工频磁场对人晶状体上皮细胞DNA双链断裂的影响

目的:采用γH2AX免疫荧光法观察工频磁场对人晶状体上皮细胞DNA双链断裂的影响.方法:将人晶状体上皮细胞暴露于0.4 mT、50 Hz工频磁场2 h、6 h、12 h、24 h、48 h,以0.1 μmol/L的DNA损伤剂4-硝基喹啉-1-氧化物作用1 h作为阳性对照,结束处理后进行γH2AX免疫荧光检测.计算细胞平均焦点数.将细胞平均焦点数及焦点阳性细胞率作为评价细胞DNA双链断裂程度的指标.结果:工频磁场暴露24 h的平均焦点数、γH2AX焦点阳性细胞率分别为(2.93±0.43)、(27.88±2.59)%,与假辐照组(1.77±0.37)、(19.38±2.70)%相比,差异具有显著性(P<0.05);工频磁场暴露48 h的平均焦点数、γH2AX焦点阳性细胞率分别为(3.14±0.35)、(31.00±3.44)%,与假辐照组相比,差异具有显著性(P<0.01);而工频磁场暴露2 h分别为(2.11±0.61)、(22.44±5.09)%,6 h分别为(2.18±0.47)、(22.59±3.08)%和12 h分别为(2.35±0.43)、(23.35±2.93)%,与假辐照组比较,差异没有显著性(P>0.05).结论:体外实验表明,0.4 mT工频磁场长时间辐照可以使人晶状体上皮细胞DNA双链断裂增加.     

中频交变磁场抑制人舌鳞癌细胞的增生

目的 探讨不同强度的交变磁场辐照对人舌鳞癌细胞(TCa8113)增生的影响.方法 不同强度的交变磁场(5mT、8mT、11mT)对人舌鳞癌细胞进行连续3天的辐照刺激,每天1h,通过MTT法和流式细胞术检测细胞的增生、凋亡和细胞周期的变化.对照组(假实验组)采用相同的实验条件和作用时间但不加磁场辐照.结果 MTT法检测实验组与对照组辐照后24h、48h、72h的OD值,通过SPSS软件分析显示实验组比对照组的OD值显著降低(P<0.01).流式细胞术检测电磁场组与对照组细胞凋亡率无差异.但细胞周期有显著改变(0.5mT).结论 不同强度的交变磁场辐照对人舌鳞癌细胞增生有明显抑制作用,并可阻滞细胞周期,但对舌鳞癌细胞的凋亡未发现明显影响.     

睾酮对体外培养人早孕胚胎绒毛分泌hCG和VEGF的影响

目的 通过对各组绒毛给予不同浓度的睾酮,检测用药低浓度组与用药高浓度组绒毛HCG和VEGF的分泌情况,探讨睾酮对体外培养人早孕胚胎绒毛分泌hCG和VEGF的影响,进一步探讨临床上高雄激素血症对妊娠的影响.方法 取人早孕绒毛,行体外组织块培养法,培养绒毛.分为对照组、加低浓度睾酮组(睾酮浓度0.5 ng/ml,0.7 ng/ml,1.0 ng/ml),加高浓度睾酮组(睾酮浓度1.5 ng/ml,2.0 ng/ml,2.5 ng/ml),ELISA法检测绒毛培养液内hCG,VEGF浓度.比较不同浓度睾酮培养液的绒毛所产生hCG和VEGF与对照组的差值.结果 HCG组检测结果:每个绒毛的组间比较,低浓度组与高浓度组hCG浓度差异有统计学意义(P＜0.05);VEGF组检测结果:每个绒毛的组间比较,低浓度组与高浓度组hCG浓度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 睾酮可通过对绒毛分泌hCG能力的影响进而影响到绒毛功能,进一步导致各种妊娠疾病的产生.     

