黄酮类化合物生物合成途径的进化及其在淫羊藿中的研究展望

黄酮类化合物是植物最重要的次级代谢产物之一。大多数植物黄酮类化合物的生物合成具有相同的步骤,其合成途径是植物进化过程中的保守代谢途径。迄今已经克隆、鉴定了多种植物黄酮类化合物生物合成相关酶的结构基因,并进行了一些黄酮类化合物合成代谢的分子调控研究。结合本实验室研究实践,综述了植物黄酮类化合物生物合成途径的进化研究进展,并在此基础上初步比较研究了淫羊藿与其他植物的黄酮类化合物合成途径,提出了研究淫羊藿黄酮类化合物生物合成的比较基因组学和比较代谢组学方法,指出应当从最保守的代谢中间产物和结构酶入手,结合淫羊藿种间和种内黄酮类化合物水平的比较,研究淫羊藿黄酮类化合物的代谢途径及其调控机制。     

海滨土壤芽胞杆菌的初步鉴定及其次级代谢产物的性质

目的：对从黄海海滨土壤中分离得到的菌株进行鉴定并研究其次级代谢产物的抗菌、抗肿瘤活性和结构信息。方法：分析分离得到的菌株的16srDNA、形态等特征，确定其种属以及研究其次级代谢产物（BSC）的抗菌抗肿瘤活性，并对BSC的结构进行了初步分析。结果：根据该株菌的16s rDNA、形态等特征，确定其为芽胞杆菌属，其次级代谢产物BSC具有一定的抗菌抗肿瘤活性，其分子式为C48H94O19。结论：分离得到的菌株为芽胞杆菌属，其次级代谢产物BSC具有一定的抗菌、抗肿瘤活性，是潜在的抗生素类药物。     

免疫抑制剂KF506的血中浓度与临床效果

FK506是日本在1984年从一种放线菌Str-eptomyces tsuKubaensis代谢产物中发现的大环内酯族化合物,具有强的免疫抑制作用。1989年Starzl等人首先将FK506应用于临床,现在达到可与环孢素相匹敌作为肝移植主要的免疫抑制剂。临床应用FK506时,必须根据血药浓度的测定调整用量,本文主要就FK506在肝移植患者体内动态与药效、毒性加以阐述。     

肝移植术后他克莫司血药浓度与血糖、血脂的相关关系探讨

目的探讨肝移植患者术后他可莫司(FK506)血药浓度与血糖、血脂之间的相关关系。方法微粒子酶免疫法(MEIA)测定FK506血药浓度;酶法测定血糖、血脂,动态观察血糖、血脂与不同血药浓度的关系。结果FK506血药浓度与血糖呈直线正相关关系;FK506血药浓度与甘油三酯呈直线正相关关系;FK506血药浓度与总胆固醇相关程度较低。结论肝移植患者使用FK506后应进行血糖、血脂的动态监测,避免因血糖、血脂升高给机体带来的一系列损害。     

mdr1基因C3435T多态性与口服FK506后血药浓度关系的实验研究

目的 调查中国汉族肾脏移植人群mdr1基因C3435T单核苷酸多态性与口服FK506后血药浓度的关系.方法 采用不同引物进行PCR扩增了17例中国汉族人群的基因组,判断人群的C3435T基因型,结合其口服FK506 12 h后血药浓度,判断二者是否存在关联.结果 口服相同剂量的FK506以后,基因类型为T/T的患者血药浓度最高,C/T次之,C/C最低,三者存在显著差异(P＜0.05).结论 mdr1基因的C3435T与口服FK506后的血药浓度密切相关,检测汉族肾脏移植患者mdr1基因的C3435T,对指导临床上FK506的使用有一定帮助.     

