深圳市2009-2011年乙型流感病毒流行特征分析

目的了解2009-2011年深圳市乙型流感的流行状况,为制定预防控制措施提供依据。方法在流感哨点监测医院随机采集流感样病例的咽拭子或咽漱液标本,用犬肾传代细胞进行病毒分离,分离阳性的病毒用血凝抑制实验进行流感病毒株型别鉴定。结果 2009-2011年共采集并检测流感样病例咽拭子5 353份,其中分离并鉴定出乙型流感病毒阳性139例,总阳性率为2.60%;以2009年第11周阳性率最高,达33.33%;病毒阳性者平均年龄为(13±15)岁,其中大于60岁组的阳性率最高,达4.21%。结论 2009-2011年深圳市乙型流感病毒的监测中,Victoria亚型为主要流行株。深圳乙型流感病毒主要累及青少年和老年人群。应继续加强监测工作,并在流行季节及时采取预防控制措施以保护公众的身体健康。     

深圳市流感预警机制的应用与探讨

目的　制定符合深圳市特点的流行性感冒（流感）预警机制，尽可能降低流感暴发或流行带来的社会经济损失。 方法　以分析2007年1-8月全市的流感样病例（influenza?鄄like illness, ILI）警戒曲线、流感病毒分离曲线、ILI暴发疫情曲线为基础，应用三级预警机制指标评价流感活动的实际变化趋势。结果　全市ILI监测、病毒分离监测、ILI暴发疫情三者的变化趋势较为一致，均于6月中下旬出现高峰，三级预警机制具有一定的实际指导意义。 结论　深圳市的流感三级预警机制具有较好的灵敏性和可操作性，可为科学防控流感提供重要支持。     

双重荧光定量RT-PCR快速检测N_1、N_2亚型流感病毒的研究

目的利用荧光定量RT-PCR技术建立快速检测流感病毒N1、N2亚型的方法。方法根据N1、N2亚型流感病毒NA基因的相对保守序列,设计两对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系后,采用十倍稀释体外转录RNA检验建立体系的灵敏度和重复性并建立相对定量标准曲线;利用多种流感病毒和具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性。结果 N1、N2亚型流感病毒的检测灵敏度为10拷贝/μl,扩增效率分别为102.21%和101.78%,标准曲线相关系数大于99%,重复性良好,特异度实验未发现有非特异性扩增。结论双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确的检测N1、N2亚型流感病毒。     

1994-2006年深圳市分离的B型流感病毒分子进化研究

目的 通过对深圳市分离的B型流感病毒HA1分子系统进化分析,初步了解深圳市B型流感病毒的流行变异规律.方法 选取深圳市1994-2006共13年间分离的50株B型流感毒株,通过RT-PCR将其HA1基因片段扩增后进行序列解析,然后,通过MEGA等软件对序列进行分子进化分析.结果 1994-2006年间深圳市流行的B型流感病毒分为Yamagata和Victoria两个亚系,两系的毒株分别是不同年份的主要流行株.两个亚系的HA1分子具有1个糖基化位点的差异,在4个抗原决定簇区域也分布有多个氨基酸位点的变异.结论 1994-2006年间深圳市B型流感病毒的两个亚系分别在不同年份主导流行,但变异均比较缓慢.

Abstract：

Objective To study the prevalence and variation of influenza B viruses of Shenzhen. Methods Fifty strains influenza B viruses in Shenzhen from 1994 to 2006 were selected. HA1 gene were amplified by RT-PCR and sequenced. Phylogenetic analysis of HA1 was conducted by MEGA program. Results The influenza B viruses of Shenzhen were divided into Yamagata and Victoria lineage. The two lineages prevailed respectively in different years from 1994 to 2006. The variance of glycosylation site and some mutations of antigenic determinants were detected in the two lineages. Conclusion The viruses of Yamagata and Victoria lineage prevailed respectively in different years in Shenzhen but the mutation rates of the two lineages were slowly.     

