滇龙胆草对肺纤维化小鼠肺组织NF-κB和CTGF表达的影响

  目的  研究滇龙胆草对肺纤维化小鼠肺组织NF-κB和CTGF表达的影响。  方法  气管滴注博莱霉素（5 mg/kg ）制备昆明小鼠肺纤维化模型，造模后灌胃给予低、中、高剂量（50、100、200 mg/kg）的滇龙胆草，每日给药1次，设比非尼酮为阳性对照。在建模后第28天，取肺组织进行检测，肉眼观察肺组织大体病理改变，Masson染色观察肺组织纤维化程度；采用Western blot检测肺组织中NF-κB和CTGF蛋白的表达。  结果  与模型组比较，不同剂量的滇龙胆草组和阳性药物比非尼酮组小鼠肺组织胶原沉积明显减少。与模型组比较，不同剂量的滇龙胆草组和阳性药物比非尼酮组小鼠肺组织NF-κB和CTGF蛋白表达明显下调，差异有统计学意义（P < 0.05）。  结论  滇龙胆草具有抗肺纤维化作用，其机制与下调NF-κB和CTGF蛋白表达，减轻肺组织炎症和胶原沉积有关。     

不同剂量天麻素对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马中TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路的影响

  目的  探讨不同剂量的天麻素（Gastrodin,Gas）对甲基苯丙胺（Methamphetamine,Meth）依赖条件性位置偏爱（Conditioned place preference,CPP）大鼠海马中TLR4/MyD88/NF-κB通路的作用。  方法  建立Meth（10 mg/kg,ip,14 d）依赖大鼠CPP模型,采用低中高剂量的天麻素（10、30、100 mg/kg）干预14 d后,采用Western blotting和RT-qPCR方法检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路中关键因子的蛋白和mRNA在海马中的表达水平。  结果  天麻素干预后TLR4、MyD88、NF-κB p65、TRAF6的蛋白和mRNA表达呈剂量依赖性降低 （P < 0.001、P < 0.01或P < 0.05）、p-NF-κB p65的蛋白表达呈剂量依赖性降低 （P < 0.01或P < 0.05） 、IκB-α的蛋白和mRNA表达呈剂量依赖性升高（P < 0.01或P < 0.05）,天麻素干预后p-IκB-α的蛋白表达降低（P < 0.01）。  结论  天麻素干预对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马的神经炎症具有保护作用,且与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路密切相关。     

葛根素抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用

  目的  探索葛根素（Puerarin）治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）的作用和机制。  方法  将C57BL/6小鼠随机分为对照组、EAE组、Puerarin处理EAE组（Puerarin组）。从诱导EAE当日开始，Puerarin组用葛根素（80 mg/kg）灌胃，其余2组用同体积生理盐水灌胃，每日1次。每天记录神经功能评分及体重变化；劳克坚劳蓝（luxol fast bBlue，LFB）髓鞘染色检测脊髓脱髓鞘情况；ELISA法检测血清中IL-6、IL-10、IL-17、IL-22和TGF-β的水平；Western 印迹法检测脊髓组织NF-κB、IκBα、IL-17、Foxp3等蛋白表达。  结果  Puerarin组小鼠神经功能评分及平均分均较EAE组明显降低（P < 0.01），而体重明显增加（P < 0.01）。应用葛根素后，EAE小鼠脱髓鞘面积（P < 0.01）及病理评分（P < 0.05）均明显下降。Puerarin组小鼠促炎因子IL-6、IL-17和IL-22水平显著降低（P < 0.01），抑炎因子IL-10和TGF-β显著增加（P < 0.05）。应用葛根素后:NF-κB及IL-17表达明显减少（P < 0.05）；IκBα及Foxp3表达显著增加（P < 0.01）。  结论  葛根素可缓解EAE小鼠症状，减少脱髓鞘。作用机制是抑制NF-κB通路，调节IL17/Tregs平衡，实现对免疫功能的调节。     

