miR-185通过调控E2F6抑制肺鳞癌细胞增殖和侵袭

目的 探讨微小RNA-185(microRNA-185,miR-185)对肺鳞癌细胞增殖和侵袭能力的作用及其可能的作用机制.方法 人肺鳞癌细胞系(NCI-H520、NCI-H226)以及正常肺上皮细胞(BEAS-2B)为实验用细胞;qRT-PCR检测miR-185表达量;miR-NC(对照)和miR-185 mimics(miR-185类似物)利用Turbofect进行转染;Western blot检测E2F6的蛋白表达量;双荧光素酶报告基因检测miR-185与E2F6的靶向调控关系;MTT检测细胞的增殖能力;细胞侵袭试剂盒检测细胞的侵袭能力;构建pcDNA.3.1-E2F6重组载体,并转染肺鳞癌细胞过表达E2F6.结果 miR-185表达量在肺鳞癌细胞中显著降低(P＜0.01).miR-185靶向抑制E2F6基因(P＜0.05).转染miR-185 mimics显著上调miR-185的细胞含量(P＜0.01)并抑制E2F6蛋白表达(P＜0.01),肺鳞癌细胞增殖能力(P＜0.05或P＜0.01)和侵袭能力(P＜0.05)亦显著受抑.转染pcDNA.3.1-E2F6到miR-185含量升高的细胞,E2F6蛋白表达量显著升高(P＜0.01)且细胞增殖(P＜0.01)和侵袭能力(P＜0.05)上升.结论 miR-185可以通过靶向E2F6抑制肺鳞癌细胞增殖和侵袭.     

环状RNAcirc-ccnb1通过抑制细胞周期蛋白核转位对食管鳞癌增殖和迁移的影响

目的 探讨环状RNA circ-ccnb1对细胞周期蛋白（cyclinb1、ccnb1）的作用,以及对食管鳞癌增殖和迁移的影响。方法 ①收集60例食管鳞癌组织及癌旁正常组织标本,按癌组织及正常组织分为两组,通过免疫组化检测两组组织中ccnb1的表达,并分析食管鳞癌中ccnb1表达与临床病理因素（淋巴结转移、病理分期）之间的相关性。②培养食管鳞癌细胞,并分为两组：正常食管上皮细胞（Het1-A）和食管鳞癌细胞109（EC109）。采用蛋白免疫印迹法（WB）检测两组中ccnb1蛋白的表达。③用携带circ-ccnb1的质粒转染EC109,检测其中ccnb1的核转位情况,将细胞分为3组：未转染组（Blank组）、转染空载体组（Vector组）及转染circ-ccnb1组（cir-ccnb1组）。转染成功后进行核桨分离,采用WB检测转移至胞核内的ccnb1蛋白量的变化,细胞增殖实验 (CCK-8 法)及划痕实验检测细胞增殖率、迁移率。结果 食管鳞癌组织中ccnb1蛋白的表达高于正常组织,EC109细胞中ccnb1蛋白的表达高于Het1-A细胞（均P＜0.05）。与Blank组相比,cir-ccnb1组细胞中ccnb1蛋白的核转位水平明显降低,细胞增值率、迁移率降低（均P＜0.05）。结论 cir-ccnb1可以通过抑制ccnb1在食管鳞癌细胞中的核转位进而影响食管鳞癌的发展,即抑制癌细胞增殖和迁移。     

TRIM28对肺鳞癌SK-MES-1细胞生长的影响

目的：：探讨TRIM28基因对肺鳞癌细胞系SK-MES-1细胞生长的影响。方法：采用RNA干扰技术抑制肺鳞癌SK-MES-1细胞TRIM28基因的表达,通过RT-PCR和Western-blot技术检测抑制效果,应用克隆形成实验和MTT实验观察TRIM28基因被抑制后SK-MES-1细胞的增殖和活性。结果：RNA干扰技术能有效抑制TRIM28基因在肺鳞癌SK-MES-1细胞中的表达。TRIM28基因被抑制后,肺鳞癌SK-MES-1细胞的活性和生长受了到明显抑制。结论：TRIM28对肺鳞癌SK-MES-1细胞的生长具有促进作用。     

