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1.
目的建立一种基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)检测方法。方法提取2017年6月至2020年10月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的4例乙型肝炎患者肝脏总DNA后,使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)分别进行酶切;根据松弛环状DNA(rcDNA)和cccDNA的结构差异,设计特异性扩增HBV cccDNA的引物,对酶切后的产物进行滚环扩增(RCA)和PCR扩增;并筛选crRNA,建立基于CRISPR/Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。结果利用α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)和HBV表面抗原(HBsAg)引物对双重酶切后的产物进行扩增,验证产物中HBV基因组的存在;利用HBV cccDNA和HBV rcDNA引物对PSDA酶切后的产物扩增,验证了产物中只存在HBV cccDNA;利用RCA后的阳性样本作为模板梯度稀释,然后进行PCR扩增转录后使用CRISPR/Cas13a检测,计算出检测下限为10拷贝/μl。结论本研究建立了RCA-PCR-CRISPR-Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和高特异性检测,为乙型肝炎患者抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有效的监测手段。 相似文献
2.
目的:探讨育龄妇女RV—IgG血清和唾液检测结果及评价其差异。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。结果:对两组标本血清和唾液OD值进行相关分析,r=0.12,然后对两标本测得阴阳性结果进行X^2检验,X^2:0.022,V=1,P〉0.05,两种样本的检测结果无联系;X^2=37.81,V=1,P〈0.005,两样本有差异,血清检出率高于唾液检出率。讨论:本研究结果显示:血清RV—IgG浓度〈15、00IU/L有56例占32%(56/175),其属于风疹病毒易感人群,应注意风疹病毒减毒疫苗的接种预防;对于血清RV—IgG浓度高的患者,根据临床症状,应采取适当治疗,保证育龄妇女的正常妊娠,如果怀孕妇女RV—IgG呈现强阳性,必要时考虑终止妊娠。本实验又对153例唾液标本RV—IgG进行检测,评价唾液检测结果与血清检测结果的差别,表明用唾液代替血清测定RV—IgG尚不可行,分析原因可能是标本本身问题,也可能是由于唾液检测RV—IgG还不成熟,仍需进一步摸索. 相似文献
3.
目的探讨结直肠癌卵巢转移患者的临床病理特征和预后。方法回顾性分析2010—2015年中国医学科学院肿瘤医院收治的122例结直肠癌卵巢转移患者的临床病理资料,生存分析采用Kaplan-Maier法,预后影响因素分析采用Log rank检验和Cox比例风险模型。结果122例结直肠癌卵巢转移患者的中位总生存时间(OS)为19.7个月,1、3、5年生存率分别为72.1%、24.7%和9.9%。122例患者中,行卵巢切除99例(81.1%)。行卵巢切除患者的中位OS(21.9个月)高于未行卵巢切除的患者(10.3个月,P<0.01)。单纯卵巢转移、原发肿瘤切除和卵巢转移灶切除均与患者的总生存有关(均P<0.01);原发肿瘤切除和卵巢转移灶切除为影响患者总生存的独立因素(均P<0.01)。结论结直肠癌卵巢转移患者接受积极的手术治疗,包括原发肿瘤切除术和卵巢转移灶切除术,可能获得生存改善。 相似文献
4.
正血管钙化是慢性肾脏病患者常见的并发症之一,是导致其心血管事件发生和猝死的重要原因。在慢性肾脏病病因中,高血压肾病已成为第三位,而高血压可以导致动脉血管硬化,引起心血管事件发生,有研究表明动脉血管硬化是机体异位钙化的最常见部位[1,2]。因此,研究高血压肾病患者中血管钙化具有重要意义。血管钙化是由多因素参与的主动调节过程,调节机制比较复杂,主要调节机制为钙化激活和钙化抑制,分别由相应的因子参与。胎球蛋白A就是钙化抑制因子之一,对异位 相似文献
5.
6.
7.