青蒿琥酯对甲型流感病毒肺炎的治疗作用研究

  目的  探讨青蒿琥酯（artesunate, ART）对甲型流感病毒肺炎的治疗作用。  方法  将36只小鼠随机分为6组:正常对照组（C组）、溶剂对照组（M组,10%DMSO）、阳性药物组（P组,奥司他韦1.25 mg/kg）、ART高剂量组（ART-G组,ART 120 mg/kg）、ART中剂量组（ART-Z组,ART 60 mg/kg）和ART低剂量组（ART-D组,ART 30 mg/kg）,每组6只。除C组不进行病毒干预和腹腔注射外,其余5组小鼠鼻腔滴入感染甲型流感病毒（influenza A virus, IAV）,12 h后按分组剂量进行每日一次腹腔注射;治疗过程中观察小鼠体征、体质量和存活情况;治疗7 d后,取小鼠肺组织,计算肺指数,HE染色观察小鼠肺组织病理变化,RT-qPCR和Western blot分别检测肺组织中Toll 样受体 4（Toll-like receptor 4, TLR4）、核因子κB（nuclear factor kappa-B, NF-κB）（p65）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α, TNF-α)、白细胞介素-6（interleukin-6, IL-6）和白细胞介素-1β（interleukin-1, IL-1β）mRNA和蛋白表达水平。  结果  与C组比较,M组小鼠体征变差、体质量和存活率降低,肺指数增加,肺组织出现严重病理变化,肺组织中TLR4、NF-κB (p65)、TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05）;与M组比较,ART各组小鼠体征明显改善、体质量和存活率升高,肺指数降低,肺组织病理变化得到改善,肺组织中TLR4、NF-κB (p65)、TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.05）,且上述指标变化以ART-G组最显著。  结论  ART对甲型流感病毒肺炎具有治疗作用,其机制与抑制TLR4/NF-κB (p65)信号通路活化和抗炎相关。     

核因子-κB及单核细胞化学趋化蛋白-1在慢性阻塞性肺疾病大鼠中的表达

目的：探讨核因子-κB（NF-κB）及其调控的单核细胞化学趋化蛋白-1（MCP-1）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型中的表达.方法：36只Wistar大鼠随机分为空白对照组、COPD组、布地奈德治疗组和茶碱治疗组,每组9只;用ELISA法检测各组大鼠外周血单个核细胞（PBMC） NF-κB和MCP-1的表达水平,用免疫组织化学染色和原位杂交技术检测各组大鼠细支气管上皮细胞NF-κB和MCP-1的表达水平.结果：（1）COPD组大鼠PBMC中NF-κB和MCP-1水平以及细支气管上皮细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比、MCP-1 mRNA和蛋白表达明显高于正常对照组;（2）布地奈德治疗组和茶碱治疗组大鼠PBMC中NF-κB、MCP-1水平以及细支气管上皮细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比、MCP-1 mRNA表达和蛋白表达明显低于COPD组.结论：NF-κB基因及其调控蛋白MCP-1参与了COPD的发病过程,用激素和茶碱治疗后可延缓COPD的发展.     

血管紧张素(1-7)对小鼠肢体缺血再灌注所致肾损伤的改善作用及其机制

观察血管紧张素（1-7）［Ang-（1-7））］预处理肢体缺血再灌注（LIR）小鼠肾组织和血清中Ang-（1-7）水平及肾组织中核因子κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及Mas受体蛋白表达水平和分布,探讨Ang-（1-7）对LIR小鼠肾损伤的影响及其炎症机制。     

人参皂苷Rg1联合抗生素治疗小鼠脓毒症急性肺损伤

  目的  观察人参皂苷Rg1联合抗生素亚胺培南对脓毒症急性肺损伤的影响。  方法  C57BL/6雄性小鼠以盲肠穿刺法建立脓毒症模型,将模型小鼠随机分为模型组、亚胺培南组、人参皂苷Rg1组、人参皂苷Rg1+亚胺培南组,每组10只。另取10只C57BL/6小鼠只开腹不穿刺,作为假手术组。各组于术后2 h、26 h、50 h腹腔注射给药。末次给药2 h后（术后52 h）,取小鼠动脉血液测定氧合指数,取肺组织测定肺脏湿/干质量比,HE染色观察肺脏炎症,ELISA测试盒检测肺泡灌洗液白介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α及核转录因子（NF）-κB的水平,蛋白印迹及免疫组织化学染色检测肺组织NF-κB p65的表达。  结果  各给药组均能够显著降低脓毒症小鼠的肺脏湿/干质量比,并升高血液中的氧合指数（P<0.01）,降低肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6、TNF-α及NF-κB水平（P<0.01）,同时降低肺组织中NF-κB p65的表达（P<0.01）。人参皂苷Rg1合并亚胺培南应用时,与单用人参皂苷Rg1及单用亚胺培南组相比,上述指标更接近对照组水平。HE染色结果显示给药治疗后的各组脓毒症小鼠的肺泡炎细胞浸润减轻,联合用药组的肺脏组织形态与假手术组最为接近。  结论  人参皂苷Rg1单用和联用均能够抑制脓毒症小鼠的肺脏炎症,以抗生素治疗脓毒症时或可考虑联合使用。     

