肝纤维化大鼠TGF-β1与TIMP-1 mRNA的表达及补肾柔肝方的治疗作用

目的:探讨中药复方补肾柔肝方对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导大鼠肝纤维化后肝脏组织金属蛋白酶抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)和转化生长因子β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)的影响,以了解其对肝纤维化的治疗作用和分子机制.方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组和治疗组,对模型组和治疗组运用DMN诱导大鼠肝纤维化.治疗组在造模4周后给予补肾柔肝方灌胃,剂量10 g·kg-1·d,共治疗4周.第8周末处死全部大鼠,对肝组织进行HE和天狼猩红染色观察,并采用RT-PCR半定量方法,检测大鼠肝组织TIMP-1及TGF-β1mRNA的表达水平.结果:肝组织病理学研究结果显示DMN可以成功诱导大鼠肝纤维化,模型组肝组织TIMP-1和TGF-β1mRNA表达明显增强,中药复方治疗组与模型组相比明显减弱,而正常对照组表达较少.结论:TIMP-1与TGF-β1mRNA的表达与肝纤维化的发生密切相关,中药复方补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1及TGF-β1具有明显的抑制作用,可达到抗肝纤维化的作用.     

酒精性肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1／Smads信号分子表达的变化

目的观察TGF-1／Smads信号分子在酒精性肝纤维化大鼠肝组织中的变化,探讨酒精性肝纤维化的发病机制。方法50只SD大鼠,随机分成模型组和对照组各25只。模型组用56度白酒灌胃（15m1．kg-1·d-1）致肝纤维化,对照组以等量生理盐水代替灌胃。6个月后全部处死取肝待检。采用HE染色观察肝纤维化程度,免疫组化法观察肝组织中TGF-β1蛋白的表达水平,RT-PCR法观察肝组织中TGF—β1和SmadsmRNA的表达水平。结果6个月酒精灌胃能成功制作大鼠酒精性肝纤维化模型。和对照组相比较,模型组肝组织中TGF—p1蛋白表达水平显著升高（P〈0．01）,TGF-β1,smad3,samd4mRNA表达水平显著升高（均P〈0．01）,而smad7mRNA水平显著降低（P〈0．05）。结论TGF-βl／Smads信号通路参与酒精性肝纤维化的形成过程,其中Smad7起着对肝纤维化负调控的作用。     

加味桃核承气汤对肝纤维化大鼠TGF-β1蛋白表达的影响

[目的]观察加味桃核承气汤对四氯化碳肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达的影响。[方法]用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,研究分组为正常对照组、模型对照组、加味桃核承气汤高、中、低剂量治疗组和秋水仙碱对照组;灌胃给药,疗程8周;用免疫组化技术检测肝组织TGF-β1的蛋白表达;检测血清ALT、AST水平;用苦味酸-天狼红胶原染色方法进行半定量肝纤维化计分(SSS)。[结果]高、中、低剂量组及秋水仙碱组的TGF-β1的表达水平均低于模型对照组;经加味桃核承气汤治疗后血清ALT、AST水平及肝纤维化SSS计分显著下降。[结论]加味桃核承气汤可抑制肝纤维化大鼠TGF-β1的表达,达到抗肝纤维化作用。     

五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1表达影响的实验研究

[目的]五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。[方法]用白酒辅以吡唑、玉米油的混合食料灌胃的方法建立大鼠酒精性肝纤维化模型,随机分为正常组、模型组、中药低剂量组、中剂量组、高剂量组、易善复组(正常组10只,其余组各18只)。12周后处死苏木精-伊红(HE)、Masson染色观察肝纤维化的形成;酶联免疫检测法(ELISA)检测血清Ⅲ型前胶原蛋白肽(PⅢP)、层黏连蛋白(LN)两者含量;实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中TGF-β1 mRNA的表达。[结果]模型组大鼠血清Ⅲ型前胶原蛋白肽(PⅢP)、层黏连蛋白(LN)含量和肝组织TGF-β1mRNA的表达明显增多,各治疗组相对于模型组均有不同程度减少,其中五田保肝液中、高剂量组降低更为明显。[结论]五田保肝液可抑制酒精性肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1的表达,这可能是其防治酒精性肝纤维化的机制之一。     

