缬氨酸对必特螺旋霉素生物合成的影响

在必特螺旋霉素基因工程链霉菌WSJ-1-195发酵生产必特螺旋霉素的摇瓶实验中,发酵36 h时向合成培养基中添加0.5 g/L的缬氨酸对必特螺旋霉素效价和组分的影响最为显著.实验结果表明:添加缬氨酸后,菌体在发酵48～60 h糖耗加快,达到1 g/(L·h),发酵液中丙酸和丁酸浓度先增后降,而发酵液中丙酮酸在胞内积累,丙酮酸羧化酶活性在48 h和60 h时分别增加20%和95%.由于糖耗加快,更多碳流可以通过甲基丙二酰CoA转羧基酶途径(MCT途径)将缬氨酸分解生成的丙酰CoA和丁酰CoA转化为内酯环合成所需要的直接三碳前体,最终效价比对照高出45.3%.添加缬氨酸后,由于大环合成增多,侧链前体的供应无法满足内酯环增加的需求,导致酰化组分含量总体下降,其中总异戊酰组分降低23%,乙酰螺旋霉素Ⅲ降低30.8%,丙酰螺旋霉素Ⅱ降低33%,丙酰螺旋霉素Ⅲ降低48.8%.同时缬氨酸代谢生成的丁酸也有可能会影响异戊酰基转移酶的活性.     

芳酰基类蛋白酪氨酸激酶抑制剂的合成及其活性研究

目的：以Ex-Rad为先导化合物,设计并合成具有蛋白酪氨酸激酶（PTK）抑制活性的芳酰基类化合物。方法分别以1-[（4-氟苯基）氨基甲酰基]环丙烷羧酸、1-苯基咪唑烷-2-酮为原料合成中间体3a~3d,将中间体与羧酸通过酰氯法合成目标化合物T1~T7。用酶联免疫吸附法（ELISA）测定PTK抑制活性,计算抑制率,筛选出具有抑制PTK活性的化合物。结果合成芳酰基类新化合物7个,结构经1H NMR确证。活性初筛发现化合物T2、T6的抑制活性强于先导化合物。结论合成方法简单,原料价廉易得。ELISA法测定结果表明T2、T6的PTK的抑制活性较强。     

铵离子对必特螺旋霉素生物合成的调控

研究了在复合培养基中发酵生产必特螺旋霉素时，铵离子浓度对发酵组分的影响。从发酵24h开始，每12h补加3．2mmol／L的铵离子，考察其对必特螺旋霉素中异戊酰螺旋霉素组分和异戊酰基螺旋霉素Ⅲ／Ⅱ的调节作用。实验结果表明：在降低基础培养基铵离子浓度的基础上，补加铵离子可以明显改善必特螺旋霉素组分，生物效价达2200u／mL。通过测定发酵过程中还原糖、相关有机酸、琥珀酸脱氢酶（Succinate dehydrogenase，SDH）活性、缬氨酸脱氢酶（Valine dehydrogenase，VDH）活性等中间代谢数据，对铵离子的作用原理进行了讨论。     

正丙醇、铜离子、烟酰胺对红霉素合成的作用

在摇瓶培养过程中，发酵初期加入正丙醇可使红霉素的效价提高49．31％，正丙醇提高了丙酸激酶的比活力，表现出对该酶诱导作用，而对丙酰CoA合成酶比活力无影响。加入铜离子和烟酰胺可使红霉素效价分别提高24％和179／5。用HPLC测定发酵液中有机酸含量，分析测定结果认为发酵过程可分为3个阶段：积累期、转折期和生产期。     

异亮氨酸对他克莫司发酵的影响

研究了前体氨基酸对发酵合成他克莫司的影响,结果显示:在发酵初期添加2.5 g/L的异亮氨酸(Ile),他克莫司产量提高约59%。有机酸分析和丙酰CoA合成酶与丙酰激酶活性测定的结果显示:异亮氨酸的加入显著增加了丙酸(Pro)的浓度,在产物合成期丙酰CoA合成酶的最大酶活提高到600 U/g。由此表明该前体氨基酸促进他克莫司发酵合成的原因可能是其促进了丙酰CoA等前体物质的合成,从而增进了内酯环的形成。     

1，4-二（3-溴丙酰基）哌嗪的合成及结构确证

1，4-二(3-溴丙酰基)哌嗪是一种烷化剂类抗血液病药，据文献报道，它对红细胞增多症、血小板增多症和慢性粒细胞白血病有明显治疗作用，但毒性亦较大。此实验的目的是在合成1，4-二(3-溴丙酰基)哌嗪的基础上，继续合成其衍生物，并进行抗癌活性对比实验，以期获得低毒高效的药用化合物。     

人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶2研究进展

酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT)是细胞内惟一合成胆固醇酯的酶,在细胞和生物体胆固醇代谢平衡中起着重要作用。在哺乳动物细胞中存在两种基因编码的ACAT(ACAT1和ACAT2)。ACAT2选择性地在肝脏及小肠细胞中表达,参与胆固醇的吸收和载脂蛋白的装配。本文主要介绍ACAT2的生理功能和病理作用,概述ACAT2的研究进展。     

