原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中趋化因子受体CXCR3 mRNA表达水平变化

目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR3mRNA表达及其与疾病发病机制、疾病活动性的关系.方法 采用逆转录实时荧光定量(FQ-RT)-PCR的方法,在Light Cycler Real time PCR检测仪上检测59例PBC患者(活动期29例、缓解期30例)、结缔组织病(CTD)患者20例(疾病对照组)、健康体检者29名(健康对照组)外周血PBMC中CXCR3 mRNA的表达水平和含量.以Act=Ct(待测基因)-Ct(内参基因)比较基因表达水平的变化.结果 活动期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平(Act=5.41±2.69)明显高于缓解期PBC患者(Act=7.77±2.74,t=3.39,P＜0.01);活动期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平(Act=5.41±2.69)明显高于正常对照组(Act=7.16±2.76,t=2.45,P＜0.01)和疾病对照组(Act:7.24±2.75,t=2.53,P＜0.01);缓解期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平与正常人及疾病对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PBC患者CXCR3 mRNA表达水平显著高于正常人、疾病对照组和疾病缓解期,提示CXCR3的表达与PBC的发生发展存在一定关联性.     

蛇床子素对海人酸致痫大鼠神经元Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响

目的:观察蛇床子素对海人酸致痫大鼠海马神经元的影响以及对海马神经元Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响,揭示蛇床子素对海人酸致痫大鼠海马神经元作用的机制。方法:30只SD大鼠随机分成3组,其中对照组10只、海人酸组10只、蛇床子素组10只。结晶紫染色观察海马神经元的形态,免疫组化染色法检测海马神经元Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达。结果:结晶紫染色结果显示,海人酸组中海马神经元胞体皱缩,形态不规则。蛇床子素干预组中海马神经元的数量和形态与对照组相似,胞浆清晰淡染,核仁清楚。免疫组化染色结果显示,海人酸组中海马神经元活性Caspase-3和Caspase-9蛋白表达与对照组比较显著增加(P0.05),蛇床子素组中海马神经元活性Caspase-3和Caspase-9蛋白表达与海人酸组比较显著减少(P0.05)。结论:蛇床子素对海人酸致痫大鼠海马神经元具有保护作用,其机制可能与蛇床子素抑制海马神经元Caspase-3和Caspase-9蛋白活性有关。     

蛇床子素对海人酸致痫大鼠海马神经元Puma表达的影响

目的:探讨蛇床子素对海人酸致痫大鼠海马神经元损伤的保护作用及相关分子机制。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、海人酸组和蛇床子素组,采用结晶紫染色法观察大鼠海马神经元的形态,采用免疫组化法检测大鼠海马神经元Puma蛋白的表达。结果:形态学观察结果显示,海人酸组较正常对照组大鼠的海马神经元排列不规则,数量减少,核固缩;蛇床子素组较海人酸组大鼠的海马神经元排列规则,数量增加,神经元形态与正常对照组相似。Puma蛋白检测观察结果显示,海人酸组较正常对照组大鼠海马神经元Puma蛋白表达增高(P0.05),蛇床子素组较海人酸组大鼠海马神经元Puma蛋白表达降低(P0.05)。结论:蛇床子素对海人酸致痫大鼠海马神经元损伤具有保护作用,其机制可能与下调大鼠海马神经元Puma蛋白表达有关。     

Ca^＋依赖性磷脂酶A2有效表达系统的构建

为了构建Ｃａ＾２＋依赖性磷脂酶Ａ２（Ｃａｌｃｉｕｍ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ Ａ２，ｃＰＬＡ２）的有效表达系统，本实验应用Ｓａｌ Ⅰ消化ｃＰＬＡ２－ＰＭＴ２重组体，电洗脱法回收ｃＰＬＡ２片段并使期平末端化。应用ＮｏｔⅠ消化ＰＲＣ／ＣＭＶ载体使其线性化，之后脱磷酸以防止自身环化。ｃＰＬＡ２与线性化且脱磷酸载体ＰＲＣ／ＣＭＶ进行平末端连接，转染鼠巨噬细胞，扩增培养，收集细胞，提     

红景天苷对神经退行性疾病保护作用的实验研究进展

红景天苷(salidroside,Sal)是从景天科植物红景天中提取的主要活性成分,具有抑制炎症、改善认知功能、抗疲劳、抗毒素、抗氧化、减少自由基和抑制神经元凋亡的作用[1-4]。近期文献报道,红景天苷对阿尔兹海默病、帕金森病、亨丁顿舞蹈症、癫痫、缺血性脑卒中等神经退行性疾病具有保护作用。本文将红景天苷对神经退行性疾病保护作用的实验研究综述如下,为红景天苷对神经退行性疾病的作用及机制的深入研究奠定基础。     

ELISA检测尿液sIgA及临床意义

sIgA作为黏膜免疫系统的效应分子在呼吸道、胃肠道和泌尿生殖道的黏膜抗感染中发挥重要作用。检测sIgA有助于上述部位感染的诊断和治疗。本实验建立了尿液sIgA的ELISA法,并探讨尿液sIgA测定对鉴别泌尿系统感染部位的意义。     

自噬在阿尔茨海默病中的作用机制及治疗前景

自噬过程受到一系列复杂信号分子的调控。基础水平的自噬在清除异常积聚的蛋白质、长寿命蛋白以及受损细胞器、维持细胞内稳态和细胞生存中扮演重要角色。阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种以进行性认知障碍和记忆力损害为主的脑部神经退行性疾病,其发病机制尚未明确,目前仍无有效的治疗方法。介绍自噬和阿尔茨海默症的关系和药物治疗,旨在为AD相关药物的开发及合理利用提供实验依据。     

雷公藤提取物对神经退行性疾病的作用机制研究进展

雷公藤提取物在阿尔茨海默病、帕金森病、实验性自身免疫性脑脊髓炎、脑缺血等神经退行性疾病中,通过促进B细胞淋巴瘤因子-2蛋白表达抑制神经元凋亡;通过抑制肿瘤坏死因子α、白细胞介素-1β的转录减轻神经炎症反应;通过增加多巴胺的分泌水平提高多巴胺能神经元存活率。雷公藤提取物具有显著的抗神经炎症及抗神经元凋亡作用,有望成为延缓神经退行性疾病病程的重要手段。     

免疫印迹法检测血清抗Sa抗体方法的建立

目的：建立免疫印迹法检测血清抗Sa抗体，并对其敏感性、特异性和稳定性进行评价。方法：通过3组正交设计实验，确立检测方法的最佳条件；主要条件为硝酸纤维素膜应用15％小牛血清封闭2 h，被测血清作1：40稀释，酶标抗体作1：800稀释。结果：抗Sa抗体对类风湿性关节炎(RA)敏感性为42.7％，特异性为100％；结论：建立的免疫印迹法检测血清抗Sa抗体结果较稳定，并有较高特异性。，Objective:To establish a method for detecting anti-Sa antibody in serum bywestem-blot and evaluate its sensitivity, specificity and stability. Methods: We established thebest conditions for detecting anti-Sa antibody by 3 orthogonal design tests. Results: The mainconditions are as follows:The nitrocellulose membrane was blocked in 15 % bull seru solution for 2 hours;the patients'serum was diluted at 1:40 while labeled antibody at 1:800; thesensitivity of anti-Sa antibody to rheumatoid arthritis was 42.7 % and specificity was 100 %.Conclusion :The results detected by western-blot are stable and specific.