变异株与野毒株慢性乙型肝炎干扰素治疗疗效比较

干扰素(IFN-α)是慢性乙型肝炎抗病毒治疗的有效药物,但关于IFN治疗由变异株病毒或野毒株病毒感染的慢性乙型肝炎的疗效何者更优尚无定论。本文根据轻度慢性乙型肝炎患者前C区1896位的变异情况分为变异株组和野毒株组,比较两组采用IFN治疗的临床疗效。1资料与方法1.1临床资料19     

HBV前C／BCP区变异对HBeAg阳性慢乙肝患者干扰素治疗早期应答的影响

目的：研究HBV DNA前C区1896位变异,BCP区1762/1764位变异与干扰素α治疗应答的关系。方法以41例接受干扰素治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎（慢乙肝）患者为研究对象。治疗前取患者外周血清,采用PCR 技术扩增前C区、BCP区,并测序分析。同时监测治疗0、12、24周患者外周血ALT、HBsAg、HBeAg、HBV DNA水平。结果①PC/BCP区变异（突变型,non-WT）患者HBeAg转阴率（ n＝13,72．2％）高于未发生PC/BCP变异（野生型,WT）患者（n＝4,28．8％）（P＝0．014）;②突变组HBsAg降低（ n＝5,56．7％）、HBVDNA转阴（n＝8,53．5％）,完全应答（ n ＝5,62．5％）,野生组 HBsAg 降低（ n ＝6,43．3％）、HBV DNA 转阴（ n ＝7,46．7％）,完全应答（n＝3,37．5％）,2组间无明显差异。结论突变型患者HBeAg转阴率高于野生型患者。     

乙型肝炎病毒X区T^1762－A^1764和前C区A^1896变异对干扰素治疗的影响

目的：研究乙型肝炎病毒(HBV)基因组X区和前C区热点变异对干扰素(IFN)治疗的影响。方法：采用半套式聚合酶链反应(HN-PCR．)结合限制性片段长度多形态(RFLP)技术检测20例慢性乙型肝炎患者IFN治疗前病毒核苷酸序列的突变。结果：A^1896变异株不影响治疗结束时应答率，6／8例T^1762-A^1764变异株感染者为应答者。停药后12mo时，l例T^1762-A^1764变异株感染者由无应答者变为应答者：在复发者中，既有T^1762-A^1764变异株感染者，又有A^1896变异株感染者，或两者同时存在。结论：T^1762-A^1764变异者近期疗效好，而A^1896变异者不影响近期疗效；T^1762-A^1764变异者远期疗效还有待进一步观察。     

应用PCR产物直接测序技术测定乙型肝炎病毒前C区基因序列

目的 :测定乙型重型肝炎和慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,探讨乙型肝炎病毒前C区基因变异的意义。方法 :采用PCR产物直接测序技术 ,测定 13例乙型重型肝炎和 10例慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,并与基因库中来自世界各地的不同基因型的毒株进行比较。结果 :患者血清中乙型肝炎病毒前C区基因序列 ,除发现乙型肝炎病毒前C区基因 1896位存在点变异外 ,还可见 184 6位点变异 ,且乙型重型肝炎患者发生病毒变异的频率明显高于慢性乙型肝炎 (P <0 .0 5 ) ,而 186 2位未检出变异。 1838位核苷酸全部为腺嘌呤核苷酸 (A) ,184 6位核苷酸大多为胸腺嘧啶核苷酸 (T) ,仅 4例发生了G→A点突变。经与不同基因型的毒株进行比较 ,提示沈阳地区流行的乙型肝炎病毒毒株接近美国株。结论 :乙型重型肝炎患者发生病毒变异的频率明显高于慢性乙型肝炎 ;沈阳地区流行的乙型肝炎病毒毒株接近美国株     

乙型肝炎病毒1896位点变异荧光PCR法检测及意义

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）前C区1896位点突变与临床关系。方法：采用荧光聚合酶链反应（PCR）对74例各型乙肝患者HBV前C区基因进行扩增,鉴定前C区1896位点突变。结果：有41例（55．41％）发生了1896位点突变。其中慢性乙型肝炎（CHB）和肝硬化（LC）组均高于无症状HBV携带者组（ASC）（P〈0．05）。抗-HBe（＋）组的变异检出率为71．11％,高于HBeAg（＋）组的31．03％（P〈0．01）。并且随着HBVDNA含量的增高,其发生变异的可能性越大（P〈0．01）。结论：前C区1896位点突变的发生可能与机体长期的炎症活动、免疫压力的选择有关。     