替米沙坦对2型糖尿病大鼠肾组织MCP-1、NF-κB表达的影响

目的观察替米沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏病变中单核巨噬细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、核因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分成正常对照组（A组,n=10）和糖尿病模型组（n=20）。A组给予常规饲料;模型组给予高糖高脂饲料,4周后腹腔注射链尿佐菌素（STZ）30mg/kg,造模成功后模型组再随机分成糖尿病组（B组,n=10）和替米沙坦治疗组（C组,n=10）,C组每天给予替米沙坦5mg/kg灌胃。替米沙坦干预12周后,用免疫组化法检测各组大鼠MCP-1、NF-κB在肾脏表达的变化。结果与A组比较,B、C组大鼠肾组织中MCP-1、NF-κB表达明显增加（P〈0.01）;C组比B组MCP-1、NF-κB表达明显降低（P〈0.01）。结论2型糖尿病大鼠肾组织中MCP-1、NF-κB表达明显增加,替米沙坦可通过降低肾组织MCP-1、NF-κB表达,从而减轻肾脏的炎症反应。     

NF-κB/iNOS信号通路在感音神经性听力损失小鼠模型中对螺旋神经节的影响

  目的  探究在3-硝基丙酸（3-NP）诱导的感音神经性听力损失小鼠模型中核转录因子κB（NF-κB）/诱导型一氧化氮合酶（iNOS）信号通路的表达水平变化对听力损失的影响。   方法  本研究采用鼓室注射法进行动物建模。将C57BL/6雄性小鼠分为3个组,每组9只。3-NP组（鼓室内注射3-NP溶液）,3-NP+EVP4593组（鼓室内注射3-NP溶液,腹腔注射NF-κB抑制剂EVP4593溶液）,以及对照组〔鼓室内注射磷酸缓冲液（PBS）〕。在注射前后进行听性脑干反应检测。4周后取出耳蜗,并进行NF-κB p65、RelB、iNOS、Caspase-3抗体的免疫组织化学及实时荧光染色定量（qRT）-PCR检测。   结果  3-NP组小鼠反应阈值较对照组和3-NP+EVP4593组高（P<0.05）,且3-NP+EVP4593组的听阈比对照组高（P<0.05）。免疫荧光染色和qRT-PCR结果显示3-NP暴露可导致螺旋神经节区域NF-κB p65和RelB、iNOS表达较对照组增加（P<0.05）,其表达可随着EVP4593的应用而减少（P<0.05）。3-NP组螺旋神经节细胞Caspase-3表达高于对照组,3-NP+EVP4593组Caspase-3的表达较3-NP组减少（P<0.05）。   结论  3-NP可通过激活NF-κB/iNOS信号通路导致感音神经性听力损失模型小鼠的耳蜗螺旋神经节发生炎症反应,这可能在感音神经性听力损失的发病中起重要作用。     

硝基酪氨酸对糖尿病肾病大鼠肾脏NF-κB、MCP-1 及TGF-β1表达的影响

目的观察硝基酪氨酸（NT）对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏核因子-κB（NF-κB）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和转化生长
因子-β1（TGF-β1）表达的影响,探讨其在DN发生发展中的作用机制。方法用链脲佐菌素腹腔注射法建立DN大鼠模型,造模
成功的大鼠随机分3组：DN模型组、DN+NT组和DN+NT+Ebselen组（NT抑制剂）,另设正常对照组。各组分别干预8周后,观
察24 h尿蛋白定量变化,采用免疫组织化学染色检测肾脏组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检
测肾组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1 mRNA表达,光镜观察肾脏病理改变。结果与DN模型组比较,DN+NT组大鼠24 h尿蛋
白定量、肾脏组织中NF-κB、MCP-1和TGF-β1的蛋白及mRNA水平均显著增加,肾脏病理改变加重;NT抑制剂Ebselen可明显
减轻这些变化。结论硝基酪氨酸可上调DN大鼠肾脏组织NF-κB、MCP-1及TGF-β1 蛋白及其mRNA的表达,加重炎性反应,
促进DN的进展。
     

