牛磺酸对小鼠脾细胞DNA修复能力的影响

①目的观察牛磺酸对小鼠脾细胞ＤＮＡ修复能力的影响，以探讨牛磺酸抗衰老的机制。②方法以不同鼠龄小白鼠脾细胞悬液进行培养，实验组培养液中加入牛磺酸（３０μｇ／ｍｌ），以１０ｍｍｏｌ／Ｌ羟基脲抑制ＤＮＡ复制，经紫外线照射后，以３Ｈ－胸腺嘧啶脱氧核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＤＮＡ损伤后修复能力。③结果鼠龄１１０ｄ，１５０ｄ和１８０ｄ３组小鼠中，ＤＮＡ修复能力均随鼠龄增加而降低，但在不同鼠龄阶段，牛磺酸组ＤＮＡ修复能力均高于对照组，牛磺酸组的闪烁值分别为８．０±０．６Ｈｚ，５．３±０．５Ｈｚ和４．１±０．４Ｈｚ，而对照组则分别为６．３±０．７Ｈｚ，４．７±０．５Ｈｚ和３．２±０．２Ｈｚ（ｔ＝７．５０，２．８７，３３．８０，Ｐ均＜０．０１）。④结论牛磺酸具有增强小鼠脾细胞ＤＮＡ的修复能力和延缓衰老的作用。     

一种检测异基因骨移植后供体植活的巢式PCR方法

目的 利用ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２Ｋ＾ｄ）和Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ－２Ｋ＾ｂ）小鼠Ｈ－２Ｋ等位基因不同,建立一种检测异基因骨髓移植后供体植活的方法。方法 分别以供鼠（ＢＡＬＢ／Ｃ）和受鼠（Ｃ５７ＢＬ／６）及ａｌｌｏ－ＢＭＴ后小鼠骨髓和脾细胞ＤＮＡ为模板进行巢式ＰＣＲ,并用琼脂糖凝胶电泳分析ＰＣＲ扩增产物。结果 以供鼠和移植后小鼠骨髓和脾细胞ＤＮＡ行巢式ＰＣＲ可扩增了约４２１ｂｐ的特异性片段,而未经移植的Ｃ     

IL—12提高DNA疫苗诱导小鼠抗HBV皮下移植瘤的免疫研究

目的 观察ＩＬ－２真核表达载体（ｐＷＲＧ３１６９）对ＨＢＶ－ＳＤＮＡ疫苗（ｐＣＲ３．１－Ｓ）诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠（Ｈ－２＾ｄ）的特异性细胞免疫应答及其对稳定表达ＨＢｓＡｇ的小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５细胞（Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ）成瘤性的影响。方法肌肉注射ＤＮＡ疫苗,背部皮下接种Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ细胞,观察成瘤情况,４ｈ＾５１Ｃｒ释放法检测小鼠脾细胞ＣＴＬ活性。结果 对照组、ｐＣＲ３．１－Ｓ及共同免疫     

抗Ia单克隆抗体促进异基因皮肤移植耐受

目的：探索抗Ｉａ单克隆抗体促进“细胞＋环磷酰胺（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ,ＣＰ）”系统诱导移植耐受的作用及其机制。方法：ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２＾ｄ）小鼠经尾静脉注入Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ－２＾ｂ,Ｂ６）小鼠脾细胞,４８ｈ后腹腔注射ＣＰ,接着两天分别经尾静脉注入抗小鼠Ｉａ单克隆抗体５００μｇ,然后进行皮肤移植,并于耐３受３０ｄ对受体小鼠作混合淋巴细胞反应（ｍｉｘｅｄ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｒｅａｃ     

白细胞介素－12 mRNA在移植物中的变化

应用反转多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及萤光标记ＤＮＡ探针技术检测ＩＬ－１２ｍＲＮＡ在纯系小鼠心移植物及宿主脾脏中的变化。结果表明：①移植的心脏在移植后（７．０±０．７）ｄ被排斥。②ＩＬ－１２ｍＲＮＡ在正常Ｂａｌｂ／ｃ（Ｈ－２￣ｄ）小鼠心脏中为阴性，在正常Ｃ＿３Ｈ／ＨｅＪ（Ｈ－２￣ｋ）小鼠脾脏中为弱阳性。③移植后第５ｄ，移植于Ｃ＿３Ｈ／ＨｅＪ的Ｂａｌｂ／ｃ心脏中和宿主Ｃ＿３Ｈ／ＨｅＪ的脾脏中ＩＬ－１２ｍＲＮＡ呈强阳性。提示ＩＬ－１２在排斥反应中起重要作用。     