PTEN对鳞癌细胞的抑制作用及其在口腔白斑和鳞癌中的表达

目的：观察转染PTEN的鳞癌细胞的增殖情况及PTEN在口腔白斑及鳞癌中的表达,探讨PTEN基因在口腔鳞癌发展过程中的作用。方法：采用RT-PCR法从正常组织中扩增PTEN基因,构建真核表达载体pcDNA-PTEN,采用脂质体将pcDNA-PTEN转染人舌鳞癌（Tca8113）细胞系,MTT法观察转染前后细胞的增殖情况,流式细胞术检测PTEN基因转染后细胞各周期细胞所占比例。免疫组织化学技术检测口腔白斑（25例）和口腔鳞癌组织（32例）中PT
EN蛋白表达率。结果：成功构建pcDNA-PTEN载体,并获得阳性转染细胞。与空载体组相比,转染pcDNA-PTEN组的舌癌细胞系Tca8113细胞的生长抑制率具有显著性差异(P<0.01);与空载体组比较,转染PTEN基因的Tca8113细胞G0-G1期细胞数增多（P<0.01）, S期细胞减少（P<0.01）;PTEN在口腔鳞癌中表达减少或缺失,且与组织分化程度明显相关（P<0.05）。结论：PTEN的表达可抑制舌鳞癌细胞的生长;PETN在舌鳞癌发展过程中发挥抑癌作用。     

H2-calponin在食管鳞癌中的表达及意义

目的: 探讨H2 钙调理蛋白(H2 calponin)在食管鳞癌中的表达及意义。方法: 免疫组化技术检测30例食管鳞癌患者癌组织及癌旁组织芯片中H2 calponin的表达水平;体外培养人食管鳞癌ECA109、TE 1细胞株和正常食管上皮Het 1a细胞;荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测食管鳞癌细胞株中H2 calponin的表达;将食管鳞癌TE 1细胞分为空白对照组（常规培养）、阴性对照组（转染空载体siRNA）和H2 calponin siRNA组（转染H2 calponin siRNA）,采用蛋白质印迹法测定细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、E 钙黏蛋白(E cadherin),波形蛋白以及基质金属蛋白酶 2(MMP 2)、MMP 9、内皮生长因子 A(VEGF A)、血管内皮生长因子 C(VEGF C)蛋白的表达;ELISA法测定各组细胞培养上清液中MMP 2,MMP 9和VEGF C含量;荧光定量PCR检测NF κB通路抑制剂PDTC处理前（0 h）及处理后0.5, 1, 2, 4, 8, 12 h H2 calponin mRNA的表达;蛋白质印迹技术检测H2 calponin及NF κB通路蛋白的表达。结果： 免疫芯片结果显示,食管鳞癌组织中H2 calponin表达量低于癌旁组织, H2 calponin阳性表达率与食管鳞癌患者性别、年龄、肿瘤部位及病理分级之间无明显相关性(P均>0.05);荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中H2 calponin表达明显低于正常食管细胞(P<0.01);下调H2 calponin表达后,PCNA、E 钙黏蛋白和VEGF A表达无明显变化,而波形蛋白、MMP 2、MMP 9和VEGF C表达明显增加;ELISA结果显示,MMP 2、MMP 9和VEGF C分泌量明显增加(P<0.05);PDTC处理后可显著增加IκBα的蛋白表达进而恢复并上调H2 calponin的表达(P<0.01)。 结论： NF κB通路通过抑制H2 calponin表达保证波形蛋白,MMP 2,MMP 9,VEGF C持续表达,促进食管鳞癌细胞侵袭、转移发生。     

