初发SLE患者Th1/Th2及其调控因子基因的研究

目的探讨未经药物治疗初发狼疮病人Th1/Th2细胞亚群分布及其调控细胞因子基因表达的差异. 方法运用三色荧光标记流式细胞术检测35例初发狼疮病人细胞亚群分布,并以10例正常人作对照;ABI*#7700 real-time PCR法同时检测38例病人和28例正常人IL-10、IL-12P35、IL-12P40、IL18 mPNA表达水平的差异. 结果1.初发狼疮病人Th1较正常人明显减低(P＜0.05),但Th1/Th2无显著性改变.2.与正常组相比,SLE组病人IL-12P35、IL-12P40、IL-18mRNA及其受体表达较正常人明显降低(P均＜0.05);3.面部红斑组病人Th1/Th2、IL-12P35较正常组降低(P均＜0.05);4.RNP阳性组病人IL-12P40较正常组升高,IL-12P35、IL-18较正常组降低(P均＜0.05);5.有关节炎较无关节炎患者IL-18RmRNA表达升高(P＜0.05). 结论SLE是一种以Th1细胞下降,Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病,源于诱导向Th1细胞分化的一系列细胞因子及其受体减少和细胞因子间失衡所致.     

系统性红斑狼疮患者外周血Th1和Th2平衡的研究

目的 通过检测系统性红斑狼疮（SLE）患外周血中CD4^ 和CD8^ T淋巴3细胞分泌细胞因子的情况以及γ干扰素（IFN-γ)和白介素－4（IL－4）的水平，探讨T淋巴细胞亚群与SLE发病的关系。方法 采用流式细胞术分析SLE患和正常健康人外周血中淋巴细胞内细胞因子（IFNγ、IL－4）和表面抗原（CD4、CD8），用Dot blot法检测IFN－γ和IL－4mRNA的表达。以ELISA法测定血清中IFN－γ和IL－4的水平。结果 与对照组相比，SLE患外周血中1类辅助T细胞（Th1)、Th1/Th2比率、IFN－γmRNA的表达和IFN－γ水平和IFN－γ／IL－4比值均明显降低（P＜0．01），而Th2细胞、Th0细胞和IL－4 mRNA表达的水平及其外周血中IL－4的水平则无明显改变（P＞0．05）。结论 在SLE患外周血中，Th1细胞的数量及其分泌的细胞因子的水平均明显下调，提示Th1/Th2细胞的失衡在SLE发病中有着重要的作用。     

口服抑毒高干产液对慢性乙型肝炎患者Th1／Th2细胞因子的调节作用

目的：研究抑毒调平液对慢性乙型肝患者Th1/Th2细胞因子的影响。方法：60例慢性乙型肝炎（中度）患者按随机双盲原则分为治疗组、对照组（每组30例）。两组分别口服抑素调平液或安慰剂。收集治疗前，治疗后停药时及停药3月末空腹血清标本，用酶联免疫吸附法检测细胞因子白细胞介素－2、白细胞介素－4、白细胞介素IL－2、IFN－γ、IL－12的水平及IFN－γ／IL－4明显低于正常人（P＜0．05），IL－4的含明明显于正常人（P＜0．05），治疗组与对照组患者间上述各项指标比较均无明显差异（P＞0．05）；治疗后停药时，停药3月末治疗组IL－2、IL－12、IFN－γ、IFN－γ／IL－4的值持续增加（P＜0．05），IL－4持续下降（P＜0．05），而对照组无明显变化（P＞0．05）。结论：抑毒调平流上调血清中IL－2、IL－12、IFN－γ的含量及IFN－γ／IL－4的比值，调IL－4的代名词，促使Th1/Th2分泌的细胞因子比值恢复平衡，至少维持治疗结后3个月。     