齐墩果酸对肝DNA和蛋白质合成速率的影响

采用原代增减的小鼠 ＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）和＾３Ｈ－亮氨酸掺入的方法，研究齐墩果酸（ＯＬＡ）预处理小鼠肝细胞ＤＮＡ和蛋白质合成速率的影响。结果发现，经ＯＬＡ预处理的小鼠，其肝细胞的ＤＮＡ和蛋白质合成速率明显增加。提示ＯＬＡ经体内代谢后，能提高肝细胞ＤＮＡ和蛋白质的合成。     

核心蛋白聚糖对肝细胞和肝星形细胞体外增殖的影响

目的：探讨核心蛋白聚糖（ｄｅｃｏｒｉｎ）在肝纤维化形成机制中的作用。方法：在正常人肝细胞株Ｌ－０２及大鼠肝星形细胞株ＨＳＣ－Ｔ６体外培养体系中,分别加入不同质量浓度（０．０１,５,１０μｇ／ｍｌ）ｄｅｃｏｒｉｎ共培养不同时间后,进行细胞计数以及＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入量测定。结果：实验组经０．０１μｇ／ｍｌ ｄｅｃｏｒｉｎ作用４ｄ或６ｄ后,ＨＳＣ－Ｔ６和Ｌ－０２细胞增殖数量以及＾３Ｈ－Ｔ     

商陆多糖I对小鼠淋巴细胞DNA多聚酶α活性的影响

本实验在建立ＤＮＡ多聚酶α活性测定方法的基础上观察了商陆多糖Ｉ（ＰＡＰ－Ｉ）对小鼠淋巴细胞增殖及淋巴细胞ＤＮＡ多聚酶α活性的影响。采用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法和模板活化法（［３Ｈ］－ｄＴＴＰ掺入法）分别检测ＰＡＰ－Ｉ给药组及对照组小鼠淋巴细胞增殖能力和淋巴细胞ＤＮＡ多聚酶α活性。体外实验发现ＰＡＰ－Ｉ显著增强ＣｏｎＡ诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖及其ＤＮＡ多聚酶α的活性；小鼠腹腔注射ＰＡＰ－Ｉ（每周１次）对脾淋巴细胞ＤＮＡ多聚酶α活性基本上无影响，但加入ＣｏｎＡ（５μｇ／ｍｌ）刺激后，ＰＡＰ－Ｉ１０ｍｇ／ｋｇ剂量组ＤＮＡ多聚酶α活性显著增强。结果提示ＰＡＰ－Ｉ增强ＤＮＡ多聚酶α活性可能是促进脾淋巴细胞增殖、增强免疫功能的机制之一。     

DNA聚合酶β对DNAγ线辐射损伤的修复作用

采用ＤＮＡ聚合酶专一性抑制剂，观察ＤＮＡ聚合酶β对ＤＮＡｒ线损伤的修复作用。结果表明：在重组大鼠ＤＮＡ聚合酶β作用下，［＾３Ｈ］－ＴＴＰ掺入率明显高于未照组（Ｐ＜０．０１）；在一定剂量范围内（肝细胞小于２０ｇｙ，ＳＭＭＣ－ＬＴＮＭ肝癌细胞小于５Ｇｙ），［＾３Ｈ－ＴＩＰ掺入率随照射剂量增加而升高， 继续增加照射剂量时，［＾３］－ＴＴＰ掺入率反而下降；在同一剂量下，不同剂量率照射线这间ＤＮＡ聚合酶β的     

