四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡相关分子Caspase 8 mRNA表达的影响

目的:观察四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡执行分子Caspase 8 mRNA表达的影响。方法:24只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、给药组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,采用全自动血液分析仪检测外周血象,TUNEL法检测肝细胞凋亡百分率,荧光定量PCR法检测Caspase 8 mRNA表达。结果:与模型组相比,给药组小鼠外周血红细胞数及血红蛋白含量升高(P0.05),肝细胞凋亡百分率下降(P0.05),Caspase 8 mRNA表达水平下降(P0.05)。结论:四物汤可改善血虚证模型小鼠外周血象,下调凋亡执行分子Caspase 8 mRNA表达,减少肝细胞凋亡。提示四物汤减少血虚证模型肝细胞凋亡的作用机制可能与其抑制Caspase 8激活有关。     

四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡相关分子Caspase3及Caspase8表达的影响

目的观察四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡相关分子Caspase3及Caspase8表达的影响。方法 24只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、给药组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,采用全自动血液分析仪检测外周血象,TUNEL法检测肝细胞凋亡百分率,荧光定量PCR法检测Caspase3及Caspase8 mRNA表达。Western blot检测Caspase3及Caspase8蛋白表达。结果与模型组相比,给药组小鼠外周血红细胞数及血红蛋白含量升高(P0.01),肝细胞凋亡百分率下降(P0.01),Caspase3及Caspase8 mRNA及蛋白表达水平下降(P0.05,P0.01)。结论四物汤可改善血虚证模型小鼠外周血象,下调凋亡相关分子Caspase3及Caspase8表达,减少肝细胞凋亡。提示四物汤减少血虚证模型肝细胞凋亡的作用机制可能与其抑制Caspase3及Caspase8激活。     

四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡以及Bax表达的影响

目的:观察四物汤对血虚证小鼠肝细胞凋亡及促凋亡基因Bax表达的影响。方法:30只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、四物汤组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡,荧光定量PCR法检测Bax mRNA表达。结果:四物汤可升高血虚证模型小鼠外周血红细胞计数、白细胞计数以及血红蛋白含量,降低肝细胞凋亡百分率,下调促凋亡基因Bax mRNA表达。结论:四物汤补益肝血作用机理可能与其减少肝细胞凋亡有关。     

四物汤对环磷酰胺所致贫血小鼠肝细胞凋亡及Caspase3表达的影响

【目的】观察四物汤对环磷酰胺所致贫血小鼠肝细胞凋亡及凋亡执行分子Caspase3表达的影响。【方法】选用48只C57BL/6J小鼠随机分为空白组,模型组,四物汤低、中、高剂量组(剂量分别为5、10、20 g·kg-1·d-1),肌苷(阳性对照,剂量为0.06 g·kg-1·d-1)组。以腹腔注射环磷酰胺(剂量为0.1 g/kg)复制贫血模型,采用TUNEL法检测肝细胞凋亡,Western blot法检测Caspase-3表达。【结果】四物汤可显著升高贫血模型小鼠外周血红细胞计数、白细胞计数以及血红蛋白含量,显著降低肝细胞凋亡百分率,下调Caspase3蛋白表达(均P﹤0.05)。【结论】四物汤补益肝血的作用机理可能与其减少肝细胞凋亡有关。     

左归补髓生血方对再生障碍性贫血小鼠骨髓有核细胞凋亡的影响

目的 观察左归补髓生血方治疗小鼠再生障碍性贫血的疗效及其对骨髓中有核细胞凋亡的影响。方法 将40只SPF级ICR小鼠随机分正常组、模型组、西药组、中药组。采用二甲磺酸丁酯和环磷酰胺交替给药12 d的方法复制再生障碍性小鼠模型。观察外周血细胞计数以及骨髓组织形态学变化,采用TUNEL法检测各组小鼠骨髓中有核细胞凋亡。结果 与正常组比较,模型组小鼠外周血白细胞、红细胞、血小板计数和血红蛋白浓度明显减低（P＜0.05）,骨髓有核细胞凋亡率明显升高（P＜0.05）;光镜下可见小鼠骨髓增生极度减少,红系、粒系、巨核细胞系均明显减少。与模型组比较,中药组以及西药组外周血红细胞、白细胞、血小板计数和血红蛋白浓度明显升高（P＜0.05）,骨髓有核细胞凋亡率明显降低（P＜0.05）;光镜下可见骨髓中造血组织比例增多。结论 左归补髓生血方可以有效升高再生障碍性贫血小鼠外周血细胞计数,抑制骨髓中有核细胞的凋亡。     

