大肠腺瘤及腺癌细胞凋亡与p53和bcl-2的表达

目的探讨大肠粘膜癌变中细胞增殖和凋亡的特征以及凋亡相关调控基因的表达。方法对60例大肠腺瘤．癌用原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡,免疫组化SP法检测PCNA增殖指数（proliferative index,PI）及bcl-2和p53蛋白的表达。另选大肠高分化腺癌和正常粘膜20例作为对照检测。结果①正常粘膜、腺瘤和腺癌的p53蛋白表达率为5％、33．3％和70％。三组间有显著的差异（P均〈0．05）。②正常粘膜、腺瘤和腺癌的bcl-2蛋白表达率分别为15％、70％和65％．腺瘤和腺癌组均高于正常对照组（P均〈0．01）,腺瘤与腺癌组间差异不显著（P均〉0．05）。③大肠腺瘤和腺癌细胞的凋亡指数（AI）均高于正常粘膜（P均〈0．01）,bcl-2和p53蛋白的表达率与细胞AI呈显著负相关（rs=-0．66,rs=-0．62）。结论凋亡和增殖在肿瘤的发生、发展、转化中起着重要作用,上述指标的联合检测可以作为临床早期判断人肠腺瘤癌变的重要参考指标。     

大肠癌、大肠腺瘤Cyclin D1、P16和PCNA蛋白表达及其意义

探讨细胞周期调控因子蛋白表达在大肠癌发生发展中的作用及其对预后影响。方法采用免疫组化染色对１１３例大肠癌、１４例大肠腺瘤、１１例腺瘤癌变化组织中ＣｙｃｌｉｎＤ１,Ｐ１６和ＰＣＮＡ进行了检测。结果大肠癌、腺癌和癌变ＣｙｃｌｉｎＤ１,Ｐ１６以ＰＣＮＡ阳性表达率与大肠粘膜相比均相差异显著（Ｐ〈０．０５）腺瘤癌变ＣｈＣｌｉｎＤ１表达明显增高,大肠癌Ｐ１６表达明显降低,大肠癌、腺癌癌变的ＰＣＮ较腺癌组显著增     

β-catenin蛋白表达与大肠腺瘤癌变的关系

目的探讨β-catenin蛋白表达与大肠腺瘤癌变的关系.方法采用免疫组化法检测25例正常大肠粘膜(NCM)、42例大肠腺瘤(CA)和19例大肠腺瘤癌变(CAC)组织中β-catenin蛋白的表达.结果正常大肠粘膜β-catenin蛋白表达位于细胞膜,大肠腺瘤和大肠腺瘤癌变组织的β-catenin细胞膜表达有不同程度的缺失,而细胞浆和细胞核异位表达明显增加.大肠腺瘤癌变组织β-catenin异位表达率为89.5%,显著高于大肠腺瘤42.9%(P＜0.01).大肠腺瘤组织β-catenin细胞膜表达缺失率为33.3%,大肠腺瘤癌变组织为42.1%.结论β-catenin蛋白的异常表达可能是大肠腺瘤癌变的重要环节之一.     

家族性腺瘤性息肉病肠粘膜、腺瘤及癌组织的基因蛋白检测与意义

研究家族性腺癌性息肉病（FAP）癌变过程中P21－H－ras、EGFR和P53的变化与意义。方法：用ABC免疫组化方法检测并比较以上三种指标在41例FAP患者的正常肠粘膜、腺瘤和癌组织标本中表达情况。结果：P21－H－ras、EGFR及P53在正常肠粘膜中阳性表达率分别为0、4．7％与0，在腺癌中为29．3％、35．4％与20．8％，癌组织中为47．4％、60．6％与52．6％，癌与腺癌的阳性率都显著高于正常肠粘膜（P＜0．05）；P21－H－ras、EGFR在癌组织中的阳性率高于腺瘤，但差别不显著（P＞0．05），P53在癌的阳性率显著高于腺癌（P＜0．05）。癌组织有2个以上指标阳性者占55．6％，3个都阳性者占27．3％；腺瘤中分别为13．2％与4．4％，差别显著（P＜0．05）。结论：提示P21－H－ras、EGFR、P53基因都参与FAP癌变，P21－H－ras基因、EGFR可能作用于早期，P53基因则作用于晚期。检测P21－H－ras、EGFR、P53对早期诊断FAP癌变有一定意义。     

