细胞外信号调节激酶和转化生长因子β1在哮喘气道重塑中的作用以及糖皮激素的调控

目的 研究细胞外信号调节激酶（ERK）和转化生长因子β1（TGF—β1）在哮喘气道重塑中的作用,探讨糖皮质激素对ERK、TGF—β1及哮喘气道重塑的调控。方法建立慢性哮喘动物模型,将30只SD大鼠随机分对照组、哮喘组、地塞米松干预组（DM组）。免疫组化测定肺组织中磷酸化的ERK（P-ERK）,ELISA测定血清中TGF—β1含量。体外培养大鼠气道上皮细胞,以BB型血小板源性生长因子（PDGF—BB）、U0126、布地奈德（BUD）作为工具药干预细胞,Western印迹检测细胞ERK磷酸化水平,ELISA法检测细胞上清液TGF—β1含量。结果哮喘组P—ERK平均吸光度和TGF—β1含量[分别为（31．1±2．2）和（28．1±7．4）μg/L]均较对照组[（12．8±2．4）和（13．6±2．7）μg/L]高（P〈0．01）,DM组[分别为（18．7±3．1）和（15．0±3．2）μg/L]较哮喘组低（P均〈0．01）。ERK的磷酸化与PDGF—BB存在浓度依赖关系,50μg/L时ERK磷酸化水平最高,高于对照组（P〈0．01）;U0126和BUD均可抑制ERK的磷酸化;各处理组细胞上清TGF—β1差异无统计学意义。结论ERK磷酸化、TGF—β1在支气管哮喘气道重塑中起重要作用;PDGF—BB不能通过ERK磷酸化诱导正常大鼠气管上皮细胞产生释放TGF—β1;糖皮质激素能抑制ERK磷酸化。     

烟曲霉菌孢子对哮喘大鼠气道炎症和气道反应性的影响

目的研究大鼠哮喘模型接触烟曲霉菌孢子后的气道炎症和气道反应性的改变。方法70只健康雄性Wistar大鼠随机分为Ⅰ和Ⅱ两大组（每组35只），每组下分为空白对照组（5只）、哮喘组（10只）、孢子滴鼻对照组（10只）和孢子滴鼻哮喘组（10只）。以卵白蛋白（OVA）致敏并激发建立大鼠哮喘模型，分别在OVA激发前（Ⅰ组）或激发后（Ⅱ组）予烟曲霉菌孢子滴鼻。通过BCA法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）上清中总蛋白浓度以观察支气管上皮损伤情况，并进行BALF细胞计数和分类。通过测定跨肺压和气体流速来计算大鼠气道阻力和予以不同浓度乙酰胆碱（Ach）刺激后的气道反应性变化。结果在Ⅰ组中，激发前孢子滴鼻哮喘组（CA组）BALF上清中总蛋白浓度较未用孢子滴鼻的哮喘组（A1组）明显增多[（1．125±0．254）μg／mL比（0．825±0．173）μg／mL，P〈0．01]，且CA组大鼠在给予10μg／kg和100μg／kg Ach后的气道阻力[（0．997±0．196）cm H2O·mL^-1·s^-1，（1．123±0．142）cm H2O·mL^-1·s^-1]均较A1组[（0．655±0．089）cm H2O·mL^-1·s^-1，（0．687±0．048）cm H2O·mL^-1·s^-1]显著升高（P均〈0．05）。但在Ⅱ组中，激发后孢子滴鼻哮喘组（AC组）BALF上清中总蛋白浓度，基础气道阻力和给予Ach后气道阻力与哮喘组（A2组）比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）。CA组BALF细胞总数和细胞分类与A1组间差异无统计学意义，但AC组BALF中性粒细胞较A2组明显升高[（2．488±0．420）×10^6比（0．936±0．459）×10^6，P〈0．05]。结论哮喘大鼠在雾化激发前接触烟曲霉菌孢子，能加重其支气管上皮损伤和增加气道反应性。     

