健脾解毒方对湿热证结肠癌小鼠肿瘤血管新生的抑制作用

  目的：探索健脾解毒方对湿热证结肠癌小鼠肿瘤血管新生的影响。  方法：将Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组及健脾解毒方低、中、高剂量组,对照组复制结肠癌原位模型,其余各组建立小鼠湿热证结肠癌模型。健脾解毒方低、中、高剂量组分别灌胃给药(250 、500、1 000 mg·kg-1·d-1),对照组和模型组灌胃等体积的生理盐水,均干预28 d。干预结束,每组各处死部分荷瘤鼠,测量瘤体质量,免疫组化法检测各组瘤体的Ki67和肿瘤微血管密度(MVD)表达,ELISA测定血清中血管内皮生长因子(VEGF)表达;剩余小鼠用于观察生存时间。  结果：健脾解毒方各剂量组的瘤体质量均较模型组显著减小(P<0.01),荷瘤鼠中位生存时间均较模型组明显延长(P<0.01),且中、高剂量组的瘤重抑制率和生命延长率均高于低剂量组(P<0.01)。检测结果显示,模型组肿瘤MVD及VEGF表达水平较对照组显著提高(P<0.01),健脾解毒方各剂量组肿瘤细胞Ki67指数、MVD计数及VEGF水平均较模型组显著降低(P<0.01),且中、高剂量组明显低于低剂量组(P<0.01),呈剂量依赖效应。  结论：健脾解毒方能够抑制湿热证结肠癌小鼠肿瘤的生长、延长荷瘤鼠生存时间,其机制可能与下调VEGF表达从而抑制肿瘤血管新生有关。     

温补肾阳中药对虚证模型小鼠肾上腺皮质激素合成的调节作用

  目的：研究温补肾阳中药及其配伍对虚证模型小鼠肾上腺皮质激素合成的影响。  方法：120只雄性ICR小鼠随机分成10组,即对照组、模型组、淫羊藿(5.3 mg·kg-1·d-1)组、仙茅(4.3 mg·kg-1·d-1)组、巴戟天(4.3 mg·kg-1·d-1)组、杜仲(5.3 mg·kg-1·d-1)组、补骨脂(5.3 mg·kg-1·d-1)组、菟丝子(6.0 mg·kg-1·d-1)组、肉苁蓉(5.3 mg·kg-1·d-1)组以及配伍(各单味中药等比例混合,4.7 mg·kg-1·d-1)组,每组12只。除对照组外,其他各组小鼠灌胃给予0.66 mg·kg-1·d-1氢化可的松溶液,连续14 d,以复制药源性虚证模型。造模同时,各中药干预组及配伍组小鼠灌胃给予相应药液,连续14 d。末次给药后,称量小鼠体质量;采集血清和双侧肾上腺组织。ELISA检测血清皮质酮含量;PCR检测肾上腺相关基因的表达,包括类固醇激素合成酶(Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1、Hsd3b1)、胆固醇转运分子(Star、StarD3、Npc1、Npc2)、胆固醇摄取分子(Ldlr、Scarb1)、胆固醇合成限速酶(Hmgcr)、胆固醇储存分子(Lipe、Acat1)、胆固醇流出分子(Abca1、Abcg1)、胆固醇稳态分子(Srebf2、Nr1h3);Western blot检测肾上腺CYP11A1、CYP21A2、HSD11B1、StAR、NPC1、NPC2、LDLR、SRBI、HSL、ACAT1的蛋白表达。  结果：①与模型组相比,各中药干预组及配伍组小鼠的体质量和血清皮质酮含量无明显变化(P>0.05)。②与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Cyp21a1 mRNA表达和CYP11A1蛋白表达显著降低(P＜0.01);与模型组相比,淫羊藿组和仙茅组Cyp21a1 mRNA表达明显上调(P<0.05),各中药组及配伍组CYP11A1蛋白表达呈上调趋势。③与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Star和Npc1的mRNA表达及StAR和NPC1蛋白表达显著降低(P<0.05,P＜0.01),NPC2蛋白表达显著升高(P＜0.01);与模型组相比,淫羊藿组、仙茅组、杜仲组、菟丝子组及配伍组StAR蛋白表达明显升高(P<0.05,P＜0.01),各中药组NPC1蛋白表达量增多,以补骨脂作用最为显著(P<0.05),除杜仲组外其他中药干预组及配伍组NPC2蛋白表达明显下调(P＜0.01)。④与对照组相比,模型组小鼠肾上腺Ldlr、Scarb1的mRNA表达以及LDLR、SRBI的蛋白表达均显著降低(P<0.05,P＜0.01);与模型组相比,仙茅组、补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组Ldlr mRNA表达明显下调(P＜0.01),杜仲组、菟丝子组及配伍组SRBI蛋白表达显著升高(P<0.05,P＜0.01)。⑤模型组小鼠肾上腺Hmgcr mRNA表达及HSL蛋白表达较对照组显著降低(P＜0.01);与模型组相比,仙茅组、巴戟天组、杜仲组、补骨脂组、肉苁蓉组Hmgcr mRNA表达明显降低(P<0.05,P＜0.01),淫羊藿组、补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组HSL蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。⑥模型组小鼠肾上腺Abcg1 mRNA表达较对照组显著升高(P＜0.01);与模型组比较,除肉苁蓉组外,其他各中药干预组及配伍组的Abcg1 mRNA表达均显著降低(P<0.05,P＜0.01)。⑦模型组小鼠肾上腺Srebf2 mRNA表达较对照组显著降低(P＜0.01);与模型组相比,补骨脂组、肉苁蓉组及配伍组Srebf2 mRNA表达显著降低(P<0.05,P＜0.01),且补骨脂组、菟丝子组、肉苁蓉组及配伍组Nr1h3 mRNA表达显著降低(P<0.05)。  结论：温补肾阳中药可调节氢化可的松诱导的虚证模型小鼠肾上腺皮质激素的合成能力,其中以淫羊藿、仙茅、杜仲、菟丝子的作用较为显著。     

