miR-128对视网膜色素上皮细胞增殖与凋亡的影响及机制分析

目的:探讨miR-128对视网膜色素上皮细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:选择miR-128 mimics和miR-128 inhibitor分别转染人视网膜上皮细胞(retinal pigment epithelial cells,RPE)株ARPE-19(miR-128 mimics组和miR-128 inhibitor组),加入同样体积DMEM培养基的ARPE-19细胞作为NC组,采用荧光定量PCR检测RPE miR-128 mRNA相对表达量, MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western-blot法检测蛋白表达水平。结果:转染48 h后,miR-128 mimics组的miR-128 mRNA表达水平显著高于其他两组(P<0.05),miR-128 inhibitor组miR-128水平则显著低于NC组(P<0.05)。miR-128 mimics组的细胞增殖活性显著高于NC组和miR-128 inhibitor组(P<0.05),细胞凋亡率显著低于NC组和miR-128 inhibitor组(P<0.05)。Western-blot法检测转染48 h后,miR-128 mimics组的m-TOR蛋白表达水平显著高于NC组和miR-128 inhibitor组(P<0.05)。结论:miR-128能提高RPE的增殖活性,抑制RPE的凋亡,可提高mTOR蛋白的表达,改善细胞功能,从而发挥对糖尿病视网膜病的保护作用。     

miR-584对人胶质母细胞瘤侵袭和迁移能力的影响

目的探讨miR-584对人胶质母细胞瘤U251细胞侵袭和迁移能力的影响。方法将化学合成的miR-584-3p在脂质体Lipofectamine 2000的介导下,瞬时转染人胶质母细胞瘤U251,细胞分为空白对照组(无转染,其他条件相同)、mimics NC组(转染miR-584-3p mimics阴性对照序列)、miR-584-3p mimics组(转染miR-584-3p mimics)、inhibitor NC组(转染miR-584-3p inhibitor阴性对照序列)和miR-584-3p inhibitor组(转染miR-584-3p inhibitor)。Real-time PCR法检测细胞中miR-584-3p的表达水平;CCK-8法检测细胞增殖能力;划痕实验和Transw ell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果与空白对照组和mimics NC组相比,miR-584-3p mimics组的miR-584-3p表达上调约100倍(P<0.05),细胞增殖能力无明显差异(P>0.05),细胞侵袭和迁移能力明显下降(P<0.05);与空白对照组和inhibitor NC组相比,miR-584-3p inhibitor组的miR-584-3p表达下调至空白对照组的5%(P<0.05),细胞增殖能力无明显差异(P>0.05),细胞侵袭和迁移能力显著增强(P<0.05)。结论 miR-584-3p mimics转染抑制了U251细胞的侵袭和迁移能力;miR-584-3p inhibitor转染能增强U251细胞的侵袭和迁移能力。     

miR-433-3p通过调控MAPK8蛋白在H_2O_2诱导的心肌细胞损伤中发挥保护作用

目的探究miR-433-3p在过氧化氢(H_2O_2)诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)损伤中的作用及具体机制的研究。方法构建氧化应激损伤模型,以H9c2心肌细胞为研究对象,通过转染miR-433-3p模拟物(miR-433-3p mimics)、miRNA阴性对照(miR-NC)、阴性对照(pcDNA-NC)和MAPK8过表达质粒(pcDNA-MAPK8)至H_2O_2诱导的H9c2细胞中,将细胞分为对照组(Control),H_2O_2模型组(H_2O_2),H_2O_2+miRNA阴性对照组(H_2O_2+miR-NC),H_2O_2+miR-433-3p模拟物组(H_2O_2+miR-433-3p mimics),H_2O_2+miR-433-3p模拟物+pcDNA阴性对照组(H_2O_2+miR-433-3p mimics+pcDNA-NC)和H_2O_2+miR-433-3p模拟物+MAPK8过表达组(H_2O_2+miR-433-3p mimics+pcDNA-MAPK8)。采用qRT-PCR法检测miR-433-3p和MAPK8在H9c2细胞中的mRNA表达水平。MTT法和ELISA试剂盒分别检测细胞活性和乳酸脱氢酶(LDH)释放量。Western blot法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、MAPK8和GAPDH的蛋白表达水平。双荧光素酶报告实验检测miR-433-3p与MAPK8之间的靶向关系。结果与对照组相比,miR-433-3p在H_2O_2诱导的心肌细胞H9c2中低表达。相比较H_2O_2+miR-NC组,miR-433-3p过表达可以显著降低LDH释放量并增强细胞活力。此外,相比较H_2O_2+miR-NC组,miR-433-3p过表达可以显著降低促凋亡蛋白Bax和Cleaved Caspase-3的表达水平,而促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平。双荧光素酶报告实验显示miR-433-3p可以靶向结合MAPK8并负调控MAPK8的表达。过表达MAPK8可逆转miR-433-3p过表达对H_2O_2诱导的H9c2细胞活性损伤和细胞凋亡的抑制作用。结论 miR-433-3p通过负靶向调控MAPK8在H_2O_2诱导的心肌细胞损伤中发挥保护作用。     

