四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡相关分子Caspase3及Caspase8表达的影响

目的观察四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡相关分子Caspase3及Caspase8表达的影响。方法 24只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、给药组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,采用全自动血液分析仪检测外周血象,TUNEL法检测肝细胞凋亡百分率,荧光定量PCR法检测Caspase3及Caspase8 mRNA表达。Western blot检测Caspase3及Caspase8蛋白表达。结果与模型组相比,给药组小鼠外周血红细胞数及血红蛋白含量升高(P0.01),肝细胞凋亡百分率下降(P0.01),Caspase3及Caspase8 mRNA及蛋白表达水平下降(P0.05,P0.01)。结论四物汤可改善血虚证模型小鼠外周血象,下调凋亡相关分子Caspase3及Caspase8表达,减少肝细胞凋亡。提示四物汤减少血虚证模型肝细胞凋亡的作用机制可能与其抑制Caspase3及Caspase8激活。     

四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡以及Bax表达的影响

目的:观察四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡及促凋亡基因Bax表达的影响。方法:30只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、四物汤组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡,荧光定量PCR法检测Bax mRNA表达。结果:四物汤可升高血虚证模型小鼠外周血红细胞计数、白细胞计数以及血红蛋白含量,降低肝细胞凋亡百分率,下调促凋亡基因Bax mRNA表达。结论:四物汤补益肝血作用机理可能与其减少肝细胞凋亡有关。     

四物汤对环磷酰胺所致贫血小鼠肝细胞凋亡及Caspase3表达的影响

【目的】观察四物汤对环磷酰胺所致贫血小鼠肝细胞凋亡及凋亡执行分子Caspase3表达的影响。【方法】选用48只C57BL/6J小鼠随机分为空白组,模型组,四物汤低、中、高剂量组(剂量分别为5、10、20 g·kg-1·d-1),肌苷(阳性对照,剂量为0.06 g·kg-1·d-1)组。以腹腔注射环磷酰胺(剂量为0.1 g/kg)复制贫血模型,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡,Western blot法检测Caspase-3表达。【结果】四物汤可显著升高贫血模型小鼠外周血红细胞计数、白细胞计数以及血红蛋白含量,显著降低肝细胞凋亡百分率,下调Caspase3蛋白表达(均P﹤0.05)。【结论】四物汤补益肝血的作用机理可能与其减少肝细胞凋亡有关。     

补血养肝法对血虚证小鼠肝细胞凋亡的影响

目的:观察补血养肝法对血虚证小鼠肝细胞凋亡的影响。方法:30只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、实验组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,检测各组小鼠外周血红细胞数、白细胞数及血红蛋白含量,采用Tunnel法检测肝细胞凋亡。结果:与模型组相比,实验组小鼠外周血红细胞数、白细胞数以及血红蛋白含量升高(P0.05),肝细胞凋亡百分率下降(P0.05)。结论:补血养肝法对血虚证的治疗作用可能与其减少肝细胞凋亡有关。     

清开颗粒对急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的影响

目的:研究急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的变化及清开颗粒对其影响,探讨清开颗粒防治急性肝衰竭的作用机制。方法:以Ga1N LPS染毒昆明小鼠造成急性肝衰竭动物模型。分别以大、中、小剂量清开颗粒进行干预,并以大、中、小剂量促肝细胞生长颗粒(HGF)作为阳性对照,采用TUNEL染色观察肝细胞凋亡,RT-PCR检测Caspase-3 mRNA表达,采用免疫印迹方法(Western Blot)检测Caspase3表达。结果:清开颗粒各组凋亡细胞数均较HGF各组明显减少(P<0.05);清开颗粒中、高剂量组Caspase-3 mRNA表达明显低于HGF低、中剂量组(P<0.05);清开颗粒各组活化的Caspase3表达较HGF低、中剂量组显著降低(P<0.05)。结论:清开颗粒能减少内毒素肝损伤小鼠肝细胞凋亡、下调肝细胞Caspase-3的表达,提示其抑制肝细胞凋亡可能是其防治急性肝衰竭的机制之一。     