复方中药组分对糖尿病大鼠血浆ET-1、AngI、AngⅡ的影响

  目的：观察复方中药组分(黄连生物碱40%、三七总皂苷35%、麦冬多糖25%)对糖尿病模型大鼠血浆内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响。  方法：用链脲菌素制备糖尿病大鼠模型,随机分为5组(模型对照组、二甲双胍组及高、中、低剂量中药组),每组各10只;另取10只作为空白对照组。其中模型对照组和空白对照组用0.9%NaCl溶液10 ml·kg-1·d-1,二甲双胍组用二甲双胍0.05 mg·kg-1·d-1,高、中、低剂量中药组分别用中药组分0.45、0.15、0.05 g·kg-1·d-1,连续灌胃干预4周后断头采血;用酶联免疫吸附法检测血浆中ET-1、AngⅠ、AngⅡ的含量。  结果：模型对照组ET-1、AngⅠ、AngⅡ含量明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)。中、高剂量中药组和二甲双胍组ET-1、AngⅠ含量低于模型对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);高剂量中药组与二甲双胍组AngⅡ含量低于模型对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。高剂量中药组AngⅡ含量低于二甲双胍组,差异有统计学意义(P＜0.05)。  结论：复方中药组分可能通过降低ET-1、AngⅠ和AngⅡ的水平减轻血管内皮损伤,起到改善糖尿病血管并发症的作用。     

NLR家族Pyrin域蛋白3炎症小体对糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合的作用及其机制研究

目的 探究含NLR家族Pyrin域蛋白3（NLRP3）炎症小体对糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合的作用及其机制。方法 将30只大鼠随机分为对照组、模型组、炎症小体抑制组，每组10只。除对照组外，采用高糖饲养+腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型，模型复制成功后用球钻毁损大鼠部分牙槽骨骨质，复制牙槽骨缺损模型。模型复制成功后，炎症小体抑制组大鼠立即尾静脉注射20 mg/kg NLRP3抑制剂，1次/d，连续给药28 d。给药结束后，检测各组大鼠空腹血糖。采用酶联免疫吸附试验测定各组大鼠血清护骨因子（OPG）和碱性磷酸酶（ALP）含量。分别采用苏木精-伊红（HE）和抗酒石酸酸性磷酸酶（TARP）染色观察牙槽骨缺损愈合情况及破骨细胞数，进行骨再生Lane-Sandhu评分。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和Western blotting检测NLRP3、Caspase-1和白细胞介素1β（IL-1β）mRNA和蛋白的表达。结果 模型组OPG、ALP低于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。HE染色结果显示，模型组大鼠牙槽骨缺损严重，可见大量炎症浸润细胞，炎症小体抑制组牙槽骨缺损程度低，炎症浸润细胞较少。模型组Lane-Sandhu评分低于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。TARP染色结果显示，模型组破骨细胞数高于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。模型组大鼠上颌骨组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和炎症小体抑制组（P <0.05）。结论 抑制NLRP3炎症小体可改善骨代谢，促进糖尿病大鼠牙槽骨缺损愈合，其作用可能与抑制NLRP3/IL-1β通路有关。     