表皮生长因子受体及Ki67在大肠肿组织中的表达及意义

目的 评价表皮生长因子受体（EGFR）及Ki67在大肠良、恶性肿瘤不周组织类型中的表达情况。方法 采用免疫组织化学SP法检测内镜及病理确诊的大肠息肉、大肠腺瘤和大肠腺癌患者共115例，分别对所选标本进行EGFR、Ki67检测，对其阳性表达率进行统计学分析。结果 EGFR、Ki67阳性反应分别主要定位干细胞膜、细胞核。息肉组EGFR、Ki67的阳性表达率均较低，分别为40．2％、12．3％。EGFR、Ki67在管状腺瘤及绒毛状腺瘤中阳性表达率均较高，管状腺瘤、绒毛状腺瘤中EGFR表达率分别为98．3％、70．4％，而Ki67在两者中表达率分别为78．6％、70．4％。EGFR及Ki67在管状腺癌、乳头状腺癌和粘液腺癌中的阳性表达率均较高（〉60％）。EGFR阳性表达在腺瘤与腺癌组织中无显著性差异（P〉O．05），而Ki67阳性表达在两者间有显著性差异（P〈0．001）。结论 EGFR、Ki67表达均与息肉无关。Ki67阳性表达比EGFR对大肠恶性肿瘤的诊断意义更大。     

大肠腺瘤-癌序列中抗凋亡基因Survivin的表达

目的：研究大肠癌发生过程中不同病理阶段(增生性息肉、腺瘤和腺癌)抗凋亡基因Survivin的表达情况。方法：应用免疫组化SABC法检测12例正常大肠黏膜、6例增生性息肉、22例腺瘤和32例腺癌的石蜡标本中Survivin表达情况。结果：Survivin在正常大肠黏膜无1例表达，在增生性息肉、腺瘤和腺癌中的阳性率分别为16.7％(1／6)、77.3％(17／22)和68．8％(22／32)；大肠腺癌组和大肠腺瘤组中Survivin表达显著高于正常大肠黏膜组和增生性息肉组(P＜0．05)；大肠腺瘤组Survivin表达高于大肠癌组(P＜0．05)。结论：Survivin基因在大多数大肠腺瘤和腺癌中表达；Survivin的过度表达是大肠上皮癌变过程的早期事件之一。     

Survivin基因在侧向生长型大肠肿瘤的表达

目的:对大肠腺瘤组、LST良性组、大肠腺癌组分别进行Survivin基因表达的研究,为进一步完善大肠肿瘤发生的分子生物机制奠定基础。方法:分别用RT-PCR法和免疫组化SP法对大肠腺瘤、大肠腺癌、LST良性组及正常大肠黏膜组织,检测Sur-vivin的表达。结果:大肠腺癌组、大肠腺瘤组和LST良性组中Survivin表达显著高于正常大肠黏膜组(P<0.05);大肠腺瘤组和LST良性组Survivin表达低于大肠癌组(P<0.05),而大肠腺瘤组和LST良性组间无差异表达。结论:Survivin的过度表达是大肠上皮癌变过程的早期事件之一。LST与大肠腺瘤有着相同的基因改变,同样是由于多种基因协同作用的结果,同样经过腺瘤-癌顺序学说演变成大肠腺癌。     

大肠腺癌及腺癌ras,P^53基因点突变的检测

应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测了２０例正常大肠粘膜、３０例大肠腺瘤、７４例大肠腺癌及７４例癌旁粘膜ｒａｓ、Ｐ＾５３基因点突变。结果显示，正常大肠粘膜及癌旁粘膜未检测到基因突变，大肠腺癌及腺癌ｒａｓ基因突变率分别为２６．７％及４１．９％，且ｒａｓ基因突变率随腺瘤大小及不典型增生程度增高而增高。大肠腺癌及腺癌Ｐ＾５３基因（第２４８位点）突变率分别为１．３％及１４．９％。１例腺瘤、６例腺癌存在ｒａｓ及Ｐ＾５     