NF-κB Inhibitor Parthenolide Promotes Renal Tubules Albumin Uptake in Type 2 Diabetic Nephropathy

Objective Injured tubular reabsorption is highlighted as one of the causes of increased albuminuria in the early stage of diabetic nephropathy; however, the underlying mechanism has not been fully elucidated. In this study, we aimed to explore whether reducing inflammation and remodeling the insulin signaling pathway could improve albumin uptake of renal tubules.Methods 8-week-old male db/db mice (n=8), a type 2 diabetic nephropathy model, administered with nuclear factor kappa-B (NF-κB) inhibitor parthenolide (PTN, 1 mg/kg) intraperitoneally every other day for 8 weeks, were as the treatment group. Meanwhile, the age-matched male db/m mice (n=5) and db/db mice (n=8) were treated with saline as the control group and type 2 diabetic nephropathy group. When the mice were sacrificed, blood and urine were collected to examine homeostasis model assessment of insulin resistance (HOMA-IR) and urine albumin creatinine ratio, and kidney samples were used to analyze histopathologic changes with periodic acid-Schiff (PAS) staining, NF-κB p65, phosphorylation of AKT (p-AKT), amnionless and cubilin expressions with immunohistochemistry as well as western blot, and the albumin uptake of renal tubules by using immunofluorescence. In addition, HKC cells were divided into the insulin group treated with insulin alone, the TNF-α group treated with insulin and tumor necrosis factor (TNF-α), and the TNF-α+PTN group exposed to PTN, insulin and TNF-α. The levels of albumin uptake and expression levels of NF-κB p65, p-IRS-1/IRS-1, p-AKT/AKT, amnionless and cubilin in HKC cells were measured.Results Compared with the db/db group, the db/db+PTN group demonstrated decreased levels of HOMA-IR (36.83±14.09 vs. 31.07±28.05) and urine albumin creatinine ratio (190.3±7.3 vs. 143.0±97.6 mg/mmol); however, the differences were not statistically significant (P>0.05). Periodic acid-Schiff staining showed PTN could alleviate the glomerular hypertrophy and reduce the matrix in mesangial areas of db/db mice. The renal expression of NF-κB p65 was increased and p-AKT (s473) decreased in the db/db group compared with the db/m group (P<0.05). PTN significantly reduced the renal expression of NF-κB p65 and ameliorated the decline of p-AKT (s473) compared with the db/db group (P<0.05). Compared with the db/m group, the expression of amnionless and cubilin decreased and albumin uptake in tubules were reduced in the db/db group (P<0.05), and PTN could significantly increase the expression of cubilin (P<0.05), and improve albumin uptake in tubules. Insulin promoted albumin uptake and the expression of amnionless and cubilin in HKC cells (P<0.05). TNF-α stimulated the expression of NF-κB p65, increased p-IRS-1 (s307) and reduced p-AKT (s473) in HKC cells (P<0.05). In the TNF-α+PTN group, the expression of NF-κB p65 declined and p-IRS-1 (s307) and p-AKT (s473) were restored, compared with the TNF-α group (P<0.05). The expression of amnionless and cubilin decreased in the TNF-α group (P<0.05), and PTN could significantly increase the expression of cubilin (P<0.05).Conclusions Inflammation caused damage to insulin signaling, which reduced amnionless-cubilin expression and albumin uptake. PTN could reduce inflammation and remodel the impaired insulin signaling pathway, which promoted the expression of cubilin and albumin uptake. Our study can shed light on the role of inflammation in the reduction of albumin uptake of renal tubules in type 2 diabetic nephropathy.     

