内瘦素表达的变化,探讨应激反应对颌下腺瘦素分泌的影响及其意义.方法:采用水浸束缚应激(WRS)方法,将20只SD大鼠随机均分为WRS组(n=10)和对照组(n=10),用免疫组织化学方法观察大鼠颌下腺内瘦素的定位与分布;用ELISA法检测两组大鼠血清和颌下腺组织中瘦素水平.结果:瘦素免疫反应阳性细胞主要定位于颌下腺导管的颗粒曲管和纹状管,腺泡细胞为阴性,其中颗粒曲管上皮细胞呈强阳性反应. WRS组大鼠颌下腺导管上皮细胞瘦素免疫反应细胞的染色强度高于对照组. 与对照组相比,WRS组大鼠血清和颌下腺中瘦素水平均显著升高(P＜0.01).结论:瘦素表达于大鼠颌下腺导管上皮细胞;水浸束缚应激可致大鼠血清和颌下腺中瘦素浓度增加,颌下腺内瘦素可能参与应激反应过程的调节.     

神经生长因子和表皮生长因子在衰老大鼠下颌下腺的表达

目的 观察D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)、表皮生长因子(EGF)表达的改变.方法 选取18只SD雌性大鼠,随机分成正常组、模型组,模型组大鼠每天腹腔注射D-半乳糖,连续60 d,制造亚急性衰老大鼠模型.用SP免疫组化法检测下颌下腺NGF、EGF的阳性表达.结果 NGF、EGF阳性反应颗粒为浅棕色至深褐色,主要分布于颗粒曲管细胞及纹状管细胞顶部胞质中,腺泡细胞为阴性.正常组NGF、EGF表达明显高于模型组(P＜0.01).结论 D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺NGF、EGF表达较正常大鼠明显减少,说明NGF、EGF表达伴随衰老明显降低,为延缓组织退行性改变、预防衰老性涎腺疾病研究提供了一定的实验资料.     

大剂量氨甲喋呤对大鼠肠黏膜损伤及叶酸解救的对照观察

【目的】观察大剂量氨甲喋呤(HDMTX)及叶酸解救时大鼠肠黏膜的损伤情况，并建立相关的动物模型。【方法】6周龄大鼠分两组，单纯HDMTX组(HDM)每鼠一次注射MTX 10mg后逐日杀鼠取肠作黏膜形态学检查及ALP测定。叶酸解救组(CFR)注射MTX后24h开始解救共7次(0．15mg／次)至第72h，第3、5、7、10天杀鼠。【结果】用MTX后第3天开始出现腹泻，第4天最严重，CFR组腹泻轻。用MTX后小肠绒毛变短，绒毛及腺窝上皮细胞变矮至扁平，第2．3天最严重；CFR组小肠黏膜形态改变较HDM组轻，第5天恢复，后短暂高于用药前又再回复；回肠黏膜改变早于空肠，细胞高度的变化早于绒毛。小肠黏膜ALP活性早期与形态学改变一致，但恢复后期仍低于用药前。结肠上皮细胞第1、2天变矮，绒毛长度则无显变化。【结论】HDMTX致大鼠小肠黏膜严重损伤，表现为绒毛萎缩和上皮细胞变矮，恢复期绒毛有暂时性过度增长现象，但功能上可能仍有缺陷；结肠黏膜影响不大。叶酸解救减轻但未能完全阻止肠黏膜损伤。     

糖尿病大鼠下颌下腺内瘦素和瘦素受体表达变化

目的观察糖尿病大鼠下颌下腺内瘦素和瘦素受体表达的变化.方法 SD雄性大鼠24只,随机分为实验组12只(4、12周各6只)及对照组12只.用链脲佐菌素复制糖尿病动物模型,分别于4、12周后测体重和血糖,应用HE和免疫组织化学SABC法,观察组织学变化并检测瘦素及其受体表达.结果与对照组比较,实验组腺实质趋于萎缩.对照组大鼠下颌下腺导管上皮细胞呈瘦素及瘦素受体免疫反应中等阳性,免疫反应物分布于细胞胞质内,细胞核和腺泡细胞呈阴性.4周糖尿病组瘦素及其受体免疫反应呈较强阳性;12周时呈强阳性.结论随糖尿病病程延长,大鼠下颌下腺组织发生退变且瘦素及其受体表达增强,为探讨瘦素变化在糖尿病发病机制中的作用及意义提供了形态学依据.     