Co2+对红霉素生物合成过程的影响

研究了红霉素生物合成过程中糖代谢相关的关键酶:己糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、磷酸果糖激酶和异柠檬酸脱氢酶,以及合成红霉内酯环前体甲基丙二酰CoA相关的酶:甲基丙二酰CoA异构酶和甲基丙二酰CoA羧基转移酶的时序变化,并测定了过程中有机酸的含量变化。实验表明:Co2 能大幅提高红霉素效价。这可能与Co2 能明显提高甲基丙二酰CoA异构酶与甲基丙二酰CoA羧基转移酶的比活,并在一定程度上促进糖代谢有关。     

必特螺旋霉素发酵组分中亮氨酸的影响研究

目的：研究分析必特螺旋霉素发酵组分中亮氨酸的影响。方法在合成培养基中加入亮氨酸,观察其对于必特螺旋霉素发酵组分的影响。结果加入亮氨酸以后,对于初级代谢所产生的影响不大,可提高异戊酞基螺旋霉素组分以及总异戊酰基螺旋含量,效价保持不变。讨论亮氨酸可使必特螺旋霉素主要组分作用机理得到提高。     

双酰基吡咯类化合物的合成及抗炎镇痛作用的研究

设计并合成了１５个未见文献报道的双酰基吡咯类化合物，药理试验表明，所合成的大部分化合物具有明显的抗炎镇痛活性．     

光化学诱导脑缺血损害区NO和Ca^2＋的变化及绞股蓝总皂甙的保护作用

目的　探讨NO、Ca     

成纤维细胞超微结构的研究

本文用实验组织学的方法系统地观察了成纤维细胞的六种基本细胞形态的超微结构。发现成胶原细胞有前、中、后期三个功能阶段,中期细胞又有合成期和分泌期之分;破纤维细胞可区分出吞噬型和溶酶体型两种亚型;纤维细胞亦存在静止型和衰老型两种亚型。成胶原细胞和破纤维细胞分别是胶原合成和胶原降解的主要细胞。本文还证实了成纤维细胞来源于毛细血管旁未分化间充质细胞,少分化成纤维细胞是其他形态的成纤维细胞的始祖。成纤维细胞各种成熟的细胞形态可以互相转化,在功能上互相协调。本文提出了“成纤维细胞系统”的概念,该系统包括上述成纤维细胞的六种基本细胞形态,系统的主要机能是合成胶原蛋白和其他细胞间质,降解胶原和使结缔组织(包括疤痕组织)收缩。     

小柴胡冲剂治疗小儿病毒性心肌炎临床观察

目的:探讨小柴胡冲剂在治疗小儿病毒性心肌炎中的价值。方法:将68例患儿随机分为治疗组和对照组。两组均卧床休息,每日静滴维生素C,同时治疗组加用小柴胡冲剂口服,对照组加用ATP、CoA静脉滴注,疗程均为21d。结果:治疗组患儿EKG、心肌酶谱及症状较对照组有明显改善(P<0.05)。结论:小柴胡冲剂对小儿病毒性心肌炎有明显的治疗作用。     

毛冬青甲素调节花生四烯酸代谢的机理探讨

毛冬青甲素(ilexonin A)是从冬青科植物毛冬青中分离出的一种有效成分,分子式为C_(34)H_(48)O_6Na,临床上初步试用于治疗脑血栓、心肌梗塞等心血管疾病。药理实验表明,毛冬青甲素在体外有抗血栓形成,抑制血小板粘附、聚集和释放功能及抑制TXA_2样物质的生成。最近研究结果表明,其抑制血小     

干扰素治疗丙型肝炎疗效预测因素的研究

目的：探讨能预测干扰素疗效的因素。方法：分别应用引物特异PCR法、信号引物能量转移技术、薄板层析技术、放免法及APAAP免疫桥联酶标法检测20例慢性丙型肝炎HCV基因型及干扰素治疗前后血清HCV－RNA水平，β2微球蛋白，2′－5′寡腺苷酸合成酶活性及外周血淋巴细胞亚群。结果：（1）疗前HCV－RNA量低者及治疗和随访过程中HCV－RNA量持续降低者对干扰素治疗反应好。（2）HCV－Ⅲ型患者对干扰素安全应答率高于HCV－Ⅱ型，P＜0.05。（3）疗前2′－5′寡腺苷酸合成酶活性低者对IFN治疗反应好。（4）治疗前后血清β2微球蛋白水平无显著变化，疗前不同应答组β2微球蛋白水平也无显著差异。（5）治疗后外周血CD3^ ,CD4^ 及CD4^ /CD8^ 升高，完全应答组疗前CD3^ ,CD4^ 及CD4^ /CD8^ 较部分应答组高，但无统计学差异。结论：IFN治疗前HCV－RNA水平、HCV基因型、2′－5′寡腺苷酸全盛酶活性测定可作为预测IFN疗效的指标。治疗期间及随访过程中血清HCV－RNA水平变化对IFN疗效评价有重要意义。疗前β2微球蛋白水平及淋巴细胞亚群检测不能作为预测IFN疗效的指标。     