P53及Bcl-2蛋白在大肠腺瘤及腺癌中的表达

目的：检测大肠腺瘤及腺癌中Ｐ５３蛋白及Ｂｃｌ－２蛋白的表达，探讨ｐ５３基因、ｂｃｌ－２基因在大肠癌发生发展过程中的作用。方法：应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测１０例正常大肠粘膜、３０例大肠腺瘤、１００例大肠腺癌及癌旁粘膜中Ｐ５３蛋白及Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：大肠腺瘤Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白阳性率分别为２６．７％及７６．７％，大肠腺癌Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白阳性率分别为４３％及６７％，均显著高于正常粘膜与癌旁粘膜（Ｐ＜０．０１）；随着腺瘤不典型增生程度的加重，Ｐ５３蛋白阳性率显著增高（Ｐ＜０．０１），而Ｂｃｌ－２蛋白表达与腺瘤分级无关；大肠腺癌Ｐ５３蛋白阳性率显著高于腺瘤Ⅰ级不典型增生（Ｐ＜０．０１），与Ⅱ、Ⅲ级不典型增生间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），分化差的大肠腺癌Ｐ５３蛋白阳性率显著高于分化好的大肠腺癌（Ｐ＜０．０１），而分化差的大肠腺癌Ｂｃｌ－２蛋白阳性率显著低于分化好的大肠腺癌（Ｐ＜０．０５），大肠腺癌Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白表达呈负相关（Ｐ＜０．０５）；Ｐ５３蛋白表达患者复发率高、５年生存率低（Ｐ＜０．０５），Ｂｃｌ－２蛋白过度表达的大肠癌患者复发率低、５年生存率高（Ｐ＜０．０５）。结论：ｂｃｌ－２     

15 - 羟前列腺素脱氢酶在大肠腺瘤和腺癌组织中的表达

目的：探讨15-羟前列腺素脱氢酶（15-PGDH）在腺瘤和腺癌组织中的表达和意义。方法：选取肠镜检查和手术活检组织标本118例,其中正常大肠黏膜30例,大肠腺瘤43例,大肠腺癌组织45例。用Real Time PCR检测15-PGDH mRNA的表达,免疫组织化Elivision法检测组织中15-PGDH的蛋白表达。结果：15-PGDH在大肠腺癌组织中的mRNA的表达、阳性表达率及光密度值均低于大肠腺瘤及正常黏膜组（P〈0.05）;且大肠腺瘤组低于正常黏膜组（P〈0.05）。结论：15-PGDH表达降低或缺失,可能是大肠腺癌发生过程中的重要环节。     

Survivin和uPA在结直肠腺瘤与腺癌中的表达及意义

目的：检测survivin蛋白在结肠腺瘤、腺癌中的表达,探讨其与增殖细胞核抗原（PCNA）、尿激酶型纤溶酶激活物（uPA）的关系。方法：应用免疫组织化学染色法检测survivin、uPA、PCNA蛋白在30例正常结直肠黏膜、30例结直肠非腺瘤性息肉、68例结直肠腺瘤、70例结直肠癌中的表达。结果：Survivin、UPA、PCNA的表达从结直肠正常黏膜、非腺瘤型息肉、腺瘤型息肉、腺癌逐渐增高,差异有统计学意义（P〈0.05）,并在此过程中survivin与PCNA呈正相关（P〈0.05）,survivin与PCNA表达呈正相关（P〈0.05）。结论：survivin和PCNA及UPA在结肠腺瘤中的发生、发展中起着协同的作用。     

应用生物信息学技术筛选结直肠腺瘤相关基因

目的应用生物信息学技术筛选结直肠腺瘤与正常结直肠黏膜组织的差异表达基因,寻找其中的关键基因并分析分子机制。方法公共数据库GeneExpressionOmnibus（GEO）下载基因芯片GSE8671,通过R语言软件筛选出差异表达基因,进一步对差异表达基因进行GO功能富集分析和KEGG信号通路分析,并通过构建蛋白质-蛋白质相互作用网络筛选出关键基因。结果共筛选出381个差异表达基因,其中结直肠腺瘤中上调的基因248个,下调的基因133个。GO功能富集分析显示差异表达基因主要与趋化因子激活、趋化因子受体结合、激素激活和生长因子激活有关,KEGG信号通路分析表明差异表达基因与趋化因子信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、细胞因子与受体相互作用和药物代谢有关。通过蛋白质-蛋白质相互作用网络共筛选出IL-8、CXCL1、CXCL12、CXCL13、CXCL11、CXCL2、CCL19、CCL20、PPBP、PF-4等10个关键基因。结论应用生物信息学技术分析筛选结直肠腺瘤基因有助于进一步探讨结直肠腺瘤和腺癌发病的分子机制,为两者的早期诊治提供理论依据。     