补肾益精健脾养血方对贫血大鼠骨髓细胞凋亡的影响

【目的】观察补肾益精健脾养血方对贫血大鼠骨髓细胞凋亡的影响。【方法】将48只Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,中药低、中、高剂量组,肌苷组(阳性对照),每组8只。模型组及各给药组以腹腔注射环磷酰胺法建立贫血模型,空白组给予等容积生理盐水腹腔注射。成功造模后,中药低、中、高剂量组给予补肾益精健脾养血方6、12、24 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,肌苷组给予肌苷0.05 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,空白组和模型组则给予等容积的生理盐水灌胃,给药2周。全自动血液分析仪检测外周血红细胞数、白细胞数、血小板数及血红蛋白含量。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法测定骨髓细胞凋亡百分率,光镜下观察骨髓细胞凋亡情况。蛋白免疫印迹法检测骨髓细胞B-细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3、Caspase 8的表达。【结果】与空白组比较,模型组血红细胞数、白细胞数、血小板数、血红蛋白含量及骨髓细胞Bcl-2蛋白表达水平降低(P 0.05),光镜下骨髓凋亡细胞增多,骨髓细胞凋亡百分率及骨髓细胞Bax、Caspase 3、Caspase 8蛋白表达水平升高(P 0.05)。经补肾益精健脾养血方干预后,上述指标得到明显改善。【结论】补肾益精健脾养血方抗贫血作用机制可能与其减少骨髓细胞凋亡有关。     

当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞凋亡和脱核因子的影响

目的:通过实验研究当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞细胞凋亡因子BCL-2、Caspase9、Bax,脱核因子C-myc、HDAC2的影响。方法:C57BL/6小鼠20只,雌雄各半,28～32 g。给模型组小鼠每日腹腔注射一次环磷酰胺380 mg·kg-1,正常小鼠腹腔注射等量生理盐水,连续3 d。造模后,以脱颈椎法处死各组小鼠,取出股骨,剔除肌肉和结缔组织,剪开股骨两端,用6号针头以生理盐水反复冲洗骨髓腔,并将冲出的骨髓打碎,再用4号针头过滤制成单个细胞悬液,在离心机上2000 r/min,离心10 min,去上清液,加入4 mL冷70%乙醇固定,上振荡器摇匀制成骨髓干细胞样本。细胞实验分为6组,包括正常组、模型组、"EPO"组、"EPO+(G-CSF)"组、当归多糖组、黄芪多糖组、两药配伍组。直接给药当归多糖0.2 mg/mL,黄芪多糖0.2 mg/mL,EPO50 U/mL,G-CSF 50 U/mL于骨髓干细胞体外培养体系中,培养3 d,室内18～20℃,20%相对湿度,5%CO2,37℃孵育箱。采用RT-qPCR法检测骨髓干细胞中BCL-2、Caspase9、Bax、C-myc、HDAC2的mRNA表达。结果:(1)造模后模型组小鼠骨髓干细胞BCL-2 mRNA表达下降,Caspase9、BaxmRNA表达升高,与正常组比较差异均有统计学意义(P0.05)。①各给药组与模型组BCL-2 mRNA均有明显差异,当归多糖有提升BCL-2 mRNA作用,黄芪多糖作用不明显,两药间有交互作用,合用不如单一用药。②各给药组与模型组Caspase9 mRNA均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有降低Caspase9 mRNA作用,两药交互作用明显,合用不如单用黄芪多糖。③各给药组与模型组Bax mRNA均有明显差异,黄芪多糖有降低Bax mRNA作用,当归糖作用不明显,两药交互作用无统计学意义。(2)造模后模型组小鼠骨髓干细胞C-myc、HDAC2 mRNA表达升高,与正常组比较差异均有统计学意义(P0.05)。①各给药组与模型组C-myc mRNA均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有降低C-myc mRNA作用,两药交互作用明显,合用不如单一用药;②各给药组与模型组HDAC2 mRNA均有明显差异,当归多糖与黄芪多糖均有降HDAC2 mRNA作用,两药交互作用明显,合用不如单一用药。结论:当归多糖、黄芪多糖及其配伍对化疗性骨髓抑制小鼠骨髓干细胞能促进BCL-2 mRNA表达、降低Bax、Caspase9 mRNA表达,同时也能降低C-myc、HDAC2mRNA表达,对细胞凋亡因子和细胞脱核因子具有一定的调控作用。并且当归多糖、黄芪多糖两药交互作用明显,合用不如单一用药。     