厄贝沙坦可减轻2型糖尿病db/db小鼠心肌组织的炎症反应

目的 探讨血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂(ARB)厄贝沙坦对2型糖尿病db/db小鼠心肌组织炎症反应的保护作用及其心脏保护机制.方法 10周龄db/db小鼠随机分成模型组、厄贝沙坦治疗组50 mg/(kg·d),同窝出生的10周龄非糖尿病db/+小鼠充当正常对照组.正常组,模型组灌服等体积生理盐水,厄贝沙坦治疗组灌服厄贝沙坦(溶于生理盐水),药物干预16周后,记录心脏质量、体质量,测定空腹血糖、血甘油三酯、血总胆固醇含量,对心脏行HE染色、Western blot、免疫组化和qPCR检测.结果 与正常组db/+小鼠相比,模型组db/db小鼠发生了肥胖、高血糖、高血脂(P<0.01);心肌组织肌纤维排列紊乱,间质增多,炎症细胞浸润;P-IкBα蛋白水平升高、IкBα蛋白水平降低,P-IкBα/IкBα升高(P<0.001);NF-кB(P65)活性增强,入核增加(P<0.001),且促炎细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA水平升高(P<0.01),这些异常均与糖尿病心肌组织炎症反应升高有关.厄贝沙坦的慢性治疗改善心肌病理学变化,并改善了2型糖尿病db/db小鼠高血糖诱导的心肌组织炎症反应指标.结论 厄贝沙坦改善了2型糖尿病db/db小鼠心肌组织炎症反应,其机制可能与抑制心脏血管紧张素Ⅱ的作用和NF-кB信号通路有关.     

硼替佐米靶向NF-κB信号通路抑制结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤的研究

  目的  研究硼替佐米对结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤（ENKTL）的抗肿瘤作用。  方法  单独使用不同质量浓度（0、1、2、4、5、6 ng/mL）硼替佐米处理SNK-6细胞24、48、72 h,及不同浓度核因子-κB （NF-κB）信号通路抑制剂BAY11-7082（0、1、2.5、5、10、20 μmol/L）处理SNK-6细胞24 h后,采用CCK8法检测细胞存活率并计算其半数抑制浓度（IC₅₀）。联合使用30 μmol/L Z-VAD-FMK（Pan-caspase抑制剂）+3 ng/mL硼替佐米,以及5、10 μmol/L BAY11-7082+3 ng/mL硼替佐米处理SNK-6细胞24 h,CCK8法检测细胞存活率。不同质量浓度硼替佐米处理SNK-6细胞24 h后,采用Annexin Ⅴ/PI流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、多聚ADP核糖聚合酶（PARP）和Bcl-2的表达,检测NF-κB信号通路相关蛋白P65和P100/52的表达。  结果  硼替佐米可呈剂量依赖性的抑制SNK-6细胞增殖（P<0.05）,24 h IC₅₀﹝（2.87±0.06） ng/mL﹞低于48 h和72 h（P<0.05）。BAY11-7082亦可抑制SNK-6细胞增殖,24 h IC₅₀= （9.73±0.36） μmol/L。联合用药结果表明,Z-VAD-FMK能减弱硼替佐米对SNK-6细胞增殖的抑制作用（P<0.05）,BAY11-7082能增强硼替佐米对SNK-6细胞增殖的抑制作用（P<0.05）。硼替佐米处理SNK-6细胞24 h后,凋亡相关蛋白Caspase-3裂解、PARP激活,以及Bcl-2裂解;NF-κB信号通路相关蛋白P65磷酸化水平降低,P52减少。  结论  硼替佐米通过阻断NF-κB信号通路抑制ENKTL细胞增殖,并且经线粒体介导的Caspase途径诱导ENKTL细胞凋亡。     

全反式维甲酸对巨噬细胞中白介素-1β表达的调控及机制研究

  目的  探究全反式维甲酸（all-trans retinoic acid, ATRA）对巨噬细胞中白介素（interleukin, IL）-1β表达的调控及作用机制。  方法  巨噬细胞经1 μmol/L ATRA处理24 h后转录组测序,筛选差异表达基因,进行KEGG通路分析、GO功能分析和PPI网络分析。不同剂量ATRA处理巨噬细胞24 h后,qRT-PCR和Western blot验证炎症因子IL-1β的表达水平。Western blot和免疫荧光染色检测核因子（neuclear factor, NF）-κB信号和半胱天冬酶-1（caspase-1）的变化。  结果  测序结果显示,与空白对照组相比,巨噬细胞经ATRA处理后71个差异表达基因上调,KEGG分析显示上调基因参与IL-17信号通路、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF）信号通路等,GO分析显示上调基因参与IL-1β的产生、对脂多糖的反应等生物学过程,PPI分析揭示炎症因子,黏附分子和趋化因子为ATRA作用的核心基因。体外实验表明,ATRA呈浓度依赖性促进巨噬细胞中IL-1β的表达,ATRA组中磷酸化（p）-NF-κB、NF-κB和caspase-1的表达较对照组升高（P<0.05）,且p-NF-κB发生了核转移。  结论  ATRA可能通过激活巨噬细胞中的NF-κB信号和caspase-1促进炎症因子IL-1β的表达。     

