银翘散抗甲1型流感病毒作用的实验研究

目的以MDCK细胞及小鼠流感肺炎模型为基础，观察不同浓度银翘散煎剂对流感病毒导致细胞病变的抑制作用和改善小鼠肺炎严重程度的情况，评价古方银翘散对甲1型流感病毒的抑制作用。方法接种甲1型流感病毒于MDCK细胞，观察银翘散体外抗流感病毒作用；以甲1型病毒滴鼻感染小鼠，观察对肺指数、病毒致小鼠死亡率等的影响。结果银翘散的最大无毒浓度为1．13g.L^-1，100TCID50病毒攻击量下，银翘散（在0．52～66g．L^-1浓度下）在MDCK细胞对甲1型流感病毒FM1株均无明显的抑制作用。银翘散对流感病毒致小鼠肺炎的抑制作用，其40、20、101mg．kg^-1三个剂量组的肺指数分别为1．35、1．36、1．52，其中银翘散40、20mg／kg两个剂量组与病毒对照组相比，差异有显著性（P〈0．01）；银翘散100mg．kg^-1与病毒对照组相比，在死亡保护率和平均存活时间均有统计学的差异显著性（P〈0．05）。结论银翘散可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状，延长生命率，对甲1型流感病毒感染小鼠有死亡保护作用，对病毒性感冒显示了较好的疗效。     

盐藻多糖抗病毒实验研究

目的通过体内外抗病毒实验观察盐藻多糖抗副流感病毒的作用。方法接种副流感病毒1型(HVJ)于狗肾细胞(MDCK),观察盐藻多糖对病毒致细胞病变效应的作用;体内实验以副流感病毒滴鼻感染小鼠,观察盐藻多糖对感染病毒小鼠的死亡率、生存时间、肺指数和肺病变程度的影响。结果盐藻多糖10、30、100μg/mL的浓度均有明显抑制病毒致细胞病变的作用;盐藻多糖30、100 mg/kg剂量组能显著降低病毒感染小鼠的死亡率,延长小鼠的生存时间,降低肺指数,减轻肺病变程度。结论盐藻多糖具有良好的抗副流感病毒的作用。      

宣肺和解方对流感病毒感染小鼠的保护作用

目的：观察宣肺和解方对流感病毒感染小鼠的保护作用。方法：取体重为17～18g的NIH小鼠分为正常对照组、感染模型组、宣肺和解方组和病毒唑组。以流感病毒FM1株滴鼻感染小鼠,致病毒性肺炎模型。应用宣肺和解方进行防治,以病毒唑注射液为对照。结果：在观察的时间内,与模型组比较,宣肺和解方可以显著降低流感病毒感染小鼠的死亡率（P〈0.05）,显著延长平均生存时间（P〈0.05）,显著降低肺指数（P〈0.05）,以及显著降低肺匀浆中病毒血凝滴度（P〈0.05）;各组小鼠体重也有显著性差异（P〈0.05）。结论：宣肺和解方可有效抑制病毒性肺炎小鼠体内病毒增殖,降低肺指数,提高存活率。     

清肺解毒方对流感病毒感染小鼠的保护作用

目的研究清肺解毒方对流感病毒感染小鼠的保护作用及对病毒性肺炎的治疗作用。方法小鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、阳性对照组,以及清肺解毒方5、2.5和1.25g/kg剂量组,采用滴鼻感染流感病毒,造模2 h后灌胃给药,连续6 d后继续饲养至感染后14d,统计小鼠死亡率、平均存活时间、死亡保护率和生命延长率,观察清肺解毒方对流感病毒感染小鼠的保护作用;参照以上实验方法于造模后第3天和第6天取肺,以肺指数、肺脏病毒滴度和肺组织病毒载量为评价指标,观察清肺解毒方对病毒性肺炎小鼠的治疗作用。结果与模型组相比,清肺解毒方2.5和1.25g/kg剂量组死亡率显著降低,死亡保护率明显提高(P<0.01),存活时间明显延长,生命延长率明显增加(P<0.01);造模后第3天和第6天小鼠的肺指数、肺脏病毒滴度及肺脏病毒载量显著降低(P<0.01)。结论清肺解毒方2.5和1.25 g/kg剂量组具有明显的抗流感作用。     