系统性红斑狼疮患者外周血T辅助细胞因子的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中T辅助细胞因子Th1和Th2的表达情况。方法：用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测了10例正常人和8例活动期SLE患者血清中的白细胞介素2（IL－2）、白细胞介素4（IL－4）、白细胞介素10（IL－10）、γ干扰素（INF－γ）的表达水平。结果：与正常人相比，活动期SLE患者外周血中IL－2的表达水平降低（P＜0．05），IL－10的表达水平增高（P＜0．01），而INF－γ与IL－4则无显著性差异（P＞0．05。结论：活动期SLE患者中Th12细胞因子表达为IL－2的下调，Th2细胞因子表达为IL－10的上调，可能在SLE发病机制中起一定的作用。     

乙型病毒性肝炎患者外周血T辅助细胞1，2型细胞因子含量的测定及临床意义

目的：探讨Th1,Th2细胞因子在乙型肝炎发病中的作用。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测10例急性乙肝患者,35例慢性乙肝患者及12例正常对照者外周血单个核细胞（PBMC）在植物凝血素（PHA）和脂多糖（LPS）刺激下,产生白细胞介素－10（IL－10）,γ-干扰素（IFN－γ）及白细胞介素－12（IL－12）的水平。结果：（1）所有患者在PBMC培养上清液中,3种细胞因子的水平均显著高于正常对照（P均＜0．05）,与慢性乙肝组相比,急性乙肝组IL－10较低（P＜0．01）,而IFN－γ,IL－12较高（P＜0．05）,慢性乙肝轻,中,重度3组间呈现重度＞中度＞轻度,但是差异无显著性（P均＞0．05）,（2）IL－12,IFN－γ水平与血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）及总胆红素（TBIL）呈正相关（r=0.6,0.7,p均＜0．01,r=0.6,0.6,P均＜0．05）;而与病毒含量呈负相关（r=-0.75,-0.73,P均＜0．05）,IL－10与ALT,TBIL无相关性（r=0.03,0.05,P均＞0．05）,（3）Th2/Th1比值,与正常相比,慢性患者较高,急性患者较低,差异均有显著性（P＜9．0．05）;急性患者明显低于慢性患者（P＜0．05）,慢性轻度组高于慢性中,重度组（P＜0．05）,而后二组间无明显差别（P＞0．1）。结论。Th2细胞因子与HBV感染的慢性化有关,当Th1型细胞因子占优势时,则倾向于发生急性自限性乙型肝炎,Th1细胞因子与肝组织的炎症活动相关。并且有利于病毒清除。     

系统性红斑狼疮患者Th0、Th1和Th2细胞水平检测

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血辅助性T淋巴细胞（Th）亚群在SLE发病中的作用。方法采用流式细胞术对SLE患者和正常人外周血中T淋巴细胞内细胞因子（IFN-γ、IL-4）和表面抗原（CD4）进行分析;记录患者临床资料,根据临床表现及系统性红斑狼疮活动指数（SLE-DAI）分组。结果与正常对照组比较,SLE患者外周血中Th2细胞百分比升高（P〈0．05）,Th1／Th2比值降低（P〈0．05）。Th1、Th2细胞百分比在SLE组与正常对照组之间差异无显著性（P〉0．05）。SLE患者SLEDAI〉10组Th1／Th2比值低于SLEDAI≤10组和正常组（P〈0．05）。Th2细胞百分比在SLEDAI〉10组显著升高（P〈0．05）。与阴性对照组比较,伴有口腔溃疡SLE组其Th1细胞百分数降低,有关节炎组其Th2细胞百分数升高。Th1／Th2比值与SLEDAI积分成负相关;Th0与血清补体C3成正相关。24h尿蛋白定量、白细胞数、血小板数与Th1、Th2、Th0及Th1／Th2比值无相关性。结论SLE患者体内存在Th2优势活化状态,活动期SLE患者Th1／Th2失衡尤其突出;Th亚群细胞失衡在SLE发病中有着重要作用。     