HBV前C区突变株对干扰素治疗的应答研究(简讯)

为研究国内慢性乙型肝炎前C区突变株与临床的关系，我们应用两种方法检测突变株，共检出突变株21例，其中16例曾应用干扰素治疗。结果：突变株对干扰素治疗有应答有6例，无应答者10例，应答率37．5％。国内外对干扰素治疗慢性乙型肝炎突变株的应答报告也不一致。结论：突变株中，HBeAg（＋）者与抗HBe（+）者对干扰素治疗的应答率分别为44．44％和万％，两组相比P＞0．05。Casman等认为单纯前C区基因变异并不能完全预测干扰素的疗效，然而本研究却提示HBeAg（＋）组与抗HBe（+）组在干扰素停药后复发率却有差别，分别为25％及100％。…     

乙型肝炎病毒前C区1896点突变的检测

目的：探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区1896点突变的临床意义。方法：利用PCR-ELISA技术检测38倒HBeAg阴性而HBV DNA阳性的乙型肝炎病毒感染者HBV前C区1896点突变。结果：38例HBeAg阴性而HBV DNA阳性的乙型肝炎病毒感染者检出28例HBV前C区1896变异病毒株，检出率为73．7％。结论：临床HBeAg阴性，HBV DNA阳性感染者多数为HBV l896变异病毒株感染，这些感染者具有传染性，故HBeAg阴性不能作为排除HBV复制和传染性的唯一指标。     

肝脏疾病进展与乙型肝炎病毒前 C／C 区突变

目的：研究慢性乙型肝炎患者前C/C区突变位点与肝脏疾病进展的临床意义。方法应用实时荧光定量PCR及直接测序法检测HBeAg阴性慢性乙型肝炎30例、HBeAg阳性慢性乙型肝炎20例,分析前C/C区变异位点与患者病情进展的相关性。结果肝硬化组前C/C区变异位点T1762/A1764、A1896发生率（86.3％,54.5％）明显高于慢性肝炎组（32.1％,35.7％）,差异均有统计学意义（ P ＜0.05）。慢性肝炎组与肝硬化组HBV载量差异无统计学意义（ P ＞0.05）;HBeAg阴性患者T1762/A1764,T1766/A1768,A1896变异位点发生率较HBeAg阳性患者显著增高（ P ＜0.05）。结论 T1762/A1764,A1896突变率的增加会促使肝脏疾病进展至肝硬化;HBeAg阴患者T1762/A1764,T1766/A1768,A1896变异位点的频率增加会促进肝脏疾病的进展。     

HBV多基因位点变异与肝细胞癌相关性研究

目的探讨乙型肝炎病毒前C区和C基因启动子基因变异与肝细胞癌发生的关系。方法采用实时荧光PCR检测29例慢性乙型肝炎（CHB）,27例乙型肝炎肝硬化（LC）,26例HBV相关肝细胞癌（HCC）患者血清HBV前C区G1896A和BCP区A1762T／G1764A的变异情况。结果HCC组和LC组前c区G1896A和BCP区A1762T／G1764A变异率均显著高于CHB组（P≤0．005）,HCC组和LC组间无显著差异（P〉0．05）。结论乙型肝炎病毒C基因启动子和前c区基因变异与肝细胞癌、肝硬化的发生密切相关。     

柴胡达原饮加味联合干扰素治疗HBeAg阴性慢性乙肝100例

目的：观察柴胡达原饮联合干扰素治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎的临床疗效。方法：将134例慢性乙型肝炎HBeAg阴性患者随机分为2组，治疗组煎服柴胡达原饮加味，同时应用安达芬（干扰素IFN—ct2b）6MU，6个月为1个疗程；对照组双环醇片口服，同时应用安达芬6MU治疗，6个月为1个疗程，分别于治疗前后评价主要症状体征、肝功能、HBV－DNA影像学指标和临床综合疗效。结果：治疗组和对照组的近期（治疗疗程结束后）基本有效率分别为94％、70．5％，两组比较差异有显著性，治疗组明显高于对照组（P〈0．05），而总有效率差异无显著性（P〉0．05），随访6个月时，治疗组HBV—DNA阴转率明显高于对照组（P〈0．05）。治疗疗程结束后与治疗前比较：两组ALT、AsT水平均有明显下降。差异有显著性（P〈0．01），但两组间比较差异无显著性（P〉0．05）。结论：柴胡达原饮联合干扰素治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎有效。     