miR-221在H_2O_2诱导的大鼠心肌细胞损伤中的作用及机制研究

目的探讨miR-221在过氧化氢(H_2O_2)诱导的大鼠心肌细胞(H9c2)损伤中的作用及机制研究。方法 MTT法检测不同浓度H_2O_2对H9c2细胞的损伤作用,RT-PCR法检测miR-221表达量。通过Lipofectamine2000将miR-221 inhibitor及阴性对照转入H9c2心肌细胞,并将实验分为4组,正常对照组,模型对照组(H_2O_2组),阴性对照组(H_2O_2+阴性对照组),抑制组(H_2O_2+miR-221 inhibitor组)。MTT法检测细胞活力,吖啶橙染色检测细胞凋亡情况,Western blot检测Bax,Bcl-2,10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因蛋白(PTEN)及p-蛋白激酶(AKT)表达。结果 0、25、50、100、200、400μmol/L H_2O_2对H9c2细胞活力的抑制作用逐渐加强,其中200μmol/L H_2O_2对细胞活力抑制程度适中,因此作为后续诱导剂量。与正常对照组比较,模型对照组及阴性对照组中miR-221表达量显著上调(P0.01),H9c2细胞活力降低(P0.01),细胞凋亡率显著提高(P0.01),Bax及PTEN表达量上调(P0.01),Bcl-2及p-AKT表达量下调(P0.01)。与模型对照组及阴性对照组比较,抑制组中miR-221表达量显著下调(P0.01),H9c2细胞活力提高(P0.01),细胞凋亡率显著降低(P0.01),Bax及PTEN表达量下调(P0.01),Bcl-2及p-AKT表达量上调(P0.01)。结论 miR-221低表达能显著抑制H_2O_2诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤,与调控PTEN/AKT信号通路有关。     

miR-107对HepG2细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨miR-107对HepG2细胞增殖和细胞周期的影响,以及对CDK6蛋白表达的调控。方法将50 nmol/L的miR-107 mimics 或阴性对照序列由 Lipofectamine 2000转染入人肝癌细胞株 HepG2中;qRT-PCR 法检测转染后HepG2细胞内miR-107表达水平;四甲基偶氮唑蓝( MTT)法检测细胞增殖能力;流式细胞术分析转染后细胞周期的变化;Western blot法检测CDK6蛋白表达水平。结果转染后24 h,miR-107 mimics转染组细胞内miR-107表达水平较空白对照组明显升高(P<0.05);与空白对照组相比,miR-107 mimics转染组HepG2细胞增殖受抑制( P<0.05),处于G0/G1期的细胞增多( P <0.05), CDK6蛋白表达下调( P <0.05)。结论 miR-107能够抑制 HepG2细胞增殖并诱导HepG2细胞G0/G1期阻滞,这可能与其抑制 CDK6蛋白的表达有关。     