肺癌Th1／Th2反应状态及黄芪的调节作用

目的：探讨肺癌细胞株以及荷瘤机体外周血单个核细胞（PBMC）Th1/Th2免疫反应状态,中药黄芪（AG）对两者Th1/Th2状态的作用,方法：（1）3种人肺癌细胞（鳞,腺,小细胞癌）各分为5组,其中1组即刻冻存待测,其余4组分别为不加药对照组,加5％AG,10％AG,20％AG组,培养48h,收集细胞;（2）采集并分离肺癌患者和健康志愿者的PBMCs,各分为4组,其中1组即刻冻存待测,其余3组分别为不加药对照组,加10％AG,20％AG线,培养48h,收集细胞,以IL－2,IFN－γ代表Th1型细胞因子,IL－4,IL－6,IL－10代表Th2型细胞因子,用RT－PCR方法检测各组肺癌细胞株和肺癌患者PBMC中Th1/Th2型细胞因子m-RNA的表达,结果：（1）3种肺癌细胞株的Th1型因子IFN－γ和IL－2均无表达,Th2型因子IL－4,IL－6,IL－10则均表达;经与黄芪培养后,小细胞肺癌在3种不同浓度AG存在时均可出现IFNγ表达,在5％AG时可同时出现IL－2的表达,IL－4,IL－6的表达被抑制,鳞癌和腺癌细胞株经黄芪培养后,其Th1/Th2型细胞因子的m-RNA表达与培养前异差异无显著性（P＞0．05）;、（2）肺癌患者PBMC中,IL－4,IL－6,和IL－10表达阳性率显著高于正常对照（P均＜0．05）,而IL－2无1例表达（0／23）,IFN－γ仅1例表达;经与黄芪培养后（两种浓度）,肺癌患者Th2型因子与未加AG培养组相比,IL－4,IL－6和IL－10的表达率下降（P均＜0．05）;而IL－2的表达率显著提高（P＜0．05）,结论：无论肺癌细胞株还是荷瘤机体外周血的免疫细胞的呈现Th2型免疫反应的优势状态;黄芪对于肺癌细胞株和宿主PBMCsTh1/Th2的状态有良好的凋节作用,可使肺癌细胞株和肺癌患者PBMCs的Th2型优势免疫反应向Th1方向逆转。γγγγ     

系统性红斑狼疮患者外周血Th1/Th2细胞平衡的研究

目的：探讨Th1／Th2细胞因子失衡与系统性红斑狼疮（SLE）发病的关系，为研究SLE的免疫发病机制提供新的思路，为SLE患者的临床诊断和治疗提供实验依据。方法：运用三色荧光标记法流式细胞术检测35例SLE患者（狼疮性肾炎组和不伴狼疮性肾炎组）和正常对照组20例外周血中Th1和Th2胞内细胞因子γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）的分泌情况。结果：（1）狼疮性肾炎（LN）患者Th1及Th1／Th2比值较对照组明显升高（P〈0．01）。（2）不伴有LN的SLE患者Th1较对照组降低（P〈0．05）。（3）LN患者Th1及Th1／Th2比值较不伴有LN的SLE患者明显升高（P〈0．01）。结论：伴有LN的SLE患者Th1细胞功能亢进，具有Th1优势。不伴有LN的SLE是一种Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病。     

SLE患者血清IL—4、IFN—γ水平测定及意义

目的：通过检测系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE)患血清细胞因子细胞介素－4（interlukin-4,IL-4)，γ－干扰素（interferon-gamma,IFN-γ）水平，探讨T淋巴细胞亚群与SLE发病的关系。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定SLE患和健康志愿血清IL－4和IFN－γ水平。结果：（1）SLE活动组血清IL－4水平和IL－4／IFN－γ值明显升高，与非活动组、对照组比较有显性差异（P＜0．001）。（2）血清IFN－γ水平3组（SLE活动组，非活动组和对照组）间比较差异无显意义（P＞0．05）。（3）SLE患激素治疗后血清IL－4水平明显降低。结论：IL－4、IFN－γ作为区分CD4T细胞亚群的指标之一，间接反映了Th1,Th2细胞活化状态；SLE患血清IL－4水平，IL－4／IFN－γ值明显升高，且与病情活动性相关；IFN－γ水平无明显变化，说明活动性SLE患存在Th2细胞优势活化状态，破坏了体人Th1/Th2正常平衡状态。血清IL－4水平可作为SLE病情活动性监测指标之一，并可作为疗效判断指标之一。寻找有效方法调节SLE患血清IL－4水平，从而调节体内Th1-Th2平衡，将为治疗SLE开辟一条新途径。     

