胃癌组织高迁移率族蛋白B1的表达及与临床病理特征的关系

目的：检测高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在胃癌组织的表达,分析其与胃癌临床病理特征的关系。方法112例胃癌及癌旁组织标本应用免疫组织化学法、反转录 PCR、Western‐blot检测 HMGB1的表达、定量,应用统计学方法分析其与胃癌临床病理特征关系。结果免疫组织化学染色显示：HMGB1阳性颗粒主要位于细胞核;反转录 PCR、Western‐blot显示：胃癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织和正常胃组织（P＜0．01）,HMGB1过度表达与胃癌的分化程度、组织学的类型及有无淋巴结转移关系密切。结论 HMGB1在胃癌组织中高表达与胃癌的临床病理特征密切相关,推测其过表达可能与胃癌的侵袭、转移有关。     

微小RNA204在人肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的：研究微小RNA204（miR‐204）在人肾透明细胞癌（RCCC）中的表达及临床意义。方法收集泌尿外科行手术切除的RCCC及对应癌旁正常肾脏组织标本共65例,运用qRT‐PCR技术检测miR‐204在RCCC及癌旁组织中的表达水平,统计分析miR‐204表达水平与患者临床病理资料间的相关性;采用人工合成的miR‐204模拟物转染人RCCCCaki‐1细胞,分别采用qRT‐PCR及Western‐Blot检测转染后 miR‐204下游潜在靶点Bcl‐2及SIRT1 mRNA 及蛋白的表达变化。结果 miR‐204在RCCC组织中表达水平显著低于对应癌旁正常肾组织（P＜0．05）;miR‐204低表达与肿瘤体积增大（＞3 cm ,P＜0．05）、肿瘤淋巴结转移（P＜0．05）及高TNM分期（Ⅲ＋Ⅳ期,P＜0．05）显著相关;miR‐204转染人RCCCCaki‐1细胞后可显著降低细胞内Bcl‐2及SIRT1 mRNA及蛋白的表达水平（P＜0．05）。结论 miR‐204在RCCC组织中表达下调并与肿瘤恶性临床病理特征有关, miR‐204可能通过下调Bcl‐2及SIRT1的表达来抑制RCCC的发生、发展过程。     

趋化因子受体CCR7在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨趋化因子受体CCR7在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用RT—PCR及Western blot法检测32例胃癌及其癌旁对照组织中CCR7的表达。结果CCR7mRNA在胃癌组织中的表达水平为癌旁对照组的1．66倍（P〈0．01），且其表达水平与肿瘤TNM分期（P〈0．05）、浸润深度（P〈0．05）及淋巴结转移有关（P〈0．05）；Western blot结果显示CCR7蛋自在胃癌组织中的表达水平为癌旁对照组的2．3倍（P〈0．01），且高表达于肿瘤分期较晚（P〈0．05）、分化较差（P〈0．05）、浸润较深（P〈0．05）、有淋巴结转移（P〈0．05）和远处转移（P〈0．05）的组织。结论趋化因子受体CCR7可能与胃癌的发生、发展、侵袭、转移有关。     

胃癌组织SSTR亚型与P-ERK表达关系的研究

目的研究磷酸化的细胞外信号调节激酶（P—ERK）与生长抑素受体（SSTR）在胃癌中表达的关系，探索SSTR在生长抑素（SS）抑癌机制中的作用途径。方法应用免疫组化法和Western blot法检测胃癌、癌旁及浅表性胃炎组织SSTR1、SSTR3和P—ERK的表达。结果SSTR1、SSTR3、P—ERK主要着色于胞质内，在癌旁及浅表性胃炎组织阳性细胞主要位于胃腺颈部及周围。胃癌组的SSTR1、SSTR3表达较浅表性胃炎及癌旁组明显减少（P〈0．01）。胃癌组P—ERK的表达较浅表性胃炎及癌旁组增多（P〈0．01）。Western blot显示，胃癌组SSTR1、SSTR3表达与P—ERK表达呈负相关关系（r=-0．504和-0．527，P均〈0．05）。结论SS通过SSTR抑制胃癌的机制部分可能是经过MAPK—ERK信号通路进行的。     

