瞬时受体电位蛋白通道A1 在大鼠炎症性膀胱感觉通路中不同部位的表达变化

 目的瞬时受体电位蛋白通道A员（TRPA1）参与机械性感觉、痛觉的传导以及炎性反应,我们制作大鼠的膀胱炎症模型,检测在膀胱传入通路中不同部位TRPA1 的表达情况。方法采用大鼠腹腔内注射环磷酰胺制作膀胱炎症模型,正常大鼠作为对照组。采集膀胱黏膜层及脊髓后根神经节,利用实时定量PCR 检测TRPA1 转录水平的变化。结果大鼠腹腔内注射环磷酰胺2 d 后,肉眼及病理检查证实膀胱炎性反应。TRPA1 在膀胱黏膜层的表达水平没有明显变化,在脊髓后根神经节中,与对照组相比,炎症组的TRPA1 的表达水平明显上调（P < 0.05）。结论在膀胱炎症状态下,TRPA1 在黏膜层的表达没有明显变化,提示它作为黏膜层的机械敏感性受体参与炎症诱发的排尿改变的可能性较小;TRPA1 在脊髓后根神经节中表达上调,感觉神经元表达的TRPA1 可能参与膀胱炎性反应,并且与膀胱炎时病理性的排尿方式相关。     

γ-氨基丁酸及其受体在慢性神经病理痛大鼠背根神经节中的表达及意义

目的:探讨大鼠脊髓背根神经节(DRG)γ-氨基丁酸(GABA)及其受体在慢性神经病理痛中的表达及意义。方法:20只SD大鼠行L5脊神经结扎(SNL)制备慢性神经病理疼痛模型,SABC法检测脊髓背根神经节GABA及其受体GABAAα1的表达,另取10只行假手术对照。结果:SNL组背根神经节大中神经元GABA及受体GABAA表达水平均明显下降(P<0.05)。结论:神经痛发生可能与DRG上GABA能神经元减少、GABAA受体表达下调致GABA能传递减弱有关。     

瞬时受体电位通道蛋白A1和V1在正常小鼠耳蜗中的定位表达

目的 研究瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和V1(TRPV1)在正常小鼠耳蜗中的定位与表达.方法 选择12只健康成年BALB/c小鼠,应用免疫荧光染色方法和蛋白质印迹技术检测TRPA1和TRPV1在耳蜗中的定位与表达,同时结合电生理指标听脑干反应(auditory brainstem response,ABR)测试小鼠的听力.结果 TRPA1和TRPV1在小鼠耳蜗螺旋器的内、外毛细胞、螺旋神经节细胞和血管纹边缘细胞等都有表达,且主要定位于细胞膜;蛋白质印迹检测结果亦显示小鼠耳蜗中有TRPA1和TRPV1的表达.结论 TRPA1和TRPV1在正常BALB/c小鼠耳蜗的多种细胞中均有表达,这为深入研究二者在内耳听觉生理和病理生理中的作用奠定基础.     

炎性痛-吗啡耐受大鼠背根神经节辣椒素受体表达

目的:观察辣椒素受体(VR1)在慢性炎性痛-吗啡耐受大鼠背根神经节(DRG)表达变化,探讨VR1在吗啡耐受形成过程中的作用和机制.方法:将24只健康雄性SD大鼠制成关节炎模型,随机分为3组,鞘内给予吗啡10μg/kg组(A组),鞘内给予吗啡20μg/kg组(B组),鞘内给予生理盐水组(C组).每日2次,连续7d.以触觉测试包测试50%缩爪阈值,以免疫组化方法检测背根神经节VR1表达.结果:A、B两组在给药第5日形成较稳定的吗啡耐受,其背根神经节VR1表达阳性细胞数较生理盐水组多.结论:背根神经节辣椒素受体可能参与慢性炎性痛大鼠吗啡耐受形成过程.     