TH1/TH2在慢性丙型肝炎发病机制中的作用

目的 研究Th1/Th2变化在慢性丙型肝炎发病机制中的作用。方法 采用双抗体酶联分析法检测了20例正常人,35例慢性丙型肝炎,30例慢性乙型肝炎患血清中的IFN－γ,IL-2,IL－4和IL－6的水平。结果 慢性丙型肝炎组Th2类细胞因子（IL－4,IL－6）水平明显高于正常对照组（P＜0．05）,Th1类细胞因子水平IL－2也增高（P＜0．05）,然而,Th1类细胞因子IFN－γ水平有增加趋势,但无统计学差异（P＞0．05）。Th2类细胞因子水平比Th1类细胞因子水平高。结论 Th2类细胞因子水平增高以及由此引起的Th1/Th2比值下降可能与慢性丙型肝炎的病程持续有关。     

SLE患者雌激素受体α基因多态性与Th1/Th2细胞因子漂移的相关性

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE) 患者雌激素受体α基因多态性与Th1/Th2 细胞因子漂移的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）方法检测ERα基因1号内含子Xba-Ⅰ和PvuⅡ酶切位点多态性，RT-PCR方法检测外周血单个核细胞（PBMC）IL-10、IL-4、IFN-γ及IL-2mRNA的表达。结果PpXx基因型SLE患者IL-10和IL-4的表达比对照组升高(P＜0.01，P＜0.05)； Ppxx基因型SLE患者IFN-γ、IL-2表达比对照组降低(P＜0.05)；在对照组，4种细胞因子表达差异均无统计学意义。结论不同的ER基因型与不同个体中细胞因子的表达显著相关，ER的不同基因型有可能在一定程度上作为基因背景影响体内细胞因子的表达。     

The relationship between Th1/Th2-type cells and disease activity in patients with systemic lupus erythematosus

Objective To investigate the imbalance of Th1/Th2-type cytokines in patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and its relation to disease activity. Methods Intracellular cytokines were determined by flow-cytometry following whole-blood culture. Results Patients with systemic lupus erythematosus disease activity index (SLEDAI) >10 had statistically significantly fewer CD4(+)or CD8(+)T cells producing IFN-γ than patients with SLEDAI =0, SLEDAI 1-10 or healthy controls (P<0.01, P<0.01 or P<0.05, respectively). Patients with SLEDAI>10 also had decreased ratio of IFN-γ/IL-4 positive CD4(+)or CD8(+)T cells, compared with patients with SLEDAI =0, SLEDAI 1-10 or healthy controls (P<0.05). The decreased Th1 or Tc1 cells and the ratios of IFN-γ: IL-4 positive CD4(+)T-cells were significantly correlated with disease activity (P<0.05). Conclusion SLE is characterized by an imbalance of Th1/Th2 and Tc1/Tc2 cytokines. The decreased Th1 or Tc1 cells and the Th1/Th2 ratio are related to disease activity.     

系统性红斑狼疮患者Th1／Th2相关转录因子的基因表达

目的：探讨转录因子对T细胞分化的影响及它们和细胞因子在系统性红斑狼疮（SEE）发病机制中的作用。方法：利用实时荧光定量PCR技术检测SLE患者、正常人外周血单核细胞（PBMC）中T—bet和GATA-3 mRNA表达状况;用ELISA检测SLE患者、正常人血清中IL-10和TGF-β水平。结果：SLE患者T—bet mRNA表达低于正常人,差异具有显著性（P〈0．05）;SLE患者GATA-3mRNA表达明显高于正常人,具有统计学差异（P〈0．05）。SLE患者IL-10明显高于正常人,差异具有统计学意义（P〈0．05）;SLE患者TGF-8与正常人差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：SLE患者Th1／Th2免疫不平衡占优势,调节Th1细胞的转录因子T—bet表达降低。调节Th2细胞的转录因子GATA-3表达升高,细胞因子IL-10水平升高,TGF—β没有明显变化。     