抗纤Ⅱ号对肝纤维化大鼠TGF-β1,Smad3表达的影响

目的在过去实践的基础上,欲探讨复方抗纤Ⅱ号抗肝纤维化的治疗机制。方法雄性Wistar大鼠分成5组,除正常对照外,余4组大鼠肝纤维化造模均采用腹腔注射猪血清(0.5mL/次,2次/周)。抗纤Ⅱ号早期治疗组在第3周给予中药灌胃,1g/100g每天1次。抗纤Ⅱ号晚期治疗组在造模第9周给予中药灌胃,1g/100g每天1次。γ-干扰素治疗组在造模第9周每天皮下注射10万单位的干扰素。模型组和正常对照组给等量的生理盐水灌胃。在12周杀大鼠,HE和Masson染色观察肝纤维化的形成,RT-PCR检测肝组织中TGF-β1和Smad3mRNA的表达,免疫组化观察TGF-β1和Smad3蛋白的表达。结果病理学观察,抗纤Ⅱ号早期治疗组显著逆转了猪血清诱导的肝纤维化,与模型组比较,经HE和Masson染色抗纤Ⅱ号治疗组能明显降解纤维化大鼠肝中的胶原(P<0.05)。PT-PCR分析TGF-β1和Smad3mRNA的表达在抗纤Ⅱ号治疗组均明显减少。同时分析表明TGF-β1和Smad3蛋白的表达在抗纤Ⅱ号治疗组均明显减少。结论抗纤Ⅱ号能逆转免疫引起的肝纤维化,这是由于能促进肝脏胶原的降解作用和抑制调节与纤维化有关的细胞因子TGF-β1及下游信号Smad3的表达,最终导致肝纤维化的逆转.肝纤维化的早期治疗用药优于后期的治疗。     

护肝片对纤维化肝组织TGF-β1表达的抑制作用

目的:探讨护肝片对中、晚期纤维化肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白及mRNA表达的影响.方法:采用125 g/L CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型,自模型复制之日起,大鼠分组灌胃给药(护肝片921 mg/kg)或溶媒,每日1次,直至8,13周末,分别处死动物,取左叶肝组织石蜡包埋,制作组织芯片.免疫组化S-P法检测大鼠肝组织TGF-β1蛋白的表达;原位杂交检测TGF-β1 mRNA的表达.用MetaMorph图像分析系统对TGF-β1蛋白及mRNA的表达量进行定量分析.结果:①模型复制8周和13周,模型组的肝损伤及其纤维化分级均明显高于正常组(P<0.01),护肝片组的肝损伤及其纤维化分级均轻于模型组.②模型复制8周和13周,模型组TGF-β1及mRNA的表达均较正常组显著增多(P<0.01);且其蛋白和mRNA的表达相互间呈显著正相关(P<0.01).③护肝片显著抑制8,13周纤维化肝组织TGF-β1蛋白及mRNA的表达(P<0.01).结论:护肝片可减轻肝组织的损伤及其纤维化程度,它可能在蛋白及mRNA双重水平上抑制TGF-β1的表达,从而发挥抗肝纤维化作用.     

转化生长因子β1在白细胞介素10干预肝纤维化大鼠肝星形细胞的表达

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在白细胞介索10(IL-10)干预肝纤维化大鼠星形细胞中的表达,阐明外源性IL-10的抗纤维化作用及可能机制.方法60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(N组,8只)、肝纤维化模型组(C组,28只)和IL-10干预组(Ⅰ组,24只),分别于CCl4造模第7周及11周采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉灌注分离肝星形细胞.半定量RT-PCR法检测各组新分离肝星形细胞中TGF-β1mRNA的表达水平;SP免疫细胞化学法检测各组原代培养72 h后肝星形细胞TGF-β1蛋白的表达水平.并于上述两个时间段分别将各组肝组织行苏木精-伊红染色判断炎症和肝纤维化程度.结果成功建立大鼠肝纤维化模型及IL-10干预模型,并对大鼠肝星形细胞进行分离及原代培养.与正常组相比,纤维化模型组TGF-β1的mRNA水平显著升高(P＜0.01),经IL-10干预后则明显降低(P＜0.01).纤维化模型组星形细胞TGF-β1mRNA水平在第11周时低于第7周(P＜0.05).SP免疫细胞化学法检测各组TGF-β1的蛋白表达情况与mRNA结果相平行.结论IL-10可抑制肝纤维化大鼠星形细胞中TGF-β1表达,具有抗纤维化作用.     