当归四逆汤对奥沙利铂神经毒性大鼠背根神经节TRPs通道的影响

目的探讨当归四逆汤对奥沙利铂神经毒性大鼠背根神经节TRPs通道的影响。方法使用奥沙利铂腹腔注射造成慢性神经毒性大鼠模型,60只大鼠分空白组、模型组、及当归四逆汤高、中、低剂量组。通过大鼠疼痛行为学、机械疼痛阈值测定检测当归四逆汤对奥沙利铂神经毒性的缓解作用,并进一步通过RT-PCR、Western blot观察大鼠背根神经节TRPs(TRPV1、TRPA1、TRPM8)mRNA及蛋白表达水平变化。结果大鼠行为学测定显示,与空白组比较,模型组、当归四逆汤低、中剂量组机械疼痛阈值下降(P0.05),而高剂量组未出现明显的下降(P0.05)。与空白组比较,其余各组大鼠背根神经节TRPA1、TRPM8、TRPV1蛋白表达量显著增加(P0.01)。与模型组比较,当归四逆汤低剂量组可降低TRPM8蛋白表达(P0.05),中剂量组可降低TRPA1(P0.01)、TRPM8(P0.01)、TRPV1(P0.05)蛋白表达,高剂量组明显降低三者蛋白表达量(P0.01)。与空白组比较,其余各组大鼠背根神经节TRPV1、TRPA1、TRPM8mRNA表达显著增加(P0.01),与模型组比较,当归四逆汤各组均可显著下调三者表达(P0.01)。结论当归四逆汤可以预防奥沙利铂慢性神经毒性,减缓大鼠机械疼痛阈值下降程度,其机制可能与下调TRPs通道蛋白表达有关。     

神经病理性痛大鼠突触前抑制作用的改变及其第二信使系统变化的研究

目的观察坐骨神经慢性压榨损伤(CCI)致神经病理性痛后,大鼠背根神经节(DR G)神经元γ-氨基丁酸A受体(GABAA受体)激活电流的改变及其细胞内第二信使系统的变化。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组和CCI模型组。用穿孔膜片钳全细胞记录模式观察该3组大鼠DRG神经元GABAA受体特异性激动剂蝇蕈醇(muscimol)的激活电流,比较各组激活电流的特点;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测该3组大鼠DR G神经元内IP3、cAMP和cGMP的浓度变化。结果正常对照组、假手术组和CCI模型组大鼠DR G神经元在不同浓度muscimol时激活电流均为内向电流且幅值均呈浓度依赖性,各组的EC50值差异无统计学意义。CCI模型组在不同浓度muscimol时激活电流幅值与正常对照组、假手术组相比均显著减小,正常对照组和假手术组在不同浓度muscimol时激活电流幅值差异无统计学意义。CCI模型组DRG神经元中cAMP和cGMP的浓度与正常对照组和假手术组相比均显著升高,假手术组和正常对照组之间差异无统计学意义。正常对照组、假手术组和CCI模型组大鼠DRG神经元中IP3的浓度差异无统计学意义。结论在坐骨神经慢性压榨损伤的过程中,受损伤侧DRG神经元GABAA受体激活电流显著减小,受损伤侧DRG神经元内cAMP和cGMP的浓度显著升高。GABAA受体功能的减弱导致的突触前抑制作用减弱可能是神经病理性疼痛产生的重要原因之一,并且这种功能的减弱是细胞内cAMP和cGMP浓度的改变共同参与调节的结果。     

当归四逆汤对奥沙利铂神经毒性大鼠背根神经节TRPs通道的影响

目的 探讨当归四逆汤对奥沙利铂神经毒性大鼠背根神经节TRPs通道的影响。方法 使用奥沙利铂腹腔注射造成慢性神经毒性大鼠模型,60只大鼠分空白组、模型组、及当归四逆汤高、中、低剂量组。通过大鼠疼痛行为学、机械疼痛阈值测定检测当归四逆汤对奥沙利铂神经毒性的缓解作用,并进一步通过RT-PCR、Western blot观察大鼠背根神经节TRPs（TRPV1、TRPA1、TRPM8）mRNA及蛋白表达水平变化。结果 大鼠行为学测定显示,与空白组比较,模型组、当归四逆汤低、中剂量组机械疼痛阈值下降（P<0.05）,而高剂量组未出现明显的下降（P＞0.05）。与空白组比较,其余各组大鼠背根神经节TRPA1、TRPM8、TRPV1蛋白表达量显著增加（P<0.01）。与模型组比较,当归四逆汤低剂量组可降低TRPM8蛋白表达（P<0.05）,中剂量组可降低TRPA1（P<0.01）、TRPM8（P<0.01）、TRPV1（P<0.05）蛋白表达,高剂量组明显降低三者蛋白表达量（P<0.01）。与空白组比较,其余各组大鼠背根神经节TRPV1、TRPA1、TRPM8 mRNA表达显著增加（P<0.01）,与模型组比较,当归四逆汤各组均可显著下调三者表达（P<0.01）。结论 当归四逆汤可以预防奥沙利铂慢性神经毒性,减缓大鼠机械疼痛阈值下降程度,其机制可能与下调TRPs通道蛋白表达有关。      