维拉帕米对人单核巨噬细胞蛋白质DNA,RNA合成的影响

目的；观察维拉帕米对人单核巨噬细胞ＤＮＡ，ＲＮＡ及蛋白质合成过程的影响，方法：维拉帕人单核细胞孵育２４ｈ或４ｄ，测定细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ，＾３Ｈ－ＵＲ，＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入人单核巨噬细胞状态及细胞内蛋白质含量，结果：维拉帕米在低浓度对ＤＮＡ，ＲＮＡ合成有抑制作用，呈浓度依赖性，高浓度时作用明显，对ＲＮＡ作用较ＤＮＡ显著（Ｐ〈０．０５），对蛋白质合成在高浓度时有抑制作用，维拉帕米与成熟过程中人单核巨噬细     

乙型肝炎病毒核心抗原基因疫苗对小鼠的体液和细胞免疫原性观察

目的 观察不同品系小鼠（Ｈ－２＾ｂ,Ｈ－２＾ｄ）经乙型肝炎病毒核心抗原（ＨＢｃＡｇ）基因疫苗免疫后特异性辅助性Ｔ细胞反应类型和特异性细胞毒性Ｔ细胞活性。方法 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法鉴定该基因疫苗的体外表达产物;基因枪法和肌内注射法接种该基因疫苗;间接ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗－ＨＢｃ ＩｇＧ亚类（ＩｇＧ１,ＩｇＧ２ａ）水平;＾５１铬释放法测定小鼠脾细胞ＨＢｃＡｇ特异性细胞毒性Ｔ细胞活性。结果     

健脾理气方联合rIL—2对荷瘤小鼠化疗免疫抑制的影响

研究联合应用中药健脾理气方和重组白细胞介素－２对肿瘤化学治疗免疫抑制的影响。方法用环磷酰胺给Ｈ２２荷瘤小鼠化疗，造成免疫抑制，应用中药健脾理气方和ＩＬ－２联合治疗后，用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法检测荷瘤小鼠的ＮＫ、ＬＡＫ细胞活性＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测脾细胞增殖活性，ＦＡＣＳ法检测ＩＬ－２受体，Ｌ３Ｔ４，ＬＹ２阳性细胞数。结果采用大剂量ＣＴＸ后，荷瘤鼠脾重，脾细胞数，脾细胞增殖及杀伤能力均明显降低。Ｔ细     

九钨三钛硅酸盐抗肿瘤作用及其机理研究

目的：观察九钨三肽硅酸盐（α－Ｔｉз）对小鼠肝癌细胞、Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞及Ｓ１８０腹水瘤细胞的体外抑瘤作用及荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：建立３种小鼠荷瘤模型,测定瘤重和体外抑瘤３Ｈ－ＴｄＲ掺入量以及相关免疫指标。结果：α－ＴｉзＬＤ５０为１８４９．３６ｍｇ／ｋｇ。α－Ｔｉз在６．２５ｍｇ／ｍｌ以上浓度时对３种瘤细胞的ＤＮＡ合成均有抑制作用。α－Ｔｉз能延长小鼠寿命,对荷瘤小鼠的瘤重有抑制作用,可增强荷瘤小鼠胸腺细胞自发掺入能力,脾细胞对ＣｏｎＡ的反应性及脾细胞Ｓ期ＤＮＡ的合成。结论：α－Ｔｉз增强小鼠胸腺和脾细胞免疫功能可能作为抑瘤作用机理之一。     

分泌抗人促甲状腺激素（hTSH）单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＳＰ２／０骨髓瘤细胞与经人促甲状腺激素（ｈＴＳＨ）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞融合，融合率６０．４％，抗体阳性率４．３％，经３－４次克隆化，筛出３株稳定分泌ＴＳＨＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。用放射免疫分析法（ＲＩＡ）检测小鼠腹水，抗体效价为１０＾－４时，抗体结合率为４５．５％。用ＥＬＩＳＡ方法检测小鼠腹水，抗体效价达１０＾－５。其中３株细胞做琼脂糖免疫双扩散试验，均显示为ＩｇＧ１，亚类。染色体计数     

