谷氨酸致小鼠急性损伤的实验性研究

目的:观察谷氨酸(glutamate,Glu)的肺损伤效应.方法:测定肺湿重/体质量、肺湿重/肺干重(W/D)、肺泡灌洗液中细胞和蛋白漏出量,并观察肺显微形态的变化.结果:(1)Glu(0.50～0.75 g/kg)处理2 h后小鼠肺湿重/体质量、W/D、肺泡灌洗液中白细胞、红细胞和蛋白漏出量以剂量依赖方式增加;(2)病理切片显示Glu作用2 h后肺组织呈炎症改变,有大量的中性粒细胞浸润;(3)NMDA受体阻断剂MK-801(0.1 mg/kg)预处理30 min可抑制Glu(0.50 g/kg)引起的W/D的升高(P＜0.05).结论:Glu通过激活NMDA受体可引起急性肺损伤.     

D—丝氨酸对大鼠小脑NMDA受体／NO／cGMP神经通路的调节作用

目的 :研究 D-丝氨酸对大鼠小脑 NMDA受体 /NO/c GMP神经通路的调节作用。方法 :采用清醒大鼠脑微透析技术 ,应用放免方法测定小脑透析液中 c GMP含量。结果 :小脑内局部灌流 NMDA可明显提高细胞外 c GMP水平。NMDA受体通道阻断剂 MK-80 1可明显对抗 NMDA引起的 c GMP反应。单独应用 NMDA对基础的 c GMP水平没有影响。D-丝氨酸可剂量依赖性加强NMDA2 0 0 μmol.L- 1 引起的 c GMP增加作用。单独应用 D-丝氨酸对基础的c GMP水平没有影响。结论 :说明内源性兴奋氨基酸对 NMDA受体激活作用很弱。也说明在小脑 NMDA受体的甘氨酸部位并没有完全饱和 ,应用选择性的甘氨酸部位的激活剂 D-丝氨酸可以调解 NMDA受体复合物的功能。     

大鼠孤束核内谷氨酸受体亚型对心脏伤害性感受信息的调控作用

目的：探讨大鼠孤束核(NTS)内谷氨酸受体亚型对心包内注射辣椒素诱发的心脏-躯体运动反射(CMR)的影响,阐明NTS对心脏伤害性信息调控的作用机制。方法：SD大鼠60只随机分为鹅膏蕈氨酸(IBO)组、谷氨酸组、5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸（MK-801）组、α-甲基,4-羧基苯丙氨酸（MCPG）组、MCPG联合MK-801组和6,7-二硝基喹喔啉-2,3-二酮（DNQX）组;各组大鼠孤束核内分别微量注射13 mmol•L^-1 IBO　100 nL,100、200、500 mmol•L^-1谷氨酸100 nL,NMDA受体拮抗剂 40和60 mmol•100•^-1 MK-801 100　nL,代谢型谷氨酸受体拮抗剂 25 和50 mmol•L^-1 MCPG 100 nL,25 mmol•L^-1MCPG 50 nL联合40 mmol•L^-1MK-801 50 nL,非NMDA受体拮抗剂20和50 mmol•L^-1 DNQX 100 nL;观察各组大鼠CMR的变化。结果：与对照组比较, IBO组大鼠CMR减少(P<0.05);谷氨酸组随着谷氨酸浓度的增加,大鼠CMR不断增加(P<0.05); MK-801和MCPG组CMR均减少(P<0.05); MCPG联合MK-801组CMR减少(P<0.05); DNQX组CMR无明显变化(P>0.05)。结论：NTS对心脏伤害性感受信息有易化调控作用,这种易化调节作用主要由NMDA和mGluRs受体介导。     