脊髓Toll样受体4在慢性瘙痒中的作用研究

目的研究脊髓Toll样受体4(TLR4)在重复使用噁唑酮引起的慢性瘙痒中的作用。方法选择雄性昆明小鼠152只,先随机分为3组:对照组、丙酮溶媒组和噁唑酮组,每组40只,每组再分为首次刺激前、激发0、4、9、11d5个亚组,按模型制作方法在相应时间点涂抹相应试剂,记录激发后30min行为学后处死小鼠,取脊髓颈膨大采用Western blot法检测TLR4表达水平。在确定噁唑酮致慢性瘙痒后9d小鼠脊髓TLR4表达水平接近高峰的基础上,为研究腹腔注射表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的作用,小鼠随机分为4组(n=8),丙酮溶媒组(A组)、丙酮溶媒+EGCG组(A+E组),噁唑酮组(O组)和噁唑酮+EGCG组(O+E组)。各组在第9天激发后8h开始腹腔注射EGCG(40mg/kg)或生理盐水,每8小时1次直到第11天激发前,共计6次,最后一次给药后立即激发,观察激发后30min内行为学改变,之后处死小鼠采用Western blot法检测颈段脊髓TLR4表达。结果噁唑酮组在激发后各时间点搔抓行为明显多于对照组和丙酮溶媒组(P<0.05),且脊髓TLR4表达水平与搔抓行为呈正相关(r=0.947)。结论腹腔注射EGCG可以减少脊髓TLR4表达水平与搔抓行为。脊髓TLR4参与重复使用噁唑酮引起的慢性瘙痒过程。     

大鼠前列腺炎模型中L6～S1背根神经节TRPV1和NGF的表达

目的观察大鼠前列腺炎疼痛模型中L6～S1节段背根神经节(DRG)瞬时感受器电位香草酸受体1(TRPV1)和神经生长因子(NGF)的表达变化。方法取30只SPF雄性Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,分别设0、7、14d3个时相,共6组,每组5只,通过前列腺完全弗氏佐剂和生理盐水注射制作大鼠前列腺痛模型和对照组,解剖L6～S1节段DRG组织行蛋白质印迹和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TRPV1和NGF的表达。结果慢性前列腺痛大鼠中L6～S1节段DRG的TRPV1和NGF表达在7d和14d高于对照组和0d组,差异有统计学意义(P<0.01);TRPV1表达在7d和14d组间差异无统计学意义(P>0.05);NGF表达14d低于7d(P<0.05)。结论慢性前列腺炎导致的跨器官痛觉致敏与腰骶段DRG神经元的TRPV1和NGF高表达密切相关。     

针刺通过降低TNF-α表达缓解脂多糖诱导的炎性痛

目的：探讨针刺对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的慢性炎症疼痛行为的影响以及对慢性炎症的改善机制。方法：将18只6-8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为3组：对照组小鼠腹腔注射4 mL/kg生理盐水;模型组小鼠腹腔注射LPS 3 m~kg,制造慢性炎症小鼠模型;针刺组慢性炎症小鼠给予针刺双侧“足三里”穴。3组小鼠不同处理后,分别采用Von Frev检测各组小鼠的机械缩足反射闽值(mechanical withdrawal threshold,MWT),采用酶联免疫法检测各组小鼠肿瘤坏死因子α(tumor necrosis f''actor,TNF-α)含量,采用杂交Westem blot检测各组小鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRCJ)神经无与热痛相关香草酸瞬时受体亚型1蛋白(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)表达的差异。结果：针刺组与模型组相比较,小鼠机械痛闽明显升高(P<0.05),血清TNF-α含量明显降低(P<0.05),DRG神经元TRPV1蛋白表达降低(P<0.05)。结论：针刺治疗可以减少机体炎症因子的表达,同时也改变DRG神经元中TRPV1的表达,从而缓解和抑制慢性炎症所导致的疼痛。     