长链非编码RNA DGUOK-AS1对肺鳞癌增殖及凋亡的影响

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)DGUOK-AS1对肺鳞癌增殖和凋亡的影响.方法 利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库进行筛选,结果显示lncRNA DGUOK-AS1在肿瘤组织和正常组织中的表达量存在差异;利用siRNA干扰技术降低肺鳞癌细胞株NCI-H520和SK-MES-1中DGUOK-AS1的表达,CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,使用Western blot检测细胞增殖、凋亡以及Wnt/β-Cantenin通路相关蛋白的表达.结果 与人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)相比,DGUOK-AS1 在肺鳞癌 NCI-H520 和 SK-MES-1 细胞中的表达升高(P＜0.001);CCK-8实验结果显示,在NCI-H520和SK-MES-1细胞中,与对照组相比,干扰DGUOK-AS1可降低细胞的增殖能力(P＜0.01);流式细胞术凋亡检测结果显示,在NCI-H520和SK-MES-1细胞中,与对照组相比,干扰DGUOK-AS1可促进细胞凋亡(P＜0.01);Western blot结果显示,降低DGUOK-AS1的表达可降低细胞中 PCNA、Bcl-2、β-cantenin、c-myc、cyclin D1 蛋白的表达,升高Bax蛋白的表达;RNA质核分离实验表明,DGUOK-AS1主要定位于细胞质.结论 lncRNA DGUOK-AS1在肺鳞癌细胞中表达升高,高表达的DGUOK-AS1可能通过影响Wnt/β-Cantenin通路进而促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,DGUOK-AS1可能成为肺鳞癌治疗的重要分子靶标.     

苦参碱诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡作用及其可能机制

目的：探讨苦参碱（MT）诱导人肺鳞癌细胞株SK-MES-1凋亡作用及其抗肿瘤机制。方法：培养人肺鳞癌细胞株SK-MES-1,用不同浓度的MT处理SK-MES-1细胞,用MTT法检测MT对SK-MES-1细胞生长增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;流式细胞术检测细胞相关凋亡蛋白Bcl-2、bax、caspase-3表达。结果：MT抑制SK-MES-1细胞增殖和诱导SK-MES-1细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性。与对照组相比,苦参碱处理后的SK-MES-1细胞G0/G1期百分比明显增高,S期细胞比例下降。Bax和capase-3表达增强,Bcl-2表达下调。结论：MT在体外能抑制人肺鳞癌细胞株SK-MES-1增殖,诱导细胞凋亡,其诱导作用具有明显的量效和时效关系,可能与抑制Bcl-2活性、激活bax和capase-3有关。     

CBP基因对肺鳞癌NCI-H520细胞生长侵袭的抑制作用

目的:研究CSK结合蛋白(CSK-binding protein, CBP)基因转染对人肺鳞癌NCI-H520细胞体外生长侵袭的影响?方法:构建CBP真核表达质粒pcDNA3.0-CBP,以脂质体转染法转染体外培养的人肺鳞癌细胞株NCI-H520,G418筛选出抗性克隆?Western-blotting和RT-PCR分别检测转染前后CBP蛋白和mRNA水平的变化,MTT法分析细胞生长抑制作用,Transwell体外侵袭实验和Wound-healing实验观察细胞的侵袭和迁移能力?结果:稳定转染CBP基因的细胞株有外源目的基因的整合和相应蛋白的高表达?MTT检测表明,pcDNA3.0-CBP转染组活细胞数低于未转染组和pcDNA3.0(-)空载体质粒细胞转染组(P < 0.01)?细胞侵袭?迁移实验表明转染pcDNA3.0-CBP的瘤细胞侵袭与迁移能力均明显下降(P < 0.01)?结论:外源性CBP基因稳定转染可抑制人肺鳞癌NCI-H520细胞增殖?侵袭的恶性表型?     