紧密连接蛋白1和血管内皮生长因子C蛋白与大肠癌的关系研究

目的：探讨紧密连接蛋白1（Claudin‐1）与血管内皮生长因子C（VEGF‐C）在大肠癌组织中的表达情况及二者间的相互关系。方法对该院病理科收集的50例大肠癌组织、癌旁组织及50例正常大肠组织采用免疫组织化学S P法检测,根据患者的年龄、性别、是否发生淋巴结转移、浸润深度、临床分期进行综合比较,分析Claudin‐1和VEGF‐C蛋白在大肠癌组织中表达的相关性。结果大肠癌组织的Claudin‐1、VEGF‐C阳性率显著高于癌旁组织和正常大肠组织（χ2＝32．270,P＝0．000;χ2＝41．209,P＝0．000）;癌旁组织的 Claudin‐1、VEGF‐C阳性率显著高于正常大肠组织（χ2＝7．294,P＝0．007;χ2＝5．741,P＝0．017）。大肠癌组织Claudin‐1的表达与分化程度、浸润程度、TNM 分期、淋巴结转移具有密切关系（P＜0．05）,大肠癌组织VEGF‐C的表达与浸润程度、TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小具有密切关系（P＜0．05）。大肠癌Claudin‐1、VEGF‐C表达具有显著的正相关关系（χ2＝10．953,P＝0．001,r＝0．468）。结论大肠癌组织的Claudin‐1、VEGF‐C表达显著高于癌旁组织和正常大肠组织,大肠癌组织的Claudin‐1、VEGF‐C表达与临床分期等因素具有一定的关系。     

直肠癌组织中Id-2和MMP-9的表达与临床病理学指标的关系

目的：观察在人直肠癌组织中分化抑制因子‐2（Id‐2）和基质金属蛋白酶‐9（MMP‐9）的表达情况,分析两者表达水平的相关性,探讨直肠癌临床病理学指标与两者的表达水平的关系。方法收集直肠癌组织和癌旁正常组织标本56例,采用免疫组织化学方法观察Id‐2和MMP‐9在直肠癌和癌旁正常组织中的表达水平,Spearman 相关分析法分析Id‐2与MMP‐9表达有无相关性,分析Id‐2与MMP‐9表达与直肠癌临床病理学指标之间的关系。结果 Id‐2在直肠癌组织的阳性表达率明显高于癌旁正常组织（73．21％ vs ．48．21％,P＜0．05）,MMP‐9在直肠癌组织中的阳性表达率高于癌旁正常组织（71．43％ vs ．44．64％,P＜0．05）。Spearman相关分析检测 Id‐2与 MMP‐9表达水平存在正相关性（r＝0．393,P＝0．003）;Id‐2和MMP‐9表达水平与直肠癌分化程度、TNM 分期和淋巴结转移有关（P＜0．05）;而与年龄和性别无关（P＞0．05）。结论 Id‐2和MMP‐9的表达水平与直肠癌的发生发展存在着密切的关系,直肠癌组织中Id‐2高表达可能是通过MMP‐9途径来促进肿瘤的侵袭转移。     

Dicer在胃癌组织的表达及临床意义

目的：探讨Dicer在胃癌组织中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学法检测40例人胃癌组织和40例癌旁正常胃组织标本中Dicer的表达,并结合临床资料进行统计学分析。结果：Dicer在胃癌组织中阳性率为47．5％,癌旁正常胃组织为85．O％,Dicer阳性率低于癌旁正常胃组织（P〈0．01）;胃癌组织高、中度分化、有淋巴结转移、临床分期早期患者Dicer阳性率均高于低度和未分化、无淋巴结转移、临床进展期患者（P〈0．05～P〈0．01）,而在性别、年龄和癌灶原发部位间Dicer阳性率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：胃癌组织中Dicer表达明显降低,并且Dicer表达与胃癌分化程度、有无淋巴结转移及临床分期有一定关系。     