血清人绒毛膜促性腺激素联合孕酮检测对异位妊娠的诊断价值

目的探究血清人绒毛膜促性腺激素(HCG)联合孕酮检测对异位妊娠的诊断价值。方法选取2014年7月至2016年11月驻马店市第四人民医院43例异位妊娠患者作为研究组,另选取同期检查健康的正常妊娠孕妇43例作为对照组。抽取所有受检者空腹静脉血4 ml,采用电化学发光法测定两组孕妇血清HCG及孕酮水平,并分析两指标单独诊断及联合诊断异位妊娠的敏感度、特异度和准确度。结果研究组血清HCG和孕酮水平均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);血清HCG和孕酮的联合诊断敏感度(90.70%)和准确度(93.02%)均高于血清HCG(60.47%、76.74%)、血清孕酮(58.14%、75.58%),差异有统计学意义(P均<0.05);血清HCG和孕酮联合诊断的特异度(95.35%)与血清HCG(93.02%)、血清孕酮(93.02%)比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论血清HCG和孕酮联合检测可有效提高异位妊娠的诊断敏感度及准确度,减少误诊及漏诊,为临床干预方案的制定提供参考依据,具有推广价值。     

脂筏在工频磁场诱导受体聚簇效应中的作用及机制初探

目的:研究50 Hz工频磁场诱导细胞膜表面表皮生长因子受体(EGFR)聚簇与脂筏(lipid rafts)结构以及酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASM)之间的关系,探索工频磁场诱导细胞膜受体聚簇及其可能的相关机制。方法:将人羊膜上皮细胞(FL)暴露于50 Hz、0.4 mT工频磁场15 min,设立假辐照组和EGF阳性对照组,同时各组增加制霉菌素(nystatin)预处理组,细胞经处理后采用间接免疫荧光法分别用相应抗体标记EGFR和ASM,用FITC标记的霍乱毒素B亚基标记脂筏结构。制片后通过激光共聚焦显微镜进行观察分析。结果:阳性对照组和50 Hz磁场处理组均能观察到EGFR的聚簇现象;制霉菌素预处理1 h后,细胞膜上脂筏结构被破坏,阳性对照组和磁场处理组中受体聚簇现象基本消失。在ASM转位分析中,阳性对照组和磁场处理组Cy3标记的ASM和FITC标记的脂筏结构产生共定位现象,并且在胞膜表面形成特定的富集区域,而在假辐照组中基本处于散在状态。结论:工频磁场诱导FL细胞膜表面EGFR发生聚簇与脂筏结构密切相关,ASM有可能参与了工频磁场诱导的受体聚簇及/或信号转导过程。     

工频磁场对人乳腺癌细胞基因表达的影响

目的:了解工频磁场对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞基因表达谱的影响,筛选工频磁场的可能反应基因,判断工频磁场对细胞功能的影响。方法:将体外传代培养的MCF-7细胞随机分为2组,分别接受0.4 mT的50 Hz磁场连续辐照和假辐照24 h。辐照结束后,立即提取细胞总RNA,用Affymetrix公司的人类基因组芯片U133A进行基因组转录水平分析,芯片实验数据采用MAS5.0软件和DMT 3.0软件进行分析。采用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证基因芯片分析筛选到的候选差异表达基因。结果:MCF-7细胞受50 Hz磁场辐照后,有30个100%一致变化的候选差异基因。6次重复定量RT-PCR实验结果表明,MCF-7细胞受50 Hz磁场辐照后,SCNN1A基因和METTL3基因被显著性上调(P<0.05),GPR137B基因被显著性下调(P<0.05);而其它基因则未发生显著性改变(P>0.05)。结论:本研究检测到50 Hz工频磁场对MCF-7细胞基因表达的微弱变化,并确定了MCF-7细胞3个50 Hz工频磁场反应基因SCNN1A、GPR137B和METTL3。     