大鼠下颌下腺内ncNOS及NT-3的表达

目的对大鼠下颌下腺内神经型一氧化氮合酶(ncNOS)及神经营养因子(NT-3)进行定性和定位研究.方法取10只SD大鼠下颌下腺,进行HE染色和免疫组织化学染色.结果大鼠下颌下腺颗粒曲管、纹状管及小叶间导管上皮细胞呈ncNOS及NT-3免疫反应阳性,而腺泡细胞则为阴性.结论大鼠下颌下腺导管上皮中有ncNOS及NT-3的表达,提示下颌下腺具有复杂的分泌功能.     

SD大鼠颌下腺腺泡细胞培养及胶原海绵的细胞相容性

【目的】研究SD大鼠颌下腺腺泡细胞体外培养方法以及和胶原海绵的细胞相容性,探讨胶原海绵应用于涎腺组织工程支架材料的可行性。【方法】取新生SD大鼠颌下腺组织,胰酶消化后将细胞于适宜的体外环境培养、纯化、鉴定,并将鉴定好的颌下腺腺泡细胞移植到胶原海绵上,采用DAPI进行特异性的核染色,荧光显微镜下观察腺泡细胞与胶原海绵的相容情况,评价腺泡细胞与胶原海绵的相容性。【结果】体外培养的颌下腺腺泡细胞经纯化后能够分泌特异性的淀粉酶,免疫细胞化学淀粉酶抗体阳性染色,并能在胶原海绵上正常增殖。【结论】体外培养的颌下腺腺泡细胞具备腺泡细胞的生物学特征并与胶原海绵有很好的相容性,有望将胶原海绵作为组织工程化涎腺组织的支架材料之一。     

大剂量氨甲喋呤对大鼠肠黏膜损伤及叶酸解救的对照观察

[目的]观察大剂量氨甲喋呤(HDMTX)及叶酸解救时大鼠肠黏膜的损伤情况,并建立相关的动物模型.[方法]6周龄大鼠分两组,单纯HDMTX组(HDM)每鼠一次注射MTX10mg后逐日杀鼠取肠作黏膜形态学检查及ALP测定.叶酸解救组(CFR)注射MTX后24h开始解救共7次(0.15mg/次)至第72h,第3、5、7、10天杀鼠.[结果]用MTX后第3天开始出现腹泻,第4天最严重,CFR组腹泻轻.用MTX后小肠绒毛变短,绒毛及腺窝上皮细胞变矮至扁平,第2、3天最严重;CFR组小肠黏膜形态改变较HDM组轻,第5天恢复,后短暂高于用药前又再回复;回肠黏膜改变早于空肠,细胞高度的变化早于绒毛.小肠黏膜ALP活性早期与形态学改变一致,但恢复后期仍低于用药前.结肠上皮细胞第1、2天变矮,绒毛长度则无显著变化.[结论]HDMTX致大鼠小肠黏膜严重损伤,表现为绒毛萎缩和上皮细胞变矮,恢复期绒毛有暂时性过度增长现象,但功能上可能仍有缺陷;结肠黏膜影响不大.叶酸解救减轻但未能完全阻止肠黏膜损伤.     

高血压大鼠穹隆下器室管膜扫描电镜特征

目的观察高血压大鼠穹隆下器室管膜游离面扫描电镜特征。方法选择雌性Wistar大鼠40只分为实验组(n=30)和对照组(n=10)。实验组予以左旋硝基精氨酸(L-NNA)15mg/(d.kg),分别于8:00、20:00腹腔注射,制备高血压动物模型。于用药2(10只)、4(10只)、8周(10只)常规经心灌注固定、取脑。对照组不做任何处理。用扫描电镜观察高血压大鼠穹隆下器室管膜的特征。结果扫描电镜下主要表现为室管膜细胞形态改变,过渡区室管膜上纤维网排列紊乱、断裂,甚至消失;中央区室管膜上分泌泡先增加后减少。结论高血压大鼠穹隆下器室管膜细胞和室管膜上结构存在超微结构的损伤,提示以上形态学的改变和高血压的变化有关。     

生长抑素在海洛因依赖大鼠颌下腺的表达

目的：研究生长抑素（somatostatin,SS）在海洛因依赖大鼠颌下腺的表达。方法：正常SD大鼠,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组,皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、38天取颌下腺,应用免疫组织化学SABC法及图像分析方法检测SS的表达。结果：SS阳性细胞数量及免疫反应强度在海洛因依赖第10天下降,之后随成瘾时间延长呈逐渐增强趋势;图像分析显示,SS阳性细胞数量在第31天时最高（P〈0.05）,平均灰度值在第31天时最低（P〈0.05）。结论：海洛因依赖期间,生长抑素在大鼠颌下腺表达水平的变化可能是机体对海洛因依赖产生的一种适应性调节过程。     