胃癌细胞株及胃癌组织程序性死亡受体-1的表达

目的: 检测程序性死亡受体-1（programmed death receptor-1,PD-1）在胃癌细胞株及临床胃癌患者肿瘤组织中的表达。方法: 采用蛋白质印迹法检测6种胃癌细胞株及3例胃癌配对标本中PD-1的表达。免疫组织化学法检测3对临床胃癌患者癌组织及相应癌旁组织中PD-1的表达。流式细胞术定量分析PD-1在4种胃癌细胞株中的表达。结果： 6种胃癌细胞株中均有PD-1的表达,其中SGC-7901和HGC-27细胞PD-1的表达量相对较高。胃癌患者胃癌组织及相应的癌旁组织中也有PD-1的表达。结论： 各种胃癌细胞株均有PD-1的表达,PD-1在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织。     

胃癌中p-Stat3活化和SOCS3表达的临床病理意义及其对预后的影响

目的：探讨胃癌及癌旁组织中信号传导与转录激活因子3（Stat3）的活化及细胞因子信号转导抑制蛋白3（SOCS3）的表达水平对胃癌的发生、发展以及预后的影响。方法应用免疫组织化学Envision法检测53例胃癌以及其中27例相应癌旁组织中活化的Stat3（p‐Stat3）的活化及SOCS3的表达水平,并结合患者的临床病理及随访资料进行分析。结果胃癌组织细胞核中p‐Stat3的活化水平显著高于癌旁组织,细胞质中SOCS3的阳性表达明显低于非癌组织（P＜0．05）。胃癌组织中p‐Stat3活化水平与肿瘤浸润深度、分化程度和TNM分期呈明显正相关,SOCS3的表达与肿瘤浸润深度、TNM分期及淋巴结转移存在明显的负相关（P＜0．05）。胃癌中p‐Stat3活化水平与SOCS3表达水平呈明显负相关（r＝－0．492,P＜0．05）。Kaplan‐Meier生存分析结果显示,p‐Stat3的活化水平与患者生存率呈显著负相关（χ2＝－5．05,P＜0．05）;相反,SOCS3表达水平则与患者生存率呈显著正相关（χ2＝10．852,P＜0．05）。结论p‐Stat3水平增高及负调节分子SOCS3的表达减少可能参与胃癌的发生、发展,可为评估胃癌预后的潜在临床指标。     

FAK、FAKpY397和Src在肝细胞癌中的表达和意义

目的：探讨黏着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）、磷酸化黏着斑激酶（phospho-FAK Y397,FAKpY397）和类固醇激素受体共活化因子（sceroid recptor coactivator,Src）在不同分化程度肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达情况以及三者的相关性。方法：通过免疫组织化学法和人工计数法检测44例HCC组织及8例癌旁正常肝脏组织中FAK、FAKpY397和Src的表达。结果：FAK、FAKpY397和Src在HCC组织中表达均高于正常肝脏组织（P=0.027、P=0.041、P=0.030）且三者均与HCC分化程度有关（P=0.026、P=0.045、P=0.005）,FAK和Src低分化组阳性率高于高分化组（P=0.015、P=0.002）。HCC组织中三者表达两两之间呈正相关（P=0.000、P=0.000、P=0.000）。结论：HCC组织中FAK、FAKpY397和Src表达与HCC分化程度有关;FAK和Src低分化组阳性率高于高分化组且三者相互之间存在一定相关性。     