雷公藤甲素通过调控Toll-样受体(TLR)/核因子κB(NF-κB)信号通路对糖尿病肾病模型小鼠足细胞的作用研究

目的观察雷公藤甲素治疗糖尿病肾病(DN)模型小鼠的疗效,并探讨其通过Toll-样受体(TLR)/核因子κB(NF-κB)信号通路对DN足细胞的作用机制。方法6只9周龄db/m和18只9周龄db/db雄性小鼠,按db/m正常对照组(等量0.9%生理盐水)、db/db DN对照组(等量0.9%生理盐水)、替米沙坦治疗组(5mg·kg^-1·d^-1)、雷公藤甲素组(50μg·kg^-1·d^-1)分组给药,治疗8周。记录各组小鼠一般情况、24h尿白蛋白定量、体质量、肾脏指数和血生化指标,光镜观察肾小球病变情况,免疫组化计算足细胞数量,Western blot检测肾脏足细胞相关蛋白Nephrin、Podocin以及肾脏组织TLR4和NF-κB蛋白定量表达。结果与DN对照组比较,雷公藤甲素组小鼠治疗后24h尿蛋白定量[(98.28±11.10)mg/24h比(239.89±44.26)mg/24h]、血清肌酐[(38.82±3.66)μmol/L比(45.32±7.63)μmol/L]、总胆固醇[(3.05±0.54)mmol/L比(4.00±0.67)mmol/L]及三酰甘油[(1.23±0.15)mmol/L比(2.09±0.48)mmol/L]均明显下降(P均<0.01),血清白蛋白水平上升[(39.21±4.33)g/L比(25.46±1.54)g/L,P<0.01],肾小球肥大和足细胞损伤减轻[(95.50±5.01)个/肾小球比(58.78±2.86)个/肾小球,P<0.05],Nephrin[(2.05±0.44)比(1.15±0.22)]、Podocin[(1.32±0.25)比(0.72±0.20)]蛋白表达量上升(P均<0.01),TLR4[(0.37±0.04)比(0.61±0.04)]和NF-κB[(0.41±0.05)比(0.76±0.06)]蛋白表达量下降(P均<0.01)。结论雷公藤甲素可能通过抑制TLR/NF-κB信号通路相关因子表达,减轻糖尿病肾病模型小鼠足细胞损伤,减低蛋白尿,保护肾功能,起到治疗糖尿病肾病的作用。     

黄芪汤调节TLR4/NF-κB信号通路改善高糖诱导足细胞损伤的研究

  目的  探讨黄芪汤对高糖诱导足细胞损伤的作用及机制。  方法  体外培养人足细胞, 采用30 mmol·L-1葡萄糖干预24 h诱导足细胞损伤, 分别设置对照组、模型组、黄芪汤低浓度组(10 μg·mL-1)、黄芪汤中浓度组(30 μg·mL-1)和黄芪汤高浓度组(100 μg·mL-1)。采用CCK-8法检测细胞增殖能力, 划痕实验检测细胞迁移能力,qPCR法检测TNF-α、IL-6等炎症因子mRNA表达, ELISA法检测足细胞上清TNF-α、IL-6的含量,Western blot法检测足细胞TLR4、NF-κB、p-NF-κB、TNF-α及IL-6蛋白表达。  结果  与对照组比较, 模型组细胞划痕愈合率明显降低(P < 0.01),足细胞中TNF-α、IL-6、CCL24 mRNA表达水平,上清液中TNF-α、IL-6的含量和TLR4、p-NF-κB/NF-κB、TNF-α及IL-6蛋白表达均显著增加(P < 0.05,P < 0.01)。与模型组相比, 黄芪汤组细胞划痕率明显升高(P < 0.01),足细胞中TNF-α、IL-6的含量和mRNA表达,以及TLR4、p-NF-κB/NF-κB、TNF-α、IL-6蛋白表达均显著减少(P < 0.05, P < 0.01)。  结论  黄芪汤能有效减轻高糖对人足细胞的炎症损伤, 增强细胞增殖、迁移能力, 抑制细胞凋亡, 其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路、下调炎症因子的表达有关。