外源性基因经乳腺导管注射在大鼠乳腺组织中表达的机制研究

目的研究外源性基因经乳腺导管注射在乳腺组织中表达的机制。方法依据乳腺发育时期的不同（即9周龄未孕、妊娠7d、妊娠12d、妊娠18d、产后7d、产后14d）将36只SD大鼠分为6个实验组（6只／组），以绿色荧光蛋白（GFP）高效表达质粒pCE-29与脂质体混合后，经乳腺管导人各组大鼠第5对乳腺。48h后取材冰冻切片，荧光显微镜下观察各组GFP的表达情况，如有表达则对该张冰冻切片行HE染色，前后图像对比以确定GFP表达位置。另取不同发育时期正常大鼠乳腺组织制作石蜡切片，HE染色。结果pCE-29质粒由乳头管导人后，实验组中妊娠12d组和产后7d组中各有2只有GFP表达，图像对比后确定GFP是在乳腺腺泡细胞中表达：石蜡切片HE染色后观察大鼠乳腺组织，在从妊娠初始到产后的发生变化过程中，在妊娠12d和产后7d时处于分裂期的腺细胞较多，而其他时期处于分裂期的腺细胞较少。结论在妊娠12d和产后7d这两个时期，外源性基因经乳腺管注射可以转入腺泡上皮细胞而得到表达。表达的机制可能是在妊娠期及分娩后，由于体内激素作用，乳腺干细胞在以上两个时期不断分化．启动腺细胞分裂增殖，分裂期的腺细胞进行DNA复制，因此可能接受外源性基因的机率大。本实验为外源性基因经乳腺管注射在动物乳腺的表达提供了重要的研究资料。     

白陶土诱导新生大鼠梗阻性脑积水模型的建立

目的 采用白陶土混悬液诱导的方法建立新生大鼠梗阻性脑积水模型。方法 对出生1 d的SD大鼠经枕大池注射白陶土混悬液（实验组,n=40）,另设生理盐水对照组（n=10）和正常对照组（n=10）;再将实验组分为4个亚组（n=10）,分别在注射后第1、2、3、4周进行观察。注射后第1、2、3、4周,对大鼠进行头颅磁共振成像（MRI）检查。1月龄时,对大鼠开始Morris水迷宫训练,观察大鼠空间辨别能力和记忆能力。结果 实验组大鼠逐渐出现弓背、宽基步态等共济失调的表现。注射白陶土1周时,实验组大鼠MRI表现出脑室扩大征象;至第4周表现为明显的脑室扩大和皮层变薄。实验组大鼠在Morris水迷宫实验中无法准确找到平台;训练第4、5、6天时,实验组大鼠逃避潜伏期明显长于两个对照组（P<0.01）。结论 经枕大池注射白陶土可以有效地建立梗阻性脑积水动物模型。     

白陶土诱导新生大鼠梗阻性脑积水模型的建立

目的采用白陶土混悬液诱导的方法建立新生大鼠梗阻性脑积水模型。方法对出生1d的SD大鼠经枕大池注射白陶土混悬液(实验组,n=40),另设生理盐水对照组(n=10)和正常对照组(n=10);再将实验组分为4个亚组(n=10),分别在注射后第1、2、3、4周进行观察。注射后第1、2、3、4周,对大鼠进行头颅磁共振成像(MRI)检查。1月龄时,对大鼠开始Morris水迷宫训练,观察大鼠空间辨别能力和记忆能力。结果实验组大鼠逐渐出现弓背、宽基步态等共济失调的表现。注射白陶土1周时,实验组大鼠MRI表现出脑室扩大征象;至第4周表现为明显的脑室扩大和皮层变薄。实验组大鼠在Morris水迷宫实验中无法准确找到平台;训练第4、5、6天时,实验组大鼠逃避潜伏期明显长于两个对照组(P<0.01)。结论经枕大池注射白陶土可以有效地建立梗阻性脑积水动物模型。     

