兔冷冻卵巢组织自体多点种植后的组织形态和功能

目的：观察兔冷冻卵巢组织子宫系膜、卵巢囊和卵巢内多点种植后组织形态及功能,探讨移植部位和移植方法。方法：15只新西兰白兔随机分为3组,每组5只：1组,新鲜卵巢组织子宫系膜及卵巢囊种植;2组：冷冻卵巢组织子宫系膜及卵巢囊种植;3组：冷冻卵巢组织卵巢内种植。通过卵巢组织光镜和电镜观察、子宫内膜组织光镜观察、阴道脱落细胞学检查,反映种植后卵巢组织存活、卵泡生长发育及内分泌功能等情况。结果： 冷冻复苏组织和新鲜组织相比, 2组、3组移植后组织与冷冻复苏组织相比, 3个移植组间相比,正常卵泡和形态改变卵泡所占比率差异均无统计学意义(P＞0.05）;3个移植组的正常卵泡比率均低于新鲜组织(P＜0.05）;3个移植组卵巢组织中存在正常比例的各级卵泡,并且近成熟卵泡的比率与新鲜卵巢组织相比差异无统计学意义(P＞0.05）,2组、3组移植后组织与冷冻复苏组织比较,近成熟卵泡所占比率增加(P＜0.05）;冷冻后和移植后卵巢组织形态和超微结构无明显改变。结论： 小块卵巢组织冷冻可以获得良好的冷冻保存效果;冷冻卵巢组织自体多点种植后,卵巢组织光镜形态学和超微结构无明显改变,卵泡存活并正常发育;卵巢组织种植于子宫系膜、卵巢囊和卵巢内均可以得到良好的效果。     

玻璃化冷冻人卵母细胞体外受精－胚胎移植9例临床分析

目的：探讨人卵母细胞玻璃化冷冻在体外受精－胚胎移植（ IVF-ET）中的应用效果。方法行IVF-ET 治疗、因取卵日男方因素无法进行受精的患者9例,对其成熟卵子进行玻璃化冷冻保存,解冻后进行卵胞浆内显微授精（ICSI）,记录卵子复苏、受精、卵裂及移植后妊娠情况。结果9例患者共解冻复苏58枚卵子,复苏率68．2％（58／85）;复苏后进行ICSI的成熟卵子中,受精40枚,形成胚胎34枚,受精率69．0％,卵裂率85．0％。7个移植周期共移植胚胎15枚,临床妊娠3例,临床妊娠率42．9％。结论人卵母细胞玻璃化冷冻可以获得一定的临床妊娠率,在IVF-ET中可作为临床治疗的选择之一。     

玻璃化冷冻与慢速程序冷冻对人ICSI的D3胚胎的效果观察

目的 　比较冷冻环玻璃化冷冻法与慢速程序冷冻法对人ICSI的D3冷冻胚胎复苏的效果。　方法 　将接受卵母细胞浆内单精子注射-胚胎移植（ICSI-ET）患者的取卵周期移植后剩余的D3胚胎分别进行慢速程序冷冻法或冷冻环玻璃化法冷冻 ,比较胚胎复苏后的存活率、妊娠率等指标。　结果 　玻璃化冷冻复苏101个周期 ,411个胚胎、存活392个（95.4%）,种植率18.2%,临床妊娠45例(44.6%) ,其中 3例流产（6.7%）。慢速程序冷冻57个复苏周期 ,234 个胚胎、存活185 个（79.1% ）, 种植率15%,临床妊娠15例 （26.3%）。玻璃化冷冻法的胚胎复苏存活率、完整胚胎率高于慢速程序冷冻法（P<0.05）;种植率高于慢速程序冷冻,但差异无统计学意义。结论 玻璃化法的冷冻复苏率比传统的慢速程序冷冻法高,更适于人类ICSI的D3胚胎的冷冻保存。     