β-胡萝卜素对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白和转化生长因子-β_1表达的影响

目的探讨β-胡萝卜素对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法将48只大鼠随机分为对照组、肝纤维化模型组和肝纤维化β-胡萝卜素干预组,SABC法免疫组织化学染色显示α-SMA及TGF-β1,HE染色显示肝的显微结构,透射电镜观察肝超微结构。结果肝纤维化模型组、对照组和β-胡萝卜素干预组α-SMA和TGF-β1表达的平均灰度值比较均有显著性差异(P<0.01)。电镜结果显示,对照组肝星形细胞内充满脂滴,其周围无明显胶原纤维沉积;肝纤维化组肝星形细胞内的脂滴较对照组减少;肝纤维化β-胡萝卜素干预组肝星形细胞内脂滴的量介于对照组与肝纤维化组之间。结论β-胡萝卜素抑制α-SMA和TGF-β1的表达,能降低由CC l4诱导的大鼠肝纤维化的程度,其作用途径与抑制肝脏星形细胞中的脂滴丢失有关。     

清肝抑纤饮及其拆方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1及其mRNA表达的影响

目的:研究清肝抑纤饮及其拆方对CCl4致肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及TGF-β1mRNA表达的影响,探讨清肝抑纤饮抗肝纤维化的机制。方法:110只大鼠随机分为9组,空白对照组给予普通饲料喂养,自由饮水,其余各组均给予四肢或背部皮下注射40%CCl4-花生油溶液,每周注射两次,同时给予清肝抑纤饮及其拆方组成的中药煎剂灌胃,共8周。8周后处死大鼠,ELISA法检测大鼠肝组织匀浆TGF-β1浓度,RT-PCR法检测肝组织TGF-β1 mRNA表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠TGF-β1的mRNA和蛋白水平均明显异常表达;清肝抑纤饮组及合药1组可显著降低肝组织匀浆TGF-β1含量,并能降低TGF-β1 mRNA表达水平,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:清肝抑纤饮及其拆方预防用药可降低肝纤维化大鼠肝组织内TGF-β1 mRNA及蛋白的表达水平,其中清热解毒与凉血活血药物的配伍起主要作用。     

水飞蓟宾对硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3信号通路的调节作用

目的 探讨水飞蓟宾对硫代乙酰胺(TAA)诱导的肝纤维化大鼠肝组织的保护作用及对TGF-β1/Smad3信号通路的调节作用。方法45只大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组及水飞蓟宾组,每组15只。除对照组外,其余大鼠使用硫代乙酰胺建立肝纤维化大鼠模型,水飞蓟宾组大鼠按照756 mg/kg的剂量给予水飞蓟宾灌胃,对照组及模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,1次/d,给药6周。全自动生化分析仪检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)水平,苏木精 伊红（HE）染色法检测各组大鼠肝组织病理学变化,免疫印迹(Western blot)检测大鼠肝组织TGF-β1、Smad3水平。结果 与对照组比较,模型组肝纤维化大鼠血清ALT、AST、ALP、GGT、HA、LN、PCⅢ、ColⅣ水平及肝组织TGF-β1、Smad3水平显著升高(均P＜0.05),肝组织发生明显病理学变化;与模型组比较,水飞蓟宾组大鼠血清ALT、AST、ALP、GGT、HA、LN、PCⅢ、ColⅣ水平及肝组织TGF-β1、Smad3水平显著降低(P＜0.05),肝组织病理学明显改善。结论 水飞蓟宾能够明显改善硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠肝功能,抑制肝纤维化因子水平,改善大鼠肝组织病理学进展,其机制可能与调节TGF-β1/Smad3信号通路有关。     

中药胃管注入治疗肠梗阻临床观察

目的观察中药胃管注入治疗肠梗阻的临床疗效。方法将114例肠梗阻患者随机分为研究组和对照组,每组57例。对照组仅给予外科基础治疗,研究组在对照组疗法基础上辨证给予具有行气活血通腑、活血解毒通腑、健脾润肠功效的中药经胃管注入治疗。治疗结束后观察两组临床疗效和中转手术率。结果研究组临床疗效显著优于对照组(P<0.05),中转手术率显著低于对照组(P<0.05)。结论在外科基础治疗之上,经胃管辨证给予具有行气、活血、解毒、通腑、健脾、润肠功效的中药能提高肠梗阻的临床疗效,降低中转手术率。     