γ-氨基丁酸及其受体在大鼠颌下腺表达和分布特征

目的：检测γ-氨基丁酸（GABA）及其受体在大鼠颌下腺上皮细胞的表达及分布特征，探讨GABA与腺体合成和分泌功能的关系。方法：用免疫组化EnVision技术，检测GABA、GABA-A和GABA-B受体在SD大鼠颌下腺中的表达，并比较GABA和受体在腺泡和导管系统中的表达强度和细胞分布特征。结果：GABA、γ-氨基丁酸A受体α1亚基（GABA-A α1）、GABA—BR1和GABA-BR2在SD大鼠颌下腺中均有阳性表达。GABA主要分布在颌下腺腺泡和闰管、纹状管和小叶间导管上皮细胞，导管上皮强度大于腺泡上皮，且以纹状管和小叶间导管表达强度更明显，而分布特征比较一致，均位于细胞基底部。GABA-A α1表达于颌下腺小叶间导管、纹状管和部分腺泡上皮；GABA—BR1仅在纹状管上皮有散在表达。结论：大鼠颌下腺腺泡和导管上皮细胞中存在GABA及其受体，GABA系统可能通过GABA受体参与颌下腺分泌和排泄的调控。     

A型肉毒毒素对脊髓α运动神经元活性的调节作用

目的探索大鼠背根神经节A型肉毒毒素注射对脊髓前角α运动神经元活性及相关肌肉运动功能的影响作用。方法40只雄性Wistar大鼠,采用数字表法随机分为4组(每组10只):A组、B组、C组、D组。于实验前1天对各组大鼠进行H反射检测及运动功能评价,后以10%水合氯醛0.3 mL/kg腹腔注射进行麻醉,无菌条件下行左侧L4、L5、L6限制性椎板部分切除后暴露背根神经节。A组、B组分别以A型肉毒毒素背根神经节注射,C组注射等容积(6μL)0.9%氯化钠注射液,D组不干预为正常对照组。各组分别于注射后1,3,7,14 d进行H反射及运动功能评定。结果 (1)H反射测定:A型肉毒毒素注射后各观察时间点,A组大鼠左后肢H反射潜伏期、波幅较注射前均明显延长、降低(P<0.05,P<0.01);B、C、D 3组大鼠注射后各观察时间点与注射前比较H反射潜伏期及波幅差异均无统计学意义。A组大鼠A型肉毒毒素注射后各观察时间点H反射潜伏期及波幅较B、C、D组的相应观察时间点明显延长(P<0.05)和降低(P<0.01);A型肉毒毒素注射后各观察时间点B组与C组,B组与D组,C组与D组组间两两比较,H反射潜伏期及波幅差异无统计学意义(P>0.05)。(2)改良Rivlin斜板实验:A组大鼠,A型肉毒毒素注射后各观察时间点,斜板度数均较注射前为低(P<0.05);A型肉毒毒素注射后第7天,第14天,A组斜板度数显著低于B、C、D组(P<0.05,P<0.01,P<0.01);注射后不同时间点B组与C组,B组与D组,C组与D组斜板度数组间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论背根神经节A型肉毒毒素注射具有抑制脊髓反射环路,降低脊髓前角α运动神经元兴奋性的作用。     

模拟失重降低大鼠血清和下颌下腺Ghrelin水平

目的观察模拟失重状态下大鼠血清和下颌下腺内Ghrelin表达的变化,为探讨航天失重环境下消化系统功能紊乱的机制提供实验依据。方法采用尾悬吊模拟失重模型,30只Sprague-Dawley大鼠随机分为4周悬吊组（n=15）和正常对照组（n=15）,用酶免疫分析（EIA）法测定动物血清和下颌下腺组织中Ghrelin的浓度。结果与正常对照组比较,模拟失重组大鼠血清和下颌下腺组织中Ghrelin水平均显著降低【（7．14±1．65）μg／Lus（5．72±1．42）μg／L,P〈0．05;（8．36±1．87）μg／gVS（6．45±2．06）μgg,P〈0．01）1。结论模拟失重环境可致大鼠血清和下颌下腺组织中Ghrelin水平下降。Ghrelin可能参与模拟失重环境下消化系统功能紊乱的调节。     

铅对孕鼠甲状腺功能影响的形态学观察

作者用醋酸铅作为受试物,以三组剂量(20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg)于大鼠受孕第13、16、19天3次腹腔注射染毒,对照组给生理盐水。结果:光镜下甲状腺组织呈明显的低功改变,并有退行性变趋势。电镜下滤泡上皮细胞呈萎缩性改变,有关蛋白质代谢的细胞器不发达,分泌颗粒、溶酶体及胶质小泡的数量也明显减少。提示醋酸铅对甲状腺有明显的毒性作用。