地塞米松对急性过敏性哮喘小鼠肺水通道蛋白1的影响

【目的】观察水通道蛋白1（AQP1）在急性过敏性哮喘小鼠肺组织的改变，以及地塞米松对其的影响。【方法】建立小鼠哮喘模型，并随机分为3组，哮喘模型组、生理盐水对照组和治疗组，治疗组在激发阶段给予地塞米松治疗。检测各组中支气管肺泡灌洗液（BALF）的白细胞总数、分类计数以及IL-5和IFN-γ水平，用RT-PCR、Westem blot和免疫组化法检测AQP1mRNA、蛋白质水平和在肺组织的分布．观察肺组织形态学改变。【结果】（1）哮喘组BALF中自细胞总数[（52±8）×106／mL]、嗜酸性粒细胞数[（9．8±1．7）×10^6mL]和IL-5水平[（71±27）pg／mL]均高于对照组（P均〈0．01），IFN-γ水平[（294±26）pg／mL]低于对照组（P〈0．05），治疗后白细胞总数、嗜酸性粒细胞数和IL-5水平均明显下降（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．01），IFN-γ水平明显上升（P〈0．05）；（2）哮喘组AQP1mRNA（1．90±0．29）和蛋白质（1．31±0．10）明显高于对照组（P均〈0．01），治疗后表达明显下降（P〈0．01，P〈0．05）；（3）哮喘组肺组织可见较弥漫的炎性改变，黏液分泌增多，血管壁水肿明显，血管周围有大量的炎症细胞渗出物，治疗组形态学改变明显减轻；AQP1在气管黏膜上皮、微血管内皮上皮、支气管周围血管床、炎症细胞呈阳性表达，哮喘组表达呈强阳性，治疗后表达明显减弱。【结论】AQP1在急性哮喘小鼠肺组织内过度表达，地塞米松对其有显著的抑制作用，可明显改善小鼠肺部的炎性浸润和肺水渗出的病理生理过程。     

哮喘大鼠模型血清IL-12及IL-18的变化及相关性研究

目的：探讨哮喘大鼠模型血清中自细胞介素-12（IL-12）与白细胞介素-18（IL-18）之间的关系及其在气道炎症发生中的机制．方法：48只Wistar大鼠随机分为3组，分别为正常对照组、哮喘组、地塞米松干预组，用卵白蛋白（OVA）腹腔注射致敏，雾化吸入OVA激发制备大鼠哮喘模型，对照组用生理盐水代替OVA，地塞米松干预组每次雾化前经腹腔注射地塞米松．雾化激发后24h取各组肺泡灌洗液进行嗜酸性细胞计数，并用ELISA方法测定血清IL-12，IL-18的水平，分析二者相关性．结果：哮喘组、地塞米松组和对照组血清IL-12水平分别为（53．1±9．6）ng／L，（82．4±8．1）ng／L和（140．1±13．4）ng／L，与哮喘组比较，地塞米松组血清IL-12水平显著升高，但低于对照组（P〈0．01）．三组血清IL-18水平分别为（353．5±11．9）ng／L，（250．6±8．4）ng／L和（100．5±12．7）ng／L，哮喘组与地塞米松组显著高于对照组（P〈0．01）．肺泡灌洗液中嗜酸性细胞数（49．3±4．0）×10^5／L，（31．9±3．6）×10^5／L和（14．8±4．1）×10^5／L，哮喘组与地塞米松组显著高于对照组．哮喘组血清IL-12，IL-18水平分别与肺泡灌洗液中EOS数量进行两两相关分析，显示IL—12与肺泡灌洗液EOS呈负相关（r=-0．746，P〈0．01），而IL—18与肺泡灌洗液EOS呈正相关（r=0．682，P〈0．01）．结论：IL-12与IL-18可能共同参与哮喘气道炎症发病过程，并且两者的作用相互拮抗．     