银杏叶提取物抗N-甲基-D-天冬氨酸受体介导兴奋毒性作用及机制研究

目的 观察银杏叶提取物(GBE)对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体过度激活导致海马神经元和脑损伤作用的影响并探讨其可能机制.方法 用锥虫蓝染色和乳酸脱氢酶(LDH)测定等方法评估GBE对海马神经元兴奋毒性损伤的影响,并运用全细胞膜片钳记录观察GBE对大鼠海马急性分离神经元NMDA受体激活电流的调制作用;以Longa评分、红四氮唑、神经元核蛋白和微管相关蛋白-2免疫组化染色等方法评估GBE对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用.以上GBE干预作用均与NMDA受体特异性拮抗剂MK-801作比较.结果 150μg/ml GBE预处理可有效地保护暴露于NMDA+甘氨酸的海马神经元,使细胞生存率提高到85.2%±5.2%,LDH漏出减少到87 U/L±8U/L,但此效应弱于MK-801(P＜0.05);预加0.1 mg/ml GBE可明显抑制由NMDA和甘氨酸共同作用能引起的内向电流(INMDA),抑制率为40%±17%,50 μmol/L MK-801的抑制率为78%±18%,两组差异有统计学意义(P＜0.01);用标准细胞外液进行冲洗后,GBE组INMDA可恢复至91%±8%,而MK-801组不能(P＜0.05).GBE预处理可有效缓解大鼠局灶性脑缺血损伤,其保护作用弱于MK-801(P＜0.05),但没有MK-801所引起大鼠严重的行为学毒性反应.结论 GBE预处理能对抗NMDA受体过度激活所致海马神经元毒性损伤和大鼠局灶性脑缺血损伤,可能与通过拮抗NMDA受体有关,此保护作用及其与NMDA受体结合力均弱于MK-801,无行为学毒性反应,使抗兴奋毒性临床干预成为可能.     

MK-801及CNQX 对尾末端截断后小鼠血清褪黑素含量变化的影响

 目的观察谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸（MK-801）、а-氨基3-羟基5-甲基4-异恶唑丙酸/海人藻氨酸（AMPA/Kainate）受体拮抗剂6-氰基-7-硝基喹喔啉-2,3-二酮（CNQX）对尾末端截断后小鼠血清褪黑素（MLT）含量变化的影响,为进一步研究截肢后中枢的可塑性变化提供依据。方法用ELISA 法测定尾末端2.5 cm截断后2 h小鼠血清MLT 含量,并观察静脉注射MK-801、CNQX 对断尾后小鼠血清MLT含量变化的影响。结果与对照组比较,断尾后2 h小鼠血清MLT含量降低;MK-801、CNQX 分别拮抗断尾引起的小鼠血清MLT 含量的降低。结论断尾后2 h小鼠血清MLT含量降低;NMDA受体、AMPA/Kainate 受体参与断尾引起小鼠血清MLT 含量降低的过程。     

外向钾电流在谷氨酸引起的神经元损伤中的作用

目的:探讨谷氨酸通过(NMDA)受体对外向钾电流的影响以及引起神经元损伤的作用机制?方法:以分离出的孕18 d SD大鼠胎鼠的皮层神经元作为实验对象,分为对照组和谷氨酸处理组,利用全细胞膜片钳的方法记录外向钾电流的变化,通过细胞形态学和TUNEL的方法分别观察谷氨酸处理后神经元的损伤情况?结果:谷氨酸能明显引起外向钾电流的增大,而NMDA受体抑制剂MK-801明显抑制由谷氨酸引起的外向钾电流的增大?形态学以及TUNEL实验研究表明,谷氨酸明显引起神经元的损伤(P < 0.01),而MK-801?钾通道抑制剂TEA以及高浓度的外钾溶液能明显减缓由谷氨酸引起的细胞损伤(P < 0.01)?结论:外向钾电流参与了谷氨酸引起的神经元的损伤,但其机制仍需进一步的探讨?     

应用NMDA受体拮抗剂MK-801治疗局灶性脑缺血的实验研究

目的:研究N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801对大鼠局灶性脑缺血模型的治疗作用和治疗时窗,为临床治疗提供依据.方法:采用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制成局灶性脑缺血模型.以[3H]噻吩环己哌啶([3H]TCP)为配基,采用宏观和微观放射自显影术观察不同时间缺血组和给药组NMDA受体通道的活性变化.结果:缺血前及缺血2 h内给予MK-801(0.8 mg/kg体重)可有效拮抗NMDA受体的过度激活.而缺血3 h后给药则无此作用.结论:MK-801对局灶性脑缺血的治疗时窗在3 h以前.     