积雪草苷对平阳霉素诱导的大、小鼠肺纤维化的保护作用

  目的：观察积雪草苷对平阳霉素诱导的大、小鼠肺纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。  方法：①小鼠实验:将KM小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照(醋酸泼尼松,5 mg/kg)组和积雪草苷低剂量(40 mg/kg)、高剂量(80 mg/kg)组,每组10只。除对照组外,其他各组小鼠采用一次性气管注入平阳霉素(5 mg/kg)的方法诱导肺纤维化模型。造模次日,各组灌胃给予相应的药物干预,连续28 d。末次给药后,分离肺组织;测定肺指数;ELISA检测肺组织白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β含量;PCR检测肺组织转化生长因子-β₁(TGF-β₁)mRNA表达。②大鼠实验:将SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照(醋酸泼尼松,4 mg/kg)组和积雪草苷低剂量(20 mg/kg)、高剂量(40 mg/kg)组,每组10只。除对照组外,其他各组大鼠采用一次性气管注入平阳霉素(5 mg/kg)的方法诱导肺纤维化模型。造模次日,各组灌胃给予相应的药物干预,连续28 d。末次给药后,分离肺组织;测定肺指数;HE染色后光镜下观察各组大鼠肺组织形态学变化;ELISA检测肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量;PCR检测肺组织TGF-β₁mRNA表达。  结果：①小鼠实验:模型组小鼠肺指数,肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量及TGF-β₁ mRNA表达均较对照组显著升高(P<0.01)。与模型组相比,阳性对照组与积雪草苷低、高剂量组小鼠的肺指数及肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著降低(P<0.05,P<0.01),积雪草苷低、高剂量组小鼠肺组织TGF-β₁ mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。②大鼠实验:模型组大鼠肺指数,肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量及TGF-β₁ mRNA表达均较对照组显著升高(P<0.01)。与模型组相比,阳性对照组与积雪草苷低、高剂量组大鼠肺指数显著降低(P<0.05,P<0.01),肺组织TGF-β₁ mRNA表达水平显著降低(P<0.01);阳性对照组和积雪草苷高剂量组大鼠肺组织IL-6、TNF-α、IL-1β含量较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01),积雪草苷低剂量组TNF-α、IL-1β含量较模型组明显降低(P<0.05)。③HE染色观察显示,模型组大鼠肺泡结构破坏,成纤维细胞增生,伴有大量炎症细胞浸润;积雪草苷低、高剂量组和阳性对照组大鼠上述病变均有改善,炎症细胞浸润和肺泡萎陷减轻。  结论：积雪草苷对平阳霉素诱导的大、小鼠肺纤维化具有保护作用,其机制可能与下调TGF-β₁mRNA表达、抑制炎症细胞因子激活有关。     

佩兰对2型糖尿病合并脂代谢紊乱大鼠肝脏肌醇必需酶1α表达的影响

[目的]研究佩兰中药颗粒对2型糖尿病合并脂代谢紊乱大鼠肝脏肌醇必需酶1α（IRE1α）表达的影响。[方法]将造模成功的合并脂代谢紊乱的2型糖尿病大鼠按随机数字表法随机分为模型组、佩兰中药组、吡格列酮组,每组9只,另设空白对照组10只。佩兰中药组予佩兰中药颗粒按3 g/（kg·d）灌胃给药,吡格列酮组0.3 mg/（kg·d）灌胃,模型组及空白对照组予生理盐水灌胃,持续给药5周,检测各组大鼠血糖、血清甘油三酯（TG）、血清总胆固醇（TC）、血清游离脂肪酸（FFA）水平,检测肝脏IRE1α基因及蛋白表达水平。[结果]经治疗后,佩兰中药组大鼠的血清TG、TC水平明显低于模型组,肝脏IRE1α的基因及蛋白表达水平明显高于模型组。[结论]佩兰可以提高2型糖病合并脂代谢紊乱大鼠肝脏中IRE1α的表达。     

纳达合剂对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜TNF-α、IL-8、ICAM-1及MCP-1的影响