无生长追赶出生低体重幼鼠生长激素/胰岛素样生长因子1轴抵抗与胰岛素抵抗的相关研究

目的探讨生后无生长追赶的出生低体重（NCU—SGA）幼鼠的胰岛素抵抗对生长激素（GH）抵抗的影响及其受体后信号转导机制。方法以母鼠孕期限制饮食法建立雄性NCU．SGA模型研究：（1）GH和胰岛素抵抗的关系：测定4周龄时24h尿GH排泄率（24hU—GH）,血胰岛素样生长因子（IGF）-1、空腹胰岛素（FINS）、血糖以及肝组织IGF-1mRNA和STATS信号表达;（2）胰岛素抵抗对生长轴的影响：3周龄时注射P13K阻断剂1周后（设溶剂对照组）,测定大鼠体格生长,血IGF-1、FINS水平及肝IGF-1mRNA和STATS信号表达。结果（1）NCU—SGA鼠血清IGF-1浓度、肝IGF-1mRNA表达以及磷酸化与总STAT蛋白表达水平的比率均显著低于健康对照组（C组）,分别为（248±58）ng／ml,（6．1±0．3）拷贝和（61±22）％;C组为（383±62）ng／ml,（6．6±0．4）拷贝和（91±29）％（均P〈0．01）;NCU—SGA组与C组的24hU-GH差异无统计学意义（P〉0．05）;NCU—SGA组FINS及空腹血糖为（24．7±9．6）mU／ml和（5．4±0．3）mmol／L显著高于C组的（9．8±2．8）mmol／L和（4．5±1．7）mmol／L（均P〈0．05）。24hU—GH与FINS显著正相关（r=0．680,P=0．000）。（2）PBK阻断后NCU．SGA鼠胰岛素抵抗加重,体重下降,血清IGF-1及肝IGF-1mRNA为（218±60）ng／ml及（6．1±0．3）拷贝,显著低于溶剂对照组的（286±45）ng／ml及（6．3±0．3）拷贝,均P〈0．05。但两组间肝组织总的及磷酸化STATS信号表达水平差异无统计学意义。结论NCU—SGA幼鼠的胰岛素抵抗与GH抵抗密切相关。生后无追赶与GH受体后JAK2-STATS通路受损所致的GH抵抗有关。胰岛素抵抗可能经非STATS依赖途径加重了GH抵抗及生长障碍。     

信号转导和转录激活因子6在哮喘小鼠中的表达及地塞米松对其干预作用

目的 研究信号转导和转录激活因子6（STAT6）在哮喘气道炎症中的作用和地塞米松对其作用的干预。方法 30只小鼠随机分为空白对照组（A组）、哮喘组（B组）和地塞米松干预组（C组），行支气管肺泡灌洗作白细胞总数及嗜酸性粒细胞（Eos）计数；RT—PER及免疫组织化学法分别检测肺组织中STAT6和eotaxinmRNA及蛋白表达水平。结果 ①B组肺组织中STAT6，eotaxin mRNA及气道上皮STAT6，eotaxin蛋白表达水平均明显高于A组（P均〈0．01），而C组明显低于B组（P〈0．01）。②气道上皮细胞STAT6的表达与eotaxin表达、BALF中白细胞总数、Eos计数呈直线正相关（r分另q为0．625，0．533，0．607，P〈0．01）；气道上皮eotaxin表达与白细胞总数、Eos计数呈直线正相关（r分别为0．812，0．754，P〈0．01）。结论哮喘小鼠肺组织中STAT6表达增强与气道炎症有关：地塞米松可下调STAT6的表达，抑制哮喘气道炎症。     