e抗原阴性重症乙型肝炎患者HBV前C区热点变异研究

目的　研究ＨＢＶ信号肽区热点变异与重症乙型肝炎发生及转归的关系。方法　采用错配聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限 制性片段长度多态（ＲＦＬＰ）分析方法检测６８例ＨＢｅＡｇ阴性的重症乙型肝炎病人（其中急性重肝６例、亚急性重肝３８ 例、慢性重肝２４例）及４４例慢性乙型肝炎患者的Ｔ１８６２、Ａ１８９６变异情况。结果　急性重肝的Ａ１８９６、Ｔ１８６２变异分别 为６６．７％（４／６）、０（０／６）;亚急性重肝４２．１％（１６／３８）、１５．８％（６／３８）;慢性重肝 ２５．０％（６／２４）、１６．７％（４／２４）;慢性肝炎 ４５．５％（２０／４４）、２．３％（１／４４）。重症乙型肝炎组与慢性肝炎组比较Ｔ１８６２变异率有显著差异（Ｐ＜０．０１）,Ａ１８９６变异率无显 著差异（Ｐ>０．０５）。结论　提示Ｔ１８６２变异与乙型肝炎的重症化密切相关。而Ａ１８９６变异与乙型肝炎重症化进程是否有 关还不能确定。     

乙型肝炎患者HBV前C区变异及临床意义

目的研究乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区变异的临床意义。方法应用错配ＰＣＲ限制片段长度多态性分析,检测ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位突变。结果６２０例乙型肝炎患者ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位变异２６４例,变异率４２．５８％。在急性肝炎、慢性轻度、慢性中度、慢性重度、重型肝炎、肝硬化中,变异率分别为１２．５％、３５．０％、５５．９４％、４５．２６％、５４．７２％、４８．７６％。年龄、性别与变异无关,病程＞５年、谷丙转氨酶（ＡＬＴ）异常、抗ＨＢｅ（＋）者变异率均明显增高。结论ＨＢＶ前Ｃ区变异与肝病严重性有一定关系。     

乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒DNA的检测及临床意义

目的：研究乙肝患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ检测的临床意义。方法：用聚合酶链反应技术检测６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ。结果：６０例乙肝患者外周血单个核细胞及血清中乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率分别为４３．３％，４５％；同时检测血清中ＨＢｅＡｇ，其阳性率为２８．２％；外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检测率与血清乙肝病毒ＤＮＡ具有一致性；急性肝炎患者外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性率为２０％，慢性肝炎和肝炎肝硬变分别为５６．７％，４０％，外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的阳性检出率在急性肝炎和慢性肝炎之间有显著差异。结论：外周血单个核细胞乙肝病毒ＤＮＡ的存在与乙型肝炎的慢性化有关     

Efficacy of interferon alpha-2b and lamivudine therapy for chronic hepatitis B in children

Objective To evaluate the efficacy of interferon (IFN) alpha-2b and lamivudine therapy in children with chronic hepatitis B virus (HBV) infection.Method Ten children who developed chronic hepatitis B infection received IFN alpha-2b 10 million intemational units (IU)/m^2 body surface area, subcutaneously three times a week for six months. IFN lamivudine therapy began to be used in the cases who were unresponsive to IFN treatment.Results Among 27 HBsAg ( ) subjects in this study, interferon treatment was given to 11 subjects who developed chronic hepatitis. One case was excluded from the study due to detection of Herpes type 1 encephalitis. At the end of six months of follow-up, complete response was obtained in three(30%) patients and partial response in four (40%) patients, whereas no response was detected in three (30%) patients. Fifty percent of the cases experienced serological response, 70% biochemical response, and all (100%) had histological response. In three cases started concomitant IFN lamivudine therapy, HBV-DNA became negative at the second month of treatment.Conclusions IFN-alpha and lamivudine can be used for the treatment of chronic hepatitis B infection in children.     