归蓉补血片对血虚证动物模型作用的实验研究

目的 :探讨归蓉补血片益气养血功效的药理作用。方法 :观察该药对血虚证动物模型的影响。结果 :归蓉补血片组大鼠的红细胞数、电泳时间、电泳率及血红蛋白含量和小鼠白细胞、血小板、骨髓有核细胞数及脾重量均明显高于模型组。结论 :归蓉补血片对大、小鼠环磷酰胺血虚及失血性贫血模型有明显的改善作用 ,并能促进骨髓及脾脏的造血功能     

黄芪有效部位干预化疗贫血小鼠模型的药效学研究

目的：考察黄芪有效部位干预化疗贫血的效应。方法：环磷酰胺法建立化疗性贫血模型,观察小鼠一般状态,检测小鼠外周血红细胞、血红蛋白、白细胞,计算胸腺指数、脾脏指数。结果：黄芪有效部位不同程度地提升化疗贫血小鼠的外周血细胞计数、血红蛋白含量、胸腺指数、脾脏指数。结论：黄芪有效部位具有＂补血＂之效,其中黄芪多糖、黄芪皂苷＂补血＂的作用显著。推测黄芪多糖、黄芪皂苷是黄芪拮抗化疗性贫血的有效部位。     

刺五加注射液对放射损伤小鼠骨髓造血微环境的保护作用

目的　观察刺五加注射液对放射损伤小鼠骨髓造血微环境的保护作用。方法　①60 Coγ射线辐射小鼠建立骨髓微血管放射损伤模型 ;②取 6周龄左右雌性小鼠随机分为正常、模型、模型 刺五加注射液低剂量、模型 刺五加注射液高剂量和模型 复方丹参注射液 5组 ,采用分光光度计法分别测定提取的各组小鼠股骨骨髓血红蛋白溶液标本的光密度(OD)值 ;鼠尾采血测定外周血红细胞、白细胞数量和血红蛋白含量 ;并分别观测骨髓毛细动脉根数、面积和骨髓造血组织容量百分率。结果　刺五加注射液能明显降低放射损伤小鼠骨髓血红蛋白含量、提高外周血红细胞和白细胞的数量以及增加骨髓毛细动脉根数、面积和骨髓造血组织容量百分率。结论　刺五加注射液能明显修复放射损伤小鼠骨髓微血管 ,保护骨髓造血微环境     

补肾益精健脾养血方对贫血大鼠骨髓细胞凋亡的影响

【目的】观察补肾益精健脾养血方对贫血大鼠骨髓细胞凋亡的影响。【方法】将48只Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,中药低、中、高剂量组,肌苷组(阳性对照),每组8只。模型组及各给药组以腹腔注射环磷酰胺法建立贫血模型,空白组给予等容积生理盐水腹腔注射。成功造模后,中药低、中、高剂量组给予补肾益精健脾养血方6、12、24 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,肌苷组给予肌苷0.05 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,空白组和模型组则给予等容积的生理盐水灌胃,给药2周。全自动血液分析仪检测外周血红细胞数、白细胞数、血小板数及血红蛋白含量。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法测定骨髓细胞凋亡百分率,光镜下观察骨髓细胞凋亡情况。蛋白免疫印迹法检测骨髓细胞B-细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3、Caspase 8的表达。【结果】与空白组比较,模型组血红细胞数、白细胞数、血小板数、血红蛋白含量及骨髓细胞Bcl-2蛋白表达水平降低(P 0.05),光镜下骨髓凋亡细胞增多,骨髓细胞凋亡百分率及骨髓细胞Bax、Caspase 3、Caspase 8蛋白表达水平升高(P 0.05)。经补肾益精健脾养血方干预后,上述指标得到明显改善。【结论】补肾益精健脾养血方抗贫血作用机制可能与其减少骨髓细胞凋亡有关。     

归蓉补血片对血虚证动物模型作用的实验研究

目的：探讨归蓉补血片益气养血功效的药理作用。方法：观察该药对血虚证动物模型的影响。结果：归蓉补血片组大鼠的红细胞数、电泳时间、电泳率及血红蛋白含量和小鼠白细胞、血小板、骨髓有核细胞数及脾重量均明显高于模型组。结论：归蓉补血片对大、小鼠环磷酰胺血虚及失血性贫血模型有明显的改善作用。并能促进骨髓及脾脏的造血功能。     