CpG寡聚脱氧核苷酸对变应性联合气道疾病气道重塑的影响研究

背景　激素是变应性联合气道疾病（ACAD）常用的治疗方法,但慢性ACAD出现气道重塑,可能影响其疗效,故有必要寻找与激素联合并有协同作用的新型免疫治疗。前期研究发现CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN）抑制ACAD气道炎症,但对气道重塑的效果有待研究。目的　探讨CpG-ODN对慢性ACAD小鼠模型气道重塑的影响。方法　本研究时间为2016年4月-2018年3月。30只清洁级雌性BALB/c小鼠采用随机数字表法分为正常对照组（Control组）、ACAD组、变应性联合气道疾病CpG-ODN干预组（ACAD/CpG-ODN组）、变应性联合气道疾病布地奈德干预组（ACAD/BUD组）、变应性联合气道疾病CpG-ODN+BUD联合干预组（ACAD/CpG-ODN+BUD组）。实验动物腹腔卵清蛋白（OVA）或磷酸盐缓冲液（PBS）致敏,鼻腔OVA/PBS 3周激发,随之6周雾化气道激发。ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组和ACAD/CpG-ODN+BUD组分别给予CpG-ODN、BUD和CpG-ODN+BUD滴鼻,其他组给予PBS滴鼻。每次鼻腔或气道激发后10 min内,对小鼠抓鼻和喷嚏次数进行计数。HE和PAS染色观察小鼠鼻腔组织的病理特点。HE、AB-PAS和Masson's染色观察小鼠肺组织病理变化,并行气道炎症评分。免疫组化检测肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,应用Image-Pro Plus图片分析软件定量评估,并进行症状评估。结果　各组小鼠抓鼻次数和喷嚏次数比较,差异均有统计学意义（P<0.01）;其中ACAD组抓鼻次数和喷嚏次数均多于Control组,ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/CpG-ODN+BUD组抓鼻次数和喷嚏次数均少于ACAD组（P<0.05）。HE和PAS染色显示,ACAD/CpG-ODN组和ACAD/BUD组鼻黏膜病理改变较ACAD组减轻,而ACAD/CpG-ODN+BUD组进一步减轻。HE、AB-PAS和Masson's染色显示,ACAD/CpG-ODN组和ACAD/BUD组肺组织病理改变较ACAD组减轻,而ACAD/CpG-ODN+BUD组进一步减轻。各组气道炎症评分比较,差异有统计学意义（P<0.01）;其中ACAD组气道炎症评分高于Control组,ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/CpG-ODN+BUD组气道炎症评分均低于ACAD组（P<0.05）。各组肺组织中TGF-β1和α-SMA表达水平比较,差异均有统计学意义（P<0.01）;其中ACAD组TGF-β1和α-SMA表达水平均高于Control组,ACAD/CpG-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/CpG-ODN+BUD组均低于ACAD组（P<0.05）。结论　CpG-ODN、布地奈德抑制慢性ACAD模型鼻部炎症和支气管肺组织气道重塑,两者可能具有协同作用。     

CpG寡脱氧核苷酸对慢性哮喘小鼠模型气道炎症的预防作用

目的研究含非甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤（CpG）寡脱氧核苷酸（CpG-oligodeoxynueleotides,CpG- ODN）能否预防或减轻慢性哮喘小鼠气道炎症的发生。方法40只雌性C57BL／6小鼠随机均分为4组,A组（慢性哮喘组）、B组（CpG-ODN干预组）和C组（GpC-ODN对照组）分别腹腔注射卵蛋白致敏,然后用卵蛋白雾化吸入激发以制作慢性哮喘模型,D组（生理盐水对照组）用生理盐水进行致敏和激发。B组在致敏同时（d1, d14）和激发阶段（每2周1次）分别给予60μg／mLCpG-ODN腹腔注射,共6次。C组将CpG替换为鸟嘌呤-磷酸-胞嘧啶（GpC）作为对照。在末次激发24 h后,取血测嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）数,血清IgE、IgG1和IgG2α;收集支气管肺泡灌洗液（bronehoalveolar lavage fluid,BALF）作细胞分类计数;测定肺组织中白介素-4 （interleukin-4,IL-4）、白介素-13（interleukin-13,IL-13）和γ-干扰素的mRNA（interferon-γ,IFN-γ）表达量;以及肺组织病理学检查。结果A组外周血EOS数[（89±10）×10^4／mL]、血清IgE值[（279±53）ng／mL）、IgG1（A值2．151±0．628）、IgG2α（A值0．772±0．245）、BALF中EPS（6．3±1．3）]×10^5／mL）及百分比[（18．1±3．0）％]较D组明显增高（P〈0．01）;且肺组织中IL-4、IL-13和IFN-γ等细胞因子mRNA表达量[（分别为（5．72±3．89）×10^-2、（9．45±5．91）×10^-2和（3．23±1．69）×10^-2）]也明显高于D组（P〈0．05）。用CpG-ODN干预后（B组）,除IgG2α（A值1．186±0．414）和IFNγmRNA表达量[（18．91±9．85）×10^-2]增高外（P〈0．05）,其余指标均低于A组（P〈0．05）。C组的上述各指标与A组相比差异均无显著性（P〉0．05）。结论CpG- ODN对小剂量OVA反复激发所致的慢性气道炎症有一定的预防作用。     