疏风解毒胶囊防治流感体内药效学实验研究

目的评价疏风解毒胶囊在体内对H1N1流感病毒感染的防治作用。方法本研究中采用甲型H1N1流感病毒FM1和PR8株滴鼻感染正常小鼠造成肺炎模型,分别进行治疗性和预防性给药,观察小鼠肺指数、病死率。结果①感染当天开始给予疏风解毒胶囊治疗,连续4 d后3个剂量组肺指数均明显降低;②预防性给予疏风解毒胶囊连续4 d,对两种病毒感染正常小鼠引起的肺部炎症有明显预防作用。③感染前预防性给予疏风解毒胶囊4 d,FM1株三个剂量组动物的死亡数均显著降低。结论疏风解毒胶囊可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状,降低H1N1感染小鼠的肺指数,对病毒性感冒有较好的治疗和预防作用;并可明显降低感染动物的死亡率,延长评价存活天数。     

疏风解毒胶囊防治流感体内药效学研究

目的评价疏风解毒胶囊在体内对H1N1流感病毒感染的防治作用。方法研究采用甲型H1N1流感病毒FM1株和PR8株滴鼻感染免疫低下小鼠造成肺炎模型,分别进行治疗性和预防性给药,观察小鼠肺指数、病死率,并进一步进行分子机理研究。结果①致免疫低下小鼠肺炎模型实验中,治疗性给予疏风解毒胶囊4d后,三个剂量组肺指数、肺组织中的病毒载量均明显降低;FM1株三个剂量组动物的死亡数均显著降低,PR8株中剂量组动物的存活天数显著增加;②致正常小鼠肺炎模型实验中,治疗性给药可明显降低肺组织中的病毒载量;提高小鼠肺组织IFN-γ含量,增加血清中SOD活力;并降低血清中TNF-α的含量。结论疏风解毒胶囊可通过影响小鼠免疫功能,改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状;降低H1N1感染小鼠的肺指数,对病毒性感冒有较好的治疗;并可明显降低感染动物的死亡率,延长存活天数。     

板蓝根不同提取物抗甲型流感病毒的实验研究

目的:观察板蓝根不同提取物抗甲型流感病毒的作用.方法:采用用血凝滴度640以上的甲型流感病毒A/PR/8/34的尿囊液30μ1滴鼻感染小鼠,观察小鼠感染甲型流感病毒后发病及死亡情况.结果:板蓝根提取物2号1.0 g/kg剂量组和板蓝根提取物3号1.67g/kg剂量组可明显延长甲型流感病毒感染小鼠存活天数和降低死亡率,与病毒对照组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01).板蓝根提取物1号0.67g/kg剂量组和板蓝根提取物4号1.12g/kg剂量组可显延长甲型流感病毒感染小鼠存活天数,与病毒对照组比较具有显著性差异(P<0.05).结论:板蓝根提取物2号组和板蓝根提取物3号组具有较好的抗甲型流感病毒的作用.     

金银花提取物抗病毒的作用研究

目的:探讨金银花提取物的抗病毒作用.方法:采用甲型流感病毒(A/PR/8/34)感染小鼠,观察肺指数抑制率和保护率.结果:金银花提取物20g/kg和40g/kg剂量组对甲型流感病毒(A/PR/8/34)感染小鼠具有明显的保护作用,保护率分别为58.7%和69.0%,能明显降低甲型流感病毒感染小鼠的肺指数值,肺指数抑制率分别为14.6%和18.7%.与病毒对照组比较具显著性差异(P<0.05,P<0.01),组织病理学检查结果显示小鼠病毒性肺炎,主要表现为化脓性支气管炎.小叶性肺炎和间质性肺炎.金银花提取物各剂量组可明显减轻肺部病变.结论:金银花提取物具有抗甲型流感病毒感染的作用.     