慢性乙型肝炎的抗病毒治疗探讨

目的：探讨应用小剂量干扰素（IFN）联合阿昔洛韦（Acyclovir)、单用IFN、一般护肝治疗药物三种方法治疗慢性乙肝的疗效。方法：将选择的84例病人随机分为三组,联合组32例应用IFN lmu Acyclovir 0.75;单用组21例,应用IFN 3mn;护肝组31例,应用肝炎灵针4ml;疗程均为3个月。观察临床,ALT和病毒复制指标变化。结果：三组均能减轻或消除肝炎症状,改善肝功,ALT腹常率在治疗后2个月无明显差异。疗程结束后近期观察3个月,其HbeAg、HBVDNA阴转率及复发率,在联合组分别为46．2％、45．2％、6．7％,单用组分别为22．2％、28．6％、11．7％,护肝组分别为3．8％、3．2％、25．9％,有显差异。结论：小剂量干扰素联合阿昔洛韦治疗慢性乙肝具有与常规剂量干扰素同等的治疗效果。且副作用轻,治疗费用低。     

Hot spot mutations of hepatitis B virus pre-C/C gene and its promotor in Chinese patients and the clinical implications

OBJECTIVE: To study if the functions of C gene and its promotor are related to the pathogenesis of hepatitis B and to describe their hot spot mutations in Chinese patients. DATA SOURCES: We have studied this subject in recent years. A mini-review is based on some unpublished works. DATA SELECTION: The sequence data of C gene and core promotor (cp) of hepatitis B virus (HBV) were analysed in the asymptomatic carriers (AsC) and the patients of hepatitis with various severity. RESULTS: Pre-C A1896 mutation occurred in 67% of anti-HBe-positive and 38% of HBeAg-positive cases. All were chronic infections. In C gene, 8 missense mutations in the segment of codon 48-60, and 28 in codon 84-101 were found, more in severe patients. The cp mutations of nt 1762 and nt 1764 occurred more in HBeAg-negative than in positive cases (49% vs 20%), and more in patients than in AsC (56% vs 10%). CONCLUSIONS: A1896 often occurred in nature infection course. The cp and clustering C gene mutations would more frequently lead to prolonged active infection and advanced liver diseases.     

慢性重型肝炎患者乙肝病毒C基因变异的初步研究

目的探讨乙肝病毒C基因变异与乙型肝炎患者病情的关系.方法用聚合酶链反应(PCR)对2份慢性重型乙型肝炎患者血清及1份乙肝病毒无症状携带者血清进行C基因扩增和克隆,经核苷酸序列分析,与我国HBV克隆株pADR1比较.结果乙肝病毒无症状携带者的C基因与pADR-1的基因相似;而慢重肝患者C基因变异率较高,各有19和14个核苷酸变异.结论乙肝病毒C基因的变异可能与重型肝炎的发生密切相关.     

慢性HBV感染患者bcp/pc区点突变模式、pres区缺失及其临床意义

目的阐明HBV(hepatitis B virus,HBV)感染患者不同临床阶段bcp/pc(basic core promoter,BCP/precore,PC)点突变模式及pres区缺失突变规律,并探讨其临床意义。方法慢性HBV感染患者180例,其中,无症状HBV携带者13例,慢性乙型肝炎者75例,HBV相关肝硬化及肝癌分别为62、30例。Qiagen法提取血清HBV-DNA,常规PCR扩增目的基因,纯化PCR产物ABI377DNA自动测序仪直接双向测序。直接测序失败者,回收目的 DNA与PMD-18T载体连接,克隆质粒双向测序。DNAStar软件包的SeqMan软件进行生物信息分析。结果 Bcp/pc区点突变包括nt1753、nt1762、nt1764、nt1776、nt1803、nt1846、nt1896。HBV携带者、慢性乙型肝炎、HBV相关肝硬化及肝癌患者nt 1762(nt 1764)点突变率分别为7.7%、68.0%、72.7%(68.0%)及90.9%(81.8%),肝癌患者G1896A突变频率占54.6%。A1762T+G1764A联合突变占36%;A1762T、G1764A、G1896A联合突变占11%;T1753A/C、A1762T、G1764A、G1896A发生率为7%。克隆测序显示,肝硬化及肝癌患者bcp区起始点A1727G点突变率分别为72%、63%。HBeAg阴性患者存在更多的基因变异(P=0.022),G1776A和G1896A突变是HBeAg阴性的独立预测因素(P<0.05)。Bcp区点突变与HBeAg阴性无明显关系。肝硬化和肝癌患者pres基因缺失突变频率最高,肝癌及肝硬化患者pres1、pres2及pres1+s2缺失频率分别为7.1%、71.4%、7.1%及41.2%、58.8%、29.4%(P<0.05)。结论 A1727G、A1762T、G1764A及A1762T/G1764A联合突变、pres缺失在HBV相关肝硬化及肝癌患者多见,可能是肝脏疾病进展的危险因素,G1776A和G1896A突变是HBeAg阴性的独立预测因素。Bcp/pc点突变及pres区缺失可能为肝癌发生的早期预测因素,值得进一步研究。