HLA配型技术

人类白细胞抗（HLA）是人类最复杂的遗传系统，其高度的多态性影响着细胞和器官移植的免疫反应，并与一些感染性疾病的进程有关，因此，准确的HLA分型技术无疑有着重要意义。本文依据分子生物学技术、免疫学技术等方面进行了综述。     

D~(el)红细胞膜表面D抗原表位及抗原强度分析

目的分析Del红细胞膜表面D抗原表位并测定其抗原强度。方法采用16种针对D抗原不同表位的单克隆抗体,通过吸收放散方法检测74例Del个体红细胞膜表面D抗原表位,应用流式细胞术检测其相对抗原强度。结果 74例Del个体D抗原1~9表位检测均为阳性,D阴性、Del及D阳性红细胞相对D抗原阳性率分别为(0.97±0.18)%、(3.06±0.31)%和(99.65±0.71)%,3种表型红细胞D抗原平均荧光强度分别为13.89±2.45,24.18±3.38,223.32±13.05。结论 Del红细胞膜表面D抗原表位表达基本完整,其D抗原强度极低,仅含有微量的抗原分子数目。     

慢性粒细胞白血病患者骨髓单个核细胞中CaMKⅡγ在疾病不同阶段的表达及分子机制

目的探讨钙调蛋白依赖性激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)在慢性粒细胞白血病患者从慢性期到急变期过渡的表达及其分子机制。方法 59例来自不同时期慢性粒细胞白血病患者的骨髓,通过Ficoll分离液分离单个核细胞,裂解蛋白进行Western blot检测CaMKⅡγ的表达,并初步探讨其分子机制。结果 CaMKⅡγ在慢粒加速和急变期患者中高表达,而慢性期患者表达量低或不表达,其表达与β-catenin基本一致。结论 CaMKⅡγ在慢性粒细胞白血病慢性期到加速期过渡中发挥重要作用,可通过调控β-catenin的表达影响白血病干细胞的自我更新。     

树突状细胞和肿瘤细胞融合疫苗的研究进展

随着树突状细胞（DC）在体外的大量扩增和融合技术的飞速发展,肿瘤细胞与DC融合所获得的融合瘤苗已经成为国内外肿瘤免疫治疗的焦点。DC融合瘤细胞在共刺激信号存在的条件下,加工处理递呈肿瘤相关性抗原（TAA）和肿瘤特异性抗原（TSA）,诱导特异性抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞（CTL）,逆转机体对肿瘤抗原的耐受,是一种有广阔应用前景的免疫治疗方法,为肿瘤患者的治疗开辟了一条新的途径。     

人类Rh血型系统的研究进展及临床应用

Rh血型系统在临床输血、新生儿溶血病和自身免疫性溶血性贫血中具有重要意义。本文就Rh血型基因结构、表型、基因分型及Rh血型系统在临床输血和新生儿溶血病中的应用等最新研究进展作一综述。     

合成特异性寡核苷酸探针检测KP阳性副溶血弧菌

合成了２０ｂｐ的寡核苷酸探针，应用克隆杂交技术对３０株包括各种神奈川现象（ＫＰ）反应和不同血清型的副溶血弧菌作了杂交试验，特异性试验，发现在合适的反应条件下，该探针能够有效地将（ＫＰ）阳性副溶血弧菌同ＫＰ弱阳性或阴性副溶血弧菌相鉴别。     

荧光定量PCR检测Rh阴性孕妇外周血浆游离DNA中胎儿RhD血型

目的 探讨荧光定量PCR(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)技术对Rh阴性孕妇血浆中游离胎儿DNA进行非创性产前诊断胎儿RhD血型的可行性.方法 选取78份妊娠11～40周、B超确诊为单胎的Rh阴性孕妇血浆.采用9个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)多态性位点及Y染色体性别决定区基因(sex-determining region Y chromosome,SRY)确定胎儿DNA的存在;运用FQ-PCR技术对血浆中游离胎儿DNA进行RHD基因外显子5、7、10和内含子4定量分析,以确定胎儿RhD血型的基因型;其基因型结果与产后新生儿脐血血清学检测结果进行对比分析,回顾性评价胎儿基因定型结果的准确性.结果 78份标本中,41份检测到SRY基因,平均浓度为(214.7±120.9)拷贝/ml,产后证实皆为男性.70份FQ-PCR基因定型结果与血清学结果相符,另有5份确定为假阳性,3份基因定型结果不可确定,检测结果总符合率为90%(70/78).5份假阳性标本通过检测RHD1227A等位基因鉴定了4份RhD放散型,FQ-PCR最终结果准确率达到95%(74/78).结论应用FQ-PCR方法进行非创性胎儿RhD血型检测可用于新生儿溶血病的预防和诊断.     

肺腺癌细胞总RNA转染树突状细胞诱导特异性CTLs的体内抗肿瘤效应研究

目的探讨人肺腺癌细胞总RNA转染的树突状细胞(DCs)诱导抗原特异性的细胞毒T细胞(CTLs)对移植瘤裸鼠的抗肿瘤作用。方法 1)从外周血单个核细胞(PBMCs)中诱导DCs,提取人肺癌细胞A549总RNA,用于电转染DCs,转染后的DCs与自体T细胞混合培养,诱导抗原特异性的CTLs;2)实验分为转染RNA的DCs组、转染PBS的DCs组和未转染DCs组,流式细胞术(FCM)鉴定T细胞表型,3H-TdR掺入检测T细胞增殖能力;3)建立肺癌细胞株A549荷瘤裸鼠模型,过继回输CTLs,比较肿瘤体积,计算抑瘤率,免疫组化法检测移植瘤组织中Bax、Bcl-2、COX-2和VEGF的表达,并用全自动图像分析系统分析其平均光密度值(MOD)。结果 1)转染RNA的DCs和自体T细胞共育诱导的CTLs的CD8+T细胞大幅度上调,表达率(79.29±2.18)%明显高于转染PBS的DCs组CD8+T细胞(26.10±1.76)%和未转染DCs组CD8+T细胞(25.58±2.73)%(P0.05);2)转染RNA的DCs显著刺激了自体T细胞增殖,3H-TdR渗入所得的cpm值:阳性对照组为17 105±130,转染RNA的DCs组为7 759±493,转染PBS的DCs组为2 611±161,未转染DCs组为2 248±332(P0.05);3)成功建立肺癌裸鼠移植瘤模型,实验结束时,转染RNA组裸鼠荷瘤体积(540±99)mm3明显小于转染PBS组(1 572±147)mm3和未转染组(2 043±395)mm3(P0.05);4)转染RNA组和转染PBS组的抑瘤率分别为68.53%和8.62%;5)转染RNA的DCs诱导的CTLs能显著上调Bax的表达(转染RNA组MOD值为335±105),显著下调Bcl-2、COX-2和VEGF的表达(转染RNA组MOD值分别为146±47、122±33和128±58)。结论人肺腺癌细胞总RNA转染DCs诱导的抗原特异性CTLs对肺腺癌裸鼠移植瘤的生长产生抑制作用。