水白菜与水菜花的核型分析

利用植物染色体常规压片法，对水白菜及水菜花的核型进行了分析，结果表明：水白菜的核型为２ｎ＝４ｘ＝４４＝２２ｍ＋１４ｓｍ＋８ｓｔ，水菜花的核型为２ｎ＝２ｘ＝２２＝２ｍ＋１４ｓｍ＋６ｓｔ。核型资料表明水白菜很可能是经由水菜花演化而来的四倍体，二者具有密切的亲缘关系，支持水莱花可代水白菜入药的观点。     

CLINICAL OBSERVATION OF 74 REVASCULARIZED OSTEOMYOCUTANEOUS FLAP GRAFTS TO RECONSTRUCT THE MANDIBULAR DEFECTS

Vascularized osteomyocutaneous transplantation using the technique of microvascular anastomosis has shown many advantages. For the purpose of immediate reconstruction of composite defects of the mandible, 74 osteomyocutaneous flaps have been used in the last six years. They included 43 iliac osteomyocutaneous flaps pedicled to the deep circumflex iliac artery, 16 latissimus dorsi osteomyocutaneous flaps pedicled to the thoracodorsal artery and 15 pectoralis major asteomyocutaneous flaps pedicled to the acromiothoracic artery. The survival rate of the former was 90.7% (39/43), and the latter two 71% (22/31). The factors influencing the survivalrate of these osteomyocutaneous flaps have been analyzed; the complications of the recipient and donor sites have been presented; the long term results have been discussed. The authors conclude: mandibular reconstruction by using osteomyocutaneous flap grafts has the advantages of resistance to infection, fast bone healing and survival in a poorly vascularized recipient bed. The iliac osteomyocutaneous flap is better than the other two in survival ability.     

慢加急性肝衰竭前期临床常规预警指标研究

目的分析慢加急性肝衰竭前期的临床特征,发掘预警肝衰竭发生的指标,建立基于临床指标的早期肝衰竭预警模型。方法回顾性分析我科2002年5月至2008年4月慢加急性肝衰竭前期病例50例、慢性乙型肝炎重度病例62例,比较其发病诱因、发病特点以及临床常规辅助检查指标变化特征间差异,并通过Logistic回归建立判断肝衰竭发生风险的模型。结果两组病例间性别、发病诱因、黄疸出现时间、有无肝硬化、HBeAg阳性率无显著性差异,CHB重度组患者发病年龄分布范围较大(12～72岁),Pre-ACLF组患者发病年龄较集中(29～69岁),两者有显著差异。首次辅助检查指标中,两组凝血检验指标与TBil存在显著差异。指标的变化速率中,Pre-ACLF组PT、INR、TBil最大增加速率显著高于CHB重度组(P=6.386×10-11、1.905×10-11、0.006 5)。ACLF发生概率的预警模型为P=1/[1+e^-(-2.414+7.687×PT延长速率)],PT最大延长速率每天增加1 s,肝衰竭的风险增加2 179.045倍。结论与CHB重度病例比较,Pre-ACLF病例病变相对较剧烈,主要表现为凝血功能的大幅下降与黄疸的大幅增加。其中PT最大延长速率是预测肝衰竭发生最强的风险因素。     

葛根素调控骨代谢的体外实验研究

目的：探讨中药葛根对骨形成和骨吸收的调控作用。方法：鼠颅盖骨机械法体外分离培养获得成骨细胞（osteoblast，OB）；新生兔长干骨机械分离法获得破骨细胞（osteoclast，OC）。实验组培养液为10％（体积分数）胎牛血清 αMEM培养液 不同（质量）浓度的葛根素，对照组不加葛根素。分别用四甲基偶氮唑盐（MTT）和碱性磷酸酶（ALP）法检测OB的增殖和分化状态；抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察OC形态变化，图像分析体外骨吸收陷窝面积，原子分光光度计法测定OC培养液上清液中Ca^2 含量。结果：中药葛根素对大鼠OB的增殖无明显的刺激作用，但能够促进OB合成分泌ALP。同时，造成体外培养的OC空泡性变，骨吸收陷窝面积减少和培养液上清液中Ca^2 含量的下降。结论：葛根通过抑制骨吸收，刺激骨形成来调控骨代谢，其中抑制骨吸收的效果较强。     

等容血液稀释和亚硒酸钠对家兔急性心肌梗塞早期左室功能的影响

观察了右旋糖酐40等容血液稀释和亚硒酸钠对家兔急性心肌梗塞早期左室收缩和舒张功能的影响。结果如下:与对照组相比,等容血液稀释和亚硒酸钠以及两者合用,使LVSP和+dp/dt-max明显回升(P<0.05)、T值和—dp/dt-max无明显变化(P>0.05);单用亚硒酸钠,LVSP和+dp/dt-max的回升随时间延长稍有下降。结果提示:①右旋糖酐40等容血液稀释和亚硒酸钠可改善急性心肌梗塞早期左室收缩功能,前者的作用持续时间较长;②两者对舒张功能作用不明显;③两者对左室功能无协同作用。