亚临床甲状腺功能减退症患者外周血三系细胞的变化及其临床意义

目的：探讨亚临床甲状腺功能减退症（亚临床甲减）患者外周血三系细胞的变化及其临床意义。方法以2012-09-2013-04体检的52例亚临床甲减患者为研究对象（亚临床甲减组）,检测其甲状腺功能、血常规、肝肾功能、血脂和血糖,同时测量身高、体重,计算体重指数。并将同期进行体检的50例健康者为正常对照组。结果与正常对照组比较,亚临床甲减组患者的血红蛋白和红细胞比容明显降低（均P＜0.01）,红细胞体积分布宽度增加,单核细胞百分数和绝对值增高,均有统计学差异（均P＜0.05）;血小板分布宽度明显增加（P＜0.01）,其余各项指标均无统计学差异（均P＞0.05）。相关分析结果表明,亚临床甲减组患者的血红蛋白与TT3呈正相关（r=0.333,P＜0.05）,血小板分布宽度与血小板总数和血小板比容呈显著负相关（r=-0.382、-0.467,均P＜0.01）。结论亚临床甲减可引起外周血三系细胞的改变,尤其是血红蛋白的降低,亚临床甲减患者有必要开展贫血的筛查.     

肝郁脾虚证大鼠血细胞和脏器指数改变的实验研究

目的探讨实验条件下肝郁脾虚证大鼠各类血细胞和脏器指数的改变情况。方法采用夹尾激怒、束缚应激、过度疲劳与饮食失节的复合方法复制肝郁脾虚证动物模型,检测对照组和2周、6周、9周模型组雄性大鼠外周血象和胸腺、肾上腺、肝、脾等脏器指数。结果外周血象检测结果显示,与空白对照组比较,肝郁脾虚证大鼠2周组白细胞和中性粒细胞数量升高(P<0.05或P<0.01),9周组红细胞数量、血红蛋白含量和淋巴细胞数量降低(P<0.05);脏器指数检测结果显示,与空白对照组比较,肝郁脾虚证大鼠6周、9周组胸腺指数降低(P<0.01),9周组肾上腺、脾脏和肝脏指数升高(P<0.05)。结论肝郁脾虚因素会影响机体的血液系统,机体遭受应激刺激时虽然短期能使中性粒细胞的数量增加以对抗伤害,增强抵抗力,但长期肝失疏泄、脾失健运导致神经-内分泌-免疫网络紊乱,造成贫血和淋巴细胞数量减少,机体运氧能力和抵抗力降低。     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭小鼠肝脏TNFRⅠ与TNFRⅡ表达的影响

目的：观察解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭小鼠肝脏TNFRⅠ与TNFRⅡ表达的影响,探讨其拮抗肝衰竭的作用机制。方法：采用D-氨基半乳糖联合内毒素腹腔注射法构建小鼠急性肝衰竭动物模型,并分别予解毒化瘀颗粒、乳果糖、安宫牛黄丸干预治疗,HE染色观察肝脏病理改变,TUNEL法检查肝细胞凋亡率,免疫组化检测小鼠肝脏TNFRⅠ与TNFRII的表达。结果：解毒化瘀颗粒干预组肝组织凋亡、坏死程度轻于模型对照组,免疫组化检测的肝脏TNFRⅠ表达量少于模型对照组（P〈0．05）,TNFRII表达多于模型对照组（P〈0．05）。结论：解毒化瘀颗粒可通过下调肝组织TNFRⅠ的表达、上调TNFRⅡ的表达途径抑制肝细胞凋亡,延缓肝脏坏死的进展。     