腹侧被盖区微注射MK-801对大鼠吗啡戒断症状的影响

目的：研究中脑一边缘多巴胺回路腹侧被盖区(VTA)内源性谷氨酸信号转导在吗啡戒断形成中的作用．方法：给VTA微注射不同剂量谷氨酸NMDA受体拮抗剂( )MK-801,用行为学方法观察对吗啡戒断大鼠戒断症状的影响．递增量吗啡ip7d建立依赖模型,末次给药1．5hip盐酸纳洛酮(2mg／kg)诱发戒断症状,以Gellert-Hohzman Score和湿狗样颤为评价戒断症状程度的指标,进行统计学分析．结果：( )MK-801(2,5,10g／L)微注射于VTA可明显减弱吗啡戒断大鼠湿狗样颤的发生次数,且能显著降低吗啡戒断鼠的Gellert-Holtzman Score．结论：VTA内源性谷氨酸受体及其与中脑一边缘多巴胺能信号转导相互作用,参与吗啡戒断的形成,提示谷氨酸受体拮抗剂可用于吗啡戒断的治疗。     

地卓西平对局灶性脑缺血大鼠海马N-甲基-D-天门冬氨酸受体的影响

目的探讨地卓西平(Dizocilpine,MK-801)对局灶性脑缺血大鼠海马N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体的影响.方法线栓法研制大脑中动脉阻断(MCAO)大鼠模型, 观察MK-801对局灶性脑缺血大鼠神经功能缺损评分、梗死体积以及脑海马NMDA受体结合位点数的影响.结果 MK-801组缺血1、6、24小时各时相NMDA受体数量明显低于模型组;缺血24小时MK-801组神经功能缺损评分及梗死体积明显低于模型组(P<0.01).结论 MK-801对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用可能与下调脑缺血后兴奋性氨基酸受体结合位点数的上调有关.     

局部麻醉药对小鼠催眠作用的研究

目的:研究局部麻醉药的全身麻醉作用及其基本机制.方法:C57BL/6小鼠通过尾静脉分别注射利多卡因、布比卡因和罗哌卡因,同时使用或不使用氯胺酮、钠通道阻滞剂TTX和NMDA受体阻滞剂MK-801.通过翻正反射的消失(LORR)来评估这些药物对小鼠的催眠作用.结果:局部麻醉药利多卡因(15 mg/kg),布比卡因(5mg/kg),罗哌卡因(5 mg/kg)的全身应用均可产生直接的催眠作用,并达到其半数有效浓度(EC50).利多卡因可以增强氯胺酮的催眠作用(达到EC50的氯胺酮+利多卡因),表明了利多卡因和氯胺酮的联合使用可以增强其对小鼠的催眠作用.而钠通道阻滞剂不能改变利多卡因的催眠作用.NMDA受体阻滞剂(11-15 mg/kg)可增强并达到EC50利多卡因的LORR.结论:局部麻醉药可以产生直接的催眠作用,全身麻醉药氯胺酮可增强其麻醉效应,而钠通道阻滞剂则不能,NMDA受体阻滞剂可增强利多卡因的催眠作用.     