糖尿病早期大鼠背根神经节IGF-I与GAP-43 mRNA的表达

目的:观察糖尿病早期(2周)大鼠背根神经节中胰岛素样生长因子-I(IGF-I)与生长相关蛋白-43(GAP-43)基因的表达变化以及胰岛素对其的影响。方法:按60mg/kg予SD大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素制备胰岛素依赖性糖尿病大鼠模型,然后将造模成功的大鼠随机分成模型组与治疗组,治疗组于造模成功后第2天开始皮下注射胰岛素进行治疗,qd。2周后取各组大鼠背根神经节(DRG),Trizol法提取总RNA,应用RT-PCR法测定IGF-I与GAP-43 mRNA的表达。结果:在糖尿病早期大鼠DRG中,IGF-I,GAP-43 mRNA的表达显著下调,胰岛素能明显上调IGF-I mRNA的表达,对GAP-43 mRNA的表达有上调趋势。结论:在早期糖尿病DRG中IGF-I,GAP-43 mRNA表达下调,参与了糖尿病外周神经病变的发生发展。     

电针对慢性炎症疼痛大鼠背根神经节牛肾上腺髓质22肽及其受体基因表达的影响

【目的】观察电针对完全福氏佐剂（completefreund’sadjuvant,CFA）致慢性疼痛大鼠患侧腰背根神经节（dorsalrootganglion,DRG）牛肾上腺髓质22肽（BAM22）与其感觉神经元特异性受体（SNSR）、MOR与DOR基因表达的影响。[方法]200＋20g雄性sD大鼠30只,随机分成正常对照组、模型对照组、电针组,每组10只,模型对照组、电针组右足CFA造模。电针组从造模24h开始治疗,患侧“足三里”穴,2／100Hz,30min,1次／d,治疗10d,其余2组不予治疗。采用辐射热法检测大鼠缩爪潜伏期观察大鼠患侧热痛敏变化,免疫组化法检测患侧背根神经节BAM22多肽的含量,定量PCR（quantitativepotymerasechainreaction,qPCR）法检测患侧背根神经节SNSR、MOR与DORmRNA的表达。[结果]经过10d的治疗,电针组的痛阈与模型对照组相比,有显著提高（P〈0．05）。免疫组化结果显示,电针干预后,患侧背根神经节的BAM22阳性细胞率比模型对照组有显著的提高（P〈0.01）。定量PCR结果显示,电针极大地促进了SNSR（P〈0．01）、MOR（P〈0．01）与DORmRNA（P〈0．01）在患侧DRG中的表达。[结论]电针对CFA大鼠慢性疼痛有良好的干预作用,推测该作用与电针增强患侧腰背根神经节BAM22多肽表达,增强其非阿片受体SNSR与其阿片受体MoR与DoRmRNA表达相关。     

TRPM8对间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征小鼠疼痛症状及神经元增殖的影响

目的探讨瞬时受体电位M8(TRPM8)对间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征(IC/BPS)小鼠疼痛症状及神经元增殖的影响。方法将雌性野生型C57BL/6小鼠(8～10周龄)按随机数字表法分为对照组、IC/BPS模型组和IC/BPS模型+薄荷醇组(各6只);TRPM8基因敲除小鼠随机分为TRPM8基因敲除组和TRPM8基因敲除模型组(各6只)。IC/BPS模型组、IC/BPS模型+薄荷醇组和TRPM8基因敲除模型组小鼠皮下注射尿路斑块蛋白65-84氨基酸残基(UPK3A65-84)多肽;IC/BPS模型+薄荷醇组继续注射薄荷醇。建模成功后, 通过机械敏感性评估各组疼痛阈值的差异;膀胱壁注射细胞膜红色荧光探针(Dil), 10 d后采集背根神经节(DRG)组织, 利用Western蛋白印迹法和实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测各组TRPM8和生长相关蛋白43(GAP43)的蛋白质和mRNA含量的差异;免疫荧光技术检测DRG组织中TRPM8表达与GAP43或Dil的分布情况。分析TRPM8与IC/BPS小鼠疼痛症状的关系及在神经元增殖中的作用。结果模型均构建成功。与对照组相比, ...     

羊蹄根提取物对血小板减少症模型小鼠造血系统的作用

目的：研究羊蹄根丙酮、乙醚提取物对小鼠血小板减少症的治疗作用。方法： 80只BACB/C小鼠随机分为5组（每组16只）：阴性对照组（色拉油）、羊蹄根丙酮提取物中剂量（0.5 g生药•kg^-1）、高剂量（5.0 g生药•kg^-1）组和乙醚提取物中剂量（0.5 g生药•kg^-1）、高剂量（5.0 g生药•kg^-1）组。小鼠连续3 d皮下注射环磷酰胺（0.3mL/20g）,建立血小板减少症模型;将造模成功小鼠分别给予色拉油,中、高剂量羊蹄根丙酮提取物及中、高剂量羊蹄根乙醚提取物灌胃,20 d后处死动物采血检测血小板数、红细胞数、白细胞数。结果： ①与造模前比较,造模后第14天各组小鼠血小板数量降至最低(P<0.01);②造模后第20天（实验结束时）各组小鼠血小板数量高于第14天（P<0.01),且小鼠血小板数羊蹄根丙酮、乙醚提取物各实验组高于阴性对照组（P<0.01) ;③羊蹄根丙酮、乙醚提取物各实验组小鼠红细胞、白细胞的数量与对照组比较差异无显著性（P>0.05）。结论：中、高剂量羊蹄根丙酮、乙醚提取物对小鼠血小板减少症有明显治疗作用。     