玻璃化冷冻保存对小鼠卵巢组织的影响

目的探讨玻璃化冷冻保存对小鼠卵巢组织内卵泡形态及卵巢组织激素分泌功能的影响。方法将23只4周龄ICR雌鼠随机分为新鲜卵巢组、去势组和玻璃化冷冻组，应用乙二醇（EG）和二甲基亚砜（DMSO）玻璃化冷冻小鼠卵巢组织。冷冻前后取部分小鼠卵巢组织行组织学观察；同时将部分新鲜和复苏组织自体移植入小鼠肾被膜下。移植术后5d开始观察小鼠的动情周期，术后30d测定小鼠血清雌激素浓度。结果冻融卵巢组织内存活的原始卵泡和初级卵泡与新鲜组织无显著差异（P〉0．05）；而次级卵泡的存活率显著下降（P〈0．01）。移植术后玻璃化冷冻组和新鲜卵巢组小鼠均出现动情周期，两组动情周期出现时间无明显差异（P〉0．05）。移植术后第30天两组小鼠血清雌激素浓度无显著差异（P〉0．05）。结论玻璃化冷冻法可以较好地保存小鼠卵巢组织内的原始卵泡和初级卵泡，且不影响卵巢组织的激素分泌。     

卵母细胞玻璃化冻融获成功妊娠1例

目的 探讨玻璃化冷冻方法在冷冻保存卵母细胞中的临床应用价值.方法 2015年3月在我中心行卵母细胞玻璃化冷冻1例,于2015年7月行玻璃化解冻,行卵胞浆内单精子注射受精,获得胚胎后进行移植和冷冻.结果 共冷冻13枚卵母细胞,解冻后存活12枚(92.3％),对12枚成熟卵母细胞行单精子卵浆内显微注射,9枚(75.0％)正常受精,8枚(88.9％)卵裂,再次解冻移植获单胎妊娠,现正在妊娠中.结论 玻璃化冻融卵母细胞是一种方便可行的方法,在特殊情况下发挥着不可替代的作用,可以获得临床妊娠.     

基因重组/尿卵泡刺激素对卵巢的反应及辅助生殖技术结局的对比性研究

目的评估基因重组和尿卵泡刺激素对不孕妇女卵巢的刺激反应和体外受精（IVF）或卵胞浆内单精子注射（ICSI）的妊娠结局.方法对1049例实施IVF或ICSI的不孕患者作回顾性分析,在2种促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa）方案下,分别给予尿卵泡刺激素（uFSH）、高纯度尿卵泡刺激素（hpFSH）和基因重组卵泡刺激素（rFSH）促排卵,比较3组雌二醇（E2）峰值水平、FSH剂量、成熟卵母细胞数、受精率和妊娠率.结果在中度和高度卵巢反应者（GnRHa长方案）、hpFSH组和rFSH组出现较高的E2峰值和绒毛膜促性腺素的注射延迟,其中rFSH组的胚胎种植率和持续妊娠率最高;在低弱卵巢反应者（GnRHa短方案）、hpFSH组和rFSH组的E2峰值显著增高,其周期取消率也明显减低,但各组之间种植率或妊娠率无明显差异.结论本研究说明,在卵巢的反应性和IVF/ICSI妊娠结局的层面上,基因重组卵泡刺激素较尿卵泡刺激素更显优越性.     

玻璃化冷冻人成熟卵母细胞的临床应用

目的 探讨玻璃化冷冻在人成熟卵母细胞冻存中的临床应用效果.方法 运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,冻融后成功复苏的卵母细胞行胞质内单精子注射一胚胎移植(ICSI-ET),观察复苏后卵母细胞受精、卵裂以及生化妊娠、临床妊娠情况.结果 15例共81枚成熟卵母细胞冻融后进行卵胞浆内单精子注射或者体外受精-胚胎移植(IVF-ET),有69枚卵母细胞成功复苏.52枚卵母细胞受精,39枚卵母细胞卵裂,移植后4例患者获得临床妊娠.结论 玻璃化冷冻人成熟卵母细胞方便、快捷、成本低下、冷冻损伤小,有极大的临床应用价值.     