大剂量甲基强的松龙联合MK-801治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究

目的观察大剂量甲基强的松龙（MP）联合MK-801（地卓西平马来酸盐）对大鼠急性脊髓损伤的治疗效果。方法采用Allen的重物坠落法建立大鼠急性脊髓损伤模型,将72只致伤大鼠一次性随机分为4组,每组18只大鼠（其中每组又包括24h、72h、15d三个亚组,每个亚组6只大鼠）。对照组伤后0．5h腹腔注射5mL生理盐水;MP组伤后0．5h腹腔注射甲基强的松龙30mg／kg体重;MK-801组伤后0．5h腹腔注射2．5％MK-801（地卓西平马来酸盐）5mg／kg体重;联合组伤后0．5h腹腔注射甲基强的松龙和MK-801（剂量、浓度同前）。分别在伤后24h、72h、15d处死动物,观察受损部位脊髓的病理形态和细胞凋亡,其中15d组分别于第1、3、5、7、10、15天做Gales评分和斜板试验。结果甲基强的松龙、MK-801及联合组治疗大鼠急性脊髓损伤,在Gales评分、斜板试验及病理形态上、细胞凋亡检测与对照组相比都有很大提高,但三个治疗组在上述方面却处于同一水平。结论甲基强的松龙、MK-801及两药联合对大鼠急性脊髓损伤的治疗作用在目前的实验条件下无明显差异。     

Spinal cord protection: effect of N-methyl-D-aspartate receptor antagonist MK-801 for spinal cord ischemia in a rabbit model

Excitatory amino acids (glutamate, aspartate) play an important role in the ischemic cascade leading to cell death. The N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor is an excitatory amino acid (EAA) receptor, and NMDA receptor antagonists have been shown to exert a neuroprotective effect in central nervous system ischemia. The purpose of this study was to investigate the effects of noncompetitive NMDA receptor antagonists MK-801 and to observe the changes in EAAs after spinal cord ischemia in a rabbit model. Spinal cord ischemia was induced by clamping the infrarenal abdominal aorta for 24 min. Group 1 (n = 6) received no pharmacologic infusion. Group 2 (n = 5) was administered an intra-aortic hypothermic MK-801 (1 mg/kg) solution and group 3 (n = 6) was administered an intra-aortic normothermic MK-801 (2 mg/kg) solution immediately after clamping of the abdominal aorta. We evaluated the neurological function at 12, 24 and 48 hrs after spinal cord ischemia. A histopathologic study was carried out 72 hrs after spinal cord ischemia, and the results for groups 1 and 3 were compared. The glutamate and aspartate levels in the blood plasma were compared at pre-ischemia and at 12, 24, and 48 hrs among the groups. The perfusion of a normothermic MK-801 (2 mg/kg) solution significantly reduced the neurological dysfunction and the neuronal damage. There was a significant increase in aspartate at 24 and 48 hrs in group 1, but no such increase in glutamate occurred in groups 1 and 3. In conclusion, these data provide the evidence that therapeutic intervention with MK-801 (2 mg/kg) in the early period of spinal cord ischemia is beneficial in reducing neurological dysfunction and neuronal damage.     

齐墩果酸抑制地佐环平诱导的小鼠精神分裂症的实验研究

目的：观察齐墩果酸在NMDA受体拮抗剂地佐环平（MK-801）诱导的小鼠精神分裂样行为中的作用。方法：小鼠口服给予齐墩果酸,观察MK-801诱导的小鼠精神分裂样行为反应,包括旷场实验、听觉惊吓反射（ASR）实验和新物体识别反应。结果：MK-801处理的小鼠在旷场实验中表现出过度的兴奋性运动,而单次给予齐墩果酸阻断了这一作用。齐墩果酸本身对小鼠ASR或前脉冲抑制（PPI）没有影响,却可以减轻MK-801诱导的前脉冲缺陷。在新物体辨识实验中,单次给予齐墩果酸同样可以逆转MK-801诱导的小鼠注意力和识别记忆损伤。此外,齐墩果酸抑制MK-801对前额叶Akt、GSK3β信号通路的激活。结论：齐墩果酸可以作为治疗严重精神分裂症如阳性症状、感觉门控失调、意识损伤的候选药物。     

