高效液相色谱法同时测定人血阿莫西林钠/克拉维酸钾血药浓度

目的建立阿莫西林钠/克拉维酸钾人血药浓度的色谱分析方法。方法采用对乙酰氨基酚为内标,人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后高速离心进样;色谱柱:C18色谱柱(依利特Hypersil BDS,5μm,4.6mm×150mm);流动相:乙腈-0.05mmol/L磷酸盐缓冲液=10∶90(V/V,磷酸调pH至2.3);紫外检测波长:220nm;流速:1.0ml/min;柱温:25℃。结果克拉维酸钾、阿莫西林钠及内标物对乙酰氨基酚保留时间分别为5.3、7.2、8.5min,人血浆中内源性杂质对目标物的测定没有干扰。阿莫西林钠在0.52~4.16μg/ml范围线性良好(r2=0.9996),克拉维酸钾在0.266~2.14μg/ml范围线性良好(r2=0.9998);阿莫西林钠和克拉维酸钾的最低检测浓度分别为0.065和0.066μg/ml。;阿莫西林钠的相对回收率分别为95.9%~96.5%(n=5),克拉维酸钾的相对回收率分别为92.5%~98.8%(n=5),阿莫西林钠日内RSD为1.84%~6.4%,日间RSD为2.1%~7.8%;克拉维酸钾日内RSD为3.57%~8.6%,日间RSD为1.8%~9.1%。结论本方法简便、准确、灵敏、特异性强、重现性好,可作为同时测定人血浆中阿莫西林钠/克拉维酸钾浓度方法 。     

固相萃取-反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中羟基积雪草苷的浓度

目的:建立大鼠血浆中羟基积雪草苷测定的高效液相色谱法.方法:固相萃取法对样品进行纯化处后,选用Welchrom-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),水-乙腈(24:76)为流动相测定药物含量;流速:1.0ml/min;紫外检测波长:225 nm;柱温:30℃;内标:葫芦素B.结果:在此色谱条件下,羟基积雪草苷和内标葫芦素B的保留时间分别为5.11 min和8.14min.线性范围为5μg/ml～1.5 mg/ml(r=0.9998),最低检测浓度为1μg/ml.方法回收率在90.21%～95.65%,提取回收率在80.65%～87.04%.日内与日间精密度的RSD在1.31%～3.07%(n=5).结论:该检测方法简便可靠,选择性和重现性好,符合常规生物样品检验的要求,可用于羟基积雪草苷在大鼠体内的药代动力学研究.     

高效液相色谱法测定人血浆中甲苯咪唑含量

目的建立固相萃取、反相高效液相色谱测定人血浆中甲苯咪唑的方法。方法血浆加入阿苯哒唑为内标,以0.5mol/L的硼砂NaOH缓冲液3ml碱化后经乙醚提取,固相萃取,进行HPLC测定,采用HypersilBDSC18(4.6mm×200mm5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1mmol/L(NH4)2SO4溶液(60∶40,V/V);流速1.0ml/min;检测波长310nm。结果甲苯咪唑血药浓度为0.05～1.6μg/ml,峰面积与血药浓度呈线性关系,方法平均回收率为97.21%。平均RSD为3.56%;最低检测限为0.02μg/ml。结论该方法符合生物样品分析要求,为甲苯咪唑的体内含量测定提供了一种简便、准确、灵敏度高的分析方法。     

顶空气相色谱法测定二氯乙酸二异丙胺尿药浓度

目的:建立顶空气相色谱法测定尿中二氯乙酸二异丙胺浓度.方法:Agilent DB-5MS毛细管色谱柱(30m×0.25mm),柱温:40℃保持2min,以5℃/min升至80℃保持2min,再以20℃/min升至200℃保持8min;进样口温度200℃,分流比5:1;氢火焰检测器,检测温度300℃;载气为高纯N2,流速1ml/min,H235ml/min,空气350ml/min;内标仲丁醇.结果:标准曲线线性范围为8～800μg/ml,尿中二氯乙酸二异丙胺提取回收率为88.75%～98.06%,相对回收率为97.36%～103.25%,日内和日间RSD分别为2.95%～6.62%和2.45%～5.61%,最低检测浓度为2μg/ml.结论:该法操作简单,杂质干扰小,提取回收率高,适合于二氯乙酸二异丙胺尿药浓度的测定.     