实施ICSI后对复苏胚胎的妊娠结局

目的 讨论卵泡浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection ICSI)与常规体外受精(in vitro fetrilizationⅣF)受精方式对冷冻胚胎的解冻和移植后对临床妊娠的影响.方法 慢速冷冻IVF或ICSI周期中剩余的优质胚胎,随后用快速融解法复苏后进行移植.观察各组胚胎冷冻解冻后的胚胎存活率及相关指标和临床妊娠率.结果 50例患者中,IVF组为30个周期,妊娠4例,妊娠率为13.33%,ICSI组为20个周期,妊娠5例,妊娠率为25%,ICSI组冷冻胚胎优胚率、复苏后胚胎存活率、存活胚胎累积细胞数与复苏胚胎的累积细胞数百分比(累积细胞存活率)和存活胚胎累积评分与复苏细胞累积评分的百分比(累积评分率)有显著差异.结论 冷冻胚胎的优胚率及复苏后获得高质量的胚胎是影响解冻胚胎移植的临床妊娠率重要因素.     

实施ICSI后对复苏胚胎的妊娠结局

目的 讨论卵泡浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection ICSI)与常规体外受精(in vitro fetrilizationⅣF)受精方式对冷冻胚胎的解冻和移植后对临床妊娠的影响.方法 慢速冷冻IVF或ICSI周期中剩余的优质胚胎,随后用快速融解法复苏后进行移植.观察各组胚胎冷冻解冻后的胚胎存活率及相关指标和临床妊娠率.结果 50例患者中,IVF组为30个周期,妊娠4例,妊娠率为13.33%,ICSI组为20个周期,妊娠5例,妊娠率为25%,ICSI组冷冻胚胎优胚率、复苏后胚胎存活率、存活胚胎累积细胞数与复苏胚胎的累积细胞数百分比(累积细胞存活率)和存活胚胎累积评分与复苏细胞累积评分的百分比(累积评分率)有显著差异.结论 冷冻胚胎的优胚率及复苏后获得高质量的胚胎是影响解冻胚胎移植的临床妊娠率重要因素.     

人冻融卵母细胞赠送的初步研究

目的为要求接受赠卵的不孕症患者提供一种人卵母细胞的保存方法。方法将供卵者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中自愿捐献的多余的成熟卵母细胞29个,慢冻快融后采用受者丈夫精子行单精子胞浆内注射(ICSI),观察受精、卵裂及发育过程,选择形态好的胚胎移植。结果29个成熟卵母细胞冻融后存活22个(存活率75．86％),17个正常受精(受精率77．27％),形成胚胎12枚(胚胎形成率70．59％),移植9个胚胎。4例接受赠卵者中1例获临床妊娠。结论慢速冷冻快速融冻人卵母细胞是一种可行的卵母细胞的冻融方法。并获得赠卵临床妊娠成功。     

三种超促排卵方案的临床应用效果分析

目的比较三种控制性超促排卵（COH）方案在体外受精-胚胎移植（IVF-ET）/卵胞浆内单精子注射（ICSI）的临床结果,分析人尿绝经期促性腺激素（HMG）和基因重组促性腺激素（rFSH）的应用价值.方法回顾性分析570例接受IVF-ET /ICSI的不育患者,采用三种COH方案的情况.A组50个周期,应用HMG;B组81个周期,应用rFSH;C组445个周期,rFSH结合HMG促排卵.结果 B组用药天数少于A组 （P〈 0.05）,用药安瓿数少于A组和C组,有统计学差异（P〈 0.05）;B组获卵数明显多于A组和C组（P〈 0.01, P〈 0.05）.结论 COH中应用rFSH可以募集较多的卵泡,三种COH方案的胚胎发育情况、临床妊娠率、胚胎移植结局无显著差异.     

