液相色谱串联质谱法检测肝癌细胞N6- 甲基腺嘌呤核苷甲基化水平

目的 建立同时测定N⁶-甲基腺嘌呤核苷(m⁶A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。方法 HepG₂和L₀₂细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理。色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C₁₈柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82:18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃。质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m⁶A和A的浓度,计算细胞m⁶A甲基化水平。 结果 建立的LC-MS/MS法检测m⁶A和A的浓度分别在0.15～50.00 ng/ml和1.50～500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r > 0.999),日内、日间精密度均小于15.00 %,准确度为93.67 %～101.10 %,回收率为91.46 %～97.60 %,基质效应为90.26 %～99.27 %,样品稳定性良好。HepG₂和L₀₂细胞m⁶A甲基化水平分别为(0.73 ± 0.11)%和(1.26 ± 0.22)%。结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。     

HPLC法测定不同产地淫羊藿中7种主要黄酮类成分的含量

目的 采用HPLC法测定不同产地淫羊藿药材中7种主要黄酮类成分的含量。 方法 色谱柱为SHISEIDO MG-C18柱 (3.0 mm×100 mm, 3.0 μm);流动相为乙腈(A)和0.1％的甲酸水溶液(B),梯度洗脱,A相含量随时间的变化：25%(0～10 min),25%～40%(10～12 min),40%～45% (12～22 min), 45%～75% (22～25 min), 75%(25～30min);流速0.6 mL/min;检测波长270 nm;柱温25 ℃;进样量5 μL。淫羊藿药材以70%乙醇超声提取。 结果 7种黄酮类成分朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、淫羊藿次苷II、脱水淫羊藿素在30 min内基线分离。方法学验证表明,线性关系良好(r＝0.9999),日内日间精密度RSD%均小于2.0%,回收率在98%～102%之间,稳定性和重复性RSD%也均小于2.0%,符合方法学要求。测定了对照药材及辽宁、甘肃、湖北3个产地淫羊藿中7种黄酮类成分的含量。　结论 该方法快速简便,可为淫羊藿药材的质量控制提供依据,也为进一步开展淫羊藿中黄酮类成分的药动学及组织分布研究奠定了良好的基础。     

益气活血方和补肾生髓方对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区wnt5a、LRP5蛋白表达的影响

目的:探讨补肾生髓方和益气活血方对脑缺血大鼠海马CA1区wnt5a、LRP5蛋白表达的影响。方法:采用线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和补肾生髓方组。脑缺血2 h,持续灌注10 d,采用免疫组化Envision两步法观察缺血侧海马CA1区wnt5a、LRP5蛋白表达。结果:与假手术组比,模型组wnt5a和LRP5蛋白表达的平均吸收光密度值显著高于假手术组(P<0.05);与模型组比,补肾生髓方组与益气活血方组wnt5a蛋白表达的平均吸收光密度值显著高于模型组(P<0.05),补肾生髓方组LRP5蛋白表达的平均吸收光密度值显著低于模型组(P<0.05)。结论:两种中药复方可通过增强海马CA1区wnt5a蛋白表达,抑制LRP5蛋白的表达,调节wnt/β-catenin信号转导通路。     

围产期孕妇阴道B群链球菌感染及其药敏实验研究

目的对围产期孕妇阴道B群链球菌(GBS)的感染情况以及药敏实验进行分析,辅助临床诊断及治疗。方法收集524例围产期孕妇的阴道分泌物标本,进行GBS培养鉴定和药敏试验,对结果进行统计分析。结果 524例阴道分泌物检出B群链球菌69株,阳性率13.14%(69/524)。药敏试验结果显示,头孢唑林、左氧氟沙星、万古霉素未见耐药株,青霉素、氨苄青霉素、克林霉素的耐药率分别是8.7%、14.5%和26.1%。结论围产期孕妇阴道B群链球菌感染率高,应尽早干预并恰当选择药物,以保证围产儿健康。     