  目的：探索中药纳达合剂对胆汁反流性胃炎(BRG)大鼠胃黏膜及相关炎症因子的影响。  方法：采用灌胃牛胆酸钠+胰酶+卵磷脂法制备胆汁反流性胃炎模型。正常组、模型组灌胃生理盐水,纳达合剂低、中、高剂量组及麦滋林组分别予灌胃相应药物干预。实验结束,通过病理切片HE染色观察各组大鼠胃黏膜炎症变化情况,ELISA法检测大鼠胃黏膜白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1),Western blot方法检测大鼠胃黏膜单核细胞趋化因子-1(MCP-1)。  结果：模型组大鼠胃黏膜炎症细胞浸润明显,炎症积分较正常组显著增高(P<0.01);与模型组比较,各药物干预组均可以显著改善大鼠胃黏膜炎症情况(P<0.01),其中纳达合剂组呈剂量依赖性,且与麦滋林组比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠胃黏膜炎症因子TNF-α、IL-8、ICAM、MCP-1蛋白表达较正常组显著增高(P<0.01);与模型组比较,纳达合剂各剂量组呈剂量依赖性地显著降低TNF-α、IL-8、ICAM、MCP-1蛋白表达(P<0.05或P<0.01),药麦滋林组亦可显著减少胃黏膜TNF-α、IL-8、ICAM、MCP-1蛋白表达(P<0.01),而纳达中、高剂量组在改善TNF-α表达方面优于麦滋林组(P<0.05或P<0.01),纳达高剂量组在改善ICAM-1表达方面优于麦滋林组(P<0.01)。  结论：纳达合剂可显著改善胆汁反流性胃炎大鼠的胃黏膜病理,并对相关炎症因子有明显的抑制作用。     

清利健脾补肾方对糖尿病大鼠肾和膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1、PDL1蛋白表达的影响

  目的：研究清利健脾补肾方对糖尿病大鼠肾和膀胱组织转化生长因子-β(TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、程序性细胞死亡受体1(PD1)及其配体(PDL1)蛋白表达的影响。  方法：雄性Wistar大鼠一次性腹腔注射55 mg/kg链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型。取造模成功的大鼠,随机分为模型组、二甲双胍(100 mg/kg)组及中药低剂量(清利健脾补肾方药液,4.5 g/kg)、高剂量(清利健脾补肾方药液,18 g/kg)组,每组8只。另设8只大鼠为正常组。各组灌胃给予相应药物,连续28 d。干预期间,测量各组大鼠血糖水平。末次给药后,收集大鼠的肾脏和膀胱组织;HE染色后光镜下观察大鼠肾脏和膀胱组织形态学变化;Western blot分别检测大鼠肾脏和膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1和PDL1蛋白表达。  结果：①干预第14天,二甲双胍组和中药高剂量组大鼠血糖水平较模型组明显降低(P<0.05);干预第28天,二甲双胍组和中药低、高剂量组大鼠的血糖水平较模型组均显著降低(P<0.05,P<0.01),且中药高剂量组血糖水平明显低于低剂量组(P<0.05)。②模型组大鼠可见肾小管上皮细胞肿胀和坏死,局部肾小管扩张,肾小球上皮细胞增生;膀胱平滑肌肌细胞肥大,出现间质黏液样变性,且排列紊乱。二甲双胍组和中药低、高剂量组大鼠的病变程度明显减轻。③模型组大鼠肾组织TGF-β和α-SMA蛋白表达较正常组显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,二甲双胍组和中药低、高剂量组肾组织TGF-β和α-SMA蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),中药高剂量组PD1蛋白表达亦显著降低(P<0.05),且中药高剂量组PD1蛋白表达较二甲双胍组和中药低剂量组显著降低(P<0.05)。④模型组大鼠膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1和PDL1蛋白表达水平较正常组均明显升高(P<0.05);与模型组相比,二甲双胍组和中药高剂量组膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1和PDL1蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),中药低剂量组TGF-β、α-SMA和PD1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),且中药高剂量组PDL1蛋白表达明显低于低剂量组(P<0.05)。  结论：清利健脾补肾方可降低STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖水平,减轻肾脏和膀胱组织病理损伤,其作用机制可能与下调肾脏和膀胱组织TGF-β、α-SMA以及膀胱组织PD1、PDL1的蛋白表达水平有关。     