板蓝根颗粒和苦甘颗粒对流感病毒感染小鼠的保护作用研究

目的板蓝根颗粒和苦甘颗粒两种中药方剂对流感病毒FM1感染小鼠的保护作用,观察中药方剂对流感动物模型的防治作用,探讨其相应中医治法的理论内涵。方法将实验小鼠随机分为空白对照组、模型组、达菲组（磷酸奥司他韦）及中药各剂量组,观察肺指数及肺指数抑制百分率。结果板蓝根颗粒大剂量组、苦甘颗粒大剂量组和高剂量组均能显著降低流感病毒FM1感染小鼠模型的肺指数（P〈0.05或P〈0.01）。结论板蓝根颗粒和苦甘颗粒对流感病毒FM1感染小鼠具有保护作用。实验结果结合中医理论认识,寒凉清热药所具有的重要药理作用及其对温病的治疗,正与温病学说的创导者们所提出的温病的表证往往是里热怫郁所致,因而其治疗也应以清解里热为主的观点相符合;辛凉辛温,并用除邪,卫气同治,表里双解的治法,与当代中医药治疗流感的用药趋势相一致。实验结果为中药方剂治疗流感的疗效提供了实验依据。     

芩石解毒颗粒治疗流行性感冒的实验研究

目的:通过观察芩石解毒颗粒对流感病毒性肺炎小鼠的治疗作用、对发热模型大鼠的解热作用、对流感病毒引起的细胞病变(CPE)的抑制作用来考察芩石解毒颗粒对流行性感冒的疗效。方法:(1)将小鼠随机分为空白组,模型组,芩石解毒颗粒高、中、低剂量组,连花清瘟组和利巴韦林组,于感染前一天开始灌胃给药,连续5 d,采用流感病毒鼠肺适应株FM115LD50滴鼻感染小鼠,感染后96 h解剖,取肺称重,进行病理检测,观察芩石解毒颗粒对流感病毒性肺炎小鼠的治疗作用;(2)选取体温36.6~38.3℃,且3 d内变化不超过0.3℃的大鼠50只,随机分为芩石解毒颗粒高、中、低剂量组,连花清瘟组,模型对照组,每组10只,采用背部皮下注射2,4-二硝基苯酚(DNP)致热法建立大鼠发热模型,观察给药后1 h、2 h、3 h、24 h的体温变化;(3)通过体外培养技术进行狗肾细胞(MDCK)培养,以甲型流感病毒株感染MDCK细胞,以利巴韦林为阳性对照药,比较观察芩石解毒颗粒对流感病毒引起的细胞病变的抑制作用。结果:肺炎小鼠实验显示芩石解毒颗粒可降低肺指数,改善肺部组织病变;解热实验显示芩石解毒颗粒具有解热作用;细胞实验显示芩石解毒颗粒对甲型流感病毒有一定疗效。结论:芩石解毒颗粒对流行性感冒具有良好的治疗作用。     

抗病毒中药1号在MDCK细胞中对流感病毒B的抑制作用

目的　为了解抗病毒 1号单味中草药对流感病毒B的抑制作用。方法　本研究采用细胞培养技术 ,以病毒唑为阳性对照药 ,观察抗病毒 1号对流感病毒的抑制作用。结果　抗病毒 1号半数中毒浓度(TC50 )为 60 53mg/ml ;治疗和预防给药方式均有抗流感病毒作用 ,其抗流感病毒B的半数有效浓度 (EC50 )分别为 8 88mg/ml和 9 2 1mg/ml ;治疗指数 (TI)分别为 6 81和 6 57。结论　抗病毒 1号对流感病毒B的抑制作用存在着明显的量效关系。     

紫贻贝多糖抑制流感病毒在鸡胚中增殖的研究

目的:研究紫贻贝多糖(MEPS)对流感病毒在鸡胚中增殖的抑制作用。方法:采用血凝滴度测定研究MEPS对鸡胚培养甲型流感病毒的抑制作用。结果:与病毒对照组比较,MEPS各剂量组的血凝滴度降低差异有非常显著性(P<0.01)。结论:MEPS能明显抑制鸡胚培养流感病毒的增殖,具有开发成抗流感病毒生物制剂的前景。     