固肾方对糖尿病肾病模型大鼠的影响

目的 :通过观察固肾方对糖尿病肾病模型大鼠血常规、生化指标及肾脏病理结果的影响,以探讨固肾方对糖尿病肾病的疗效。方法:选取雄性SD大鼠50只,用链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,造模成功后,将大鼠随机分成5组,每组10只进行实验。大鼠于给药12周后处死,进行血常规和生化指标检测。结果:血常规与模型组比较,正常对照组、中药组、固肾方组白细胞降低(P0.01或P0.05),血红蛋白明显降低(P0.01),血小板明显降低(P0.01或P0.05),体重明显升高(P0.01)。血生化结果表明,与模型组比较,其他各组血糖、尿素氮和血肌酐明显降低(P0.01),清蛋白明显升高(P0.01),血钾明显降低(P0.01),肝功能无明显差异(P0.05)。与模型组比较,固肾方组三酰甘油明显降低(P0.05),正常组血钙低(P0.05),西药组超敏C反应蛋白(hsCRP)降低(P0.01),正常组、西药对照组、固肾方组血管紧张素转换酶(ACE)明显降低(P0.01或P0.05)。病理可见固肾方组蛋白减少,系膜增生减轻。结论:中药固肾方能降低较高的血红蛋白、降低白细胞和血小板,升高体重,并能降低血糖,改善肾功能,减轻炎症反应,降低血管紧张素转换酶活性,减轻系膜增生,表明固肾方对糖尿病肾病大鼠有明显治疗作用。     

三七总皂苷抗衰老的实验研究

目的：从肝细胞线粒体DNA（mtDNA）、细胞因子的角度,探讨三七总皂苷（PNS）延缓衰老的可行性和可能的作用机制。方法：将实验大鼠随机分为青年对照组、衰老模型组、三七总皂苷组,每组12只。三七总皂苷组予三七总皂苷混悬液,余两组均喂普通饲料。检测实验肝细胞mtDNA的相对含量、血清SOD活性、MDA含量、血清白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）含量。结果：三七总皂苷能够降低衰老状态下大鼠肝细胞mtDNA相对含量及血清MDA含量,提高血清SOD活性,与衰老模型组比较,有显著性差异（P〈0.05）;同时还能够增加衰老状态下大鼠血清IL-2含量,降低IL-6含量,与衰老模型组比较,有显著性差异（P〈0.05）。结论：三七总皂苷具有减轻D-半乳糖诱导亚急性衰老大鼠模型的氧化损伤,保护肝细胞mtDNA,提高机体的免疫功能作用。     

超敏C反应蛋白、白细胞计数及中性粒细胞分类在新生儿败血症早期诊断中的临床分析

目的：探讨超敏C反应蛋白、外周血白细胞计数、中性粒细胞分类检测在新生儿败血症的早期诊断和治疗的应用。方法：选2011-12～2013-06间在我院治疗的已确诊的细菌感染组40例新生儿,另外选取同期住院治疗确诊的病毒感染的40例新生儿,同时选取健康的40例新生儿,比较三组新生儿的hs-CRP、外周血白细胞计数、中性粒细胞分类检测结果。结果：细菌感染组hs-CRP、外周血白细胞计数、中性粒细胞分类的检测结果分别为（15.92±12.52） mg/L,（19.10±3.34）×10^9/L,（56.57±13.60）％;与病毒感染组及健康对照组分别比较,差异有统计学意义（ P＜0.05）;细菌感染组40例新生儿的hs-CRP、外周血白细胞计数、中性粒细胞分类的阳性率分别为77％（31/40）、38％（15/40）、67％（27/40）,均显著高于正常对照组（ P＜0.05）,差异有统计学意义（P＜0.05 x2＝126.308）。细菌感染组40例新生儿中35例发热,35例发热新生儿治疗后hs-CRP、外周血白细胞计数、中性粒细胞分类检测结果分别为（4.66±2.48） mg/L、（9.74±2.44）×10^9/L ,（34.14±6.06）％,分别均较治疗前明显降低,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：超敏C反应蛋白、外周血白细胞计数、中性粒细胞分类联合检测对新生儿败血症早期诊断提供重要依据。     

慢性乙型肝炎不同脾虚兼证与外周血树突状细胞表型及功能的关系

目的： 研究慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B, CHB）患者不同脾虚兼证与外周血树突状细胞（dendritic cell, DC）表型及功能的关系。 方法：CHB患者60例,按中医证候诊断标准分为脾虚肝郁、脾虚湿热和脾肾两虚组,每组20例,10名健康人为正常对照。分离各组外周血单个核细胞,体外诱导培养DC,流式细胞仪测定DC表型,酶联免疫吸附检测法测定DC分泌白细胞介素10（interleukin-10, IL-10）浓度,同步检测患者生化指标及乙肝病毒的脱氧核糖核酸（hepatitis B virus DNA, HBV-DNA）水平。 结果：CHB患者DC体外诱导增殖能力较正常人下降,DC成熟表面标记物显著低于正常人（P〈0.05）。不同证候CHB患者DC表面标记物CD80、CD86和CD1a表达阳性率均低于正常人（P〈0.05）。脾虚肝郁证患者CD80、CD1a和HLA-DR表达阳性率显著高于脾肾两虚证（P〈0.05）,脾虚湿热证患者CD1a表达阳性率显著高于脾肾两虚证（P〈0.05）。CHB患者DC培养上清中IL-10浓度显著高于正常人（P〈0.05）。脾肾两虚证患者DC培养上清中IL-10含量高于脾虚肝郁证（P〈0.05）。 结论：在CHB发病过程中,不同脾虚兼证CHB患者DC的表型及功能间存在差异,提示中医证候分类与机体免疫功能之间存在一定相关性。     