Reg Ⅳ, a differentially expressed gene in colorectal adenoma

Objective To discover and identify differentially expressed genes associated with colorectal adenomaforma tion and the role of ReglV in colorectal adenoma differentiation.Methods A subtracted cDNA library was constructed with cDNAs that were isolated from either the normal mucosa or adenoma tissue of a single patient. Suppressive subtractive hybridization (SSH)combined with virtual northern blotting was used to characterize differentially expressed genes and contigs were assembled by electronic cloning (in silico cloning ) with the EST database. Semi-quantitative RT-PCR was performed in 9 colorectal adenomas.Results The amino acid sequence was determined with open reading frame (ORF) prediction software and was found to be 100% homologous to the protein product of Reg Ⅳ (a novel gene isolated from a large inflammatory bowel disease library). RegⅣ was found to be highly expressed in all of the adenoma samples (9/9) compared with the normal mucosa samples, while 5/6 casess howed RegⅣ to be more strongly expressed in adenocarcinoma.Conclusion RegⅣ may play an important role in the initiation of colorectal adenoma differentiation,and its detection mav be useful in the earlv diaonosis of colorectal adenoma formation.     

Reg IV , a differentially expressed gene in colorectal adenoma

Objective To discover and identify differentially expressed genes associated with colorectal adenoma formation and the role of Reg IV in colorectal adenoma differentiation.Methods A subtracted cDNA library was constructed with cDNAs that were isolated from either the normal mucosa or adenoma tissue of a single patient. Suppressive subtractive hybridization (SSH) combined with virtual northern blotting was used to characterize differentially expressed genes and contigs were assembled by electronic cloning (in silico cloning) with the EST database. Semi-quantitative RT-PCR was performed in 9 colorectal adenomas.Results The amino acid sequence was determined with open reading frame (ORF) prediction software and was found to be 100% homologous to the protein product of Reg IV (a novel gene isolated from a large inflammatory bowel disease library). RegIV was found to be highly expressed in all of the adenoma samples (9/9) compared with the normal mucosa samples, while 5/6 cases showed Reg IV to be more stron     

uPA、PAI-1蛋白在大肠癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator,uPA）、纤溶酶原激活物抑制物（plasminogen activator inhibitor type 1,PAI-1）蛋白在大肠癌中的表达及其与大肠癌侵袭、转移的关系.方法 采用免疫组化SP法对uPA、PAI-1蛋白在29例正常大肠黏膜、28例大肠腺瘤、51例无淋巴结转移大肠癌、50例有淋巴结转移大肠癌样本中的表达情况进行检测.结果 （1） uPA及PAI-1蛋白在大肠癌发生发展过程中表达均逐渐升高,差异有统计学意义（P＜0.05）,且均与大肠癌是否有淋巴结转移有负相关关系（P＜0.05,rs＇=-0.7408及P＜0.05,rs＇=-0.7807）;与分化程度之间差异有统计学意义（P＜0.05）,而与浸润深度之间差异无统计学意义; （2）在大肠癌中,uPA及PAI-1蛋白的表达呈正相关关系（P＜0.05,rs＇=0.2043）; （3）应用Cox比例风险模型回归分析,显示uPA的表达程度是影响结直肠癌患者术后生存的因素之一,PAI-1蛋白表达程度和患者年龄是影响结直肠癌患者术后生存的因素.结论 uPA及PAI-1蛋白在大肠癌发生发展中起一定的作用,是影响大肠癌预后的一个因素.     