目的 探讨髋关节数字化断层融合(DTS)摄影中最佳剂量比的设定,以最大程度地减少患者接受的辐射剂量.方法 90例行髋关节数字化断层融合摄影的患者,以随机数字表法,分别以6、7、8倍的剂量比组进行DTS检查,使用单因素方差分析比较不同剂量比设定下所得的图像质量和辐射剂量.结果 3组的表面吸收剂量(ESD)、剂量面积乘积(DAP)、图像质量评分分别为[(3.76±1.89)mGy、(18.41±11.71)dGy ·cm2、3.03±0.24]、[(5.24±2.76)mGy、(26.99±13.34)dGy ·cm2)、3.60±0.11]、[(6.39±1.75)mGy、(36.96±22.49)dGy ·cm2、3.64±0.09],各组间差异有统计学意义(F=10.94、9.45、139.26, P<0.05),通过3组间两两比较,ESD值和DAP值均是6倍剂量比组<7倍剂量比组<8倍剂量比组.6倍剂量比组的图像质量评分低于其他两组,7倍剂量比组和8倍剂量比组的图像质量评分差异无统计学意义.结论 剂量比是决定DTS检查辐射剂量的重要参数,髋关节DTS检查的剂量比设置为7时,可实现低曝光剂量和高图像质量的平衡,以最大限度地保护患者免受不必要的辐射损害. 相似文献
8.
目的设计平衡型氨基酸透析液,应用于维持性血液透析患者常规血液透析治疗,观察临床应用效果。方法选用解放军总医院第一附属医院长期维持性血液透析患者29例,透析2~3次/w,实验采用自身交叉对照设计,使用碳酸氢盐透析液1月后,再应用平衡型氨基酸透析液1月,分别观察血液生化指标、血浆蛋白、肾功能以及炎症指标的变化。结果血浆氨基酸谱显示绝大部分游离氨基酸及总游离氨基酸含量均恢复到与健康人相仿的水平;平衡型氨基酸透析液治疗后尿素氮、肌酐、尿酸等。肾功能指标有不同程度的升高,但电解质及钙、磷没有明显的变化;血浆总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PreA)、转铁蛋白(Trf)等较前无明显变化,但β2微球蛋白(β2-MG)和超敏C反应蛋白(SCRP)则较应用前有明显的降低(P〈0.01和P〈0.05)。结论平衡型氨基酸透析液能减少维持性血液透析患者的氨基酸丢失,部分改善其体内的氨基酸代谢紊乱,同时有可能减轻体内的微炎症反应。 相似文献
9.
10.
2007年度北京地区血液透析患者透析龄调查分析 总被引:7,自引:1,他引:6
目的分析北京地区109个血液透析单位2007年度血液透析患者的登记资料,了解血液透析患者的流行病学规律。方法根据该年度北京地区109个血液透析单位5065例透析龄资料完整的病例,按照患者透析龄及相应的性别、年龄、原发病进行分层分析。结果随着透析龄延长,坚持血液透析的患者逐渐减少。透析龄在1~2年的患者数仅为透析龄0~1年的46.0%,其后透析龄每增加1年,剩余患者数是前一透析龄的75.0%左右。男女患者逐年退出的比例都与总体患者的退出规律相类似,但女性患者坚持透析的时间明显长于男性。50~80岁的患者在各个透析龄段人数均最多;30岁以下和80岁以上的患者在0~1年的透析龄中所占比例偏高(分别为59.5%和41.0%),而至透析龄1~2年时其下滑的幅度大于其它年龄段患者。原发病以原发和继发肾小球疾病所占比例最高,透析龄均数也最长。结论随着透析龄增长,坚持血液透析的人数减少,透析第1年前后退出的人数最多,以后退出人数似乎遵循着一定的比例。女性的平均透析龄长于男性。30~80岁患者人数在各个透析龄段均高于其它年龄段。不同原发病透析龄存在着差异。 相似文献