芦荟大黄素调控miR-30b促进子宫内膜癌细胞自噬的研究

目的探讨芦荟大黄素(AE)调控子宫内膜癌细胞HEC-1-B中miR-30b表达促进细胞自噬的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测miR-30b在正常子宫内膜细胞和不同子宫内膜癌细胞株HEC-1-A、HEC-1-B、RL95-2中的表达水平。取miR-30b表达水平最高的HEC-1-B癌细胞分为HEC-1-B癌细胞组、miR-30b inhibitor NC组(转染miR-30b inhibitor NC)、miR-30b inhibitor组(转染miR-30b inhibitor)以及AE组(30μmol/L AE,未转染)和AE+转染组:AE+miR-30b mimics NC组(30μmol/L AE,转染miR-30b mimics NC)、AE+miR-30b mimics组(30μmol/L AE,转染miR-30b mimics)。q RT-PCR法检测各组细胞miR-30b表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色法检测各组细胞自噬率;蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测各组细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3-I、LC3-II和p62表达水平。结果与人正常子宫内膜上皮细胞相比,HEC-1-A、HEC-1-B和RL95-2癌细胞中miR-30b表达水平显著升高(P0.05)。其中HEC-1-B癌细胞中miR-30b表达水平最高,所以后续将选择HEC-1-B癌细胞进行转染实验。与HEC-1-B癌细胞组和miR-30b inhibitor NC组相比,miR-30b inhibitor组癌细胞miR-30b表达水平、细胞增殖率以及p62蛋白表达水平显著降低(P0.05),细胞凋亡率、自噬率以及Beclin1蛋白表达水平和LC3-II/I比值显著升高(P0.05)。与HEC-1-B癌细胞组相比,AE组和AE+miR-30b mimics NC组癌细胞miR-30b表达水平、细胞增殖率以及p62蛋白表达水平显著降低(P0.05),细胞凋亡率、自噬率以及Beclin1蛋白表达水平和LC3-II/I比值显著升高(P0.05)。与AE+miR-30b mimics NC组相比,AE+miR-30b mimics组癌细胞miR-30b表达水平、细胞增殖率以及p62蛋白表达水平显著升高(P0.05),细胞凋亡率、自噬率以及Beclin1蛋白表达水平和LC3-II/I比值显著降低(P0.05)。结论子宫内膜癌细胞中miR-30b表达较高,AE可能通过抑制miR-30b表达,促进癌细胞自噬和凋亡,抑制癌细胞增殖,而过表达miR-30b可逆转AE发挥的作用。     

miR-134靶向基质金属蛋白酶1对喉癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响

目的 探讨miR-134靶向基质金属蛋白酶1(MMP1)对喉癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.方法 双荧光素酶报告基因实验验证MMP1基因是否为miR-134的靶向基因.转染实验分为miR-134 mimics组、miR-134 antagomir组和空白对照组,采用CCK-8、流式细胞术和Transwell法检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况,Western blot检测过表达或降低miR-134对MMP1蛋白表达的影响.结果 双荧光素酶报告基因结果显示miR-134能和MMP13'-UTR端结合且明显抑制荧光素酶活性.miR-134 mimics组细胞在转染后24 h的细胞活力明显低于空白对照组(P<0.01),而miR-134 antagomir组明显高于空白对照组(P<0.05).与空白对照组凋亡率[(4.32±0.36)％]比较,miR-134 mimics组[(12.02±0.45)％]明显增加(P<0.01),而miR-134 antagomir组[(2.31±0.26)％]明显降低(P<0.05).与空白对照组比较,miR-134 mimics组的细胞侵袭和迁移能力明显减弱、MMP1蛋白表达明显降低(P<0.05),miR-134 antagomir组的细胞侵袭和迁移能力明显增强、MMP1蛋白表达明显升高(P<0.05).结论 miR-134在转录后水平调控MMP 1蛋白表达来影响喉癌细胞的增殖、凋亡、侵袭及迁移.     

