高活性α-淀粉酶的分离与纯化

目的研究高活性α-淀粉酶分离与纯化的新方法。方法运用吸附树脂和离子交换的方法,分离纯化α-淀粉酶。结果吸附树脂分离纯化所得α-淀粉酶的活性约为60000U/g,DEAE-纤维层析所得α-淀粉酶的活性在吸附树脂法的基础上提高了约1倍。结论该方法分离纯化α-淀粉酶简便,成本低,便于工业化生产。     

基于Alpha稳定分布的信号频谱估计

分析基于FLOM估计的共变谱估计,当α<1时,这种方法并不适应。提出了一种分数低阶共变谱的估计方法,通过对这两种α稳定分布噪声中正弦信号估计与分辨的仿真结果的比较表明,文章提出的方法显示出了较好的谱估计性能,且对α稳定分布噪声具有广泛的适用性。     

肿瘤坏死因子α在人早期胎盘中的产生及其对hCG分泌的调节作用

用酶免疫分析法检测了人胎盘组织和分离的滋养层细胞产生的肿瘤坏死因子α(TNFα)。在组织切片上用抗TNFα单克隆抗体显示出胎盘产生TNFα的部位在滋养层。重组TNFα刺激分离的滋养层细胞,并测出其产生绒毛膜促性腺激素的值,该值依赖于所用重组TNFα的浓度。     

可食用的肉齿菌属蘑菇的甾醇对HL60和HT29细胞的生长抑制作用

麦角甾醇过氧化物（EP）5α，8α-环二氧-22E-麦角甾-6，22-二烯-3β-醇（1）广泛分布于蘑菇中。从可食用蘑菇S．aspratus（Berk．）S．Ito中分离的EP已被证实是HL60细胞凋亡诱导剂。作者从该蘑菇中分离、精制了另一种甾醇9，11-脱氢麦角甾醇过氧化物[9（11）-DHEP][即5α，8α-环二氧-22E-麦角甾-6，9（11），22-三烯-3β-醇，2]，研究了化合物抗肿瘤细胞生长和诱导细胞凋亡的作用。     

肿瘤坏死因子α在人早期胎盘中的产生及其对hCG分泌的调节作用

用酶免疫分析法检测了人胎盘组织和分离的滋养层细胞产生的肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）。在组织切片上用抗ＴＮＦα单克隆抗体显示出胎盘产生ＴＮＦα的部位在滋养层。重组ＴＮＦα刺激分离的滋养层细胞，并测出其产生绒毛膜促性腺激素的值，该值依赖于所用重组ＴＮＦα的浓度。     

带跳的非线性随机延迟微分方程的Split-step算法

研究了It意义下一类具有特殊情形的、带跳的非线性随机延迟微分方程的Split step算法,证明了该算法在均值意义下以1.5阶矩一致收敛,在均方意义下以1阶矩一致收敛;得到了Split step法均方稳定的条件,最后通过一些数值实例验证了算法的有效性。     

胚胎大鼠神经干细胞分离培养及基因转染研究

以低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)基因重组腺病毒体外转染胚胎大鼠神经干细胞,建立能稳定表达HIF-1α的基因工程化神经干细胞,为进一步的实验研究提供理论和物质基础.方法 ①分离SD大鼠胎鼠的间脑,加入神经生长因子EGF、bFGF和B27的神经干细胞务件培养基中克隆培养.通过检测神经干细胞的特异性抗原神经巢蛋白(nestin)、自我增殖能力和分化能力来鉴定神经干细胞;②用含有HIF-1α基因的腺病毒感染培养第2代的神经干细胞,通过绿色荧光蛋白的表达证明转染基因的表达,Western-blot检测转染后HIF-1α蛋白表达的变化,免疫原位杂交检测转染后HIF-1αmRNA 阳性细胞.结果 ①分离培养出了大量具有不断增殖能力的神经干细胞;②70%～80%的神经干细胞能感染HIF-1α基因重组腺病毒,Western-blot和免疫原位杂交实验显示HIF-1α蛋白大量表达.结论 成功建立了神经干细胞的分离培养方法及能长期稳定表达HIF-1α的基因工程化神经干细胞.     

长爪沙鼠肝星状细胞的分离培养与鉴定

目的探索长爪沙鼠稳定、经济的肝星状细胞分离和培养方法,为深入探讨长爪沙鼠肝纤维化的细胞机制提供技术支撑。方法取成年雄性长爪沙鼠,用链蛋白酶、胶原酶及DNA酶体内门静脉灌注消化长爪沙鼠肝脏细胞,经Nycodenz密度梯度离心,分离肝星状细胞。台盼蓝拒染实验鉴定细胞活力,α-SMA,Desmin免疫细胞化学染色鉴定细胞性质。结果肝星状细胞得率为0.5~1×107/肝。肝星状细胞存活率在90%以上。原代培养3 dα-SMA阳性细胞达75%以上,传代培养后,α-SMA,Desmin阳性达100%。结论成功建立了稳定可靠的长爪沙鼠肝星状细胞分离培养方法,为肝脏相关疾病研究和防治药物的开发提供了技术支持。     

兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定

目的：建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法：成年新西兰白兔2只(正常及梗阻各1只)，采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后，于10％小牛血清的DMEM中培养，观察细胞形态和扩增情况，用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果：在倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片苏木精-伊红(H-E)染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。结果证明，用该方法所分离、培养的膀胱平滑肌细胞其纯度几乎达99％。结论：该方法易行、可靠，在短期内可获得大量高纯度膀胱平滑肌细胞。     

药用狗牙花茎叶部分化学成分

目的对药用狗牙花(Ervatamia officinalis)茎叶的化学成分进行分离及结构鉴定。方法利用硅胶柱、凝胶柱及反相硅胶柱等色谱柱技术进行分离,根据理化性质及波谱学方法进行结构鉴定。结果共分离并鉴定了10个化合物:α-香树醇(α-amyrin,1)、α-香树酯醇乙酸酯(α-amyrin acetate,2)、棕榈酸(palmitic acid,3)、正三十四烷醇(tetratriacon-tanol,4)、豆甾醇(stigmasterol,5)、β-胡萝卜苷(β-daucosterol,6)、羽扇豆醇(lupeol,7)、毛蕊异黄酮(calycosin,8)、木犀草素(luteolin,9)、蓝萼甲素(glaucocalyxin A,10)。结论化合物1、3～10为首次从该植物中分离得到,化合物7、9、10为首次从该属植物中分离得到。     

重组胸腺素α1的分离纯化和活性测定

目的：利用融合表达载体pThioHisA的重组质粒pThioHisA-Tα1④,转化大肠杆菌TOP10得到的工程菌,来分离纯化表达的胸腺素α1（thymosin alpha1,Tα1),方法将高效表达融合蛋白的工程菌用菌胞破碎器裂解,经80℃热处理,离心上清采用Q－SepharoseFF阴离子交换色色谱纯化Tα1单体,应用SDS－PAGE,2L－Tricine-SDS-PAGE和HPLC进行鉴定。结果SDS－PAGE分析表明菌体表达的融合蛋白牛菌体总蛋白的400g.kg^-1,经2L－Tricine-SDS-PAGE分析证实,融合蛋白可裂解出Tα1单体,裂解物经简单的离子色谱可以纯化出Tα1单体,HPLC鉴定纯化的Tα1纯度可达950g.kg^-1以上,利用^3H-TdR进行的生物活性测定表明,在致有丝分裂原ConA存在的条件下,融合蛋白和Tα1单体均具有刺激小鼠脾淋巴细胞分裂增殖的能力,与化学合成的Tα1相比具有相似的生活性。结论该方法是分离纯化Tα1简便易行,经济有效的方法,同时也为Tα1的分离纯化和大规模的开发生产奠定了基础。     

Berlandiera lyatra中具细胞毒活性的倍半萜内酯

目的研究B erland iera lya tra中的抗肿瘤活性化学成分。方法以M TT法进行抗肿瘤活性化学成分的追踪,利用硅胶柱色谱和Sephadex-LH-20分离化合物,用理化和光谱数据确定化合物结构。结果从B erland iera lya-tra的CHC l3活性部位中,分离得到了两个细胞毒活性化合物,并确定其为3α-环氧短小伯兰菊素(3-αepoxypum ilin)和短小伯兰菊素(pum ilin)。结论3α-环氧短小伯兰菊素和短小伯兰菊素是该植物抗肿瘤的主要活性成分,也是首次从该植物中分离得到的抗肿瘤活性成分。     

高产α—淀粉酶菌株分离培育的初步研究

用常规的细菌培养法从土壤中分离选育出产α—淀粉酶的菌株,再对该菌进行热以及紫外线照射,最后筛选出高产α—淀粉酶的生产用菌株。     

云南兔耳草中环烯醚萜苷类成分的研究Ⅲ

目的 对云南兔耳草的化学成分进行研究.方法 用硅胶柱色谱和HPLC对化合物进行分离,并用光谱方法进行结构鉴定.结果 分离鉴定了4个环烯醚萜苷类成分:6-O-α-L-(4“-O-E-cinnamoyl)rhamnopyranosylcatalpol(Ⅰ),6-O-α-L-(2“-O-E-p-methoxycinnamoyl)rhamnopyranosycatalpol(Ⅱ),6-O-α-L-(4“-O-E-feruloyl)rhamnopyranosylcatalpol(Ⅲ),gmelinoside L(Ⅳ).结论 以上4个化合物均为首次从该植物中分离得到.     