肾移植患者血浆FK506浓度与其FBG及HbA1c水平的相关性分析

目的探讨肾移植患者血浆他克莫司（FK506）浓度对其空腹血糖（FBG）和糖化血红蛋白（HbA1c）水平的影响。方法根据肾移植患者血浆FK506浓度的不同,将45例患者分为FK506血药浓度较高组、正常组和较低组三组,分别于术前和术后3、6个月检测患者FBG及HbA1c水平,分析患者FK506血药浓度与FBG及HbA1c水平的关系,并判断其临床意义。结果术后3个月时,三组患者的FBG水平均较术前显著增高（P〈0.05）,且FK506血药浓度较高组的FBG水平显著高于FK506血药浓度正常组和较低组（P〈0.05）;术后6个月时,三组患者的FBG及HbA1c水平均较术前及术后3个月显著增高（P〈0.05）,且FK506血药浓度较高组的FBG及HbA1c水平均显著高于FK506血药浓度正常组和较低组（P〈0.05）。结论肾移植患者应用FK506可导致其FBG及HbA1c水平升高,而且血浆FK506浓度超过正常浓度范围越多、使用时间越长,越易引起药物性糖尿病。     

PCR检测ETEC中的irp1基因

目的：探讨高致病岛（High Pathogenility Island,HPI)的irp1基因在ETEC菌株中的分布状况。方法：利用小肠结肠耶尔森菌HPI的irp1基因,设计合成引物,对ETEC菌株进行PCR（多聚酶链反应）检测。结果：94株ETEC菌中有10株呈现阳性。结论：HPI的irp1基因在小肠结肠炎耶尔森菌与ETEC（肠致病性大肠杆菌）之间存在着基因的水平转移,但其转移机制如何及转移过程有待于进一步研究。     

维拉帕米对FK506肾毒性的防治作用与肾脏P—450的关系

通过对大鼠应用FK506及维拉帕米从而观察其对肝、肾P－450的影响。结果：FK506及CsA均使Bun和Scr升高，使用维拉帕米后BUN及Scr较FK506组低。FK506和CsA均致肾脏P－450含量升高，使用维拉帕米后肾脏P－450下降。而FK506和CsA均使肝P－450含量下降。实验证明：FK506具有肾毒性，FK506经肝脏代谢，且抑制肝脏微粒体中P－450的产生。FK506和CsA相似，也会引起肾脏P－450增多，这可能参与肾毒性，而维拉帕米致肾脏产生P－450减少，在这一环节亦起到防治肾毒性的作用。     

内生真菌对宿主植物生长和次级代谢产物影响研究进展

内生真菌经过长期进化与宿主植物形成互利共生的关系,植物可以为内生真菌提供生长所需的营养物质,内生真菌可以调节宿主体内植物激素的水平,从而发挥调控植物生长和协助宿主植物对抗恶劣环境的作用。内生真菌亦能促进宿主植物次级代谢产物的积累,并且产生与宿主植物相类似的次级代谢产物。文章对内生真菌中植物激素生物合成过程进行梳理,对内生真菌调节植物激素水平从而发挥调控宿主植物生长、协助宿主对抗环境胁迫、产生与宿主植物相类似的次级代谢产物,并且诱导宿主次级代谢产物积累的相关研究进行综述,以期为后续研究内生真菌对宿主植物作用以及中药资源研究提供一定参考。     

长沙人间布鲁菌分离株omp25基因扩增和系统进化分析

目的了解长沙地区人间布鲁菌omp25基因的序列特征并阐明其系统进化关系,为布鲁菌病防控以及omp25基因克隆与表达研究提供参考。方法根据Gen Bank公布的羊种布鲁菌16M的omp25基因序列设计1对PCR引物,采用PCR法从长沙地区布鲁菌分离株基因组中扩增omp25基因,产物用凝胶电泳进行分析后进行双向核苷酸序列测定,测序结果用DNAstar 7.1进行分析,将测序结果提交Gen Bank,并利用Mega 7软件构建布鲁菌长沙分离株系统进化树。结果 41株布鲁菌成功扩增出omp25基因片段,片段长度约640 bp,通过测序后Blast同源性分析,证实41株菌株均为羊种布鲁菌,长沙分离株与10株羊种布鲁菌序列100%相同,进化树显示长沙分离的布鲁菌和国内外羊种布鲁菌位于同一进化分支上,同广西的LA1105参考株亲缘关系最近。结论长沙地区人间布鲁菌分离株omp25基因序列与参考菌株序列同源性高,且与羊种布鲁菌在同一分支,表明omp25基因序列是一个保守序列。该研究结果可为布鲁菌的分子生物学鉴定和诊断试剂的研制提供参考。     