增殖细胞核抗原及凋亡相关基因蛋白在肺鳞癌中的表达及意义

目的分析PCNA、bcl—xl、bak蛋白在肺鳞癌中的表达，探讨其与肺鳞癌发生、发展的关系。方法应用免疫组化法对40例肺鳞癌组织中PCNA、bcl—xl、bak蛋白的表达进行观察和分析。结果PCNA在肺鳞癌中的阳性表达率显著高于正常支气管粘膜（P〈0．01）。bcl-xl在肺鳞癌中的阳性表达率显著高于正常支气管粘膜（P〈0．01）。bak在肺鳞癌中的阳性表达率显著低于正常支气管粘膜（P〈0．01）。随着肿瘤分化程度的降低，肺鳞癌中PCNA的阳性表达呈上升趋势，而bcl-xl及bak的阳性表达呈下降趋势。结论PCNA、Bcl-xl、bak都参与了肺鳞癌的形成和发展，因此，有效地控制细胞的增殖与凋亡，对肺鳞癌治疗有重要的研究价值，可为肺鳞癌的治疗提供新的思路。联合检测PCNA、bcl—xl、bak在评估肺鳞癌的发展及判断转移趋势方面均具有重要意义。     

增殖细胞核抗原PCNA, 凋亡抑制基因bcl-2在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨增殖细胞核抗原（PCNA）和调亡抑制基因bcl-2产物在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达规律以及与宫颈鳞状细胞癌的关系．方法：应用SP（链霉抗生物素蛋白一过氧化物酶）免疫组织化学方法,检测43例宫颈鳞状细胞癌（Ⅰ级10例,Ⅱ级22例,Ⅲ级11例）,24例宫颈不典型增生,16例正常宫颈组织中PCNA,bcl-2基因产物的表达．结果：PCNA在子宫颈鳞状细胞癌组织中呈明显阳性表达,定位于宫颈鳞癌细胞核,PCNA在宫颈鳞癌Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ各级中的表达有显著差异（P＜0．05）．PCNA在正常宫颈组织中无阳性表达,在宫颈鳞癌中的表达与宫颈不典型增生及正常宫颈组织有显著差异（P＜0．05）,且随肿瘤恶性程度的增高而升高．bcl-2阳性表达产物定位于宫颈鳞癌细胞质,bcl-2在宫颈鳞癌Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ各级中的表达有显著差异（P＜0．05）,在宫颈鳞癌中的表达与宫颈不典型增生及正常宫颈有显著差异（P＜0．05）．结论：PCNA,bcl-2在子宫颈鳞状细胞癌中的过度表达及其共同作用,可能在宫颈鳞状细胞癌发生、发展过程有重要意义．     

转录组数据分析肺腺癌和肺鳞状细胞癌中基因的差异表达

目的对非小细胞肺癌两种亚型肺腺癌和肺鳞状细胞癌的基因差异表达进行生物信息学分析,寻找非小细胞肺癌潜在的 生物学标志物运用于临床诊断,进而提高患者生存率。方法获取肺腺癌和肺鳞状细胞癌的基因表达谱分析数据集,使用R语 言处理,t检验分析鉴定肺腺癌和肺鳞状细胞癌之间的转录组差异,并通过维恩图显示所鉴定的基因差异表达。从GEO获得差 异表达的基因,用DAVID及IPA进行分析,进一步确定潜在可用于鉴别肺腺癌和肺鳞状细胞癌的几种信号通路和生物标记。利 用TCGA数据和临床肺癌样本中的生物标记表达,验证Osteoarthritis pathway和LXR/RXR分别在肺腺癌和肺鳞状细胞癌的基 因差异表达;挑选miR-181b-5p及其靶基因WNT5A和MBD2进行验证,收集23例肺鳞癌患者的肺肿瘤组织（23例肿瘤组织,实 验组）及其邻近肺组织（23例癌旁肺组织,对照组）,检测miR-181b-5p和其靶基因WNT5A和MBD2的表达差异用于鉴别肺腺 癌和肺鳞状细胞癌。结果GEO数据分析结果揭示肺腺癌和肺鳞状细胞癌的差异表达基因：肺腺癌中有851个DEGs（276个上 调,575个下调）,而肺鳞状细胞癌中有885个DEGs（406个上调,479个下调）。DAVID和IPA分析差异表达基因结果显示,白细 胞迁移和炎症反应在肺腺癌中比肺鳞状细胞癌富集程度更高,Osteoarthritis pathway在肺腺癌中是抑制状态,而在肺鳞状细胞 癌中显示是激活状态。IPA对重要转录因子、细胞因子和miRNA的分析结果显示肺腺癌和肺鳞状细胞癌之间的区别主要是：转 录因子（GATA4,RELA,YBX1,TP63 和MBD2）;细胞因子（WNT5A和IL-1A）和microRNA（miR-34a,miR-181b 和miR-15a）。 其中miR-34a 和IL-1A、miR-15a 和YBX1、miR-181b 和WNT5A和MBD2 可作为鉴别非小细胞肺癌亚型的成对microRNA和 mRNA靶点。临床样本实验结果支持miR-181b-5p 的表达上升和WNT5A的表达下调可视为诊断肺鳞状细胞癌的分子标记 物。结论通过对转录组数据分析,发现了肺腺癌和肺鳞状细胞癌的候选基因、成对的microRNA鉴别肺腺癌和肺鳞状细胞癌, 为其鉴别诊断和治疗提供了新的思路。     

