运用离体心脏灌注装置研究心肌缺氧所致心肌超微结构的变化

本文介绍利用心肌缺氧模型研究缺氧时在超微结构上的变化,及运用胶体镧作为标志,同时测定灌注液中肌酐磷酸激酶(CPK)含量来观察细胞膜通透性的变化,与对照组相比较观察到的显著变化。现报道如下:     

喂饲克山病病区粮大白鼠心肌细胞膜通透性的变化——用硝酸镧作示踪物的电子显微镜观察

以硝酸镧作示踪物用电子显微镜观察喂饲克山病病区粮3个月的大白鼠心肌细胞膜通透性的变化。结果发现喂饲克山病病区粮的动物心肌细胞肌丝间和部分线粒体内均有镧盐沉着,而非病区粮饲养的动物镧盐颗粒只见于心肌细胞外间隙。表明喂饲克山病病区粮的大白鼠心肌肌膜和部分线粒体膜通透性增大。     

电镜技术中硝酸镧示踪法探讨

本文仅对心脏手术中缺血,重获氧和血灌注所造成的再灌注损伤的现象进行了研究。用硝酸镧作示踪剂,检查了心肌细胞膜通透性的改变。对正常细胞,只能存在于细胞膜外,而在膜受损后则可以进入细胞内,置换结合钙,故可作为缺血心肌细胞膜受损和通透性增加的标记。电镜图像显示出:正常组镧颗粒沉积在闰盘处,细胞内细胞器上则没有;缺氧组由于细胞膜损坏,通透性增强,闰盘处沉积物减少,形成一条稀疏带,而线粒体膜上却出现了镧的沉积物。表明用硝酸镧示踪法研究心肌缺氧等损伤条件下细胞膜通透性的改变是较好的方法。     

缺血预适应对体外循环中心肌细胞膜通透性变化的影响

目的 :观察缺血预适应 (IPC)对体外循环 (CPB)中缺血再灌注损伤所致心肌细胞膜通透性变化的影响。 方法 :建立猫体外循环模型并随机分为 4组 :对照组 (n=30 )仅做单纯并行 CPB转流 ,不阻断升主动脉 (ACC) ;缺血再灌注组 (IR组 ,n=30 )于 CPB开始 4 5 min后 ACC6 0 m in,开放主动脉使心脏恢复再灌注 ;单次 IPC组 (IPC组 ,n=30 )于 ACC前进行 1次 IPC(ACC5 min后开放 1 0 m in) ,余同 IR组 ;多次 IPC组 (IPCs组 ,n=30 )于 ACC前进行 3次 IPC,余同 IR组。应用细胞化学 -镧示踪法观察心肌细胞膜通透性的变化情况 ,同时测定心肌组织中 Ca2 +含量。 结果 :IR组在 ACC早期镧颗粒即出现于心肌细胞内 ,且随主动脉阻断时间的延长而逐渐增多并进入心肌细胞线粒体中 ;再灌注早期 ,胞质和线粒体内镧颗粒流入加快 ;同时心肌 Ca2 +含量在 ACC30 min开始逐渐升高 ,心脏再灌注期间 ,Ca2 +含量进一步增加 (P<0 .0 1 )。而 IPC组与 IR组相比无明显差别。IPCs组各时间点细胞内镧颗粒沉积明显少于 IR组 ,且线粒体中较晚出现镧颗粒 ;IPCs组心肌组织 Ca2 +含量在 ACC6 0 m in以及再灌注期间虽较对照组有所升高 (P<0 .0 5 ) ,但升高幅度明显低于 IR组。结论 :多次 IPC有助于减轻或延迟 CPB期间缺血再灌注所导致的心肌细胞膜通透     

衰竭心肌细胞膜及线粒体膜镧通透性改变的初步电镜观察

５例心功能处于不同状态心脏病人活检心肌标本硝酸镧示电镜观察结果显示：５例均有镧颗粒进入心肌细胞内，分布于肌原纤维及线粒体，并部分进入线粒体内，使线粒体显像，进入细胞内，线粒体内镧颗粒的多少与心功能状态一致，反映了衰竭心肌细胞膜及线粒体膜通透性增加，提示生物膜通透性损伤参与心肌细胞衰竭发生发展过程。     