标准桃金娘油对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症的影响

[目的]研究标准桃金娘油对慢性阻塞肺疾病（COPD）大鼠模型气道炎症的影响。[方法]24只Wistar大鼠随机分为3组：①对照组：不加任何干预;②COPD组：吸烟14支／次&#215;2次／d&#215;6d／周&#215;12周;③标准桃金娘油组：吸烟情况同COPD组,每日吸烟前给予标准桃金娘油灌胃治疗至第12周末。12周后测定肺功能;行支气管肺泡灌洗计数白细胞;用ELISA法测定肺部TNF—α、IL-6的含量;用HE染色评估肺部病理改变;用免疫组化法测定气道上皮ICAM-1的表达。[结果]①COPD组和标准桃金娘油组大鼠出现明显肺气肿病理改变和气流阻塞。②BALF细胞总数及中性粒细胞数结果：正常对照组分别为（1．30&#177;0．10）&#215;10^7／L与（0．09&#177;0．04）&#215;10^7／L,COPD模型组分别为（1．99&#177;0．94）&#215;10^7／L与（0．27&#177;0．13）&#215;10^7／L,P均〈0．05;标准桃金娘油组为（1．71&#177;0．97）&#215;10^7／L与（0．15&#177;0．05）&#215;10^7／L,较COPD模型组减少（P均〈0．05）。③支气管上皮ICAM—1表达及肺组织内TNF—α、IL-6表达：COPD模型组分别为6．99&#177;0．81,（860．82&#177;53．62）pg／mL,（689．01&#177;49．05）pg／mL,较对照组[分别为4．22&#177;0．74,（159．08&#177;46．65）pg／mL,（411．5&#177;26．60）pg／mL]增高（P均〈0．05）;标准桃金娘油组表达分别为5．04&#177;0．88,（668．36&#177;31．07）pg／mL,（589．64-4-19．03）ps／mL,较COPD组降低（P均〈0．05）。④COPD组BALF中性粒细胞数与支气管上皮ICAM-1表达强度呈正相关（r=0．571,P〈0．05）,也与肺组织中TNF-α、IL-6含量呈显著正相关（r=0．623、0．691,P均〈0．05）。[结论]吸烟可增加大鼠气道炎症反应,标准桃金娘油能改善由吸烟导致的气道炎症。     

咪喹莫特对小鼠哮喘模型气道炎症和STAT6表达的影响

目的：观察咪喹莫特对小鼠哮喘模型气道炎症和肺组织信号转导与转录激活因子1（STAT1）和STAT6表达的影响．方法：建立哮喘模型，自14d时雾化吸入OVA前0．5h，干预组分别雾化吸入咪喹莫特30min及ip地塞米松．OVA雾化结束后24h取左上叶肺组织做HE染色观察肺组织炎症改变；收集肺泡灌洗液进行细胞计数和分类；用免疫组化和West blot方法检测肺组织STAT1和STAT6的表达；用逆转录-聚合酶链反应半定量检测肺组织STAT1，STAT6，IL-4，eotaxin和IFN-1 mRNA表达水平．结果：①HE染色示地塞米松组和咪喹莫特组小鼠肺组织炎症程度较哮喘小鼠减轻．②哮喘组小鼠BALF中细胞总数及各种炎症细胞较正常组显著增加，咪喹莫特治疗组嗜酸性粒细胞、淋巴细胞比哮喘组明显减少（P〈0．01）．③STAT1和STAT6均在气道上皮细胞表达，哮喘组肺组织STAT1和STAT6表达较正常组增强，咪喹莫特组STAT1表达与哮喘组无明显区别，较正常组增加．④哮喘组小鼠肺组织STAT1，STAT6，eotaxin，IL-4 mRNA表达较正常组增强（P〈0．01），IFN-γ mRNA表达减少，咪喹莫特组STAT1 mRNA表达与哮喘组无明显区别，STAT6，eotaxin和IL-4 mRNA的表达较哮喘组降低，较正常组增加，IFN-γ mRNA表达较哮喘组增加，但低于正常组．结论：雾化吸入咪喹莫特可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症，抑制肺组织STAT6蛋白和mRNA的过度表达．     