糖尿病患者踝肱指数与峰值流速和多普勒血流波形相关性的研究

目的探讨踝眩指数（ABI）、峰值流速（Vmax）及多普勒血流波形改变在评估精尿病患者周围血管病变（PVD）中的价值。方法用多普勒血管检测仪测定129例糖尿病患者ABI、Vmax,并观察其多普勒血流波形的变化。根据ABI值分为A组（ABI≥0．9组,共97例）和B组（ABI〈0．9组,共32例）,测量身高、体重、血压、血糖,糖化血红蛋白、血脂水平。结果B组的年龄、血压、病程高于A组（P〈0．01）,HDL、ABI、Vmax低于A组（P〈0．05）。Vmax与ABT显著相关（r=0．58,P〈0．01）。ABI与多普勒血流波形改变的一致性不高（Kappa==0．245,P〈0．01）。结论在测定ABI时,应同时测定Vmax及观察多普勒血流波形改变来评估糖尿病患者下吱动脉缺血的情况。     

不同球浆比例换血治疗新生儿重症高胆红素血症的研究

目的探讨不同比例的红细胞与血浆换血对新生儿重症高胆红素血症的疗效。方法将55例高胆红素血症需换血的新生儿随机分为3组,采用红细胞与血浆换血1∶1组20例,2∶1组19例,2.5∶1组16例。换血量按(150~180)mL/kg双倍量换血。其中1∶1组、2∶1组换血结束后常规输注浓缩红细胞(15～20)mL/kg,2.5∶1组换血结束后不再常规输注浓缩红细胞,监测换血前后血清总直接胆红素、红细胞数量、血红蛋白、红细胞压积的变化。结果同组换血前及换血后总胆红素、间接胆红素有显著变化(P<0.05),1∶1组、2∶1组换血后红细胞数量、血红蛋白、红细胞压积均下降(P<0.05),而2.5∶1组换血后红细胞数量、血红蛋白、红细胞压积无明显下降(P>0.05);换血后三组间比较,1∶1组及2∶1组红细胞数量、血红蛋白、红细胞压积较2.5∶1组明显下降(P<0.01),其中1∶1组红细胞数量、血红蛋白、红细胞压积较2∶1组下降更明显(P<0.01)。结论 2.5∶1组换血后贫血发生率更低,2.5∶1球浆比例组合较2∶1、1∶1球浆比例组合换血更适合新生儿高胆红素换血的临床需要。     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞PI3K p85α蛋白表达的影响

目的观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝细胞磷脂酰肌醇-3-激酶p85α（PI3K p85α）表达的影响。方法以高脂饮食12周建立大鼠NAFLD模型后,造模组大鼠再随机分为模型组、疏肝组、健脾组、综合组和自然恢复组等5组。治疗组分别给予相应药物灌胃,其他组给予等量蒸馏水灌胃,模型组继续高脂饮食,其余均予基础饲料喂养。治疗8周后,用3%戊巴比妥腹腔麻醉,腹主动脉取血,全自动生化仪检测血脂及肝功,稳态模型法评价胰岛素抵抗程度,光镜下观察各组肝脏病理改变,免疫组化方法检测肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达情况。结果与模型组相比,药物治疗各组及自然恢复组肝脏脂变程度明显减轻,肝功、血脂、胰岛素抵抗均有显著改善（P〈0.05或P〈0.01）,肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达明显减少（P〈0.05）。与自然恢复组相比,药物治疗各组肝功、血脂、血糖的改善无显著差异,但肝脏脂变程度减轻,胰岛素抵抗指数明显下降（P〈0.05）,肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达显著降低（P〈0.05）。结论疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的大鼠NAFLD有较好的治疗作用,其机制可能是与其降低肝细胞PI3K p85α的表达有关。