葛黄颗粒含药血清对乙醇诱导L-02肝细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的 观察葛黄颗粒含药血清对乙醇诱导的L-02肝细胞损伤的保护作用并探讨其分子机制.方法 将SD大鼠分3组:空白对照组、葛黄颗粒组(3.1 g· 100 g-1·d-1)、美他多辛组(0.1 g·100 g-1·d-1),每组20只,每日灌胃给药2次,连续给药5d后,取血制备含药血清.构建3％乙醇干预24 h诱导的体外肝细胞损伤模型.L-02肝细胞分为6组,包括正常组、模型组、葛黄颗粒高、中、低剂量组及阳性对照组,L-02肝细胞接种培养24 h后,正常组加入含10％正常大鼠血清的培养基,模型组在正常组基础上同时加入3％乙醇,葛黄颗粒高、中、低剂量组则加入3％乙醇及不同体积比的葛黄颗粒含药血清,阳性对照组加入3％乙醇和美他多辛含药血清,干预24 h后,收集上清液及L-02肝细胞.采用全自动生化分析仪检测上清液天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH),流式细胞仪检测细胞凋亡,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Fas、FasL、caspase3、caspase8mRNA的表达.结果 在模型组中,细胞上清液AST、LDH的水平,L-02细胞的凋亡率及Fas、FasL、caspase3、caspase8 mRNA的表达水平均较正常组明显增高(P＜0.05),经相应干预后,上述各项检测指标在葛黄颗粒中、高剂量组和阳性对照组中的表达水平均显著下降(P＜0.05);中剂量组和阳性对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),高剂量组和阳性对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 葛黄颗粒含药血清可降低细胞上清液中AST、LDH的水平,下调Fas、FasL、caspase3、caspase8 mRNA的表达,减少凋亡率,对酒精性肝病的保护作用可能与抑制细胞凋亡有关.     

Caspase12在ERS介导的肝细胞凋亡中的作用

目的：探讨Caspase12在肝纤维化内质网应激（ERS）介导的肝细胞凋亡中的作用.方法：雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只.肝纤维化组按0.3ml/100g体重的剂量皮下注射40％ CCl4植物油溶液,每隔3天注射一次,造模时间分别为4周和8周;对照组大鼠皮下注射等量植物油溶液.采用TUNEL法检测肝组织中肝细胞凋亡情况;免疫组化检测肝组织中Caspase12蛋白的表达变化;Real-time PCR检测肝组织中Caspase12 mRNA的表达变化.结果：免疫组化及Real-time PCR检测显示肝纤维化4周组大鼠肝组织中Caspase12蛋白及mRNA的表达与正常4周组比较无显著差异;随着肝纤维化程度的加重,肝纤维化8周时大鼠肝组织中Caspase12蛋白及mRNA的表达显著增加;同时TUNEL法检测发现肝纤维化大鼠肝组织中肝细胞凋亡的数目较正常组显著增加.结论：Caspase12可能参与了肝纤维化时ERS介导的肝细胞凋亡过程.     

保肝解毒颗粒对急性肝损伤小鼠肝细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的:观察保肝解毒颗粒对雷公藤多苷所致小鼠急性肝损伤肝细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响,探讨保肝解毒颗粒的干预作用。方法:60只昆明种清洁级小鼠随机分为6组,即空白组,模型组,对照组,保肝解毒颗粒给药高剂量组、中剂量组、低剂量组。造模前,每天1次,给予小鼠灌胃不同剂量的保肝解毒颗粒,连续5 d;对照组灌服甘利欣混悬液;空白组、模型组灌服生理盐水。第5天给药后禁食12 h,以雷公藤多苷造模。免疫组织化学法检测肝细胞Bcl-2、Bax基因表达。结果:与正常组对比,模型组Bcl-2蛋白表达下降(P0.05),而Bax蛋白阳性表达升高(P0.05);保肝解毒颗粒组与模型组对比,下调Bax蛋白表达(P0.05),上调Bcl-2蛋白表达(P0.05)。结论:保肝解毒颗粒可以下调促凋亡基因Bax水平,上调抗凋亡基因Bcl-2水平,抑制细胞凋亡,从而起到对肝脏的保护作用,这可能是其治疗急性肝损伤的机制之一。     

抑酸药治疗小儿消化性溃疡合并出血临床观察

目的　观察抑酸药对小儿消化性溃疡合并出血的治疗效果。方法　将 4 2例消化性溃疡合并出血患儿分成 3组 ,分别以西米替丁、雷尼替丁、洛赛克静脉滴注治疗。结果　 3种药物的显效率分别为 4 0 .0 %、4 6 1%、77.8% ,差异无显著性意义 (χ2 =3.6 5 4 ,P >0 .0 5 ) ;总有效率分别为 90 .0 %、92 .3%、88.9% ,差异无显著性意义 (χ2 =4 .372 ,P >0 .0 5 )。结论　抑酸药对小儿消化性溃疡伴出血有较好的疗效     