miR-1285通过YAP对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制

目的 探讨miR-1285通过转录共激活因子Yes相关蛋白1(YAP1)对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 构建miR-1285的质粒，使K562细胞过表达miR-1285及敲低miR-1285,分为miR-1285 mimics、mimics control、miR-1285 inhibitor、inhibitor control四组；采用qRT-PCR法定量分析四组中miR-1285的表达量，验证转染效率，利用CCK8、AnnexinⅤ-FITC方法检测四组K562细胞的凋亡、增殖情况；使用Western blot检测YAP及其下游分子表皮生长因子受体(EGFR)等变化，检测凋亡相关分子BAX、Bcl-2蛋白表达变化。结果 敲低miR-1285后，可促进K562细胞的增殖，抑制凋亡，YAP的表达升高，下游分子EGFR表达相应升高，凋亡相关分子BAX降低，而Bcl-2表达升高；而过表达miR-1285后，K562细胞增殖减弱，凋亡增加，YAP表达降低，下游分子P-EGFR表达降低，凋亡分子BAX表达升高，而Bcl-2表达降低。结论 miR-1285...     

miR-137靶向Notch1调控人视网膜微血管内皮细胞的增殖、周期和凋亡

目的 探讨miR-137靶向Notch1调控对人视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)增殖、周期和凋亡的影响。方法 使用RT-qPCR检测我院20例高血压视网膜病变患者和20例高血压视网膜正常患者血清miR-137表达水平。将miR-137阴性对照(miR-NC)和miR-137过表达组(mimics)转染至HRCEC中,转染24 h后RT-qPCR检测miR-137和Notch1的RNA表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。运用生物信息学预测和荧光素酶报告实验验证miR-137与Notch1存在靶向性。Western Blot检测Notch1以及与周期和凋亡相关蛋白的表达。结果 RT-qPCR结果显示,高血压视网膜病变患者血清中的miR-137表达量显著高于高血压视网膜正常组患者(P<0.05)。细胞增殖实验结果表明,miR-137mimics组细胞增殖指数显著低于miR-NC组(P<0.05)。转染后24 h, miR-137mimics组过表达组的G0/G1期百分比(65.00±1.29)%相对于miR-NC组(56.52±0.81)%显著增加(P<0.05),G2期百分比(17.58±0.75)%则显著低于对照组(22.29±1.57)%(P<0.05);miR-137mimics组的凋亡率(12.67±0.31)%显著高于miR-NC组(2.16±0.12)%(P<0.05)。生物信息学方法预测到miR-137与Notch1存在靶向性。荧光素酶报告实验说明miR-137可以靶向结合Notch1。miR-137mimics组的Notch1 mRNA和蛋白的相对表达量均显著低于miR-NC组(P<0.05),miR-137mimics组的周期相关蛋白CDK2相比miR-NC组表达量显著下降(P<0.05),miR-137mimics组抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量相比miR-NC组显著降低(P<0.05),而miR-137mimics组的促凋亡蛋Bax表达量相比miR-NC组则显著增加(P<0.05)。结论 miR137能抑制Notch1信号通路,抑制细胞增殖和周期,促进细胞凋亡,提示miR-137可作为预测高血压视网膜病变的潜在分子标志物。     

AEG-1抑制miR-137对非小细胞肺癌增殖调控作用

目的 探讨AEG-1在miR-137抑制非小细胞肺癌(NSCLC)增殖中的作用及机制。方法收集2013年2月~2014年5月在本院手术治疗的65例NSCLC患者肿瘤标本,提取RNA,qRT-PCR检测NSCLC组织、A549、H460及16HBE细胞中miR-137与AEG-1的表达,统计分析NSCLC组织中miR-137与胶质细胞上调基因1(AEG-1)表达的相关性;将A549细胞根据不同转染试剂分成4组:转染miR-137 mimics及空载体组,转染miR-137 mimics及AEG-1表达载体组,转染miR-137 inhibitor及siRNA无关序列组,转染miR-137 inhibitor及AEG-1 siRNA组。用Lipofectamine 2000进行转染,生长曲线实验检测转染后细胞增殖情况。结果在NSCLC组织中miR-137与AEG-1的表达呈负相关;miR-137表达高的NSCLC细胞中AEG-1表达降低;共同转染miR-137 mimics与AEG-1过表达载体的A549细胞在48 h的细胞数高于对照组,而共同转染miR-137 inhibitor与AEG-1 siRNA的A549细胞在48 h、72 h的细胞数低于对照组。结论miR-137与AEG-1在NSCLC组织及细胞中表达呈负相关;AEG-1逆转miR-137对NSCLC细胞增殖的作用。     