西罗莫司产生菌——吸水链霉菌的FK506结合蛋白

目的 分离吸水链霉菌菌体蛋白质，探讨西罗莫司产生菌－吸水链霉菌的FK506结合蛋白（FKBPs)。方法 制备西罗莫司产生菌－吸水链霉菌菌体蛋白，分离蛋白质并进行PPIase酶活性测定。结果 获得吸水链霉菌的蛋白谱型，其中25kD蛋白质及15.5kD蛋白质具有PPIase活性，初步认定相当于FKBP25及FKBP12。结论 西罗莫司产生菌－吸水链霉菌中存在二种FKBPs，即FKBP25和FKBP12，与前人报告不合。     

氧化苦参碱对小鼠肝微粒体药物代谢酶的诱导作用

氧化苦参碱是自中药苦参中提取的一种生物碱,本文就其对小鼠肝微粒体药物代谢酶的影响进行了探讨。结果表明,氧化苦参碱(100mg/kg)能缩短小鼠戊比妥钠睡眠时间,提高肝微粒体细胞色素 P-450含量并增强乙基吗啡 N-脱甲基酶对硝基茴香醚 O-脱甲基酶和苯并芘羟化酶的的活性,形态上使肝细胞滑面内质网增生。以上结果说明,氧化苦参碱是细胞色素 P-450的诱导剂。     

阿魏酸钠对溴苯肝损害的有效作用

通过动物（小鼠）实验观察了溴苯（ＢＢ）肝损害时阿魏酸钠（ＳＦ）的有效作用。结果表明，给予ＢＢ（１５０ｍｇ／ｋｇ）时，小鼠ｓＧＰＴ活性，肝匀浆ＭＤＡ含量及肝微粒体细胞色素Ｐ４５０酶和苯胺羟化酶活性均增高，组织学现在可见细胞形态明显异常。ＳＦ（１００ｍｇ／ｋｇ）预处理后，小鼠上述各指标的活性或含量均显著降低细胞形态结构基本恢复至正常。提示ＳＦ可部分对抗ＢＢ所致肝损害，推测其机制与抗脂质过氧化及降低肝脏药物代谢酶活性有关。     

肝移植术后服用他克莫司致神经毒性反应的观察

目的探讨肝移植术后如何安全有效地服用他克莫司(FK506).方法对16例肝移植病人术后他克莫司用量、血药浓度及他克莫司对神经毒性损害进行对比观察.结果不同时间段,他克莫司用药剂量大小、血药浓度高低对神经损害副反应差异有极显著性.结论他克莫司是肝移植术后安全有效的强免疫抑制剂,其神经毒副反应与他克莫司用药剂量大小、血药浓度高低及合并应用潜在性的神经毒性药物呈正相关关系.     

CTPTD对大鼠肝细胞色素P－450的诱导作用

本研究用诊断性底物和针对Ｐ－４５０的多克隆抗体测定不同剂量ＣＴＰＴＤ对大鼠肝细胞色素Ｐ－４５０的影响。结果表明：①ＣＴＰＴＤ以剂量依赖性方式诱导肝细胞Ｐ－４５０总量；②高剂量可使本研究测定的单加氧酶活力增加；③ＣＴＰＴＤ主要诱导ｐ－４５０ＩＩＢ和Ｐ－４５０ＩＩＩＡ，并由这两个亚型代谢；④Ｐ－４５０ＩＡ和ＩＩＥ１在ＣＴＰＴＤ代谢中的作用需进一步确定。     