奥昔非君对大鼠心肌细胞和细胞膜的影响

目的研究奥昔非君注射剂对心肌细胞的保护作用。方法：实验动物分对照组,肾上腺素（ＥＰi）致损伤组,奥昔非君（ＯＸＦ）给药组并区分为ＯＸＦ＋Ｅpi１、３、５h后分别处死动物,取出心肌以镧离子（Ｌa^3 ）作为示踪剂,检测心肌细胞膜的通透性,以测定心肌细胞无机磷（Ｐi）的含量,显示心肌细胞ＡＴＰase的代谢状况。结果：对照组心肌细胞膜通透性好,Ｌa^3 定位于细胞膜外侧。ＥＰi组心肌细胞膜损伤严重,Ｌa^3 透过细胞膜定位     

赖氨酸对喂饲克山病病区粮大白鼠心肌细胞膜通透性的影响

用硝酸镧作示踪物研究大白鼠心肌细胞膜的通透性。结果证明用克山病病区粮喂饲的大白鼠心肌细胞膜通透性明显升高,表明细胞膜受到损伤。而在病区粮中加入赖氨酸,则可明显降低心肌细胞膜的通透性,对细胞膜有保护作用。同时证明加赖氨酸后使心肌内硒含量进一步降低,表明赖氨酸对细胞膜的保护作用并不是通过增加硒含量而实现的。本文对蛋白质缺乏与克山病发病的关系进行了讨论。     

赖氨酸对喂饲克山病病区粮大白鼠心肌细胞通透性的影响

用硝酸镧作示踪物研究大白鼠心肌细胞膜的通透性，结果证明山克山病病区粮喂饲的大白鼠心肌细胞膜通透性明显升高，表明细胞膜受到损伤，而在病区粮中加入赖氨酸，则可明显降低心肌细胞膜的通透性，对细胞膜有保护作用，同时证明加剌氨酸后使心肌内硒含量进一步降低，表明赖氨酸对细胞膜的保护作用并不是通过增加硒含量而实现的，本文对蛋白质缺与克山病发病的关系进行了讨论。     

缺血再灌注兔心肌细胞质膜渗透性的改变及其钙通道阻滞剂对它的影响

应用镧离子示踪法于透射电镜下观察了缺血再灌注兔心肌细胞质膜渗透性的改变及其钙通道阻滞剂对它的影响。正常心肌中镧离子存在于细胞外间隙;缺血30min时超微结构改变呈可逆性,镧进入细胞并粘附于线粒体膜外面;再灌注后超微结构损伤呈不可逆性,镧进入线粒体内;再灌注前给以异搏停,再灌注损伤明显改善,线粒体内镧颗粒消失;缺血前给以异搏停,细胞膜和超微结构保存较好,细胞内镧基本消失。实验提示缺血再灌注心肌细胞中,细胞膜渗透性改变先于细胞的不可逆性损伤,而细胞膜渗透性改变又早于细胞器膜,无论是在缺血前还是于再灌注前给以导搏停,对质膜结构和功能均有一定的保护作用。     

家兔阿霉素心肌病时心肌细胞膜通透性改变——以镧盐为标记物的电镜观察

本实验利用阿霉素心肌病的家免模型,以镧盐为标记物电镜下观察了心肌细胞膜通透性改变。实验表明,尽管早期超微结构的损伤还不明显,但在受损心肌细胞内(特别是线粒体内)就可见到镧盐的沉积。我们认为阿霉素所致心肌细胞膜通透性改变,是心肌不可逆损伤的形态指征之一,阿霉素心肌病的本质为生物膜性损伤;镧盐示踪技术适应于监测超微结构损伤不明显时的细胞膜通透性变化。     

阿魏酸钠对大白鼠实验性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

阿魏酸钠800mg/kg 灌胃15d,然后进行结扎大白鼠左枝冠状动物45min.解除结扎恢复血流灌注60min,复制大自鼠心肌缺血再灌注损伤模型。观察该药对心肌缺血再灌注损伤的影响。结果:阿魏酸钠明显提高心肌组织超氧化物歧化酶活性,降低心肌丙二醛含量和减少心肌细胞的肌酸磷酸激酶释放,(Creatine phosphokinase,CPK),减轻再灌注导致心肌超微结构损伤。提示,阿魏酸钠对大白鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用。作用机理与抗氧化作用有关。     