人α干拢素的抗体亲和层析(摘要)

本文报道了用抗人α-干扰素(HuIFN-α)抗体亲和层析纯化相应IFN的研究。通过用经三氯醋酸和蓝色葡聚糖纯化的人类淋巴细胞IFN(HuLyIFN-α)、免疫绵羊,获得绵羊抗IFN血清。从该抗血清中分离得到抗HuLyIFN-α抗体之后,用偶联在琼脂糖     

一种基于积分分离的内模PID主动队列管理算法

针对PI主动队列管理算法存在调节时间长和鲁棒性差的缺点,提出了一种基于积分分离的内模PID主动队列管理算法（IMC PDPID）。其突出特点是控制器参数整定方便,由于采用了积分分离的方法,使其既保持了积分作用,又减小了超调量。仿真结果表明：该算法较PI算法有更小的超调量,队列收敛速度明显加快。     

RNA干扰热休克蛋白90α表达对NIH-3T3细胞应激反应的影响

目的 用RNA干扰方法建立稳定的热休克蛋白90α（HSP90α）抑制表达细胞株，研究热休克蛋白90α抑制表达对细胞应激反应的影响。方法 将人Hsp90αRNA干扰基因片段连接入pSilencer2．1-U6 neo载体，重组质粒pSilencerHSP90经亚克隆、纯化、测序鉴定后，用电穿孔法转染到小鼠成纤维细胞系NIH-3T3细胞内。经G418筛选、克隆分离培养，用免疫荧光、免疫印迹鉴定阳性克隆。用高温作用（44℃，40min）模拟氧化应激环境，以NIH-3T3细胞为对照，流式细胞仪测定DNA受损细胞数，分析在细胞应激状态下对细胞膜和DNA的损害及HSP90低表达对细胞应激反应的影响。结果 转染pSilencerHSP90的NIH-3T3细胞Hsp90免疫荧光染色减弱，主要分布于胞浆；与对照相比，44℃，40min时DNA的损害加重（9．2％vs18．5％，P〈0．01）。结论 建立稳定低表达HSP90αNIH-3T3细胞株；热休克蛋白90表达与其应激保护作用密切相关。     

基于Adaptive Elastic Net与加速失效时间模型的亚组识别方法的应用拓展

目的 针对适应性设计下的Adaptive Elastic Net与加速失效时间模型亚组识别方法进行更多适用条件下的研究,以获得该方法最佳应用效果所对应的参数。方法 基于前期所提出的亚组识别方法,进一步探讨协变量间相关性、二阶段显著性水准([α1]和[α2])、协变量与样本量比例对该方法的影响。通过模拟研究,探讨含/不含协变量主效应的惩罚模型在不同情形下的亚组识别效果。结果 协变量间的相关性r=0、0.3、0.5时,检验效能（power）表现稳定;在二阶段自适应设计中,当[α1]和[α2]分别为0.035和0.015时,模型的power最高;固定样本量n的情况下,power随着待选协变量个数与n比例的上升而下降,比例升到1之后power呈现平稳趋势;对于不同生存时间的参数分布,单变量模型表现出不同的模式,而惩罚AFT模型相对稳定。结论 协变量间的相关性不影响检验power;（0.035,0.015）可作为自适应设计显著性水准的参考设置;获益亚组与非获益亚组间的治疗效果差异较小时,含协变量主效应的惩罚性AFT模型（Penalized,Eq_in）优于不含协变量主效应的单变量AFT模型（Univariate,Eq_ex）;当协变量数量与样本量的比值小于1时,“Univariate,Eq_ex”的power更高;否则,“Penalized,Eq_in”的效果会更好;生存数据的参数分布对单变量模型的影响较大,但对惩罚模型的影响较小。     

鹅胆的化学成分研究

目的 研究鹅胆 Anser anser的化学成分。方法 采用各种现代色谱手段对其化学成分进行分离,利用理化性质结合光谱数据鉴定化合物结构。结果 分离鉴定了10个化合物,分别为正四十二烷酸(Ⅰ)、胆甾醇(Ⅱ)、正十六烷酸(Ⅲ)、十六烷酸甘油酯(Ⅳ)、methyl 3α,7α-dihydroxy-5β-cholan-24-oate(Ⅴ)、3α,7α-二羟基-5β-胆甾烷-24-酸(Ⅵ)、烟酰胺(Ⅶ)、n-butyl-3α,7α-dihydroxy-5β-cholan-24-oate(Ⅷ)、正十八烷酸(Ⅸ)、3α,7α-dihydroxy-5β-cholan-oic acid N-(2-sulfoethyl) amide(Ⅹ)。结论 化合物Ⅰ～Ⅴ、Ⅶ～Ⅹ为首次从该属动物胆汁中分离得到,并首次报道了化合物Ⅷ的波谱数据。     

影响α-淀粉酶分离液澄清度的因素

本文根据凝聚和絮凝原理,研究了无机盐和高分子絮凝剂加入量对枯草杆菌BF 7658α-淀粉酶分离液澄清度的影响。实验结果表明,氯化钙可使α-淀粉酶发酵液的ζ电位降低,分离液的澄清度增加,用氯化钙和磷酸氢二钠来处理发酵液,则其分离液的澄清度较单用氯化钙为大,阴离子型高分子絮凝剂如海藻酸钠加入量对分离液澄清度也有一定影响。实验中还发现,澄清的发酵液在10℃下贮存可保持澄清透明状态。