布地奈德对哮喘小鼠模型IL-22的调控作用

目的观察白介素22(IL-22)在哮喘模型中的作用,研究布地奈德对哮喘小鼠模型气道炎症及IL-22的调控作用。方法 24只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘模型组和布地奈德组3组,用卵清蛋白(OVA)致敏、激发小鼠以制备哮喘模型。小鼠肺组织进行HE及AB-PAS染色,进行气道炎症评分,ELISA法检测3组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中IL-22的水平,实时荧光定量PCR检测小鼠肺组织中IL-22mRNA的表达水平。结果与对照组相比较,哮喘小鼠肺组织炎症评分增加,BALF中IL-22水平增高,肺组织中IL-22mRNA表达水平升高,差异均具有统计学意义。给予布地奈德治疗后,小鼠气道炎症评分及肺组织IL-22mRNA的表达水平均较哮喘组降低,差异具有统计学意义。结论布地奈德对哮喘气道炎症的治疗作用与其抑制肺内IL-22的表达和分泌有关。     

槐杞黄对哮喘气道及血清IL-13水平的影响

目的:探讨IL-13在哮喘患儿血清中的表达及槐杞黄对于哮喘大鼠IL-13表达的可能影响及与布地奈德的共同作用?方法:选择 10例哮喘缓解期儿童 (哮喘组)及10例健康儿童 (健康对照组)为研究对象?两组年龄?性别?体质指数比较差异均无统计学意义?测试两组儿童初诊时肺功能,并利用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)检测两组儿童血清 IL-13的水平?取50只4~6周龄的健康雄性SD大鼠,适应性喂养1周后,随机分为5组,即对照组?哮喘模型组?布地奈德组?槐杞黄组?布地奈德联合槐杞黄组?用卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏及激发共持续6周,建立哮喘模型?通过HE染色观察肺部炎症细胞浸润情况?应用ELISA检测及比较各组大鼠之间肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及血清中IL-13浓度的差异?结果:与健康对照组儿童比较,哮喘组儿童初诊时第1秒用力呼气量占预测值百分比及呼气峰流速占预测值百分比均升高,血清IL-13水平升高(P < 0.05)?大鼠肺组织病理学改变:模型组气道周围大量炎症细胞浸润?柱状细胞增生?气管壁增厚;对照组则无上述表现;相比模型组,布地奈德组?槐杞黄组?布地奈德联合槐杞黄组大鼠不同程度减轻(P < 0.05)?模型组BALF及血清中IL-13的浓度增加(P < 0.05)?相较于模型组,布地奈德组?槐杞黄组?布地奈德联合槐杞黄组大鼠BALF及血清IL-13浓度有不同程度降低(P < 0.05),且布地奈德联合槐杞黄组变化比布地奈德组更明显(P < 0.05)? 结论:在OVA诱导的大鼠哮喘模型中,使用布地奈德?槐杞黄或是布地奈德联合槐杞黄治疗可以不同程度改善气道IL-13分泌,因而可能改善气道炎症?布地奈德联合槐杞黄治疗可能存在协同效应?     

激素对哮喘小鼠气道黏液分泌作用的研究

目的研究糖皮质激素对小鼠哮喘模型气道黏液过度分泌的作用及机制。方法将24只 BALB/c 小鼠随机分为对照组、哮喘组和哮喘+地塞米松组,每组8只。各组小鼠于末次激发24 h 后进行麻醉,留取不同标本,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸性粒细胞数,AB-PAS 染色了解气道杯状细胞变化,用 RT-PCR 和免疫组织化学染色分别检测肺组织黏蛋白基因MUC5AC mRNA 和蛋白、白细胞介素4(IL-4)mRNA。结果与对照组相比,哮喘组 BALF 嗜酸性粒细胞和气道杯状细胞均明显增多,而哮喘+地塞米松组明显减少;哮喘组肺组织 MUC5AC mRNA(0.5341±0.0303)和蛋白(0.1906±0.0008)、IL-4 mRNA(0.6265±0.0932)均较对照组(分别为0.1994±0.0128、0.1194±0.0007和0.2389±0.0289)明显增加(P 均<0.01),哮喘+地塞米松组(分别为0.2729±0.0345、0.1456±0.0003和0.2424±0.0260)均明显高于哮喘组(P 均<0.05),但哮喘+地塞米松组 IL-4 mRNA 和对照组差异无统计学意义(P>0.05),MUC5AC mRNA和蛋白较对照组均明显降低(P 均<0.01)。结论糖皮质激素可减轻哮喘小鼠肺组织炎症,并可能通过下调MUC5AC 和 IL-4表达在气道黏液过度分泌中起治疗作用。     