工频磁场慢性暴露对大鼠神经行为的影响

目的：观察慢性工频磁场（extremely low frequency magnetic field, ELF-MF）暴露对大鼠神经行为的影响。方法：应用50 Hz正弦交变磁场,2 mT的暴露强度在每日一定时间对大鼠进行多次重复暴露。大鼠被随机分为对照组（不暴露MF）、MF1h组（每日MF暴露1 h）及MF4h组（每日MF连续暴露4 h）,通过大鼠旷场实验、高架十字迷宫实验、明暗穿梭箱实验观察大鼠的行为变化情况。结果：与对照组相比,MF4h组大鼠在旷场实验中趋触性增高、理毛行为增多,在高架十字迷宫中开放臂入臂次数和停留时间均明显减少;MF1h组与对照组相比差异无统计学意义。在明暗箱实验中,暴露组与对照组的差异无统计学意义。结论：极低频磁场暴露对大鼠有产生焦虑的作用,这种影响取决于每日暴露的时间。     

静磁场对成骨细胞增殖活性和细胞表面超微结构的影响

目的观察不同强度和作用时间的静磁场对体外培养成骨细胞的增殖活性及其表面超微结构的影响,探索静磁场加载对成骨细胞增殖等功能活性影响的机制。方法将体外培养成骨细胞分别于静磁场加载装置0、8、50、160 mT磁场强度下给予24、48、72 h的静磁场加载。应用MTT法检测成骨细胞的增殖活性;应用倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞形态及其表面超微结构的变化。结果与不给予静磁场加载对照组比较,培养成骨细胞分别于8、50、160 mT静磁场加载24、48、72 h后,其增殖活性出现不同程度的增加;其细胞形态、数量及分布上无差异;而随加载时间延长,细胞表面变得凹凸不平,微绒毛增多增粗增大,可见融合成囊泡及大囊泡,且8 mT和50 mT静磁场的作用明显。结论 8、50、160 mT静磁场随加载时间延长,体外培养成骨细胞增殖活性出现不同程度增加,细胞表面超微结构出现不同程度改建。     

难免流产孕妇血清中血管内皮生长因子水平

目的:探讨难免流产孕妇血清中血管内皮生长因子(VEGF)水平与难免流产的关系。方法:34例明确诊断为难免流产而行刮宫术的患者为难免流产组,28例因非意愿妊娠而行刮宫术的患者为对照组,刮宫术前采集静脉血,检测患者血清中孕酮、人绒毛促性腺激素(HCG)及VEGF水平。结果:难免流产组血清中孕酮和HCG水平明显低于对照组(P<0.05),难免流产组VEGF(108.6±8.9)ng/L,明显高于对照组(P<0.05)。结论:孕妇体内高水平的VEGF可能是难免流产发生的原因之一。     

内磁场在磁靶向治疗胆道恶性肿瘤中作用的实验研究

目的 评价内磁场在磁靶向治疗胆道恶性肿瘤中的作用.方法 建立异位胆管癌移植瘤裸鼠模型32只,随机分成4组,每组8只.A组(实验组):采用自制的胆道磁性支架丝,在肿瘤内部建立30mT的磁场,尾静脉注射纳米氟尿嘧啶(5-FU)磁小体;B组(空白对照组):肿瘤模型自然生长,无磁场和药物应用;C组(单纯内磁场组):建立与A组一致的肿瘤局部内磁场,无药物治疗;D组(外磁场组):建立500mT的肿瘤局部外磁场,药物干预同A组.在首次治疗当天和治疗后第4、7、11、15、19天,分别测各组肿瘤体积,做重复测量的多因素方差分析.观察期结束后处死裸鼠,观察肿瘤组织病理变化.结果 与空白对照组比较,单纯内磁场组、外磁场组和实验组的肿瘤抑制率依次为18.039%、26.078%、40.12%,实验组肿瘤生长受到明显抑制,与3个对照组的肿瘤体积均有显著性差异,该组肿瘤组织镜下显示大量细胞凋亡,可见大量纳米磁小体颗粒沉积在凋亡的肿瘤细胞内.结论 基于内磁场的磁靶向治疗可抑制肿瘤生长,其效果优于传统的依靠外磁场的靶向治疗方法.     