miR-221和miR-222在急性髓细胞白血病初发患者中的表达研究

目的探讨miR-221和miR-222在急性髓细胞白血病(AML)骨髓有核细胞中的表达及意义。方法选择16例AML初发患者和44例非白血病患者骨髓标本,分离有核细胞,抽提总RNA,以U6为内参,采用茎环Realtime RT-PCR法检测并比较AML和非白血病患者骨髓有核细胞中miR-221和miR-222的表达,同时比较这两种miRNAs在AML中M3、M4和M5三种亚型间的表达水平。结果 miR-221和miR-222在AML初诊患者骨髓中相对表达量(N=2-ΔCt)明显高于非白血病患者组(P<0.05);这两种miRNAs在M5型AML患者表达最高,但在AML三种亚型间表达水平未见显著的统计学意义(P>0.05)。结论 miR-221和miR-222有可能在为AML的诊断、治疗和预后上,提供一个新的标准和靶点指标。     

miR-221/miR-222在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的：探讨miR-221/miR-222在乳腺浸润性导管癌中的表达及与临床病理特征的相关性。方法：应用茎环Real-time RT-PCR方法检测36例乳腺浸润性导管癌及癌旁非肿瘤乳腺组织中成簇分布的miR-221和miR-222表达,分析miR-221和miR-222表达与乳腺癌常用的临床病理指标的关系。结果：乳腺癌组织miR-221和miR-222表达明显高于其对应的正常乳腺组织（P值均小于0.05）,但miR-221和miR-222两者比值差异无显著性（P=0.176）。miR-221和miR-222的表达和雌激素受体状态及Her-2表达有关。低雌激素受体表达和高Her-2表达的乳腺癌组织的miR-221和miR-222表达均明显高于高雌激素受体和低Her-2表达的标本（P值均小于0.05）。miR-221和miR-222的表达与月经状况、肿块大小、孕激素受体状态、淋巴结转移及TMN分期无关。结论：miR-221/miR-222不但是乳腺癌重要的标记,而且可能成为内分泌治疗抵抗的预兆性标记物和靶向治疗潜在作用靶点。     

miR-21、miR-126、miR-143和miR-373在正常宫颈组织、宫颈癌组织及Hela细胞中的表达差异

目的研究miR-21、miR-126、miR-143和miR-373在正常宫颈组织、宫颈癌组织及Hela细胞中的表达差异,探讨microRNAs(miRNAs)对宫颈癌发生的调控作用。方法荧光实时定量检测20例良性肿瘤患者的正常宫颈组织,20例宫颈癌组织及Hela细胞中miR-21、miR-126、miR-143和miR-373的表达。结果 miR-21在宫颈癌组织及Hela细胞系中高表达,在正常宫颈标本中低表达,在宫颈癌组织中相对定量为正常宫颈组织的11.3196倍(P<0.05);miR-143、miR-373在宫颈癌组织及Hela细胞中均低表达,在正常宫颈标本中高表达,miR-143、miR-373在宫颈癌组织中相对定量分别为正常宫颈组织的0.1553倍和0.4907倍(P<0.05);miR-126的表达无明显变化。结论 miRNAs与宫颈癌的发生和调控密切相关。在宫颈癌组织和Hela细胞中,miR-21表达上调,可能在宫颈癌的发生过程中发挥癌基因的作用;miR-143、miR-373表达下调可能发挥抑癌基因的作用;miR-126表达无差异,与宫颈癌无明显关系。     

miR-143、miR-145在膀胱癌中的表达及意义

【目的】探讨膀胱癌中miR-143、miR-145的表达及其与膀胱癌临床病理特征的关系。【方法】采用miRNA表达谱芯片、Northen blot、Real-time PCR法检测miR-143、miR-145在膀胱癌中的表达,分析miR-143、miR-145的表达与膀胱癌临床分期分级的关系。【结果】miRNA表达谱芯片、Northen blot、Real-time PCR法均提示miR-143、miR-145在膀胱癌中较癌旁正常膀胱组织中表达明显降低,差异具有统计学意义。miR-143、miR-145的低表达在不同临床分期与分级的膀胱癌中差异不明显。【结论】miR-143、miR-145在膀胱癌中明显低表达,可能与膀胱癌的发生密切相关。     