凋亡抑制基因Survivin在肺鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:研究凋亡抑制基因Survivin在肺鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法,检测Survivin在35例肺鳞癌组织、10例正常肺组织中的表达。结果:肺癌组Survivin蛋白表达率为71.4%(25/35),显著高于对照组10%(1/10)(P<0.01)。淋巴结转移组Survivin蛋白阳性表达率76.7%(23/30),显著高于无淋巴转移组40.0%(2/5)(P<0.01);随临床分期增加、淋巴结的转移,Survivin蛋白阳性表达率逐渐升高(P<0.05)。结论:Survivin的异常表达与肺鳞癌的发生、发展密切相关,可能是影响肺癌预后的重要分子指标。     

基质金属蛋白酶2与金属蛋白酶组织抑制因子2在肺鳞状细胞癌中的表达与临床意义

目的　探讨肺鳞状细胞癌(简称肺鳞癌)中基质金属蛋白酶2(MMP- 2)、金属蛋白酶组织抑制因子 2(TIMP- 2)的表达及其与肿瘤分化程度和淋巴结转移的关系。方法　利用 ABC免疫组化技术观察 60 例肺鳞癌(高分化鳞癌 40 例,低分化鳞癌 20例, 其中28例淋巴结转移)及部分癌旁正常肺组织(28例)中的MMP-2、TIMP- 2表达情况。结果　MMP- 2与TIMP- 2表达于癌细胞胞浆中,MMP- 2表达阳性率为45%,在低分化肺鳞癌中的表达高于高分化者(P<0.05),在有淋巴结转移中的表达明显高于无淋巴结转移(P<0.01)。TIMP- 2表达阳性率为40%,在高分化或无淋巴结转移的肺鳞癌中的表达高于低分化或有淋巴结转移者(P<0.05)。结论　肺鳞癌中MMP- 2和TIMP- 2表达与其分化程度及淋巴结转移有关。     

肺鳞状细胞癌p53 过度表达与肿瘤生物学行为及预后的关系

目的：探讨肺鳞状细胞癌组织ｐ５３ 蛋白的过度表达与肿瘤生物学行为及预后的关系。方法：应用单克隆抗 ｐ５３ 抗体对石蜡包埋的肺癌组织标本进行免疫组织化学染色。结果：６８ 例获随访的肺鳞状细胞癌病例中有 ４４ 例 ｐ５３ 表达阳性,总阳性率为 ６４７％ ,且其阳性率随肿瘤病理分级、临床分期的增高而增加（ Ｐ＜ ００５）;与术后５ 年存活情况有关（ Ｐ＜ ００５）。结论：提示ｐ５３ 基因的异常表达在肺鳞状细胞癌的发展过程中起重要作用,对肺鳞状细胞癌病人的预后判定有一定意义。     