应用HPLC-MS技术测定健康受试者和肝癌患者血浆中13种胆汁酸的含量

目的建立HPLC-MS方法同时检测健康人和原发性肝癌患者血浆中13种胆汁酸的含量。方法血浆样品前处理采用乙腈-蛋白沉淀法,色谱分离采用SHISEIDO MG C18（100 mm×3.0 mm,3.0μm）柱,流动相：乙腈-水（含0.1%甲酸和0.5%氨水）,梯度洗脱,流速0.4 ml/min,柱温25℃,进样量5μl。质谱监测采用ESI源负离子模式,选择离子（SIM）分段监测。结果 13种胆汁酸在3.3~4 400 ng/ml的浓度范围内线性关系良好;日内和日间精密度均〈7%;平均回收率为82.67%~109.75%。样品测定结果显示,与健康对照组相比,原发性肝癌患者血浆中胆汁酸含量升高,其中以结合型胆汁酸TUDCA、TCDCA、TCA、GCA和GCDCA的升高最为明显。结论所建HPLC-MS方法灵敏度高、选择性好,可用于原发性肝癌患者与健康人体内血清胆汁酸的含量差异比较,该研究为肝癌患者体内胆汁酸的代谢和疾病的临床诊治奠定了基础。     

色谱-质谱联用技术测定人体内类固醇激素的研究进展

类固醇激素是高效能的生物化学物质,在多种生理活动中发挥显著的调节作用,但在体内的含量极低,因此对其进行准确定量具有重要意义。在各种检测方法中,色谱-质谱联用技术因具有高效、快速、灵敏的优点而得以广泛应用。笔者综述近年来色谱-质谱联用技术在内源性类固醇激素测定中的应用,为进一步的临床研究提供参考依据。     

血管活性肠肽参与电针对大鼠胃粘膜损伤的保护作用

目的：探讨血管活性肠肽(VIP)参与电针对胃粘膜损伤大鼠保护作用的机制。方法：采用束缚冷应激胃粘膜损伤大鼠模型，通过放射免疫测定法和中枢迷走背核复合体(DVC)微量注射，观察电针对各组外周血、胃粘膜和脑组织的VIP含量的变化，胃粘膜血流量(GMBF)、损伤指数(LI)和跨壁电位差(PD)的影响。结果：电针模型组外周血、胃粘膜和脑组织VIP含量均增加，GMBF、PD也明显增加，LI下降；中枢DVC微量注射VIP后，外周血和胃粘膜中VIP含量增加。结论：VIP作为信号分子，通过神经内分泌免疫网络系统对胃粘膜损伤具有整体调控作用。     

HPLC法同时测定多效防护霜中盐酸苯海拉明、甲氧基肉桂酸辛酯和水杨酸辛酯的含量

目的 建立同时测定多效防护霜中盐酸苯海拉明、甲氧基肉桂酸辛酯和水杨酸辛酯的含量的方法。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Extend-C₁₈（4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相为甲醇-乙酸铵缓冲溶液（20 mmol/L,pH=7.5）,梯度洗脱,甲醇比例随时间变化为：0~10 min、甲醇→60%;10~12 min、甲醇60%→92%;12~20 min、甲醇→92%,采集时间20 min,平衡时间10 min,流速1 ml/min,紫外检测波长218 nm,柱温25℃,进样量15 μl。结果 3种成分在30 min内基线分离,方法学验证表明,线性关系良好（r>0.9995）,日内日间精密度均小于3.0%,回收率在90%~108%之间,稳定性和重复性RSD均<3.0%,符合方法学要求。按照新建立的方法测定了3个批次样品中3种成分的含量,结果符合要求。结论 本方法简便可靠,可为多效防护霜的质量控制提供依据,也为其质量标准研究奠定了基础。     

运用GC-MS技术对2种淫羊藿挥发性成分的比较分析

目的运用GC-MS技术对柔毛淫羊藿与朝鲜淫羊藿挥发性成分进行比较分析。方法采用水蒸气蒸馏法提取柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿挥发油,运用气相色谱-质谱联用技术,结合计算机检索对其挥发油进行分离鉴定。结果共鉴定出2种淫羊藿中76个挥发性成分,其中28个共有成分。结论柔毛淫羊藿与朝鲜淫羊藿挥发油在组分和含量上存在一定的差异,本研究为2种淫羊藿药材的鉴别及质量控制提供了重要依据。     

骨传导技术及其应用

骨传导是声音通过人体骨骼传导的现象,能够有效防止环境噪声的干扰;能够和空气传导结合形成独特的听觉环境;可以利用其听障人士助听等。目前国外已有骨传导耳机,也已将骨传导应用于手机接听,以方便在有环境噪声干扰的场合下使用。但是国内这方面的研究起步较晚,相关的报道较少,本文通过对目前国内外骨传导技术的研究现状、应用等进行综述,旨在促进此技术的发展及应用。