促排卵治疗对黄体中期子宫内膜雌、孕激素受体及其mRNA表达的影响

目的 :了解促排卵治疗对黄体中期子宫内膜雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)、孕激素受体 (progesteronereceptor,PR)及其mRNA表达的影响。方法 :应用光学显微镜检测着床窗口子宫内膜、采用免疫组化及原位杂交方法检测正常及多囊卵巢综合征 (polycysticovariansyndrome ,PCOS)妇女促排卵治疗后子宫内膜黄体中期ER、PR及其mRNA的表达 ,放射免疫法测定同期血中雌激素 (estradiol,E2 )及孕激素 (progesterone,P)水平。 结果 :正常妇女黄体中期子宫内膜组织形态 2 2例中有 2 0例为分泌中期改变 ,2例为分泌早期改变。ER、PR弱表达 ,ERmR NA及PRmRNA的表达也较弱 ,而PCOS妇女治疗后黄体中期氯米芬 9/人绒毛膜促性腺激素组及氯米芬 /绝经期促性腺激素 /人绒毛膜促性腺激素组各 15例分别有 8/ 15及 7/ 15光镜下为分泌中期改变 ,其它为分泌早期改变。ER、PR的表达增强 ,其基因的表达也明显增强 ,血清P的水平相对较低。促性腺激素释放激素激动剂 /绝经期促性腺激素 /人绒毛膜促性腺激素组共 10例 ,E2 、P及P/E2 接近对照组 ,上述标志物的表达与对照组相似。但 3组PCOS分泌中期子宫内膜均有不同程度的间质增生、致密 ,腺体与间质发育不同步 ,且间质致密处ER、PR及其mR NA表达均下降。结论 :氯米芬 /人绒毛膜促性腺     

电磁噪声阻断1800 MHz手机辐射所致的晶状体上皮细胞内活性氧增加及DNA损伤

目的:探讨1800 MHz手机辐射对人晶状体上皮细胞内活性氧(ROS)和DNA损伤的影响,以及叠加电磁噪声后对该效应的阻断作用。方法:体外培养的人晶状体上皮细胞受比吸收率(specific absorption rate,SAR)为4 W/kg的1800 MHz手机频段间断辐射24 h或与2μT电磁噪声联合作用24 h后,利用荧光探针检测ROS水平及用彗星试验检测DNA损伤水平。结果:4 W/kg手机辐射可明显诱发人晶状体上皮细胞内ROS及DNA损伤(P<0.001);与2μT电磁噪声联合暴露后可明显阻断该效应,与手机单独辐射相比,差异有显著性(P<0.001),但与假辐照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:电磁噪声可阻断1800 MHz手机辐射所诱发的晶状体上皮细胞内ROS及DNA损伤。     

Effects of extremely low frequency magnetic field on anxiety level and spatial memory of adult rats

Background  As the widespread use of electric devices in modern life, human are exposed to extremely low frequency magnetic fields (ELF MF) much more frequently than ever. Over the past decades, a substantial number of epidemiological and experimental studies have demonstrated that ELF MF (50 Hz) exposure is associated with increased risk of various health effects. The present study examined the effects of chronic exposure to ELF MF on anxiety level and spatial memory of adult rats.

Methods  The 50-Hz ELF MF was used during the whole experimental procedures and the value of magnetic field (MF) was set to 2 mT. Adult rats were divided randomly to control, MF 1 hour and MF 4 hours group. Anxiety-related behaviors were examined in the open field test and the elevated plus maze; changes in spatial learning and memory were determined in Morris water maze after 4 weeks of daily exposure.

Results  Rats in MF 4 hours group had increased anxiety-like behaviors with unaltered locomotor activity. In the Morris water maze test, rats had reduced latency to find the hidden platform and improved long-term memory of former location of platform without changes in short-term memory and locomotor activity.