理虚解郁方对慢性疲劳综合征大鼠下丘脑垂体肾上腺轴功能及体温变化节律的影响

  目的：观察理虚解郁方对慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)大鼠体温节律及下丘脑垂体肾上腺轴(HPA轴)功能的影响。  方法：将60只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组、CFS模型组、中药治疗组及促肾上腺皮质激素释放因子拮抗剂(CRFA)组,每组15只。采用多重复合慢性应激建立CFS大鼠模型。造模同时,中药治疗组和CRFA组大鼠给予理虚解郁方药液灌胃,正常对照组及CFS模型组大鼠给予生理盐水灌胃;CRFA组大鼠按3.2 mg/kg腹腔注射CP-154526 1 ml,其余各组大鼠注射等体积的80%聚乙二醇400。各组干预时间均为30 d。采用单个余弦法分析各组大鼠体温昼夜节律的变化,比较各组大鼠下丘脑、垂体及左、右肾上腺脏器指数的变化,检测各组大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平及下丘脑CRH mRNA的表达情况。  结果：①与正常对照组比较,CFS模型组、CRFA组大鼠体温中值及振幅明显减小,且峰相位显著后移(P<0.05);与CFS模型组比较,中药治疗组大鼠体温中值及振幅显著增加,峰相位前移(P<0.05)。②与正常对照组比较,CFS模型组大鼠下丘脑指数、垂体指数及左、右肾上腺指数明显增高(P<0.05),CRFA组大鼠下丘脑指数亦明显增高(P<0.05);与CFS模型组比较,中药治疗组大鼠左、右肾上腺指数明显降低(P<0.05)。③与正常对照组比较,CFS模型组、CRFA组大鼠的血浆CORT、CRH水平均显著降低(P<0.05),且CRFA组大鼠的血浆ACTH水平亦显著降低(P<0.05);与CFS模型组比较,中药治疗组大鼠的血浆CORT、CRH水平显著升高(P<0.05)。④与正常对照组比较,CFS模型组、CRFA组大鼠下丘脑CRH mRNA表达明显下降(P<0.05);与CFS模型组比较,中药治疗组大鼠的下丘脑CRH mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。  结论：理虚解郁方可影响慢性疲劳综合征大鼠下丘脑CRH mRNA的表达,进而调控血浆CRH、ACTH与CORT含量,调节体温节律。     

当归补血汤对糖尿病大鼠肝脏、骨骼肌中PKC-ζ表达的影响

[目的]研究当归补血汤对糖尿病大鼠肝脏、骨骼肌中蛋白激酶C-ζ（PKC-ζ）表达的影响。[方法]选取雄性SD大鼠50只,随机分为空白对照组、当归补血汤对照组、2型糖尿病（T2DM）模型组、T2DM+当归补血汤组、2型糖尿病+吡格列酮组。采用链脲佐菌素（STZ）联合高脂高糖饲料建立大鼠糖尿病模型,造模成功后,药物干预5周,取血检测大鼠空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）水平。用免疫组织化学法检测各组大鼠肝脏、骨骼肌细胞中PKC-ζ表达。[结果]与空白对照组比,T2DM模型组FPG、FINS显著升高;与T2DM模型组相比,T2DM+当归补血汤组和T2DM+吡格列酮组FPG、FINS下降。通过免疫组化检测发现,与空白对照组比,T2DM模型组肝脏和骨骼肌中PKC-ζ的表达下降;T2DM+当归补血汤组和T2DM+吡格列酮组较T2DM组表达升高,且T2DM+当归补血汤组与T2DM+吡格列酮组组间无明显差异。[结论]当归补血汤能够改善胰岛素抵抗、降低血糖,这可能与其促进肝脏、骨骼肌中PKC-ζ的表达有关。     

达格列净对糖尿病大鼠血管内皮功能及PTEN/PI3K/Akt信号通路的影响

目的 探究达格列净对糖尿病大鼠血管内皮功能及PTEN/PI3K/Akt信号通路的影响。方法 将30只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、达格列净组，各10只。模型组、达格列净组成功复制糖尿病模型后，达格列净组给予1 mg/（kg·d）达格列净灌胃处理，连续4周；模型组、对照组分别同时间灌胃等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。采用酶联免疫吸附试验检测血清内皮素1（ET-1）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）水平；苏木精-伊红染色观察大鼠主动脉血管组织病理学变化；Western blotting检测大鼠血管内皮组织PTEN/PI3K/Akt信号通路蛋白的表达。结果 达格列净组大鼠一般情况好于模型组。达格列净组大鼠主动脉病理变化较模型组改善。与对照组比较，模型组、达格列净组大鼠血清ET-1、HIF-1α、VEGF水平升高（P <0.05），但达格列净组大鼠血清ET-1、HIF-1α、VEGF水平低于模型组（P <0.05）。与对照组比较，模型组、达格列净组大鼠血管内皮组织PTEN蛋白相对表达量降低（P <0.05），p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量升高（P <0.05）；但达格列净组较模型组大鼠血管内皮组织PTEN蛋白相对表达量升高（P <0.05），p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量降低（P <0.05）。结论 达格列净可能通过促进PTEN/PI3K/Akt信号通路活化，改善糖尿病大鼠血管内皮功能损伤，从而防治糖尿病及其并发症的发生。     