RP-HPLC荧光法测定人血浆中替米沙坦浓度

目的建立人血浆中替米沙坦浓度RP-HPLC荧光检测法。方法以缬沙坦为内标定量血浆中替米沙坦的浓度,血浆样品在酸性条件下用苯萃取后氮气吹干,残留物用流动相复溶后直接进样。样品分离用ZORBAXEclipseXDB-C18柱(4.6×150mm,5μm)和填充相同材料的预柱(4.6×12.5mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-10mmol/L磷酸二氢钾溶液(pH3.2)(5∶40∶55,v/v/v),流速为1.0mL/min,进样体积为20μL,荧光检测激发波长为250nm,发射波长为375nm,柱温为25℃。结果血浆中内源性物质不干扰测定结果,替米沙坦和内标的保留时间分别为8.8min和10.7min。在浓度1μg/L~180μg/L范围内线性关系良好,线性方程:A=0.2769R+0.03788,相关系数r=0.9995,检测限为1μg/L。浓度为2.0、30.0、70.0μg/L血浆质控样品的平均回收率分别为97.53%、104.6%和105.1%。低、中、高浓度血浆质控样品的日内和日间相对标准偏差(RSD)均小于7%。结论本研究建立的血浆中替米沙坦的浓度测定方法,具有准确、快速、简单,灵敏度高、线性范围宽等特点。该方法更适于替米沙坦血药浓度测定及替米沙坦药物代谢动力学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中氟康唑浓度及其应用

目的:建立测定人血浆中氟康唑浓度的RP-HPLC法,并应用于临床药代动力学研究.方法:采用二氯甲烷萃取,高效液相色谱法检测,以单硝酸异山梨酯为内标,Phenomenx C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,4 μm),流动相为乙腈-水-冰醋酸(25:75:0.2),流速为1.0 ml/min;检测波长为261 nm.结果:血浆中内源性物质不干扰氟康唑的检测,氟康唑的线性范围为0.125～8.000 μg/ml,批内、批间精密度均小于15%,低、中、高浓度的(0.25 μg/ml、1 μg/ml和4 μg/ml)平均提取回收率分别为100.0%、98.8%、86.7%.结论:该法操作快速、简单、准确,符合生物样品检测要求,可用于临床药代动力学研究中大批量血样的处理.     

LC-MS/MS法同时测定Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷的含量

目的:建立同时测定Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷的LC-MS/MS分析方法。方法:以芦丁为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白处理,采用Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水(25:75)为流动相,流速为0.4 ml/min,柱温20℃;采用ESI(+)离子源,MRM扫描检测离子对为柚皮苷m/z 581→273、新橙皮苷m/z 611→303、芦丁(内标)m/z611→303。结果:血浆中柚皮苷在0.025～2.5μg/ml、新橙皮苷在0.015～1.5μg/ml浓度范围内线性关系良好,二者的方法回收率均近100%,分析方法的日内日间精密度RSD值均小于10%,内源性物质不干扰样品测定。结论:本方法简便、准确、灵敏度高、专属性好,适用于Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷测定及其体内药代动力学的研究。     

高效液相色谱法同时测定大鼠血浆中康普瑞汀A4肉豆蔻酸酯及其活性代谢产物康普瑞汀A4含量

目的：建立同时测定大鼠血浆中康普瑞汀A4肉豆蔻酸酯（CA4-14）和康普瑞汀A4（CA4）的HPLC含量测定方法。方法以甲萘酚作为内标,Agilent Eclipse plus C18柱（4.6 mm ×250 mm,5μm）,流动相乙腈（A）-0.4%甲酸水溶液（B）进行梯度洗脱,柱温为30°C,流速1.0 ml/min,检测波长295 nm,进样量20μl。结果大鼠血浆中CA4-14与CA4质量浓度分别在0.2～100（r2=0.9980）和0.05～50μg/ml（r2=0.9999）范围内呈良好的线性关系。CA4-14与CA4最低定量限分别为0.2和0.01μg/ml,平均萃取回收率分别为93.79%和96.81%,RSD分别为1.94%和3.11%。结论方法简便、快速、准确、精密度高,适合大鼠血浆中CA4-14和CA4的含量分析。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中奥美拉唑的浓度

目的建立测定奥美拉唑血药浓度的反相高效液相色谱法,考察样品提取及色谱分离条件.方法血浆中加入内标尼美舒利后,用以乙醚提取,进行高效液相色谱法检测.以Dikma Technologies C18柱,甲醇:水:三乙胺:冰醋酸(60:40:0.5:0.5)为流动相进行色谱分离.流速1.0ml/min,检测波长302nm.结果奥美拉唑浓度在50～1 800ng/ml范围内线性良好,r=0.9995.测定浓度为15、100、1 500ng/ml的血浆样品,其日间及日内的RSD分别为0.86%、6.7%、4.93%和3.04%、4.25%、5.22%(n=5).3种浓度的提取回收率分别为77.74%、79.44%和86.30%.结论方法简便、准确、灵敏,可用于奥美拉唑血药浓度的测定.     