实验性糖尿病早期大鼠背根神经节一氧化氮合酶基因表达的变化

目的：观察糖尿病早期(2周)大鼠背根神经节(DRG)中一氧化氮合酶(nNOS、iNOS、eNOS)的表达变化以及胰岛素对其的影响。方法：按60mg／kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备胰岛素依赖性糖尿病大鼠模型(16只)，造模成功后随机分成2组(模型组和治疗组)，治疗组于造模成功后第2天开始给予胰岛素治疗，正常对照组(8只)与模型组予皮下注射同样体积的生理盐水。2周后取各组大鼠背根神经节，Trizol法提取总RNA，应用RT—PCR法测定3种NOS mRNA的表达。结果：在糖尿病早期大鼠DRG中，iNOS表达明显上调，胰岛素能有效逆转此变化。而nNOS和eNOS的表达无明显变化。结论：在早期糖尿病DRG中iNOS基因表达异常，可能与糖尿病外周神经病变的发生发展有关。     

DNCB诱导TRPA1基因敲除小鼠特应性皮炎模型的建立与评价

目的：在C57BL/6遗传背景下的野生型以及瞬时受体电位通道A1（transient receptor potential cation channel,subfamily A,member 1,TRPA1）基因敲除小鼠上建立2,4-二硝基氯苯（2,4-dinitrochlorobenzene,DNCB）诱导的特应性皮炎（atopic der－matitis,AD）模型,初步探索TRPA1在该模型的作用。方法：首先将野生雄性C57BL/6小鼠随机分成实验组（n=6）,对照组（n=6）,建立AD模型。具体造模方案：在致敏阶段,于第1天小鼠背部及耳部分别使用2% DNCB（丙酮/橄榄油3∶1）溶液及单纯丙酮/橄榄油溶液外涂。在激发阶段,于第5、8、11、14、17、20天背部及耳部分别外涂0.5% DNCB溶液及单纯丙酮/橄榄油溶液,共6次,造模后取皮损行HE染色,鉴定AD模型。通过qRT-PCR和Western blot检测背部皮损TRPA1 mRNA和蛋白的表达水平,免疫组化检测TRPA1蛋白的定位及表达水平。然后随机选取6只TRPA1+/+（野生型）小鼠为模型组I,6只TRPA1-/-（敲基因型）小鼠为模型组Ⅱ,6只TRPA1+/+小鼠为空白对照组,建立AD模型,具体造模方式同上。造模结束后取血清及耳部和背部皮损组织,检测病理生理各项指标。结果：皮损及HE染色显示,在野生型小鼠上成功建立了AD模型。qRT-PCR结果显示,实验组背部皮损中TRPA1的mRNA相对表达升高,差异有统计学意义（t=4.93,P=0.008）;Western blot结果显示,实验组背部皮损TRPA1蛋白表达升高,平均光密度值差异有统计学意义（t=34.32,P=0.000）;免疫组化显示,实验组TRPA1在表皮和真皮的表达均有不同程度的增加。进一步在TRPA1基因敲除小鼠上建立AD模型显示：与对照组相比,模型Ⅰ、Ⅱ组背部皮肤表现出明显的炎症性皮损,耳部明显肿胀。病理显示角化过度和（或）角化不全、棘细胞层增厚、真皮淋巴细胞为主的炎性细胞浸润,同时发现肥大细胞浸润增加。血清总IgE水平升高,且差异有统计学意义[（1.27±0.10） μg/mL vs.（14.82±0.26） μg/mL,t=19.27,P=0.000;（1.27±0.10） μg/mL vs. （8.63±0.28） μg/mL,t=25.07,P=0.000]。TH2细胞因子[白介素-4（interleukin-4,IL-4）和白介素-13（interleukin-13,IL-13）]相对表达升高,且差异有统计学意义（P＜0.05）。与模型Ⅰ组相比,模型Ⅱ组小鼠炎症性皮损和耳部肿胀程度减轻,棘细胞层的肥厚程度及炎性细胞的浸润程度减轻,血清总IgE水平下降[（14.82±0.26） μg/mL vs. （8.63±0.28） μg/mL,t=16.34,P=0.000],TH2炎症因子相对表达下降。结论：在C57BL/6遗传背景下的野生型和TRPA1敲基因小鼠上成功建立DNCB诱导的AD模型,发现TRPA1表达上调及TRPA1基因敲除后抑制了DNCB诱导的AD炎症,说明TRPA1在DNCB诱导的AD中可能发挥重要的作用,但具体机制有待进一步研究。     