吡格列酮对大鼠脑出血后AQP4表达的影响

目的探讨吡格列酮对大鼠脑出血后脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达的影响。方法将40只成年雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、脑出血组、吡格列酮组。应用自体血尾状核定位注射方法建立大鼠自体血脑出血模型,分别采用免疫组化及半定量逆转录聚合酶链反应方法,检测脑组织AQP4蛋白及mRNA的表达。结果脑出血组AQP4蛋白的表达较假手术组明显升高(F=222.03,q=29.15,P<0.05),而吡格列酮组AQP4蛋白的表达较脑出血组明显降低(q=9.21,P<0.05)。脑出血组AQP4mRNA含量较假手术组明显增高(F=327.22,q=33.13,P<0.05);吡格列酮组AQP4mRNA含量与脑出血组比较明显降低(q=3.98,P<0.05)。结论吡格列酮能够抑制脑出血后血肿周围脑组织AQP4的表达,从而减轻脑水肿。     

双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤鼠Notch信号通路的双重调控作用

  目的：探讨双黄升白颗粒对荷瘤鼠化疗骨髓抑制期Notch信号通路的调控作用。  方法：采用Lewis肺癌荷瘤鼠腹腔注射环磷酰胺300 mg/kg制成化疗骨髓抑制模型。荷瘤鼠随机分为空白组、模型组、治疗组,另设模拟接种的正常组,每组8只。治疗组在造模同时灌服双黄升白颗粒溶液0.4 ml/d,连续6 d;其他组均灌服生理盐水0.4 ml/ d,连续6 d。常规计数白细胞、红细胞、血小板数和骨髓有核细胞数,称取瘤重,荧光定量PCR法检测Notch信号通路中Notch1、Notch2、Notch3、Jagged、CSL的mRNA表达。  结果： 治疗组白细胞数、骨髓有核细胞数均高于模型组(P<0.05),Notch1、Notch2、Notch3、CSL在骨髓中的mRNA表达高于模型组(P<0.05),在肿瘤中的表达则低于模型组(P<0.05);各组红细胞、血小板、瘤重、Jagged mRNA表达未发现明显差异(P>0.05)。  结论：双黄升白颗粒治疗骨髓抑制的作用机制可能与调控Notch信号通路有关,且该调控作用具有双重特性,即在上调骨髓Notch信号通路主要基因表达的同时抑制肿瘤中部分基因表达。     

基于大鼠模型的骨髓CD34+、Fas(CD95)、TNF-α与再生障碍性贫血中医辨证分型关系的研究

  目的：探讨再生障碍性贫血(aplastic anermia,AA)大鼠模型的骨髓中凋亡因子CD34⁺、Fas(CD95)、TNF-α表达与中医证型的关系。  方法：将60只Wistar 雄性大鼠随机分为正常组、模型组、心脾两虚组、脾肾阳虚组、肝肾阴虚组,每组12只。采用马利兰丙酮提取液腹腔注射制备大鼠AA模型,然后按相关文献方法加重模型大鼠的心脾两虚、脾肾阳虚、肝肾阴虚症状。检测各组大鼠的白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)水平及其骨髓CD34⁺、Fas、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达情况。  结果：①与正常组比较,其余各组大鼠的Hb、RBC、WBC、PLT水平均显著降低(P<0.05),提示造模成功;与模型组比较,肝肾阴虚组大鼠的Hb、RBC、WBC、PLT水平降低更加显著(P<0.05)。②与正常组比较,其余各组大鼠的骨髓CD34⁺表达均明显下调(P<0.05),Fas、TNF-α表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,肝肾阴虚组大鼠的骨髓CD34⁺下调更加显著(P<0.05),Fas、TNF-α表达上调更加显著(P<0.05)。  结论：肝肾阴虚型再生障碍性贫血大鼠的病情更加严重,这与临床中再生障碍性贫血“阳虚易治,阴虚难调”的理论基本一致,同时也为再障的中医辨证分型提供了一定的客观化依据。     