中西医结合治疗慢性充血性心力衰竭疗效观察

我院心内科自1995年10月--2005年10月，采用中西医结合疗法治疗慢性充血性心力衰竭（CHF）52例，取得了满意疗效，现报道如下。     

超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障患者的效果

目的:探讨超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障患者的效果。方法:选取86例(95眼)青光眼合并白内障患者作为研究对象,按随机数字表法将其分为对照组43例(47眼)与观察组43例(48眼)。对照组采用小梁切除术联合丝裂霉素C治疗,观察组采用超声乳化联合小梁切除术治疗,比较两组手术前后视力水平、眼压水平和并发症发生率。结果:观察组术后1、6个月视力水平均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后1、6个月眼压水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后并发症发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:超声乳化联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障患者可提高视力水平,降低眼压水平和并发症发生率,其效果优于小梁切除术联合丝裂霉素C治疗。     

奥氮平联合氟西汀治疗伴自杀意念抑郁症患者的效果

目的:观察奥氮平联合氟西汀治疗伴自杀意念抑郁症患者的效果。方法:选取80例伴自杀意念抑郁症住院患者为研究对象,采用随机数字表法分为研究组和对照组各40例。对照组采用氟西汀治疗,研究组在对照组基础上联合奥氮平治疗。比较两组的抑郁量表(HAMD-17)评分、自杀意念(BSSI量表)评分、认识功能(MoCA量表)评分、治疗效果及不良反应发生情况。结果:治疗2周、4周、8周后,两组HAMD-17评分和BSSI评分均低于治疗前,且研究组均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗8周后,两组MoCA总分均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组治疗总有效率为90.00%,明显高于对照组的67.50%,差异有统计学意义(P<0.05);研究组不良反应发生率为55.00%,与对照组的42.50%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:奥氮平联合氟西汀治疗伴自杀意念抑郁症患者,可降低抑郁评分和自杀意念评分,提高认识功能和治疗总有效率,效果优于单纯氟西汀治疗效果。     

艾恒与5-氟脲嘧啶联合治疗晚期大肠癌的护理

随着现代工业的发展，环境中致癌物质越来越多，以及人们一些不良生活方式等许多因素，使恶性肿瘤发病率逐年增加。由于科学技术水平的不断提高，治疗癌症的药物品种亦不断增加，使患者的生存率及生存质量均明显提高，新药艾恒(即注射用奥沙利铂，OXA）自2003年3月在本科室应用观察，对治疗应用5-氟脲嘧啶(5-Fu)失效的大肠癌患者取得一定的效果。本品是1、2-二氨基环已烷铂类的水溶性衍生物，与其他铂类一样，艾恒通过产生烷化结合物作用于DNA，形成链内链间交联，从而抑制DNA的合成及复制，一些对顺铂耐药的细胞系，艾恒治疗均有效，癌胚抗原持续下降，通过对临床33例患者用药的观察及护理，现将体会总结如下。     

排石汤合双金散治疗胆结石并发胆囊炎190例

胆结石与胆囊炎互为因果，相互伴发，是常见多发病。我们近十年来采用排石汤合双金散治疗胆结石并发胆囊炎190例，排石率为94．74％。现报告如下。     

丹参合剂并他莫西芬对子宫内膜异位患者免疫功能的影响

本应用抗入CD20，CD3及其亚群单克隆抗体，检测了43例子宫内膜异位症患及27例正常月经周期妇女的CD20，CD3，CD4，CD8百分率。其中24例中，重度子宫内膜异位症患用参合剂保留灌肠加他莫西芬治疗，并观察了其治疗前及治疗两个疗程后CD20，CD3，CD4，CD8，CD4/CD8比值的变化。结果表明：本病患机体存在明显的免疫功能紊乱，其紊乱程度随着子宫内膜异位症的病理变化程度而上升；丹参合剂加他莫西芬治疗对调整机体免疫功能，改善了宫内膜异位症的临床症状起了良好的作用。     

火针配合拔罐治疗带状疱疹后遗神经痛30例

带状疱疹是由水痘-带状疱疹病毒感染引起的一种以沿周围神经分布的群集疱疹和神经痛为特征的病毒性皮肤病,当疱疹消退后仍有部分病毒潜伏在神经节内,导致被侵犯部位发生疼痛,称之为带状疱疹后遗神经痛(Postherpetic neuralgia,PHN),中医学称之为"蛇丹愈后痛".自2000年以来笔者采用火针配合拔罐治疗带状疱疹后遗神经痛取得较好效果,并与皮肤针叩刺治疗进行比较,现报道如下.