蔡氏内异Ⅰ号方治疗子宫内膜异位症

目的:观察蔡氏内异Ⅰ号方治疗子宫内膜异位症气滞血瘀证患者的临床疗效。方法:60例气滞血瘀型子宫内膜异位症患者采用随机数字表法平均分为治疗组(给予蔡氏内异Ⅰ号方)与对照组(给予安慰剂),两组均连续治疗3个月经周期。治疗后比较两组患者治疗前后痛经症状评分、中医证候评分、盆腔包块大小、血清CA125水平及两组患者临床疗效。结果:治疗组有效率(83.33%)显著优于对照组(43.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组与对照组痛经有效率分别为86.67%、40.00%,两组治疗后痛经症状评分、视觉模拟评分、疼痛分级指数及现时疼痛强度评分均低于治疗前(P<0.01),且治疗组优于对照组(P<0.05)。治疗组与对照组中医证候有效率分别为83.33%、46.67%,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗后,治疗组卵巢囊肿直径明显小于治疗前(P<0.01),血清CA125水平明显低于治疗前(P<0.05)。结论:蔡氏内异Ⅰ号方治疗气滞血瘀型子宫内膜异位症患者疗效显著,可显著降低患者痛经程度和血清CA125水平,改善中医证候相关症状,缩小卵巢囊肿。     

邵氏组方配突三针治疗甲状腺良性结节

目的:观察邵氏组方配突三针治疗甲状腺良性结节的临床疗效。方法:180例甲状腺良性结节患者随机平均分为观察组和对照组。观察组给予邵氏组方配突三针,对照组给予左甲状腺素钠,两组患者均治疗两个月。比较两组患者治疗前后中医证候评分、自身抗体水平、甲状腺情况及临床疗效。结果:治疗后,两组患者中医证候评分均低于治疗前,且观察组低于同期对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者血清甲状腺微粒体抗体(thyroid microsomal antibody,TMAb)及甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibodies,TGAb)水平显著低于治疗前,观察组以上指标低于同期对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者甲状腺结节体积、数量及直径均显著低于治疗前,观察组以上指标低于同期对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的结节大小疗效和中医证候疗效分别为91.11%、86.67%,对照组分别为46.67%、41.11%,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:邵氏组方配突三针治疗甲状腺良性结节疗效显著,可明显降低患者中医证候积分,TGAb、TMAb抗体水平及甲状腺结节体积、数量。     

化浊调脂方治疗高脂血症痰瘀互结型的临床疗效

目的:探讨临床经验总结而来的化浊调脂方治疗高脂血症痰瘀互结型的疗效.方法:用随机数字表法把100例高脂血症(痰瘀互结型)患者分成观察组和对照组各50例,观察组使用化浊调脂方治疗,对照组使用阿托伐他汀钙片治疗,6周为治疗周期.治疗后对比两组患者血清各血脂成分及中医证候评分的变化.结果:治疗后两组患者总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均显著降低(P<0.05),观察组较对照组明显(P<0.05).治疗后两组中医证候积分均显著改善(P<0.05),观察组较对照组明显(P<0.05),观察组总有效率达92％,对照组总有效率为84％.结论:化浊调脂方治疗高脂血症(痰瘀互结型)具有确切的临床疗效,具有祛痰通络、活血化瘀之功,能全面调节血脂.     

肺肠同治理论辨治慢性阻塞性肺疾病临床研究

目的:观察肺肠同治理论用于治疗慢性阻塞性肺疾病的临床疗效。方法:将180例慢性阻塞性肺疾病患者随机分成观察组90例和对照组90例。对照组采用常规西药治疗。观察组在对照组治疗基础上加用中医学肺肠同治理论辨证论治:痰热阻肺证采用宣白承气汤加减治疗,方药组成:厚朴10 g,生石膏20 g,茯苓10 g,陈皮10 g,甘草6 g,莱菔子10g,瓜蒌皮20 g,大黄9 g,清半夏10 g,炙麻黄10 g,苦杏仁15 g,水煎服,每日1剂,分两次服用;肺肾阴虚证采用增液承气汤加减治疗,方药组成:大黄9 g,生地黄20 g,熟地黄10 g,玉竹10 g,天花粉10 g,芒硝10 g,玄参20 g,麦冬15 g,生甘草6 g,百合10 g,水煎服,每日1剂,分两次服用。治疗后比较两组患者Pa O2、Pa CO2、p H值、用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)、FEV1/FVC比值及两组患者的临床疗效。结果:治疗后观察组Pa O2(70.2±8.5)mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa)、Pa CO2(44.3±3.9)mm Hg、p H值(7.36±0.20),两组比较,差异均有统计学意义(P0.05);观察组FVC(2.8±0.5)L、FEV1(1.8±0.4)L、FEV1/FVC(64.3±9.0)%,两组比较,差异均有统计学意义(P0.05);观察组有效率为94.4%,对照组有效率为76.7%,两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:采用肺肠同治理论辨证论治慢性阻塞性肺疾病疗效确切,可改善患者的临床症状及预后,不良反应少。     