二甲双胍与吡格列酮治疗多囊卵巢综合征的疗效和安全性

目的 探讨了二甲双胍或吡格列酮联合炔雌醇环丙孕酮治疗多囊卵巢综合征（PCOS）的临床疗效,为PCOS的联合用药治疗提供更多的循证医学证据。方法 收集笔者医院2014年3月~2016年11月收治的PCOS患者132例,使用数字表法随机分为二甲双胍组和吡格列酮组,每组66例。使用电化学发光法测定卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）及雌二醇（E₂）水平。采用比色法测定总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）。稳态模型测定胰岛素分泌指数（HOMA-β）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。比较两组临床疗效和不良反应。结果 治疗前两组间FSH、LH、T和E₂激素水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后两组FSH、LH、T均显著减低和E₂均显著升高（P<0.01）,但治疗后两组FSH、LH、T和E₂激素水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）。二甲双胍组有效率为90.9%（60/66）,吡格列酮组有效率为93.9%（62/66）,两组间临床疗效比较,差异无统计学意义（P>0.05）。治疗前两组TC、TG、LDL-C、HDL-C、HOMA-β和HOMA-IR水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后两组TC、TG、LDL-C、HOMA-β和HOMA-IR均显著减低和HDL-C均显著升高（P<0.05和P<0.01）,但治疗后两组TC、TG、LDL-C、HOMA-β和HOMA-IR水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后吡格列酮组HDL-C水平显著高于二甲双胍组（P<0.05）。吡格列酮组治疗后BMI为25.64±5.35kg/m²,显著高于二甲双胍组的21.31±4.13kg/m²（P<0.05）,吡格列酮组治疗期间胃肠道不良反应率为13.6%,显著低于二甲双胍组的27.3%（P<0.05）。结论 炔雌醇环丙孕酮联合二甲双胍或吡格列酮治疗PCOS临床疗效显著,但吡格列酮可显著升高HDL-C,具有低的胃肠道不良反应率,而二甲双胍可以减轻患者体重,根据患者的临床特点,可以合理地选择药物联合治疗PCOS。     

灸药结合对慢性肾功能衰竭大鼠肾纤维化的影响

  目的：观察灸法结合中药方(健脾清化方)对慢性肾衰竭大鼠的干预疗效,从炎症角度探讨其对肾脏纤维化影响的作用机制。  方法：采用Platt法切除大鼠5/6肾组织+阿霉素注射造模,将造模大鼠随机分为模型组、缬沙坦对照组、健脾清化方组、灸法组、灸药结合组,给予高脂饮食喂养。缬沙坦对照组和健脾清化方组分别予缬沙坦、健脾清化方灌胃;灸法组隔日温和灸大鼠肾俞、足三里;灸药结合组予健脾清化方灌胃,隔日温和灸脾俞、足三里;假手术组、模型组以蒸馏水替代灌胃,隔日作与灸法组相同的固定,干预8周。检测血肌酐、尿素氮、IL-12、TNF-α及24 h尿蛋白定量,肾组织IL-12、TNF-α、TGF-β、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原,观察大鼠肾组织病理变化。  结果：模型组大鼠血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量较假手术组显著升高(P<0.01);健脾清化方组血肌酐较模型组降低(P<0.05);灸药结合组大鼠的血肌酐、尿素氮、尿蛋白均显著降低(P<0.05,P<0.01),其疗效优于缬沙坦对照组、健脾清化方组和灸法组,且血清IL-12、TNF-α水平(P<0.01)和肾组织中TNF-α、TGF-β、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原的阳性表达(P<0.01)均明显下降。  结论：灸药结合可以通过下调炎症因子、抑制机体炎症状态,从而改善肾功能,延缓慢性肾功能衰竭肾纤维化的进展。     

禾肾丸对阿霉素肾病大鼠肾组织PI3K及PTEN蛋白表达的影响

  目的：探讨禾肾丸对阿霉素肾病大鼠肾组织磷酯酰肌醇 3 激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)、人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)表达的影响。  方法：采用静脉注射6 mg/kg阿霉素以复制大鼠阿霉素肾病模型;大鼠随机分为空白组、模型组、依那普利组和禾肾丸组。予相应药物干预第2周、第4周、第6周及第8周,留取尿液标本,观察尿蛋白定量的动态变化,取肾组织采用免疫组化法及Western Blot法检测大鼠肾脏PI3K及PTEN蛋白的表达情况。  结果：模型组24 h尿蛋白定量逐渐增高,均高于同期空白组(P<0.05);禾肾丸组、依那普利组随灌胃时间延长尿蛋白定量逐渐降低,均明显低于同期模型组(P<0.05)。免疫组化及Western Blot结果显示,PI3K主要表达于肾脏肾小球系膜区,肾小管上皮细胞无明显表达,主要表达部位为脏层上皮细胞的胞浆;PTEN则主要表达在肾小球及肾小管的细胞核中,空白组大鼠肾脏中可见强阳性表达,造模组大鼠肾脏表达较空白组少。PI3K在灌胃2周及4周时均逐渐上升,灌胃6周达到高峰,第8周开始下降;PTEN在灌胃2周及4周时逐渐下降,第6周最低,第8周开始升高,其变化趋势与PI3K相反;禾肾丸组和依那普利组大鼠肾组织PI3K及PTEN蛋白表达均明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。  结论：禾肾丸降低慢性肾脏病蛋白尿的机制可能与其降低肾组织PI3K及PTEN蛋白表达相关。     