地卓西平对局灶性脑缺血大鼠海马N-甲基-D-天门冬氨酸受体的影响

目的　探讨地卓西平 (Dizocilpine ,MK 80 1)对局灶性脑缺血大鼠海马N 甲基 D 天门冬氨酸 (N methyl D asparticacid ,NM DA)受体的影响。方法　线栓法研制大脑中动脉阻断 (MCAO)大鼠模型 ,观察MK 80 1对局灶性脑缺血大鼠神经功能缺损评分、梗死体积以及脑海马NMDA受体结合位点数的影响。结果　MK 80 1组缺血 1、6、2 4小时各时相NMDA受体数量明显低于模型组 ;缺血 2 4小时MK 80 1组神经功能缺损评分及梗死体积明显低于模型组 (P <0 .0 1)。结论　MK 80 1对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用可能与下调脑缺血后兴奋性氨基酸受体结合位点数的上调有关。     

Propofol can Protect Against the Impairment of Learning-memory Induced by Electroconvulsive Shock via Tau Protein Hyperphosphorylation in Depressed Rats

Objective To explore the possible neurophysiologic mechanisms of propofol and N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor antagonist against learning-memory impairment of depressed rats without olfactory bulbs.
Methods Models of depressed rats without olfactory bulbs were established. For the factorial design in analysis of variance, two intervention factors were included: electroconvulsive shock groups (with and without a course of electroconvulsive shock) and drug intervention groups [intraperotoneal (ip) injection of saline, NMDA receptor antagonist MK-801 and propofol. A total of 60 adult depressed rats without olfactory bulbs were randomly divided into 6 experimental groups (n=10 per group):ip injection of 5 ml saline;ip injection of 5 ml of 10 mg/kg MK-801;ip injection of 5 ml of 10 mg/kg MK-801 and a course of electroconvulsive shock;ip injection of 5 ml of 200 mg/kg propofol;ip injection of 5 ml of 200 mg/kg propofol and a course of electroconvulsive shock;and ip injection of 5 ml saline and a course of electroconvulsive shock. The learning-memory abilities of the rats was evaluated by the Morris water maze test. The content of glutamic acid in the hippocampus was detected by high-performance liquid chromatography. The expressions of p-AT8Ser202 in the hippocampus were determined by Western blot analysis.
Results Propofol, MK-801 or electroconvulsive shock alone induced learning-memory impairment in depressed rats, as proven by extended evasive latency time and shortened space probe time. Glutamic acid content in the hippocampus of depressed rats was significantly up-regulated by electroconvulsive shock and down-regulated by propofol, but MK-801 had no significant effect on glutamic acid content. Levels of phosphorylated Tau protein p-AT8Ser202 in the hippocampus was up-regulated by electroconvulsive shock but was reduced by propofol and MK-801 alone. Propofol prevented learning-memory impairment and reduced glutamic acid content and p-AT8Ser202 levels induced by electroconvulsive shock.
Conclusion Electroconvulsive shock might reduce learning-memory impairment caused by protein Tau hyperphosphorylation in depressed rats by down-regulating glutamate content.     

5-HT2A/D2 受体平衡拮抗剂NH809抗精神分裂症作用的初步研究

目的：考察5-HT2A/D2 受体平衡拮抗剂NH809 体内抗精神分裂症药理学作用。方法：采用地卓西平马来酸盐（0.3 mg·kg^-1,ip）诱发小鼠高活动模型、阿扑吗啡（1 mg·kg^-1,sc）诱导小鼠攀爬模型及大鼠条件回避反应（conditioned avoidance response,CAR）实验,评估NH809 体内抗精神分裂症的作用,并与阳性药利培酮进行比较。结果：在地卓西平马来酸盐诱发小鼠高活动模型、阿扑吗啡诱导小鼠攀爬行为及大鼠条件回避反应体内动物 模型上,NH809 具有剂量相关的抑制作用,其ED50 分别为0.04、0.05 和0.24 mg·kg^-1;利培酮在这三个模型上的ED50 分别为0.06、0.68 和0.60 mg·kg^-1。结论：NH809 对多个精神分裂症动物模型具有显著的药理学作用,且体内活性优于利培酮。     