益气活血方与补肾生髓方对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带形态学影响

目的观察益气活血方（脑络欣通）和补肾生髓方对脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带形态学的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、益气活血方组及补肾生髓方组。采用线栓法复制局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,脑缺血2 h,分别再灌注1,2,3周,采用苏木精-伊红、Spoerrl染色法观察缺血半暗带形态学变化。结果苏木精-伊红染色示再灌注3周时模型大鼠缺血半暗带神经细胞变性坏死严重,可见核浓缩现象与胶质细胞增生及少量淋巴细胞浸润。两种中药复方在再灌注3周时,缺血半暗带神经细胞变性坏死减轻,胶质细胞增生不明显,可见少量核浓缩现象。Spoerrl染色示神经细胞突触呈蓝红色,模型组神经突触阳性总面积单位显著减小（P〈0.01）;再灌注各时间点,两种中药复方组神经细胞突触阳性总面积单位较模型组显著增多（P〈0.01）;再灌注2周补肾生髓方组比益气活血方阳性染色面积显著减少（P〈0.01）。结论益气活血方与补肾生髓方通过减轻缺血半暗带区神经细胞突触损伤或促进神经细胞突触再生,提高中枢神经系统可塑性,抗脑缺血损伤。     

中药周期序贯疗法对子宫内膜异位症不育患者体外受精胚胎移植的影响

目的观察中药周期序贯疗法在子宫内膜异位症(endometriosis,EM)合并不育症患者行体外授精胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)过程中的治疗作用。方法将准备行IVF-ET的EM合并不育患者随机分为对照组(28例)和中药组(25例),对照组采用单纯IVF-ET技术,中药组在IVF-ET基础上加用中药周期序贯疗法(基本方用菟丝子、当归、丹参、香附、三七、鸡内金等,卵泡期用滋阴方,排卵期用补肾方,黄体期用温阳方),比较两组的获卵数、胚胎种植率、妊娠率、注射人绒毛膜促性腺激素日子宫内膜厚度。结果两组年龄、获卵数、注射人绒毛膜促性腺激素之日子宫内膜厚度比较,差异无统计学意义;中药组胚胎种植率显著高于对照组;两组受精率及妊娠率比较,差异无统计学意义,但中药组妊娠率高于对照组。结论中药周期序贯疗法能够提高EM合并不育症患者的子宫内膜容受性,从而提高胚胎种植率。     

自拟中药方剂治疗风湿性腰腿痛病102例疗效观察

目的探讨自拟中药方剂治疗风湿性腰腿痛病的疗效。方法选择在医院门诊和社区卫生服务站就诊的腰腿痛病患者204例,随机分为治疗组和对照组各102例,治疗组用自拟中药方剂制成胶囊口服,对照组用非甾体抗炎镇痛药物布洛芬口服治疗,均20d一个疗程,观察疗效。结果治疗后治疗组与对照组患者疗效间差别有显著性意义（P〈0.001）;治疗组与对照组疗程间差别有显著性意义（P〈0.05）。结论自拟中药方剂治疗风湿性腰腿痛病疗效确切,无毒副作用和不良反应。     

补肾活血化瘀验方治疗血管性痴呆的临床研究

目的:探讨补肾活血化瘀验方治疗血管性痴呆的临床疗效.方法:将符合研究纳入标准的80例血管性痴呆患者随机分为试验组50例和对照组30例,试验组以补肾活血化瘀验方水煎剂加脑复康口服,对照组予单纯脑复康口服.对两组治疗前后中医症候疗效、MMSE评分、中医智能综合评分、ADL评分进行统计分析比较.结果:经过2个月的治疗,试验组...