胃动蛋白1在EB病毒相关胃癌中的表达及其意义

目的：研究EB病毒（EBV）感染与胃癌的相关性及胃动蛋白1（GKN1）表达与胃癌临床病理特征、EBV感染的关系,为EBV相关胃癌的治疗、控制和预防提供理论依据。方法胃腺癌患者104例,分析EBV感染与临床病理特征的关系。采用免疫组织化学方法检测GKN1在慢性胃炎组织、肠化胃黏膜、慢性胃溃疡组织、原位癌及胃癌组织中的表达情况;应用实时定量PCR检测胃癌及癌旁组织中GKN1 mRNA的表达水平与临床病理特征的关系。结果 EBV感染与胃癌Lauren’s分型和年龄密切相关（P＜0．05）,而与患者的性别、肿瘤部位、病理类型及TNM分期无显著相关性（P＞0．05）。GKN1 mRNA在胃腺癌和癌旁组织中的表达水平差别具有统计学意义（P＜0．05）,且 GKN1 mRNA 的低表达水平与肿瘤大小（P＝0．012）、发生部位（P＝0．022）及 EBV 感染（P＝0．034）密切相关。结论 GKN1可能是EBV相关胃癌潜在的肿瘤标志物。     

异甘草素诱导人卵巢癌细胞株SKOV3凋亡及自噬的研究

目的：观察异甘草素（ISL）对人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞株SKOV3体外增殖的抑制作用,并探讨其可能存在的分子机制。方法四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察ISL对SKOV3细胞生长的抑制作用;吖啶橙／溴化乙锭双荧光染色后观察细胞形态变化;流式细胞术AnnexinⅤ‐FITC／PI双染检测ISL对细胞凋亡的影响;Westernblot检测凋亡相关蛋白Bcl‐2、Bax及自噬相关蛋白Beclin1、LC3的表达水平。结果ISL能够抑制SKOV3细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性;荧光染色后可见细胞核变圆,碎裂,染色质浓缩;流式细胞仪检测ISL（5、10、20μg／mL）作用于SKOV3细胞48h后,凋亡率明显高于ISL0μg／mL组,差异具有统计学意义（P＜0．05）;Westernblot结果显示ISL（5、10、20μg／mL）作用于SKOV3细胞48h后Bcl‐2蛋白的表达下调,Bax、Beclin1、LC3蛋白的表达上调,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论ISL对人卵巢癌SKOV3细胞具有明显的抑制增殖和诱导凋亡的作用,其抗体外肿瘤机制可能与激活线粒体凋亡通路及自噬通路相关。     

胃癌组织中NRP-1的表达与临床病理特征及预后的相关性

目的：检测胃癌组织中神经纤毛蛋白‐1（NRP‐1）的表达,分析其与胃癌临床病理特征之间的关系,探讨其对判断胃癌预后的价值。方法回顾性分析168例胃癌患者的临床病理资料及预后情况,采用免疫组化法检测癌组织及相对正常组织NRP‐1的表达,研究 NRP‐1的表达与临床病理及预后之间的关系。结果（1）NRP‐1在胃癌组织中表达高于相对正常组织（66．7％ vs ．8．33％,P＜0．05）。（2）NRP‐1的表达与肿瘤大小、细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移及 TNM 分期有关（P＜0．05）。（3）NRP‐1高表达的患者的生存期短于低表达的患者（中位生存期28个月 vs ．64个月,P＜0．05）。（4）COX比例风险模型进行多因素分析表明,NRP‐1的表达为影响胃癌预后的独立危险因素（P＜0．05）。结论（1）NRP‐1在胃癌的发生、发展中起到重要作用,与胃癌的恶性生物学行为密切相关。（2）NRP‐1高表达提示预后不良。（3）NRP‐1有望作为判断胃癌生物学行为和预后的参考指标。     

miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达及对胃癌生物学行为的影响

目的:探讨miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达情况及对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:应用实时荧光定量PCR法分析31例胃癌组织和癌旁组织样本以及人胃癌细胞系SGC-7901、MKN45、人正常胃黏膜上皮细胞系GES1中miRNA-101的表达水平;建立miRNA-101重组腺病毒载体感染胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,对照组为感染阴性对照病毒的胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,MTT法检测miRNA-101对胃癌细胞增殖能力的影响;Transwell小室法检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力.结果:胃癌组织中miR-101表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01);miR-101在细胞系SGC-7901和MKN45中的表达量明显低于人正常胃黏膜上皮细胞系GES1(P<0.01).孵育48 h后MKN45细胞miRNA-101组的细胞增殖能力低于其对照组(P<0.05);而孵育72 h后SGC-7901细胞和MKN45细胞的miRNA-101组细胞增殖能力均亦低于相应对照组(P<0.05).迁移试验结果显示,miRNA-101组迁移的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数明显低于相应对照组(P<0.01);侵袭实验结果显示,miRNA-101组侵袭的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数亦明显低于其对照组(P<0.01).结论:miRNA-101在胃癌组织和胃癌细胞系中表达下调,转染miRNA-101可明显降低SGC-7901和MKN45细胞的增殖、迁移、侵袭能力,miRNA-101可能参与了胃癌疾病的发生及发展.     

他莫昔芬对人胃癌细胞增殖和丝氨酸蛋白酶抑制剂9表达的影响

目的：研究他莫昔芬（TAM）对胃癌细胞雌激素受体α、β（ERα和ERβ）的表达情况及对胃癌细胞增殖和丝氨酸蛋白酶抑制剂9（PI9）表达的影响。方法对前期筛选出的ERα表达阳性胃癌细胞株MNK45、SGC7901（PI9表达阳性）和ERβ表达阳性胃癌细胞株BGC823（PI9表达阴性）,采用免疫荧光化学法检测 TAM 对ERα和ERβ表达的影响,CCK8法检测 TAM 干预后胃癌细胞株的增殖情况,逆转录PCR观察TAM干预后PI9表达的变化。结果 ERα表达于MNK45和SGC7901细胞核上, ERβ表达于BGC823细胞核上,经TAM 干预后 ERα和 ERβ表达均无明显改变;TAM 在0．1～100．0μmol／L 时可明显抑制SGC7901、MNK45的细胞增殖,与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0．05）,对BGC823和MNK28的细胞增殖无明显剂量依赖关系;TAM干预后SGC7901的PI9 mRNA的相对灰度值为（0．402±0．020）,MNK45的PI9 mRNA的相对灰度值为（0．359±0．048）,较阴性对照组灰度值均明显降低,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 TAM 对ERα和PI9阳性表达细胞的增殖抑制作用强于PI9阴性表达细胞,并呈较好的剂量依赖性;TAM 对胃癌的生长抑制作用可能与改善PI9介导的免疫耐受有关。     

细胞周期素E、P21WAF1在胃癌中的表达及意义

目的:本实验通过检测细胞周期素E(Cyclin E)、P21 WAF1在胃癌中的表达及其与临床病理指标的关系,探讨二者在胃癌发生及预后中的作用.方法:应用免疫组化S-P法检测78例胃癌石蜡包埋标本及随机选取的同期癌旁组织35例中Cyclin E、P21WAF1的表达情况.结果:癌旁组织标本中Cyclin E、P21WAF1的阳性表达率明显低于胃癌组织阳性表达率.Cyclin E的表达与胃癌组织分化程度有关,Cyclin E阳性率越高,胃癌的分化程度越低.有淋巴结转移组P21WAF1的阳性表达率低于无淋巴结转移组的阳性率.结论:Cyclin E、P21WAF1与胃癌的发生、发展有关.     

CTGF、PCNP在胰腺癌中表达意义的探讨

目的：探讨结缔组织生长因子（CTGF）、PCNP在胰腺癌组织中的表达水平及意义。方法采用免疫组织化学法与蛋白质免疫印迹法检测39例胰腺癌及癌旁组织中CTGF和PCNP的表达情况,分析其与临床病理因素的关系。结果 CTGF、PCNP在胰腺癌中的阳性表达率均显著高于癌旁组织和正常胰腺组织,差异有统计学意义（χ2＝60．41、51．46,均 P＜0．01）;CT‐GF、PCNP的阳性表达率分别与TNM分期、淋巴结转移明显相关（P＜0．05）。结论 CTGF、PCNP在胰腺癌组织中表达明显上升,且两者的表达水平与肿瘤的分期、淋巴结转移状况有着明显的相关性。     