玉屏风散加味治疗慢性荨麻疹的作用及机制

目的:探讨玉屏风散(YPP)加味治疗慢性荨麻疹的作用机理.方法:采用随机对照法,将SD大鼠,NIH小鼠随机分为对照组,模型组,开瑞坦组,YPP加味高(4 g/L)、中(2g/L)、低(1 g/L)剂量组.检测对大鼠同种被动皮肤过敏反应(PCA)的影响及对小鼠皮肤毛细血管通透性、小鼠血清总IgE,右旋糖酐敛小鼠瘙痒的影响.结果:模型组PCA A值、血清IgE含量、毛细血管通透性的A值明显高于对照组,开瑞坦组;YPP加味各剂量组与模型组比较,A值及血清IgE含量明显下降(P<0.05);模型组瘙痒次数、瘙痒时间明显高于对照组;开瑞坦组,YPP加味各剂量组与模型组比较,瘙痒次数、瘙痒时间明显降低(P<0.05);并且YPP加味4g/L组效果最好,优于开瑞坦组.结论:YPP加味对PCA,血清总IgE含量,皮肤瘙痒次数和时间,毛细血管通透性均有抑制作用.     

雷公藤多甙对佐剂性关节炎大鼠L5 DRG内SP、CGRP表达的影响

目的 探讨雷公藤多甙(TⅡ)对佐剂性关节炎大鼠L5背根神经节(DRG)内SP、CGRP表达的影响及其作用机制.方法 采用佐剂性关节炎模型大鼠,分别灌胃给予雷公藤多甙预防和治疗用药7 d后,观察L5DRG内SP、CGRP阳性神经元的分布并计数.结果 TⅡ预防组和治疗组与模型组比较,L5背根神经节内SP、CGRP表达明显降低.结论 雷公藤多甙可通过降低L5 DRG内SP、CGRP的表达发挥治疗作用.     

鞘内转染Ad-hNGFβ-EGFP对神经病理痛大鼠背根神经节CGRP和SP表达的影响

目的:探讨鞘内转染携带增强型绿色荧光蛋白的重组腺病毒介导的人神经生长因子β(Ad-hNGFβ-EG-FP)对神经病理性痛大鼠背根神经节(DRG)降钙素基因相关肽(CGRP)和P物质(SP)表达的影响。方法:48只雄性SD大鼠制备坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型,分别鞘内注射人工脑脊液(CSF组)或Ad-hNGFβ-EGFP基因(Ad-hNGFβ-EGFP组),于术前1 d、转染后4～28 d测定热痛阈、机械痛阈,进行行为学评分。分别于转染后4、71、4及28 d结扎L4～6背根神经节,免疫组织化学法测定DRG中CGRP和SP的表达。另设假手术组进行对比。结果:CSF组和Ad-hNGFβ-EGFP组行为学评分升高,机械痛阈及热痛阈均降低(P<0.01),2组背根神经节SP及CGRP表达均明显高于假手术组(P<0.05,P<0.01)。结论:鞘内转染Ad-hNGFβ-EGFP基因可通过降低背根神经节SP及CGRP含量而减轻大鼠痛觉过敏。     

哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1mRNA的表达

目的观察哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1 mRNA的表达。方法 SPF级雌性Balb/c小鼠16只,随机分为哮喘组和对照组,每组8只。哮喘组应用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型,末次激发后留取肺组织,采用荧光实时定量RT-PCR技术检测支气管肺组织中TRPM8与TRPA1的mRNA表达水平。结果哮喘组肺组织中TRPM8与TRPA1 mRNA水平分别为(0.619 1±0.213 1)和(0.272 2±0.167 1),明显高于对照组(0.347 1±0.221 1和0.107 9±0.041 5),差异有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘小鼠肺组织TRPM8与TRPA1 mRNA的表达上调,可能是冷刺激诱发哮喘发作的分子机制。