Brg1通过STAT6促进哮喘气道黏液高分泌

目的研究染色质重构复合物核心催化亚基（Brg1）对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及其作用机制。方法将6~8周龄 雌性野生型C57bl/6小鼠和Brg1-/-小鼠（Ⅱ型肺泡上皮细胞AEC2s上特异性条件敲低Brg1的C57bl/6小鼠）随机分为4组：正常 对照组、哮喘组、Brg1敲低对照组（Brg1-/-）和Brg1敲低后构建哮喘模型组（Brg1-/-+哮喘）,每组10只。哮喘组和Brg1-/-+哮喘组用 鸡卵清蛋白（OVA）制备过敏性哮喘模型,对照组用生理盐水代替。收取标本,用ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中 黏蛋白MUC5AC和IL-13的表达。糖原染色检测小鼠气道杯状细胞的增生和黏液分泌,q-PCR和免疫组化检测各组小鼠气道 黏蛋白MUC5AC的表达和定量。Western blot检测各组小鼠肺组织中STAT6、p-STAT6的表达。结果Brg1-/-+哮喘组较哮喘组 气道杯状细胞增生和黏液分泌均显著减少,BALF中IL-13、MUC5AC表达明显降低,肺组织MUC5AC mRNA表达显著降低, 同时肺组织STAT6和磷酸化STAT6显著下调。结论Brg1-/-敲低的小鼠建立哮喘模型时气道黏液分泌较野生型小鼠减轻,其可 能通过影响STAT6从而抑制黏蛋白MUC5AC的表达,抑制支气管哮喘气道黏液高分泌,表明Brg1具有促进哮喘气道黏液高分 泌的作用。     

咳喘穴位敷贴对哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响

目的 观察咳喘穴位敷贴对慢性支气管哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、咳喘穴位敷贴组、地塞米松组,每组10只.除对照组外,其余各组采用卵清蛋白致敏并激发的方法 制备慢性支气管哮喘大鼠模型.造模成功后,咳喘穴位敷贴组大鼠相应穴位贴敷咳喘穴位敷贴进行干预治疗,地塞米松组大鼠腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液0.5 mg/(kg·d).治疗14 d后取大鼠肺组织,HE染色观察肺组织形态学变化,免疫组织化学、Real time PCR检测肺组织JAK1和STAT6蛋白及mRNA的表达水平.结果 与对照组相比,哮喘模型组大鼠肺组织可见大量炎性细胞浸润,气道内有大量分泌物,肺泡结构紊乱;与哮喘模型组相比,咳喘穴位敷贴组和地塞米松组大鼠肺组织炎性细胞浸润减少、气道分泌物减少、肺泡排列规则.与对照组相比,哮喘模型组大鼠气道上皮JAK1、STAT6蛋白和mRNA表达明显升高(P<0.01);与哮喘模型组相比,咳喘穴位敷贴组和地塞米松组大鼠气道上皮JAK1、STAT6蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01),JAK1、STAT6 mRNA表达下调(P<0.01).结论 咳喘穴位敷贴能够改善支气管哮喘大鼠支气管及肺组织炎症,其机制可能与降低JAK1、STAT6 mRNA和蛋白表达有关.     

麻杏石甘汤对哮喘大鼠气道上皮STAT6和黏蛋白表达的调控

目的研究麻杏石甘汤对哮喘大鼠气道上皮STAT6及黏蛋白表达的影响,探讨其在哮喘中的作用及可能机制。方法将55只SPF级雄性SD大鼠随机分为5组：对照组（A组）、哮喘组（B组）以及高、中、低剂量麻杏石甘汤＋哮喘组（C组、D组、E组）。留取支气管肺泡灌洗液（BALF）,运用ELISA法检测其中IL-12、IL～13浓度;留取肺组织标本行HE染色观察气道炎症,免疫组化法检测STAT6表达,AB—PAS染色法分析气道黏蛋白表达。结果（1）麻杏石甘汤能降低哮喘组BALF中IL-13浓度,升高IL-12含量且高、中剂量组与哮喘组相比均有统计学意义（P〈0．05）。（2）麻杏石甘汤剂量依赖性减少哮喘组气道平滑肌及血管肌层增生,减少周围炎性细胞（嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和中性粒细胞）浸润。（3）STAT6蛋白在哮喘大鼠各级气道上皮均有表达,麻杏石甘汤组STAT6含量高于对照组,且高、中剂量组STAT6表达较哮喘组显著降低（P〈0．05）。（4）哮喘组存在气道黏液高分泌,麻杏石甘汤组较对照组黏蛋白表达增多,但较哮喘组明显减少。结论麻杏石甘汤可能通过IL-13／STAT6／黏蛋白途径减轻哮喘大鼠炎症反应、气道黏液高分泌,为哮喘的临床治疗提供新的思路。     