健脾解毒方联合经皮肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌疗效观察

目的观察健脾解毒方联合经皮肝动脉化疗栓塞术（TACE）治疗原发性肝癌患者的临床疗效。方法将66例患者按平行对照研究方法,分为治疗组34例和对照组32例,两组患者在性别、年龄、病情方面比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。对照组使用TACE术及对症治疗,治疗组在对照组治疗基础上联合口服中药健脾解毒方,并随症加减。两组均治疗3个月后观察患者临床症状、疗效、KPS积分、肝功能及甲胎蛋白（AFP）指标。结果两组中医症状、肝功能、AFP方面与治疗前比较,差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。治疗组在中医症状、KPS积分、γ-GT、AFP方面的疗效明显优于对照组（P〈0.01）,在证候疗效、ALB、AKP方面的改善与对照组比较,亦有统计学差异（P〈0.05）。结论健脾解毒方联合TACE术治疗肝癌,在改善症状、提高生活质量以及对肝功能、AFP等指标影响方面有显著优势。     

化浊解毒方治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变的临床研究

目的观察化浊解毒方对慢性萎缩性胃炎（CAG）伴胃黏膜上皮中、重度不典型增生（ATP）及不完全肠上皮化生（IM）癌前病变临床症状、胃镜病理学及幽门螺旋杆菌（Hp）的影响。方法将确诊为慢性萎缩性胃炎癌前病变的120例患者随机分为治疗组和对照组两组,分别给予化浊解毒方汤剂和胃复春片治疗。治疗结束后比较两组患者的临床症状、胃镜病理学及Hp转阴率的改变情况。结果临床症状总有效率比较,化浊解毒方组为86.67%,胃复春组为71.67%,差异有统计学意义（P〈0.05）;胃镜病理学检查总有效率比较,化浊解毒方组为78.33%,胃复春组为60.00%,差异有统计学意义（P〈0.05）;Hp的转阴率比较,化浊解毒方组为73.17%,胃复春组为35.89%,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论在浊毒理论指导下运用化浊解毒方治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变具有良好疗效。其作用机制除与对抗幽门螺旋杆菌有着密切关系外,还可能与增强胃肠动力、调节免疫功能、保护胃黏膜等存在相关性。     

升降散抗流感病毒实验研究

设计了升降散水煎剂对流感病毒感染鸡胚、小鼠治疗作用实验 ,升降散抗流感病毒感染小鼠配伍及剂量的正交实验 ,结合动物免疫指标的检测 ,研究了温疫名方升降散对流感病毒的治疗作用及升降散的配伍剂量搭配问题。实验结果表明 :升降散水煎剂抗流感病毒效果优于病毒唑 ,其差异具有显著性 ;升降散对机体免疫系统影响的研究表明 ,升降散水煎液组可促进小鼠刚果红的吞噬 ,增强巨噬细胞的吞噬能力 ,提高小鼠的非特异性免疫力。实验中升降散组可显著提高 CD8+活性而表现 CD4+的降低 ,有助于小鼠肺病变的减轻和恢复 ,使小鼠肺炎症状减轻 ,使免疫系统归于平衡。     

空心莲子草有效部位提取物抗甲型H3N2流感病毒作用

[目的] 以空心莲子草有效部位提取物为研究对象, 进一步验证其抗甲型H3N2流感病毒的生物活性, 为其开发应用提供依据。[方法] 以利巴韦林注射液作为空心莲子草有效部位提取物抗病毒实验的阳性对照药物, 观察甲型H3N2流感病毒感染幼犬肾(MDCK)细胞后引起的细胞病变效应(CPE), 通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性, 采用治疗指数(TI)作为药物抗病毒效果的评价指标, 评价空心莲子草有效部位提取物抗甲型H3N2流感病毒的生物活性。 [结果] 空心莲子草有效部位提取物对流感病毒有明显抗病毒生物合成作用, 其TI为(2.43±0.01), 但其阻止流感病毒吸附与直接杀伤流感病毒的作用不明显。[结论] 空心莲子草有效部位提取物有较强的抗流感病毒作用, 其作用方式为抗病毒生物合成, 且呈剂量依赖性。     