依那普利对大鼠心肌细胞缺氧与缺氧/再给氧损伤的保护作用

目的：观察依那普利对培养的大鼠心肌细胞缺氧与缺氧／再给氧损伤时释放心肌酶的影响，研究依那普利对心肌细胞是否有直接的保护作用。方法：用培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧与缺氧／再给氧模型，检测细胞培养液中肌酸磷酸激酶(CPK)、碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)等心肌酶的活性变化，观察依那普利对上述指标的影响。结果：心肌细胞内CPK、ALP、AST及LDH的释放量随着缺氧与缺氧／再给氧时间的延长逐渐升高，依那普利能显著减少心肌细胞缺氧与缺氧／再给氧损伤期间心肌酶的释放量。结论：依那普利能减轻缺氧与缺氧／再给氧造成的心肌细胞损伤，依那普利对心肌细胞真有直接的保护作用。     

离体兔心心肌保护的实验方法

本实验应用循环式非搏动灌注装置连接的离体兔心模型。观察了心肌在低温下缺血期间和再灌注期间心肌酶的变化及应用血液灌注液对心肌保护的效果,实验分二组,A组应用临床使用的心脏停搏液,B组在上述停搏液中加入1:1血流,心脏均在20℃下缺血2小时后,应用37℃稀释的自体氧合血液再灌注60分钟。本实验用MultistatⅢ型全自动生化分析仪检测血浆中LDH,CPK和SGOT的活性,并且对心肌含水量,冠状血管阻力和灌脉血流量变化进行观察。结果发现,缺血前AB两组血浆中LDH、CPK和SGOT无明显差别(P>0.05)。随着缺血后再灌注时间延长。AB两组血浆中酶均不断上升,说明发生心肌再灌注损伤。但两组相比,B组心肌所释放的LDH,CPK和SGOT较A组低;冠状血管阻力降低,冠状血流量增大。说明血液灌注液比晶体液的保护效果明显。可能是血液在心肌缺血状态提供氧基质,保证细胞代谢和维持内环境的稳定。减轻心肌细胞的结构损伤和功能恢复。     

硝酸镧示踪犬晕厥心肌膜性结构的完整性

作者用硝酸镧作为超微结构探针，对犬晕厥心肌和梗塞心肌的细胞膜性结构通透性进行对比研究。结果表明：晕厥心肌可见线粒体肿胀和空泡形成，细胞内仅有少量镧颗粒沉着，细胞膜、线粒体膜、溶酶体膜等膜性结构完整。梗塞心肌可见大量镧颗粒通过破损的胞膜沉积于胞浆和线粒体内，说明晕厥心肌发生过程中膜性仍保持其完整性。     

黄芪注射液对心肌细胞缺氧缺糖／复氧复糖损伤保护作用的实？…

已有实验证实黄芪具有抗氧化作用，可保护心肌，减轻心肌损伤。为进一步探讨黄芪注射液肌细胞缺血“再灌注”损伤保护而进行本实验。本实验将体外培养在鼠乳鼠心肌细胞缺氧缺糖／复氧复糖损伤，造成再灌注损伤模型。实验分五组：正常对照组、缺氧缺糖组、缺氧缺糖／复氧复糖组、预防性保护组和治疗性保护组。观察细胞的搏动频率，培养其中的ＬＤＨ释放量，细胞内ＳＯＤ活性和细胞超微结构变化。结果表明：培养的大鼠乳鼠心肌细胞在缺     