皮质类固醇激素对系统性红斑狼疮患者Th细胞因子平衡的影响

目的：探讨皮质类固醇激素治疗对系统性红斑狼疮（SLE）患者Th1/Th2细胞因子平衡的影响。方法：对58例SLE患者，于皮质类固醇激素治疗前后采用ELISA法检测其血清中Th1,Th2细胞因子水平，比较其差异。结果：皮质类固醇激素治疗前SLE患者体内Th1,Th2类细胞因子水平均显著高于正常人（P＜0.05）；在治疗后SLE患 本内上述细胞因子水平均较治疗前降低（P＜0.05），但Th1类细胞因子较Th2类细胞因子降低更为显著（P＜0.05）。结论：SLE患者经皮质类固醇激素治疗后，体内Th细胞因子平衡向Th2偏移，这可能为皮质类固醇激素治疗SLE患者机制之一。     

卡莫氟对强直性脊柱炎Th1/Th2类细胞因子表达影响的研究

目的：观察卡莫氟(1-hexylcarbamoyl-5-fluorouracil,HCFU) 和柳氮磺胺吡啶(sulfalazine,SSZ)治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)后体内Th1/Th2类细胞因子的变化。方法：19例AS患者随机分为2组，分别给予HCFU(9例)和SSZ （10例），RT-PCR检测其治疗前后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）mRNA片段的表达。结果:HCFU治疗后AS患者PBMC中IFN-γ、TNF-α mRNA的表达率分别为33.33%、44.44%，与治疗前相比差异有统计学意义（P＜0.05），IL-2、IL-4及IL-6 mRNA的表达差异无统计学意义。SSZ治疗后AS患者PBMC中IFN-γ mRNA的阳性表达率为70%,半定量结果显示，治疗后PBMC中IFN-γ mRNA的表达水平明显降低（P＜0.05)。80% AS患者在治疗后PBMC中IL 4 mRNA呈阳性表达，较治疗前21.05%明显升高（P＜0.05）。IL-2、IL-6和TNF-α mRNA的表达无明显变化（P＞0.05）。结论：HCFU能使TNF-α mRNA表达降低，促进AS患者的免疫应答从Th1型向Th2型转变，小剂量即可使病情缓解。SSZ未发现对TNF-α mRNA表达有明显影响，可促使AS患者的免疫应答从Th1型向Th2型转变。     

系统性红斑狼疮患者外周血辅助性T细胞亚型和细胞因子的检测及其临床意义

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中产生白细胞介素22（IL-22）的辅助性T 细胞(Th)亚型Th22、Th17和Th1及其细胞因子的表达水平变化及其临床意义,为治疗SLE提供依据。方法：选取30例初发SLE患者（SLE组）和30名健康对照者（健康对照组）,采用流式细胞术检测2组研究对象外周血中Th22、Th17 （IL-22+Th17和IL-22－Th17）、Th1（IL-22+Th1和IL-22－Th1）细胞表达比率;ELISA法检测2组研究对象血浆中IL-22、IL-17和干扰素γ（IFN-γ）等细胞因子的表达水平;细胞比率和细胞因子表达水平之间相关性分析采用Spearman相关检验。结果：与健康对照组比较,SLE组患者外周血中IL-22+Th1、Th17和Th22细胞的比率明显升高（P<0.05）,SLE患者血浆中IL-17和IL-22的表达水平亦明显升高（P<0.05）;SLE患者Th22细胞比率与Th17（IL-22+和IL-22－）细胞比率之间呈正相关关系（r=0.721,P<0.0001;r=0.222,P=0.0132）,Th22细胞比率与血浆中IL-22的水平呈正相关关系(r=0.0326,P<0.0001)。SLE患者IL-22+CD4+T和IL-22－Th17细胞的比率随着疾病活动指数(SLEDAI)的升高而升高（r=0.549,P=0.0003;r=0.231,P=0.028）。有颜面部红斑或脱发、抗核抗体（ANA）阳性的SLE患者外周血中Th22细胞的比率均显著升高（P<0.05）;光过敏或抗dsDNA阳性的SLE患者Th17（包括IL-22+和IL-22－Th17）细胞的比率上升（P<0.05）。结论：以Th22为主的IL-22+ CD4+T细胞及其细胞因子IL-22可能在SLE的发病中起致病性作用,并可作为监测疾病严重程度的生物指标。     