高效液相色谱法测定杀线威的含量

目的建立测定杀线威的高效液相色谱法。方法采用C18色谱柱,以甲醇—水(85∶15)为流动相,流速0.8 ml/min,检测波长234 nm,选用灭多威为内标物,内标法测定杀线威原料药的含量。结果在杀线威浓度为2μg/ml~80μg/ml范围内,杀线威色谱峰面积(AS)和内标灭多威色谱峰面积(AM)的比值(RS/M)与杀线威的浓度(C)呈良好的线性关系,线性方程为:RS/M=6.53×10-2C+4.91×10-3,r=0.999 8(n=6),待测样品杀线威与内标物的色谱峰分离完全,二者分离度R>1.5,高、中、低三种浓度的加样回收率100.2%、99.12%、98.82%,日内精密度(RSD)小于0.67%。结论该方法灵敏、快速,操作简便,测定结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定人血清中氨苄西林、丙磺舒的浓度研究

目的:建立测定人血清中氨苄西林、丙磺舒浓度的高效液相色谱法。方法:(1)氨苄西林,以诺氟沙星为内标,血清样品用0.6%的高氯酸沉淀蛋白后进行测定;色谱柱为HigginsTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为有机相(甲醇-乙腈-异丙醇,100∶2∶5,v/v):水相(0.01 mol/L磷酸二氢钾,pH3.5)=23∶77;检测波长210 nm;流速1.0 ml/min;柱温30℃。(2)丙磺舒,以缬沙坦为内标,血清样品用乙腈沉淀蛋白后进行测定;色谱柱为HigginsTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为有机相(甲醇-乙腈,400∶275,v/v):水相(乙酸-水,1∶60,v/v)=77∶23;检测波长280 nm;流速1.0 ml/min;柱温30℃。结果:氨苄西林在0.14~11.2μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 5),最低检测限为0.14μg/ml;丙磺舒在0.20~16.0μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 1),最低检测限为0.20μg/ml。结论:高效液相色谱法操作简便、灵敏、专一性好,适用于人体药动学研究。     

高效液相-串联质谱方法测定法罗培南的血浆药物浓度

目的采用高效液相-串联质谱方法测定血浆中法罗培南的药物浓度。方法色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus（100mm×2.1mm,3.5μm）,流动相：乙腈与5mmol/L醋酸铵缓冲液（含0.1%甲酸）体积比为35：65,流速为0.3ml/min,文拉法新为内标。结果法罗培南的血浆浓度在0.1～20μg/ml范围内线性良好,标准曲线方程为Y=0.2700c＋0.00242（r=0.9955,n=8）,定量下限为0.1μg/ml,日内精密度〈5.4%,日间精密度〈7.9%,回收率为99.0%～113%。结论该方法处理操作简单,结果准确,专属性强,灵敏度高,适用于法罗培南人体药动学研究及生物等效性研究。     

RP—HPLC测定拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度

目的：建立RP—HPLC法同时测定人血清中抗癫痫药拉莫三嗪和苯巴比妥浓度的方法。方法：采用AgilentZorbax XDB—C18（4．6mm×150mm,5μm）色谱柱;流动相：0．1％乙酸-乙腈,梯度洗脱;检测波长：240nm;流速：1．0ml／min。结果：拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度分别在0．02-1．00μg、0．02-3．00μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为97．62％和97．96％,拉莫三嗪2．0、20．0、40．0μg/ml日内精密度（RSD,n=5）分别为4．3％、3．9％和2．9％,日间精密度（RSD,n=5）分别为5．1％、5.4％％和3．9％;苯巴比妥5．0、20．0和50．0μg/ml日内精密度（RSD,n=5）分别为3．5％、4．2％和3．6％,日间精密度（RSD,n=5）分别为5．0％、4．7％和4．2％。结论：本方法简便、准确、重现性好,可用于临床上常规监测拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度。     