尾加压素在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制

目的 观察近年新发现的活性肽尾加压素（Ｕｒｏｔｅｎｓｉｎ Ⅱ,ＵⅡ）在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制。方法 （１）采用＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＵⅡ对原代培养的大鼠气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）ＤＮＡ合成的影响,应用不同阻断剂观察ＵⅡ诱导细胞ＤＮＡ合成的信号转导通路。（２）采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针,测定ＵⅡ对胞浆游离钙浓度的影响。结果 （１）ＵⅡ呈浓度（１０＾－１０～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）依赖性刺激ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时,为对照组的７倍（Ｐ〈０．０１）;（２）蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）阻断剂Ｈ７、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）阻断剂ＰＤ９８０５９及钙通道阻断剂尼卡的平均能抑制ＵⅡ刺激的ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,其抑制率分别为２９％（Ｐ〈０．０５）,４５％（Ｐ〈     

抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备和生物学性质

用经Ｃｕ＾２＋氧化装饰４ｈ和２４ｈ的小鼠低密度脂蛋白（ｍｕｒｉｎｅＯ－ＬＤＬ）混合物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于融合前３天用经Ｃｕ＾２＋氧化修饰４ｈ和２４ｈ人低密度脂蛋白（ｈｕｍａｎ Ｏ－ＬＤＬ）的混合物加强免疫，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤ＳＰ２／０细胞融合，获得５株抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体，命名为ＨＯＬ１、ＨＯＬ２、ＨＯＬ３、ＨＯＬ４、ＨＯＬ５。这些单抗均有较高的抗体效价，抗体类型为Ｉｇ     

噬菌体呈现疫苗诱导乙型肝炎病毒特异性细胞毒性T细胞反应

目的 研究噬菌体呈现颗粒作为亚单位疫苗是否能在体诱导乙型肝炎特异性细胞毒性Ｔ细胞反应。方法 构建呈现ＭＨＣＩ类分子（Ｈ－２＾ｄ）限制性表位ＨＢｓ２８－２９的噬菌体颗粒,小剂量、无佐剂接种ＢＡＬＢ／ｃ（Ｈ－２＾ｄ）小鼠。结果 重组噬菌体呈现颗粒在体诱导Ｈ－２＾ｄ限制的ＨＢｓ２８－２９特异性细胞毒性Ｔ细胞反应。结论 丝状噬菌体疫苗有效诱导细胞毒性Ｔ细胞反应,能用于发展抗病毒疫苗。     

全反式维甲酸诱导分化舌癌细胞株的实验研究

目的 研究维甲酸对舌癌细胞株的诱导分化作用。方法 应用不同浓度（１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ～１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）全反式维甲酸体外处理人舌癌细胞株，①倒置显微镜下观察细胞的生长状态、计数活细胞并描绘细胞生长曲线，②航向电镜观察细胞超微结构的改变，③应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验测定ＤＮＡ合成能力。结果 经维甲酸处理后，倒置显微镜下可见癌细胞生长速度减慢，群体倍增时间延长，并与浓度成正比；细胞形态趋向良性分化     

胸腺肽对HBV转基因小鼠表达HBV DNA的影响

应用胸腺肽对ＨＢＶ转基因小鼠进行腹腔内注射（３ｍｇ／只）连续３个月，同时设促肝细胞生长素及生理盐水对照组，定期取血检测ＨＢＶＤＮＡ，结果发现胸腺肽组ＨＢＶＤＮＡ阴转率为２２％～５５％，停药２２ｄ后阴转率为２２％，而对照组小鼠ＨＢＶＤＮＡ无阴转，结果提示胸腺肽对ＨＢＶ转基因小鼠表达ＨＢＶＤＮＡ有抑制作用。     

槲皮素对细胞免疫功能的调节

目的：探讨槲皮素对细胞免疫功能的影响。方法：（１）昆明种小鼠随机分为三组；对照组、低剂量组、高剂量组。对照组每日腹腔注射生理盐水１０ｍｌ／ｋｇ，低剂量组和高剂量组每日分别腹腔注射槲皮素５０ｍｇ／ｋｇ体重和槲皮素１００ｍｇ／ｋｇ体重，连续给药５天后，用红细胞粘附花环实验测定了红细胞Ｃ３ｂ受体，用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放实验和＾３Ｈ－ＴｄＲ释放实验分别测定了自然杀伤（ＮＫ）细胞的杀伤效应和脾淋巴细胞增殖。（