他克莫司诱导的骨髓间充质干细胞成骨细胞分化和体内骨形成

目的研究免疫抑制剂他克莫司（FKS06）对大鼠骨髓来源的间充质干细胞（MSC）的成骨细胞分化诱导,及对MSCs结合多孔β三磷酸钙（β—TCP）的体内成骨作用。方法原代MSCs按实验目的随机分组。对照组生长培养液中加入L-抗坏血酸-2-磷酸（AsAp）和β-甘油磷酸（β—GP）;FKS06处理组在对照组基础上加入50nmol／LFK506。实验分成体外体内两部分相继进行。体外实验细胞分别于培养第4、8、12、16天时行碱性磷酸酶（APase）活性,钙含量,扫描电镜和骨钙素mRNA Northern印迹分析;体内实验将细胞载人多孔β—TCP立方块形成MSCs／β-TCP复合物,继续成骨诱导培养2周后植入大鼠背部皮下,4周和8周后取出复合物作组织学检查。结果FKS06处理组碱性磷酸酶活性、钙含量、骨钙素mRNA均明显高于对照组（均P〈0．05）;体内成骨情况亦明显优于对照组。结论免疫抑制剂FKS06能显著促进大鼠骨髓来源间充质干细胞（MSCs）的体外成骨细胞分化和动物体内继续成骨的作用,并提示FKS06可作为一种新型成骨生长因子,在临床有潜在的应用价值。     

肾移植术后普乐可复应用的临床研究

目的研究肾移植术后应用普乐可复免疫抑制治疗的临床疗效和毒副作用。方法随机将62例肾移植受者分成两组：（1）FK506组（n=24）：应用FK506＋骁悉（MMF）＋强的松（Pred）治疗方案;（2）环孢素A（CsA）组（n=38）：应用CsA＋MMF＋Pred治疗方案。结果随访24个月,FK506组有2例（8.3%）、CsA组有9例（23.7%）发生急性排斥反应（P〈0.05）;两组肾功能恢复指标血清肌酐值无明显差异（P〉0.05）;FK506组和CsA组分别有3例（12.5%）和14例（36.8%）发生肝功能损害（P〈0.05）;分别有13例（54.2%）和22例（57.9%）血压升高（P〉0.05）;分别有4例（16.67%）和6例（15.79%）血糖升高（P〉0.05）。结论 FK506具有强效的免疫抑制作用,对于发生急性排斥反应、严重肝功能损害等肾移植术后患者由CsA切换成FK506治疗是安全有效的;应用时须根据血药浓度调整剂量,以减少不良反应的发生。     

橡胶防老剂D对大鼠肝、肺药物代谢酶的影响

防老剂 D 是以 N-苯基-β-萘胺为主要成份的通用橡胶防老剂。本文探讨了防老剂 D 对大鼠肝、肺药物代谢酶的影响。实验结果发现防老剂 D 可缩短小鼠戊巴比妥钠诱导的睡眠时间,提高肝脏器系数,细胞色素 P450含量和NADPH-细胞色素 C 还原酶、谷胱甘肽 S 转移酶和肝、肺多环芳烃羟化酶、乙基吗啡脱甲基酶,对-硝基茴香醚脱甲基酶的活性。使肝、肺细胞内质网增生。     

The effects of cadmium,mercury and lead in vitro on hepatic microsomal mixed function oxidase and lipid peroxidation

In this study, the authors investigated the effect of cadmium, mercury and lead in vitro on hepatic microsomal mixed function oxidase and lipid peroxidation. The results showed that these metals could inhibit the activity of hepatic microsomal aniline hydroxylase, decrease the concentration of hepatic microsomal cytochrome P-450 and increase the concentration of the inactive form of hemoprotein, P-420. Besides, they could enhance hepatic microsomal lipid peroxidation. There were marked concentration-dependent responsesin these microsomal reactions. Thus, it may be suggested that cadmium, mercury and lead are capable of impaizing hepatic microsomal mixed function oxidase in vitro by stimulating membrane lipid peroxidation.