结直肠息肉中CD_（24）、TK1的表达及其临床价值

目的探讨CD24、TK1在结直肠息肉中的表达情况及临床应用价值。方法选择炎性息肉、管状腺瘤、管状绒毛状腺瘤、绒毛状腺瘤各20例,同期入院正常结肠黏膜及结直肠癌各20例为对照组。观察CD24、TK1表达与息肉组织类型、息肉异型增生情况、息肉大小、息肉数量的关系。结果 CD24、TK1阳性表达与息肉病理类型相关（P〈0.01）。正常黏膜与腺瘤组、腺瘤组与腺癌组CD24、TK1表达差异分别均有统计学意义（P〈0.05）。CD24、TK1阳性表达与异型增生程度有相关性（P〈0.05）。CD24、TK1在单发息肉与多发息肉直径阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 CD24、TK1在结直肠息肉中存在较高的表达,结直肠腺瘤的不同病理类型,增生的程度不一,大小不同,数量不同,其表达的程度不一。     

结直肠癌组织乳腺癌易感基因1与表皮生长因子受体的蛋白表达及其临床意义

目的：探讨乳腺癌易感基因1（ BRCA1）和表皮生长因子受体（ EGFR）蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法收集结直肠癌标本80例、腺瘤标本20例、正常黏膜标本20例,采用免疫组化法检测BRCA1和EGFR蛋白的表达情况,比较不同临床病理特征结直肠癌患者的癌组织BRCA1蛋白、EGFR蛋白的阳性表达率,分析结直肠癌患者的癌组织BRCA1蛋白、EGFR蛋白表达的相关性。结果（1） BRCA1蛋白的阳性表达率在结直肠癌组织低于腺瘤及正常黏膜组织（P＜0．05）,有淋巴结转移患者其BRCA1蛋白阳性表达率也低于无淋巴转移患者（P＜0．05）。（2）EGFR蛋白阳性表达率在结直肠癌组织高于腺瘤及正常黏膜组织（P＜0．05）;肿瘤直径＞5 cm、中（低）分化腺癌、Duke C＋D期、有淋巴结转移的患者EGFR蛋白阳性表达率更高（P＜0．05）。（3）结直肠癌组织中BRCA1与EGFR蛋白表达呈负相关（r＝－0．219, P＜0．05）。结论 BRCA1及EGFR蛋白在结直肠癌的异常表达,对肿瘤的发生发展起到重要作用。     

SDF-1在大肠腺癌中的表达及意义

【目的】探讨基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)在大肠腺癌发生、发展、浸润转移中的作用及临床意义。【方法】应用免疫组织化学(immunohistochemical,IHC)SP法检测90例大肠腺癌、45例非肿瘤性大肠黏膜组织中SDF-1的蛋白表达情况;应用逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测50例大肠腺癌、30例非肿瘤性大肠黏膜组织中SDF-1的mRNA表达情况。【结果】IHC检测结果:SDF-1蛋白在大肠腺癌中的阳性表达明显高于非肿瘤性大肠黏膜(P<0.01)。RT-PCR检测结果:SDF-1mRNA在大肠腺癌组中的表达量显著高于非肿瘤性大肠黏膜组(P<0.01)。大肠腺癌组中SDF-1蛋白、mRNA的表达量与癌组织的浸润深度、有无淋巴结转移有关(P<0.05),与性别、年龄、癌组织的分化程度无关(P>0.05)。【结论】SDF-1在大肠腺癌中高表达,且与癌组织的浸润深度、淋巴结转移有关,提示SDF-1可能与肿瘤的发生、浸润转移密切相关。     

粘蛋白MUC2、MUC5AC在大肠腺癌中的表达及意义

目的探讨粘蛋白MUC2与MUC5AC在大肠腺癌及大肠腺瘤中的表达及其与临床病理参数之间的关系.方法应用免疫组织化学方法对20例大肠腺瘤和60例大肠腺癌进行粘蛋白MUC2、MUC5AC检测.结果20例大肠腺瘤及60例大肠腺癌中,粘蛋白MUC2阳性表达率分别为100%、58.3%(P=0.000);在大肠腺癌中MUC2的阳性表达与生存期(P=0.008)呈正相关,而与浸润深度(P=0.009)、淋巴结转移(P=0.001)、Ddukes分期(P=0.002)均呈负相关.MUC5AC阳性表达率分别为30%、46.7%(P=0.296);在大肠腺癌中MUC5AC的阳性表达与分化程度(P=0.005)正相关,与浸润深度呈负相关(P=0.039).MUC2与MUC5AC无相关性.结论大肠腺癌组织MUC2的下调表达可能参与了大肠腺癌的发生,对临床上判断预后具有较大的意义.