羌银解热汤对流感患者T细胞水平的影响

【目的】通过观察中药羌银解热汤对临床拟诊流行性感冒(简称流感)患者外周血T细胞亚群水平的影响,探讨该中药组方抗流感病毒的机制。【方法】选择急诊临床拟诊为流感的患者91例,参照随机数字表随机分为羌银解热汤组46例和日夜百服咛组45例,观察2组患者的临床疗效,检测并比较2组患者治疗前后外周血CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平。【结果】(1)羌银解热汤组的痊愈率和总有效率分别为30.43%和82.61%,日夜百服咛组分别为13.33%和62.22%,羌银解热汤组的痊愈率、总有效率和总疗效均优于日夜百服咛组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(2)治疗后,2组患者的CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平均较治疗前显著提高(P<0.05)。治疗后2组比较,羌银解热汤组患者的CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平显著高于日夜百服咛组,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】羌银解热汤对临床拟诊流感患者有显著疗效,作用机理可能与其能有效提高流感患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平,增强机体免疫力有关。     

儿茶提取物抗流感病毒作用的小鼠体内实验研究

用流感病毒鼠肺适应株A/FM/1/4 7(H1N1)感染小鼠 ,制备小鼠肺炎模型 ,研究儿茶提取物对流感病毒感染小鼠死亡的保护作用。结果显示 :高剂量组对感染小鼠具有很好的死亡保护作用 (P <0 .0 5) ,高、中剂量组均可明显延长感染小鼠的平均存活时间。高剂量组 ( 12 .5g/L)的肺指数、肺指数抑制率和肺病变程度与阳性药物 (病毒唑 )对照组相比均有显著性差异 (P <0 .0 5)。研究表明 :该儿茶提取物在小鼠体内具有有效的抗流感病毒作用     

基于RNA聚合酶靶点的抗流感病毒药物筛选系统的鉴定

目的鉴定基于聚合酶亚基间相互作用的靶点特异性抗流感病毒药物筛选酵母双杂交体系。方法挑取筛选平板SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal阳性单菌落（共转化质粒PB1-pGBKT7与PA-pGADT7的AH109酵母细胞）接种培养,PCR验证重组质粒共转是否成功;glass-beads法提取酵母总蛋白,Western-blot验证融合蛋白在酵母细胞中是否表达;将PB1-pGBKT7质粒PB1基因克隆至载体pAcGFP1-C,PA-pGADT7质粒PA基因克隆至载体pProLabel-C,将构建的重组质粒PB1-pAcGFP1、PA-pProLabel共转染人胚肾GP2-293细胞,Co-IP验证在哺乳动物细胞中流感病毒聚合酶亚基PB1、PA具有相互作用。结果 PB1、PA基因PCR结果均为阳性;PB1-Myc融合蛋白Western-blot结果为阴性,PA-HA融合蛋白Western-blot结果为阳性;PB1-pAcGFP1、PA-pProLabel重组质粒PCR验证结果 PB1、PA基因阳性;Western-blot检测PB1-GFP融合蛋白阳性;Co-IP结果表明流感病毒RNA聚合酶亚基PB1与PA在哺乳动物细胞内具有相互作用。结论基于RNA聚合酶亚基间相互作用的抗流感病毒药物筛选系统构建成功,可以用于抗流感病毒靶点特异性的高通量药物的筛选。     

茶多酚主要成分EGCG体外抗流感病毒FM1株作用

【目的】研究茶多酚主要成分EGCG体外抗甲型流感病毒FM1株感染及抑制病毒复制的作用。【方法】细胞培养测定抗病毒效价,采用细胞病变抑制(CPE)法和空斑减少试验法,在不同试验策略(治疗、保护)下,评价其体外抗流感病毒作用。【结果】CPE法观察及四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测结果显示:在治疗及保护模式下,4～32 mg/mL EGCG均有显著抑制病毒、提高细胞存活率的作用(P<0.01)。空斑减少试验结果显示:2种模式下EGCG治疗指数(TI)分别为39.31及43.48,能有效抑制流感病毒,符合CPE法的结果。【结论】EGCG具有一定的体外抗甲型流感病毒FM1株的作用。