实时荧光定量RT-PCR检测肝癌组织中miR-122a及miR-224的表达

目的 运用实时荧光定量RT-PCR方法分析miR-122与miR-224两种miRNAs在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达,探讨以miRNAs为靶点在早期肝癌中的临床诊断意义.方法 采用基于2(-△△ACT)的实时荧光定量RT-PCR法对35例肝癌组织及癌旁组织的miR-122a及miR-224进行了定量分析,结果经由Noahernblot验证.结果 与正常组织相比,在所有的被检肝癌组织中,均发现了miR-122a有不同程度的表达下调(P<0.01),而上述肝癌组织中的miR-224的定量结果显示该miRNA表达显著增加(P<0.001).结论 HCC组织中存在上述两种miRNAs表达水平的改变.实时荧光定量RT-PCR法为早期、准确的在临床上检测肝组织癌变提供了新的思路.     

Clinical impact of circulating miR-26a,miR-191, and miR-208b in plasma of patients with acute myocardial infarction

Background

Aberrant expression of several types of miRNAs has been reported in acute myocardial infarction (AMI). The objective of our study was to compare miRNA expression in AMI patients and normal healthy people and determine whether miR-26a, miR-191, and miR-208b could be measured in plasma as indicators for AMI.

Methods

Detection of AMI patients and normal persons by using miRNA microarray chip analysis and miR-26a, miR-191, and miR-208b was screened out. Eighty-seven AMI patients and eighty-seven homogeneous healthy individuals were recruited. Total mRNA including miRNA was isolated and miR-26a, miR-191, and miR-208b expression were determined by qRT-PCR. Receiver operating characteristic curve analysis was performed to evaluate the instructive power of miR-26a, miR-191, and miR-208b for AMI. Dual-luciferase reporter assays indicated p21 is a direct target of miR-208b.

Results

miR-26a and miR-191 were low expressed in AMI compared with normal healthy people, but miR-208b was expressed at a high level in AMI. miR-26a showed an area under the curve (AUC) of 0.745, with a sensitivity of 73.6 % and a specificity of 72.4 %.The AUC for miR-191 was 0.669, with a sensitivity of 62.1 % and a specificity of 69.0 %.The AUC for miR-208b was 0.674, with a sensitivity of 59.8 % and a specificity of 73.6 %.

Conclusions

miR-208b was significantly increased in the AMI compared with healthy people, while miR-26a and miR-191 were decreased. miR-26a, miR-191, and miR-208b were potential indices of AMI, and miR-208b was more effective in patients with non-ST-elevation myocardial infarction.     

初发和复发膀胱尿路上皮癌中miR-21和miR-205的表达

目的检测microRNA-21(miR-21)与microRNA-205(miR-205)在初、复发膀胱尿路上皮癌中的表达情况,探讨microRNAs(miRNAs)在膀胱尿路上皮癌中的表达意义及是否与肌层浸润有关。方法采用基于2-△△CT的实时定量PCR(Real-time PCR)方法检测40例初、复发癌组织miR-21及miR-205的表达情况。结果与初发癌相比,复发癌miR-21表达上调(P<0.05),miR-205表达下调(P<0.05);与非肌层浸润性癌相比,肌层浸润性癌miR-21表达上调(P<0.05),miR-205表达下调(P<0.05);肌层浸润性癌miR-21与miR-205表达量的比值5倍于其在非肌层浸润性癌中表达量的比值。结论 miR-21高表达、miR-205低表达可能参与膀胱尿路上皮癌复发并与肌层浸润有关。     