白念珠菌性外阴阴道炎患者Th1/Th2细胞因子的研究

目的:观察白念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物Th1/Th2细胞因子水平,探讨其在阴道局部免疫功能中的作用.方法:采用ELISA检测阴道分泌物中细胞因子IFN-γ、IL-12、IL-4及IFN-γ,IL-4表达情况.结果:念珠菌性外阴阴道炎组(VVC组)阴道灌洗液细胞因子IL-12明显高于正常对照组及复发性念珠菌性外阴阴道炎组(RVVC组)(P<0.05),RVVC组与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05);IFN-γ、IL-4在VVC组与RVVC组间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于正常对照组(P<0.05);VVC组与RVVC组IFN-γ/IL-4值均低于正常对照组(P<0.05).结论:VVC患者阴道局部存在Th2细胞极化,抑制Th1细胞增殖及免疫功能的发挥,局部免疫功能紊乱降低了对念珠菌感染的抵抗力.     

慢性心衰患者 Th1与 Th2型细胞及 Treg细胞的表达

目的探讨Th1、Th2型细胞及Treg细胞在慢性心衰发病中的作用机制。方法采用RT-PCR技术检测62例慢性心衰患者和42例正常人外周血单个核细胞中T—bet、GATA-3及Foxp3mRNA的表达水平;ELISA法检测血浆中Th1／Th2型细胞因子IFN-γ／IL-4水平。结果慢性心衰患者T-bet表达水平高于正常对照组,GATA-3及Foxp3表达水平低于正常对照组（均P〈0．05）。慢性心衰组患者血浆中IFN-γ水平及IFN-γ／IL-4高于对照组（均P〈0．01）。结论慢性心衰患者T-bet／GATA-3及IFN-γ／IL-4升高,Foxp3降低,提示Th1细胞亚群表达升高,Th2型细胞及CD4＋、CD25＋调节性T细胞减少,细胞免疫异常可能参与慢性心衰的发病机制。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD3+CD56+自然杀伤样T细胞体外活化特性研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD3+CD56+自然杀伤样T(NKT样)细胞的表达以及体外活化后的增殖能力和生物学特性。方法采用流式细胞仪检测30例SLE患者(疾病活动组20例,稳定组10例)和20例正常对照组外周血CD3+CD56+NKT样细胞的表达及不同体外刺激活化后的增殖能力。通过检测Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素(IL)-4表达水平来判断其在调节炎症免疫反应中的作用。结果 SLE患者外周血CD3+CD56+NKT样细胞的表达明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而SLE疾病活动组与稳定组之间差异无统计学意义。与佛波酯(PMA)和离子霉素的非特异性刺激相比,经抗CD3单克隆抗体和IL-2特异性诱导刺激对CD3+CD56+NKT样细胞的增殖能力更强,Th1型细胞因子IFN-γ表达水平更高,差异有统计学意义(P<0.05),而Th2型细胞因子IL-4在两种刺激条件下几乎均不表达。结论 CD3+CD56+NKT样细胞通过分泌Th1型细胞因子IFN-γ来调节炎症免疫作用,SLE的发病可能与外周血CD3+CD56+NKT样细胞表达数量减少及其免疫功能严重失调有关。