Conclusion  Chronic ELF MF exposure has anxiogenic effect on rats, and the promoting effects on spatial learning and long-term retention of spatial memory.

     

补肾安胎方对人绒毛膜外滋养层细胞HTR-8分泌功能及HLA-G基因表达的调控作用

目的?观察补肾安胎方对人绒毛膜外滋养层细胞HTR-8分泌功能及人类白细胞抗原G（HLA-G）基因表达的调控,探讨其免疫保胎机制。方法?雌性SD大鼠灌胃制备空白血清和补肾安胎方含药血清。将人绒毛膜外滋养层细胞HTR-8细胞分为4组:空白对照组、低剂量组（5%中药血清组）、中剂量组（10%中药血清组）、高剂量组（20%中药血清组）,培养24?h后,ELISA法测定培养上清液中雌二醇（E₂）、孕激素(P）、人绒毛膜促性腺激素(HCG)及辅助性T细胞（Th）调控因子白介素-4(IL-4) 和干扰素 -γ（IFN-γ）水平,RT-PCR法测定HLA-G mRNA表达。结果?与空白对照组相比,低剂量组在促进E₂、P分泌方面无统计学意义（P>0.05）,中、高剂量组可有效提高细胞上清E₂、P含量,且高剂量组高于中剂量组（P<0.05）。3组含药血清均能明显提高滋养细胞HCG的分泌水平（P<0.05）,3组间差异无显著性意义（P>0.05）。低剂量组即可促进Th2型细胞因子IL-4分泌,但差异无统计学意义（P>0.05）,中、高剂量组可有效促进Th2型细胞因子IL-4含量,组间差异无统计学意义（P>0.05）。3组含药血清均能显著抑制Th1型细胞因子IFN-γ（P<0.05）,中、高剂量组均可增加HLA-G mRMA的表达,有显著差异（P<0.05）,且高剂量组高于中剂量组（P<0.05）。结论?补肾安胎方含药血清可以改善滋养细胞分泌功能,使母胎免疫向Th2型转化,并可能部分通过上调HLA-G基因表达实现。      

恒磁场对雷帕霉素作用下大鼠内皮祖细胞增殖和迁移的影响

目的 观察恒磁场对雷帕霉素作用下大鼠骨髓来源的内皮祖细胞(EPC)增殖和迁移能力的影响.方法 密度梯度离心法获得SD雄性大鼠的骨髓EPC,无菌条件下培养6 d.实验分为5组:空白对照组、雷帕霉素(1 ng/ml)组及雷帕霉素+不同强度的恒磁场(0.1、0.5、1.0 mT)组.各组皆于24 h后收集标本,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖能力,改良的Boyden小室法测定EPC的迁移能力.结果 雷帕霉素组EPC增殖显著低于空白对照组(0.252±0.006 vs 0.328±0.025,P<0.05),EPC迁移能力显著降低(31±3 vs 48±5,P<0.05);0.5 mT和1.0 mT恒磁场组EPC增殖显著强于雷帕霉素组(0.278±0.008、0.280±0.010,P<0.05),EPC迁移能力显著高于雷帕雷素组(37±3、38±4,P<0.05).结论 0.5 mT和1.0 mT恒磁场有拮抗雷帕霉素的作用,可促进EPC的增殖和迁移.     

50Hz磁场照射对小鼠嗅觉辨别能力的影响

目的:探讨长期磁场暴露对成年小鼠嗅觉辨别功能的影响.方法:采用习惯化-去习惯化模型,连续20 d每天1 h的1 mT、50 Hz磁场照射小鼠,观察对小鼠嗅觉辨别功能的影响.采用旷场行为检测小鼠的活动量和探究行为.结果:连续20 d每天1 h的1 mT、50 Hz磁场照射后,小鼠的运动能力、探究能力及嗅觉辨别功能没有显著性变化.结论:连续20 d每天1 h的1 mT、50 Hz磁场照射不影响嗅觉辨别能力.