离体兔心心肌保护的实验方法

本实验应用循环式非搏动灌注装置连接的离体兔心模型。了心肌在体温下缺血期间和再灌注期间心肌酶的变化及应用血液灌注液对心肌保护的效果。实验分二组，A组应用临床使用的心脏停搏液，B组在上述停搏液中加入1：1血流，心脏均在20度下缺血2小时后，应用37度释稀的自体氧合血液再灌注60分钟，本实验用Multistat III型全自动生化分析仪检测血浆中LDH，CPK和SGOT的活性，并且对心肌含水量，冠状血管阻力和冠脉血流量变化进行观察，结果发现，缺血前AB两组血浆中LDH，CPK和SGOT无明显差别（P＞0．05），随着缺血后再灌注时间延长，AB两组血浆中酶均不断上升，说明发生心肌再灌注损伤，但两组相比，B组心肌所释放的LDH，CPK和SGOT较A组低，冠状血管阻力降低，冠状血流量增大，说明血流灌注液比晶体液的保护效果明显，可能是血液在心肌缺血状态提供氧基质，保证细胞代谢和维持内环境的稳定，减轻心肌细胞的结构损伤和功能恢复。     

缺氧对心肌细胞内游离钙浓度和细胞膜Ca2+-ATPase表达的影响及薯蓣皂甙的干预作用

目的探讨缺氧对心肌细胞内游离钙离子浓度和细胞质膜Ca2 -ATPase表达的影响及薯蓣皂甙的干预作用.方法原代培养大鼠心肌细胞,制备心肌细胞缺氧模型,随机分为正常对照组、缺氧损伤组、左旋氨氯地平组、薯蓣皂甙组.分别测定各组心肌细胞内游离钙离子的浓度(FURA2/AM荧光探针法)和细胞质膜上Ca2 -ATPase 表达水平(RT-PCR法).结果缺氧损伤组较对照组心肌细胞内游离钙离子浓度显著上升(P<0.01),细胞质膜上的钙泵的表达明显减弱(P<0.05),经薯蓣皂甙及左旋氨氯地平干预后细胞内游离钙浓度均降低(P均<0.01),细胞膜上钙泵的表达均明显增强(P均<0.01).结论细胞内钙超负荷是缺氧损伤心肌细胞的主要机制之一,薯蓣皂甙通过增加细胞膜上钙泵的表达有效减轻心肌细胞内的钙超载,对缺氧心肌具有保护作用.     

茱萸颗粒对大鼠心肌细胞抗柯萨奇病毒感染的实验研究

目的　观察茱萸颗粒对大鼠心肌细胞抗CVB3病毒感染的作用。方法　用CVB3病毒感染大鼠心肌细胞 ,观察正常心肌对照组、病毒感染组、茱萸颗粒给药组心肌细胞病理变化和心肌酶谱变化。结果　茱萸颗粒可明显降低CVB3病毒感染后心肌细胞的病理改变和心肌细胞酶的释放 ,茱萸颗粒浓度 4 .0mg/mL的给药组与病毒对照组有非常显著差别。结论　茱萸颗粒具有较强的保护心肌细胞和助心肌细胞抗CVB3病毒感染的作用      

细小病毒B19感染性心肌炎的非缺血性可逆性心肌损伤中心肌肌钙蛋白I的释放

可逆和不可逆性心肌损伤处的心肌细胞均可释放肌钙蛋白I。损伤所致的心肌细胞膜渗透性改变足以使无结构损伤心肌细胞的胞浆池释放心肌肌钙蛋白。本文     

用硝酸镧检测心肌顿抑兔微血管的超微结构改变及呋喃丙吡啶的保护作用

观察心肌顿抑后微血管可逆性损伤的超微结构改变，以及钙拮抗剂呋喃丙吡啶对微血管损伤是否具有保护作用．方法：建立兔心肌顿抑模型，采用镧醛灌注固定法制备电镜样品．缺血再灌注前用呋喃丙吡啶预防性给药．结果：闭塞15min再灌注15min时，血管扩张，间隙水肿，血管内外附着大量的镧颗粒．再灌注30min时损伤进一步加重，但血管膜结构完整，直至再灌注120min血管通透性损伤基本恢复正常．预防性给予呋喃丙吡啶后，闭塞15min再灌注15min，血管内皮结构完整，仅在血管腔内有镧颗粒附着在血管壁上，血管外间隙水肿减轻．结论：心肌顿抑时微血管通透性增加，血管内膜结构完整，随着再灌注时间延长，血管通透性恢复正常．缺血再灌注前预先应用呋喃丙吡啶防治可以限制微血管顿抑．