尼美舒利通过PPA Rγ途径抑制结肠癌细胞增殖

目的：观察过氧化物酶增殖物激活受体γ（PPARγ）抑制剂GW9662干预后,尼美舒利（N）对结肠癌细胞凋亡和增殖的影响,探讨PPARγ途径在N抗癌机制中的作用。方法体外培养结肠癌SW480细胞,设立不加药对照组、单用PPARγ抑制剂GW9662组（GW9662组,药物浓度0．1、0．5、1．0、5．0μmol／L）、单用N组、GW9662＋N组共4组。MTT检测各组细胞生长抑制率;流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡及细胞周期的变化。Westernblot检测各组中PPARγ、p21Waf1、p27Kip1、Bcl‐2、Bax、VEGF蛋白的表达。结果MTT检测结果：GW9662组较对照组细胞增殖差异无统计学意义（P＞0．05）;N组呈时间依赖性抑制SW480细胞增殖（P＜0．01）;在GW9662＋N组中GW9662呈剂量及时间依赖性减弱N抑制细胞增殖的作用。FCM检测结果：细胞凋亡率在GW9662组与对照组之间差异无统计学意义（P＞0．05）;N组与对照组比较,SW480细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义（P＜0．01）,G0／G1期细胞比例明显增加,S期及G2／M期细胞比例显著减少;GW9662＋N组细胞凋亡率较N组明显降低（P＜0．01）,细胞在G0／G1期的比例降低,S期和G2／M期细胞的比例升高。Westernblot检测结果：N组与对照组比较SW480细胞的PPARγ、p21Waf1、p27Kip1、Bax蛋白表达率显著增加（P＜0．05或P＜0．01）,Bcl‐2、VEGF的表达率则明显下调（P＜0．01）;GW9662＋N组与N组比较,SW480细胞的PPARγ、p21Waf1、p27Kip1、Bax蛋白显著表达下调（P＜0．05或P＜0．01）,而Bcl‐2、VEGF的表达则上调（P＜0．05）。结论N在体外能有效抑制结肠癌细胞SW480的增殖,促进其凋亡。PPARγ通路在N影响结肠癌细胞增殖、凋亡中发挥重要作用。     

Pim-1在非小细胞肺癌中的表达及其与c-M yc的相关性

目的：研究原癌基因Pim‐1在非小细胞肺癌及癌旁正常组织中的表达情况及其与c‐M yc的相关性。方法收集该院胸外科手术切除的非小细胞肺癌患者的肺癌及癌旁正常肺组织标本各30例,统计临床病例资料及跟踪后期病理结果,利用RT‐PCR、qRT‐PCR及免疫组织化学方法检测肺癌及癌旁正常组织中 Pim‐1 mRNA、c‐Myc及 Pim‐1蛋白的表达,分析Pim‐1表达与临床病理特征及c‐Myc表达的相关性。结果在非小细胞肺癌中Pim‐1阳性率、mRNA及蛋白表达量明显高于癌旁组织, mRNA表达量分别为0．798±0．083和0．394±0．107（P＜0．01）,蛋白阳性例数分别为18例及6例（P＝0．002）。Pim‐1蛋白的表达与非小细胞肺癌患者的年龄差距、性别差异、有无吸烟史、肿瘤病理类型及分化程度无关（P＞0．05）,但与有无淋巴结转移及肿瘤的TNM分期有关（P＜0．05）,有淋巴结转移及TNM分期升高,其表达量也随之上调。Pim‐1与c‐Myc蛋白表达呈正相关,相关系数（r）为0．433（P＝0．017）。结论 Pim‐1在非小细胞肺癌组织中呈高表达趋势,且随着存在淋巴结的转移及 TNM 分期的升高,其表达也随之增加。