福特蒙、果纳芬和丽申宝在体外受精-胚胎移植中超促排卵效果分析

目的探讨福特蒙、果纳芬、丽申宝在体外受精-胚胎移植（IVF/ICSI-ET）中超促排卵的效果。方法回顾分析326个IVF/ICSI-ET周期的病例资料,分为福特蒙组58例、果纳芬组83例、丽申宝组185例。卵泡监测、取卵I、VF/ICSI-ET等均按本中心常规进行,观察三组获卵数、卵子成熟率、受精率、优质胚胎率、冷冻胚胎率及妊娠率。结果①三组患者年龄和不孕原因比较差异无统计学意义（P〉0.05）,其中福特蒙组不孕年限时间最短（4.05±3.76,P〈0.05）,三组获卵数、妊娠率差异无统计学意义。②三组患者按年龄分层,〈35岁中福特蒙组冷冻胚胎率最高（P〈0.05）,年龄≥35岁中福特蒙组优质胚胎率最高（P〈0.05）。③三组患者按长（短）方案分层,长方案中福特蒙组冷冻胚胎率最高（P〈0.05）,短方案中三组各方面比较差异无统计学意义（P〉0.05）。④使用果纳芬的患者卵子成熟率和受精率最高（P〈0.05）。结论在治疗35岁以上IVF患者时,福特蒙可能更有优势,丽申宝更具有价格优势,可根据患者的具体情况制定个体化促排卵方案。     

不同手术方式剥除卵巢子宫内膜异位囊肿对体外受精-胚胎移植术结局的影响

目的探讨不同手术方式剔除卵巢子宫内膜异位症囊肿对卵巢控制性超促排卵（controlledovarianhyperstimulation,COH）的反应及体外受精-胚胎移植术（invitrertilizationandembryotransfer,IVF-ET）助孕患者结局的影响。方法对67例既往开腹或腹腔镜确诊的子宫内膜异位症合并不育患者行体外受精-胚胎移植术COH和助孕结局进行回顾性分析。其中A组：21例曾行腹腔镜卵巢子宫内膜异位囊肿剔除术,B组：16例曾行开腹卵巢子宫内膜异位囊肿剔除术,C组：30例为未行囊肿剔除术的子宫内膜异位症患者。结果两种手术方式对COH中获卵数、受精率、优质胚胎数、移植胚胎数、妊娠率与对照组相比无显著性差异（P〉0.05）。促性腺激素用量及用药天数明显多于对照组;两种手术组的窦卵泡数均少于非手术组（P〈0.05）;FSH、E2均高于非手术组（P〈0.05）,而两种手术组间无显著差异（P〉0.05）。患者手术侧卵巢与未手术侧相比,卵巢虽小,但无显著性差异;窦卵泡数,HCG注射日直径≥14mm的卵泡数均明显少于对照组（P〈0.05）。结论不同手术方式剔除卵巢子宫内膜异位症囊肿对IVF-ET结局无明显影响,但可影响卵巢功能,减低卵巢储备能力。     

补充DHEA对卵巢储备功能降低患者TVF＋ET的影响

目的探讨补充脱氢表雄酮对卵巢储备功能降低患者卵巢功能及IVF—ET妊娠结局的影响。方法选择89例进行IVF／ICSI—ET的DOR患者进行随机对照研究,对照组为未服用DHEA的患者（n=47）。研究组（n=42）患者口服DHEA75mg／d,3个月后接受IVF—ET周期。分析比较研究组患者服用DHEA前后卵巢储备功能指标（基础卵泡数、基础内分泌水平等）;同时比较两组患者IVF周期治疗参数（获卵数、受精率、卵裂率、胚胎种植率、周期取消率、临床妊娠率、流产率等）的变化。结果研究组用药后FSH值较前下降（P〈0．05）,窦卵泡数较前增加（P〈0．05）;DHEA预治疗组较对照组基础卵泡计数、获卵数较对照组均显著增加（P〈0．05）,促排周期中Gn总量明显低于对照组（P〈0．05）,胚胎种植率、临床妊娠率呈提高趋势（P〉0．05）,周期取消率呈降低趋势（P〉0．05）,而卵裂率、受精率、流产率无差异（P〉0．05）。结论对卵巢储备功能降低患者补充DHEA能有效改善其卵巢储备功能,提高卵巢反应性,增加促排卵效果,进而提高IVF—ET的临床妊娠率。     