甲基强的松龙对大鼠损伤脊髓BDNF、NMDA受体表达及神经行为学的影响

目的研究甲基强的松龙(MP)对脊髓损伤大鼠神经行为学、脑源性神经营养因子(BDNF)和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达的影响。方法建立脊髓损伤(SCI)大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、SCI组和MP治疗组,每组16只。MP治疗组在SCI术后8h内肌注50mg/kg MP,此后肌注量每天减少10mg/kg,1次/d,共5d。各组取8只大鼠在术后1d、7d、28d行后肢运动功能BBB评分,并于术后28d用免疫组织化学染色观察各组BDNF在脊髓的分布、阳性细胞定位及数量变化;术后13d用[3 H]MK-801放射性配基测定各组另8只大鼠脊髓中NMDA受体亲和力(Kd)和最大结合容量(Bmax)。结果 SCI后MP治疗组中BDNF阳性细胞数较SCI组增加(P<0.05),但亚细胞定位仍分布在细胞浆,且BBB评分亦较SCI组高;NMDA受体Kd高于SCI组,Bmax较SCI组低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MP能改善脊髓损伤大鼠后肢功能,增加BDNF含量和降低NMDA受体表达。     

颈交感神经阻滞对放烧复合伤小鼠HPA轴的调节及相关机制研究

目的 探讨颈交感神经阻滞(SB)对放烧复合伤小鼠HPA轴的调节及可能机制.方法 TBSA15%Ⅲ度烧伤合并5 Gy放射损伤小鼠分为:对照组、放烧复合伤组及伤后SB治疗组,比较各组血清糖皮质激素(GC)及ACTH浓度的差异;同时利用膜片钳技术检测各组间海马NMDA受体通道特性的变化.另外,将腹腔注射足量NMDA受体阻断剂MK-801的小鼠分为:放烧复合伤组、伤后SB治疗组,比较两组血清GC及ACTH浓度的差异.结果 放烧复合伤后血GC及ACTH水平显著升高,SB治疗组血GC和ACTH水平显著底于放烧复合伤组.SB组海马NMDA受体通道开放概率、开放时间常数τ1、τ2虽然高于对照组,但显著低于放烧复合伤组.足量MK-801预处理的放烧复合伤组与SB组之间的血清GC和ACTH水平无显著差异.结论 SB通过降低NMDA受体的活性,抑制了严重创伤(放烧复合伤)小鼠HPA轴的亢进.     

银杏叶提取物对MK-801致精神分裂症小鼠模型的影响*

目的: 观察银杏叶提取物对精神分裂症小鼠模型行为学的影响。方法: 将雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、银杏叶提取物低、中、高剂量组,共6组各11只。实验第1天开始,除空白组外每组进行腹腔注射同剂量MK-801(0.3 mg/kg)制备精神分裂症小鼠模型,同时,阳性药组腹腔注射利培酮,银杏叶提取物组灌胃银杏叶提取物,1次/d,给药15 d,末次给药后1 h,进行行为学检测,Morris水迷宫实验(学习记忆)、旷场实验(阳性症状)、强迫游泳实验(阴性症状)。结果: Morris水迷宫实验中,与空白组相比,模型组小鼠的逃避潜伏期增多、穿越平台次数减少,阳性药组和银杏叶提取物中、高剂量组与模型组相比,小鼠逃避潜伏期显著缩短,小鼠穿越平台次数显著增多,差异具有统计学意义(P＜0.05)。旷场实验中,与空白组相比,模型组小鼠运动总路程显著升高,与模型组相比,银杏叶低、中、高剂量组均使小鼠的自主活动升高,差异具有统计学意义(P＜0.05)。强迫游泳实验中,与空白组相比,模型组小鼠不动时间显著延长,与模型组相比,阳性药及银杏叶低、中、高剂量组小鼠不动时间显著缩短(P＜0.01)。结论: 银杏叶提取物能改善用MK-801制备的精神分裂症小鼠模型阴性症状和认知功能障碍,不能改善精神分裂症小鼠模型的阳性症状,可能与银杏叶提取物对小鼠脑内神经递质(DA、NE、5-HT)的影响有关。