VEGF和PCNA在食管鳞癌组织中的表达及其意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)在食管鳞癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测69例食管鳞癌及10例正常食管组织中VEGF和PCNA的表达情况。结果在食管鳞癌中VEGF和PCNA的阳性表达率显著高于正常食管组织(P<0.05)。VEGF在食管鳞癌中的表达与浸润深度和有无淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)。PCNA在食管鳞癌中的表达与分化程度、浸润深度和有无淋巴结转移均有显著相关性(P<0.05)。VEGF表达与PCNA表达呈正相关(P<0.05)。结论VEGF和PCNA的表达与食管鳞癌的发生发展密切相关,可作为判断食管癌的恶性程度、预测淋巴结转移趋势和预后评估的一项重要指标。     

Wnt5a在肺鳞癌和腺癌中的表达及意义

目的 探讨Wnt5a基因及蛋白在肺鳞癌和腺癌中的表达水平及其临床意义.方法 用Northern blot及Western blot分析对43例肺鳞癌和腺癌癌组织及10例非肺癌正常肺组织的Wnt5a基因及蛋白的表达进行检测.结果 Wnt5a在肺癌组织中的表达高于正常肺组织,有淋巴结转移的肺癌组织Wnt5a表达高于无转移的肺癌组织.结论 Wnt5a与肺鳞癌和腺癌的转移与恶化密切相关.     

增殖细胞核抗原在口腔鳞状细胞癌中的表达

采用鼠抗ＰＣＮＡ单克隆抗体，ＡＢＣ法，对１１例正常口腔粘膜及２９例口腔鳞癌进行了染色。结果表明：正常粘膜仅在基底层中有少量的ＰＣＮＡ阳性细胞，其阳性分级为１级。而鳞癌阳性分级主要是３～４级，随着组织学分级的升高，ＰＣＮＡ阳性表达率也相应增高。经统计学分析，正常组织与鳞癌之间及鳞癌各级均有非常显著差异（Ｐ＜００１）。提示：ＰＣＮＡ的表达与口腔鳞癌组织学分级有关。     

组织芯片检测甲状腺转录因子-1蛋白在肺癌细胞核中表达的定量研究

目的 揭示甲状腺转录因子-1（TTF-1）蛋白在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、人胚胎肺泡上皮细胞、肺癌原发灶及淋巴结转移灶中的表达特点及规律。方法 用组织微阵列技术构建包含20例正常成人肺组织、15例胚胎肺组织、100例肺癌原发灶及其相应的55例淋巴结转移灶的765点阵的石蜡组织芯片。用免疫组化SP法检测该芯片中TTF-1蛋白的表达。用Leica Q500MC图像分析系统定量测试组织芯片上TTF-1蛋白的表达强度。结果 胚胎肺泡上皮细胞核TTF-1阳性单位（PU）值小于正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）；不同类型肺癌癌细胞核TTF-1的PU值均小于胚胎肺泡上皮细胞和正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）；肺腺癌和肺小细胞癌癌细胞核TTF-1的PU值均大于肺鳞癌和肺大细胞癌癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0、001）；肺鳞癌癌细胞核TTF-1的PU值大于肺大细胞癌癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）。肺的腺癌、鳞癌和大细胞癌淋巴结转移灶中癌细胞核TTF-1的PU值均大于其癌原发灶癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001，P〈0．001，P〈0．05）；肺小细胞癌淋巴结转移灶癌细胞核TTF-1的PU值与其原发灶癌细胞核TTF-1的PU值基本相同（P〉0．05）。有淋巴结转移的肺癌原发灶癌细胞核TTF-1的PU值大于无淋巴结转移的肺癌原发灶癌细胞核TTF-1的PU值（P〈0．001）；癌细胞胞核TTF-1的PU值与肺癌大体类型、分化程度和患者性别无关（P〉0．05）；TNMⅡ-Ⅳ期癌细胞胞核TTF-1的PU值大于Ⅰ期（P〈0．001）。结论 TTF-1的表达量在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、胚胎肺泡上皮细胞和肺癌细胞核中的表达具有差异性并依次减少；肺癌细胞核TTF-1的表达具有癌组织类型差异性，腺癌和小细胞癌相对较高，鳞癌和大细胞癌极少；TTF-1胞核高表达的肺癌易发生转移，TTF-1胞核高表达的肺的腺癌、鳞癌和大细胞癌癌细胞为具有明显转移能力的肺癌细胞的重要标志之一。     