IL-17调控IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路影响喉癌细胞的侵袭和转移

目的 研究白介素(IL)-17通过IL-6/1L-6R/JAK1/STAT3信号通路调控人源性高分化喉癌细胞(Hep-2)侵袭、转移.方法 以Hep-2细胞为研究对象,设IL-17刺激剂0、1、50、100 ng/ml浓度组,Westem blot法检测不同分组在IL-17的刺激下,Hep-2细胞中IL-6、IL-6R、JAK1、p-JAK1、STAT3、p-STAT3的表达变化.迁移、侵袭实验观察IL-17的刺激对Hep-2细胞侵袭、迁移的影响.结果 Western blot实验中,在IL-17刺激下,1、50、100 ng/ml浓度组较0 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(p＜0.01),50、100 ng/ml浓度组较1 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、1L-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P＜0.01),100 ng/ml浓度组较50 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P＜0.01);各组间JAK1、STAT3的表达无明显变化.侵袭与迁移实验显示IL-17可以促进Hep-2细胞的侵袭和迁移.结论 IL-17可能通过IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路促进Hep-2细胞的侵袭和转移.     

孟鲁司特对哮喘大鼠瘦素、STAT3及IL-6含量的影响

目的：研究leptin、STAT3及IL-6在哮喘大鼠肺组织的表达，探讨白三烯受体拮抗剂孟鲁司特对leptin，STAT3和IL-6的影响。方法：24只SD大鼠随机分为正常对照组、支气管哮喘组和孟鲁司特组，每组8只，用新鲜配制的混悬液（100mgOVA和100mg氧氧化铝干粉加入1ml生理盐水）制成，第一天腹腔注射致敏，然后第15天起超声雾化吸入1％的OVA．生理盐水激发．每天20分钟，一共7天，建立支气管哮喘动物模型。孟鲁司特组在激发哮喘前1．5小时用孟鲁斯特溶于蒸馏水中灌胃1mg／只。末次激发后，左肺做肺泡关灌洗后取右肺中叶组织做免疫组织化学染色。结果：细胞因子leptin、STAT3和IL-6在支气管上皮呈阳性表达，哮喘组表达比正常组明显增多，leptin在孟鲁司特组表达比哮喘组更加增强，而STAT3和IL-6在孟鲁司特组表达都减少。结论：leptin，STAT3和IL-6可能都参与了哮喘气道免疫炎症过程；孟鲁司特可调控JAK—STAT3途径和IL-6的表达，但不能抑制leptin在气道的表达。     

哮喘小鼠肺组织中基质细胞衍生因子1的表达及布地奈德雾化液的干预作用

目的探讨哮喘小鼠肺组织中基质细胞衍生因子1（SDF-1）的表达及布地奈德雾化液干预的影响。方法清洁级雌性昆明小鼠30只,随机分为对照组、哮喘组和布地奈德雾化液干预组,每组10只。建立卵白蛋白致敏的哮喘小鼠模型并用布地奈德雾化液进行干预,用免疫组织化学方法检测各组小鼠肺组织中SDF-1的表达,分别用HE染色和Wright-Giemsa染色方法对各组小鼠气道及支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞情况进行评估。结果 SDF-1在对照组中呈低表达（0.21±0.02）,在哮喘组中表达明显增加（0.48±0.03）,使用布地奈德雾化液进行干预后SDF-1表达明显降低（0.29±0.01）,差异有统计学意义（P〈0.01）。哮喘组气道炎症细胞浸润程度明显高于对照组,干预后降低;哮喘组中BALF中炎细胞总数及嗜酸粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞计数均高于对照组,布地奈德雾化液干预后炎性细胞总数及各分类计数均降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论SDF-1在哮喘小鼠气道炎症细胞募集中可能有重要作用,布地奈德雾化液减轻哮喘小鼠气道炎症可能与降低SDF-1的表达有关。