卵母细胞线粒体移植对年老小鼠植入前胚胎线粒体膜电位的影响

目的探讨卵母细胞线粒体移植（MIT）对年老小鼠植入前胚胎线粒体膜电位(△Ψm)的影响。方法6～8周龄雌性昆明种小鼠经超排卵、卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)及培养液空注后形成的胚胎为A组,12月龄雌性昆明种小鼠经同样处理后形成的胚胎为B组,12月龄雌性昆明种小鼠经超排卵、ICSI及MIT后形成的胚胎为C组。比较植入前各阶段3组胚胎的△Ψm以及各组胚胎植入前各阶段△Ψm的变化趋势。结果在二细胞期和桑椹胚期,A、C两组胚胎△Ψm均高于B组（P＜0.01）,而在四细胞期、八细胞期和囊胚期,A、C两组胚胎△Ψm亦均高于B组（P＜0.05）。3组中,桑椹胚和囊胚△Ψm均高于二细胞期、四细胞期和八细胞期胚胎（P＜0.05）,而前两者间以及后3者间差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论卵母细胞MIT可明显提高年老小鼠植入前胚胎各阶段△Ψm,且不改变其变化趋势。     

应用PK刀和热能刀行腹腔镜下卵巢囊肿剥离术对卵巢储备功能的影响

目的:探讨应用PK刀和热能刀两种不同刀具行腹腔镜下卵巢囊肿剥离术对术后卵巢储备功能的影响。方法:选取采用PK刀和热能刀两种不同刀具行腹腔镜下卵巢囊肿离的患者80例,其中PK刀组(A组)40例,热能刀组(B组)40例。所有患者于术前、术后1个月及3个月分别抽血检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、血清基础抑制素B(INHB)及阴道超声探测窦状卵泡数(AFC)以判断卵巢储备功能。结果:两组病例在术后1月均出现E2、INHB下降及FSH、LH增高,AFC的比较差异有统计学意义(P<0.05)。PK刀组与热能刀组术后3个月E2、INHB、FSH、LH、AFC的比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:腹腔镜下采用PK刀行卵巢囊肿剥除术较热能刀易造成卵巢储备功能降低。     

促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母细胞体外培养中的应用

目的 评价卵泡刺激素和人绒毛膜促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母细胞体外培养过程中的应用价值。方法 收集控制性超促排卵周期行单精子显微注射(ICSI)过程中得到的未成熟卵母细胞(MⅠ期和GV期), 随机分为加促性腺激素培养组和不加促性腺激素培养组, 培养24~28 h后成熟卵母细胞进行ICSI授精, 并观察胚胎发育情况, 记录成熟率、受精率、卵裂率和优胚率。结果 对于MⅠ期卵母细胞, 是否使用促性腺激素不影响其24 h成熟率、受精率、分裂率和优胚率(P>0.05)。对于GV期卵母细胞, 培养液中加入促性腺激素能提高优质胚胎率(31.3% vs 4.2%, P<0.05), 但两组的成熟率、受精率和卵裂率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 控制性超促排卵中获得的未成熟卵母细胞进一步体外培养, 无论是否添加促性腺激素都可自然成熟, 在GV期卵母细胞的体外培养过程加入促性腺激素可获得更高的优胚率。