2010年深圳市流感流行病学分析

目的对2010年深圳市流感监测结果进行分析,了解流感的流行趋势,为流感防治提供科学依据。方法收集全市31家监测单位的流感样病例数据、病原学检测结果和暴发疫情资料进行分析。结果 2010年深圳市的流感样病例百分比（ILI%）为5.43%。2010年全市共采集日常监测ILI咽拭标本4031份,分离出445株流感病毒,阳性率为11.0%,其中14株季节性H1N1亚型（3.1%）,42株季节性H3N2亚型（9.4%）,171株甲型H1N1亚型（38.4%）,213株B（Victoria,47.9%）亚型,5株B（Yamagata,1.1%）亚型。2010年全市报告了89起ILI暴发疫情,发病总人数741人,流感PCR检测阳性79起,其中季节性甲型6起（6.8%）,乙型67起（75.3%）,甲型H1N1流感6起（6.8%）。结论 2010年深圳市流感活动较低,未出现明显的高峰。     

深圳流感监测网络样品采集工作质量评估

目的为客观评价深圳市流感监测网络的流感样病例(ILI)标本的采样质量,进一步提高流感病毒分离率。方法检测分析全市8所综合监测医院为期10周(2007年第9～18周)的ILI咽拭子标本,集中进行甲乙型流感荧光RT-PCR检测,并与日常流感病毒分离及ILI监测结果相比较。结果在采集的547份ILI咽拭子标本,甲乙型流感荧光RT-PCR阳性率为41.5%(227/547),其中甲型流感病毒179份,乙型流感病毒48份;流感病毒分离阳性率为10.6%(58/547),以甲3亚型流感病毒为主(69.0%),流感RT-PCR阳性率高于病毒分离阳性率(χ2=156.8,P<0.0001)。RT-PCR与病毒分离的阳性一致率为23.3%(53/227),另随着CT值的升高,阳性一致率逐渐降低(趋势χ2=2.903,P=0.0018)。结论通过流感RT-PCR与病毒分离培养两种方法的阳性率比较,能有效反映流感监测采样与检测工作的整体运行情况,是对流感监测工作质量较为简单可行的评估方法之一。     

1995-2007年深圳市H1N1流感病毒血凝素基因的序列分析

目的 研究1995-2007年深圳市流行的H1N1流感病毒血凝素(HA)的基因特性.方法 选取在该期间分离培养到的64株H1N1流感病毒,对其进行HA片段核苷酸序列测定并推导出其氨基酸序列,用Simmonic软件和Mega软件对其进行分析.结果 深圳市H1N1流感毒株在进化树上可以划分为A、B、C三个分枝.部分2005-2006年毒株与2001年毒株在同一分枝上.通过同源性分析发现部分WHO所推荐的疫苗株在时间上滞后于深圳株.深圳H1N1株的4个抗原决定簇及受体结合位点均发生了氨基酸的替换.除1995年外其余年份的毒株均在137位上发生了氨基酸的缺失.结论 1995-2007年深圳市H1N1毒株氨基酸的变异主要集中在抗原决定簇及受体结合部位.并且抗原决定簇的变异活跃区域随时间的推移发生了转移.     

流感病毒反向遗传学技术的研究进展

反向遗传学技术的应用,使人们对流感病毒的复制及调控机制、致病性、新型疫苗制备等方面的研究更进一步。本文就反向遗传学技术的建立及其在流感病毒研究中的应用概况及前景作简要概述。     

深圳市儿童呼吸道腺病毒4型暴发流行的病原学研究

目的探讨深圳市某幼儿园一起急性呼吸道感染暴发的流行特征及病因。方法使用荧光定量PCR方法对采集的17份患儿咽拭子进行流感样病例筛查,筛查后的阴性样本进一步进行呼吸道腺病毒核酸检测,对检测出的5份腺病毒阳性标本进行病毒分离,感染Hep-2受体细胞后共获得4份腺病毒稳定细胞毒株,用腺病毒六邻体基因作为靶基因进行序列扩增及测定,测序结果在GenBank上进行序列比较,确定其病毒亚型并进行系统进化分析。结果 17份咽拭子中5份为腺病毒PCR阳性,阳性率为29.4%,用分型引物检测并分析序列确定均为腺病毒4型。结论本次急性呼吸道病毒疫情暴发由腺病毒4型引起。