吡格列酮减轻急性出血坏死性胰腺炎肺损伤的机制研究

目的 探讨吡格列酮减轻急性出血坏死性急性胰腺炎肺损伤作用的机制.方法 采用逆行胰胆管牛磺胆酸钠注射制造急性出血坏死性急性胰腺炎大鼠模型,分假手术组、急性出血坏死性急性胰腺炎组、吡格列酮治疗组.硝酸还原酶法检测肺组织NO的浓度变化,RT-PCR和Western Blot检测肺组织TLR2,4 mRNA表达变化.结果 与假手术组比较,急性出血坏死性急性胰腺炎组肺组织TLR2,4表达明显增高,NO浓度降低,肺损伤加重(P<0.05).吡格列酮治疗组TLR2,4表达降低,肺组织NO升高,肺损伤减轻(P<0.05).结论 吡格列酮可能通过抑制TLR2,4 mRNA的表达,提高NO的合成和释放,减少细胞因子的合成及释放,减轻AHNP并发肺损伤.     

鹿红颗粒对心力衰竭大鼠ACE2-Ang(1-7)轴的影响

  目的：评价鹿红颗粒对心肌梗死后心力衰竭(CHF)模型大鼠血浆ACE-Ang Ⅱ轴及ACE2-Ang(1-7)轴的影响。  方法：40只SD大鼠随机分为模型组、假手术组、雅施达组及鹿红颗粒组,以结扎左冠状动脉的方法制备心肌梗死后心力衰竭模型。药物干预8周后记录各组大鼠心脏重量,计算心脏重量与体质量的比值(HW/BW)以及左心室重量指数(LVMI);HE染色观察各组大鼠心肌病理改变;酶免疫分析法检测血浆ACE、ACE2、Ang Ⅱ及Ang(1-7)水平。  结果：与模型组相比,鹿红颗粒组HW/BW及LVMI明显降低(P<0.01),心肌病理改变显著减轻,血浆ACE水平未见明显下降(P>0.05),但ACE2和Ang(1-7)水平明显升高(P<0.01),Ang Ⅱ水平显著降低(P<0.01);与雅施达组比较,鹿红颗粒组ACE2和Ang(1-7)水平明显升高(P<0.01),Ang Ⅱ水平未见明显差异(P>0.05),Ang(1-7)/Ang Ⅱ显著升高(P<0.01)。  结论：鹿红颗粒能显著提高CHF大鼠ACE2-Ang(1-7)轴的水平、降低Ang Ⅱ水平,从而抑制心室重构、减轻心肌损伤。     

滇黄精对糖尿病大鼠创面愈合的促进作用

  目的：探讨滇黄精对糖尿病大鼠创面愈合的作用。  方法：取雄性SD大鼠,腹腔注射链脲佐菌素(STZ,45 mg/kg)诱导糖尿病大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、阳性药(西格列汀,9 mg/kg)组和滇黄精低剂量(2 g/kg)、高剂量(8 g/kg)组,每组6只；另设6只正常大鼠作为对照组。各组灌胃给予相应药物。连续干预4周后,在每只大鼠背部中央制备一个直径为2.0 cm的圆形全层皮肤缺损伤口,继续药物干预17 d。创面损伤后第3、7、14、17天,观察各组创面愈合情况及愈合率。创面损伤后第17天,取创缘皮肤组织,HE染色后光镜下观察形态学变化,并测量表皮层和真皮层厚度。  结果：创面损伤后第7、14、17天,滇黄精低、高剂量组的创面面积较模型组明显缩小,创面愈合率较模型组显著升高(P<0.05,P＜0.01)。创面损伤后第17天,滇黄精干预组的创面皮肤组织病变较模型组明显减轻,可见大量成纤维细胞与胶原纤维,炎症细胞浸润较少,新生血管较多,且高剂量组的促愈合作用更为明显。与模型组相比,滇黄精低、高剂量组表皮层厚度均显著增加(P＜0.01),滇黄精高剂量组真皮层厚度亦明显增加(P＜0.01)。  结论：滇黄精可减轻糖尿病大鼠创面皮肤组织病变,增加表皮层和真皮层厚度,促进创面愈合。