HPLC测定大鼠血浆中钩藤碱的浓度

目的建立HPLC测定大鼠血浆中钩藤碱浓度的方法。方法色谱柱为ZORBAX SB C18柱（150mm×4.6 mm,5 m）。以甲醇-水（80：20）（含0.0025 mol.L-1三乙胺,冰乙酸调pH至7.5）为流动相,检测波长为254 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,进样量为20 l。结果钩藤碱与内源性杂质有较好分离度,钩藤碱在0.39~12.50g/ml浓度范围内呈良好线性关系;最低检测浓度为0.39 g/ml;回收率大于95%;日内和日间RSD均小于7%。结论此方法准确可靠,可用于测定钩藤碱的血药浓度。     

高效液相色谱法测定不同产地土茯苓药材中落新妇苷的含量

目的：建立高效液相法测定土茯苓药材中落新妇苷含量的方法。方法：采用Luna-C18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱;流动相：甲醇-水-冰醋酸（40∶60∶0.2）;检测波长：290nm;流速：1.0ml/min。结果：落新妇苷在0.196～1.960μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为98.34%,RSD=1.80%（n=6）。结论：本方法简便、准确、重现性好,可用于土茯苓药材中落新妇苷的质量控制。     

高效液相色谱法测定饲料及食品中三聚氰胺的研究

目的：建立用高效液相色谱-二极管阵列法（HPLC-DAD）测定饲料及食品中三聚氰胺残留量的方法。方法：样品经提取分离后,用HPLC-DAD法测定,外标法定量。色谱条件：C18色谱柱（150mm×4.6mm,5μm）;流动相为乙腈-辛烷磺酸钠溶液（柠檬酸调节pH至3.0,10∶90）,流速为1.0ml/min;进样量为20μl;柱温为35℃;190～400nm波段扫描,检测波长为236nm。结果：三聚氰胺在0.5～10.0μg/ml范围内线性关系良好,相关系数R=0.99998。最低检测浓度为0.05μg/ml,回收率在89.28%～96.89%范围内,RSD〈3.5%。结论：该方法简便、快速,能满足饲料及食品中三聚氰胺残留量的检验工作需要。     

HPLC法测定小儿布洛芬口服溶液中布洛芬的含量

目的：建立高效液相法测定小儿布洛芬口服溶液中布洛芬含量的方法。方法：采用CenturySIL ODS2（4.6mm×200mm,5μm）色谱柱;流动相：醋酸钠缓冲液（取醋酸钠6.13g,加水750ml,振摇使溶解,用冰醋酸调节pH值至2.5）-乙腈（40：60）;检测波长：265nm;流速：1.0ml/min;柱温：30℃。结果：布洛芬在0.2～1.4mg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为98.1%,RSD=1.2%（n=9）。结论：本法简便、准确、重现性好,可用于小儿布洛芬口服溶液中布洛芬的质量控制。     

高效液相色谱法测定大鼠组织样品中马兜铃酸A的含量

目的建立用高效液相色谱法（HPLC）测定大鼠脾虚模型组织与血浆样品中马兜铃酸A含量的方法。方法色谱条件为HypersilODS2柱（4．6mm×250mm,5μm）,柱温30℃,流动相为甲醇：乙腈：水（0．6％冰醋酸,pH=3．60）（30：30：40）,流速为1ml／min,检测波长为250nm,20μl进样。结果空白血浆中马兜铃酸A在0．05～25μg／ml范围内与峰面积线性关系良好（Y=57672X-10065,R^2=0．9994）,提取回收率为83．46％～94．13％,方法回收率为99．67％～106．43％。低、中、高3个浓度的日内精密度RSD分别为6．28％、3．36％、1．88％,日间精密度RSD分别为9．67％、4．27％、4．56％。血浆中马兜铃酸A的最低检测浓度为0．05μg／ml,组织中最低检测浓度为0．31ng／g。结论建立的HPLC法准确、稳定、重复性好、灵敏度高,可应用于大鼠脾虚模型组织和血浆样品中马兜铃酸A的含量测定。     

RP-HPLC法测定当归芍药散中芍药苷的含量

目的：建立测定当归芍药散中芍药苷含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法,色谱柱为ODS Diamon-silTMC18（150mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-0.5%醋酸（30∶70）,检测波长为230nm,流速为1.0ml/min。结果：芍药苷在20～100μg/ml浓度范围内有良好的线性关系（r=0.9996）;平均回收率为（99.9±1.6）%,RSD为1.14%。结论：本法测定当归芍药散中芍药苷的含量,结果准确、可靠。