MiR-200c和miR-141在膀胱移行细胞癌中的表达研究

目的:探讨microRNA 200c(miR-200c)和microRNA 141(miR-141)在膀胱移行细胞癌中的表达及意义?方法:MicroRNA芯片筛选膀胱癌和癌旁组织差异表达的microRNA,实时定量 RT-PCR法验证miR-200c和miR-141在膀胱癌组织和膀胱癌细胞系中的表达?结果:MiR-200c和miR-141的表达强度在膀胱肿瘤组织高于癌旁正常膀胱黏膜,在表浅性膀胱肿瘤高于肌层浸润性膀胱肿瘤,在高级别组膀胱肿瘤高于低级别组,在分化较好?恶性度较低的5637细胞系中表达较高,在分化较差?恶性度较高的T24?J82?EJ细胞系中表达均较低?结论:MiR-200c和miR-141可能参与膀胱癌的进展?     

miR-21、miR-182、miR-382在非小细胞肺癌中的临床意义及益气除痰法的干预作用

【目的】分析miR-21、miR-182、miR-382基因对肺癌进展的影响及益气除痰法的干预作用。【方法】应用生存分析在线软件Kaplan-Meier plotter分析miR-21、miR-182、miR-382对肺癌预后的影响,应用功能富集分析工具FunRich数据库对miR-21、miR-182、miR-382进行功能富集、通路富集分析,GeneMANIA数据库分析靶基因蛋白的互作网络。选取单纯中药治疗中晚期非小细胞肺癌患者(设为“中医组”)和中药联合维持化疗的中晚期非小细胞肺癌患者(设为“结合组”),采用定量聚合酶链反应(PCR)方法分析益气除痰法对患者外周血中miR-21、miR-182、miR-382表达的影响。【结果】miR-21、miR-382的表达量与肺腺癌的生存期呈负相关,与肺鳞癌的生存期关系不明显。miR-182的表达量与肺腺癌患者的生存期无明显相关性,与肺鳞癌的生存期呈正相关。miR-21、miR-182、miR-382靶基因的功能主要为信号传导、细胞之间的通讯,所涉及的信号通路主要包括:整合素家族信号通路、血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体(VEGFR)通路及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)通路等。miR-21与肿瘤转移密切相关的靶基因包括:RECK、TNFRSF11B、TGFBI、PDCD4、SPRY2、FOXF2。中医组miR-21的增加水平较结合组低。【结论】miR-21可能影响肿瘤转移及肺腺癌的生存,益气除痰法可能通过调控miR-21的表达有效治疗中晚期非小细胞肺癌。     

血清miR-222、miR-874-3p和miR-27a联合诊断多囊卵巢综合征的应用价值

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清miR-222、miR-874-3p和miR-27a水平,并评估其在PCOS中的潜在诊断价值。 方法选取PCOS患者98例为PCOS组,因单纯输卵管不孕或男性因素不孕的妇女98例为对照组。根据体质指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和游离雄性激素指数(FAI),将PCOS组分为正常体质量组、超重组和肥胖组;非胰岛素抵抗组和胰岛素抵抗组;高雄激素组和低雄激素组。qRT-PCR检测各组miR-222、miR-874-3p和miR-27a水平,ROC曲线分析miR-222、miR-874-3p和miR-27a在PCOS中的诊断价值。 结果PCOS组BMI、HOMA-IR和FAI及血清miR-222、miR-874-3p、miR-27a均高于对照组(P＜0.05)。超重组和肥胖组miR-27a高于正常体质量组,胰岛素抵抗组miR-222和miR-27a高于非胰岛素抵抗组,高雄激素组miR-874-3p高于低雄激素组(P＜0.05)。miR-222、miR-874-3p和miR-27a联合诊断PCOS诊断效能最高。 结论PCOS患者血清miR-27a、miR-222和miR-874-3p表达上调,可能与胰岛素抵抗、脂代谢和高雄激素血症有关,三者联合检测有助于PCOS的诊断。