ZEB1的表达与肺鳞状细胞癌侵袭及转移的关系

目的：探讨锌指E-盒结合同源异形盒-1 (ZEB1)在肺鳞状细胞癌组织中的表达,分析ZEB1 mRNA和蛋白的表达水平与肺鳞状细胞癌侵袭及转移的关系。方法：选择45例肺鳞状细胞癌行外科手术切除的患者,根据所取组织与肿瘤的距离不同分为肺鳞状细胞癌组织和癌旁正常肺组织,采用RT-PCR和Western blotting方法检测肺鳞状细胞癌组织和癌旁正常肺组织中ZEB1 mRNA和蛋白的表达情况,并分析肺鳞状细胞癌不同临床病理特征ZEB1 mRNA和蛋白的表达差异;构建ZEB1特异性siRNA载体,感染肺癌NCI-H2170细胞,设未转染对照组、转染照组和ZEB1 siRNA转染组,应用Western blotting方法从蛋白质水平检测各组干扰质粒对ZEB1基因的干扰效果,通过Transwell侵袭小室观察各组NCI-H2170细胞侵袭能力的变化。结果： ZEB1 mRNA在肺鳞状细胞癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁正常肺组织（P＜0.05）;在淋巴结转移、远处转移阳性者肺癌组织中的阳性表达率显著高于其在淋巴结转移、远处转
移阴性者肺癌组织中的表达（P<0.05）;但ZEB1 mRNA的表达与肺鳞状细胞癌患者的性别、年龄及肿瘤大小及分化程度无关(P>0.05)。肺鳞状细胞癌组织中ZEB1蛋白的表达与ZEB1 mRNA的表达结果类似,ZEB1蛋白在肺鳞状细胞癌组织中的表达量显著高于癌旁正常肺组织（P<0.05）;在淋巴结转移和远处转移阳性者癌组织中的表达显著高于其在淋巴结转移和远处转移阴性者癌组织中的表达（P<0.05）。下调NCI-H2170细胞中ZEB1蛋白的表达后,NCI-H2
170细胞的侵袭及转移能力明显降低（P<0.05）。结论：ZEB1在肺鳞状细胞癌组织中高表达,表达变化与肺鳞状细胞癌的病理特征密切相关;运用RNA干扰技术有效沉默NCI-H2170细胞的ZEB1基因后,可显著降低NCI-H2170细胞的侵袭及转移能力,提示ZEB1在肺癌的发生发展中起重要作用,抑制ZEB1的表达可能成为一种治疗肺癌的方法。
     

皮肤鳞癌p53及增殖细胞核抗原免疫组化研究

目的：探讨Ｐ５３异常表达与皮肤鳞癌发生、发展的关系。方法：用免疫组化ＳＰ法，检测５１例皮肤鳞癌标本中Ｐ５３ＰＣＮＡ的表达。用已知乳腺癌阳性切片及ＰＢＳ代替－抗和阳性、阴性对照。经χ＾２检验及秩和检验。结果：Ｐ５３一率为４３．１％，其中高度分化鳞癌与中等分化、差分化鳞癌之间差异有显著性。结论：皮肤鳞癌中存在Ｐ５３的异常表达，Ｐ５３的表达与鳞癌的分化有一定的关系，Ｐ５３表达与ＰＣＮＡ的表达相近，提示Ｐ