妊高征患者脐静脉壁形态结构及顺应性变化

目的 :探讨妊高征患者脐静脉壁的形态学改变。方法 :37例新鲜脐带 ,常规石蜡包埋、切片、苏木精和伊红染色法染组织结构 ;Weigert,AnilineBlue及桔黄G分染弹性纤维、胶原纤维和平滑肌 ,光镜观察及计算机图像分析。结果 :妊高征患者中膜厚度、细胞核的数密度和面密度增大 ( P <0 .0 5) ,弹性纤维和胶原纤维含量增多 ,C/E值大 ,因而顺应性差。结论 :妊高征患者脐静脉管壁中各成分的含量呈不等比增大 ,血管顺应性较差     

人冠状动脉内、中膜平滑肌细胞核体密度的年龄性变化

目的 :探讨人冠状动脉内膜、中膜平滑肌细胞核 (smoothmusclecellnuclei,SMCN)体密度的年龄性变化。方法 :应用常规石蜡切片 ,Verhoeff氏铁苏木精 -VanGieson染色 ,对 33例 15岁～ 5 0岁正常男性左冠状动脉前室间支(以下简称冠状动脉 )内膜、中膜SMCN体密度进行了图像定量分析。结果 :正常男性冠状动脉SMCN体密度的年龄性变化不明显 ,但 31岁以后的同年龄段内膜、中膜不同部位间SMCN体密度有显著性差异 ,其中内膜高于中膜 ,31～岁 (P <0 .0 5 ) ,41～ 5 0岁 (P <0 .0 1)。结论 :正常男性冠状动脉壁平滑肌细胞的增殖能力与年龄无明显关系 ;31岁以后的同年龄段内膜中平滑肌细胞的增殖能力强于中膜。     

胎儿角膜发育规律及其组织学观察

对47例12周至足月新生儿眼球的组织学进行了观察,结果角膜上皮在12周～6个月为2层,7～8个月为2～3层,9～10个月为3～4层,新生儿为3～5层;内皮均为1层,其总数随胎龄增加而增多;前、后弹力膜在12周时均已形成,随胎龄增长而增厚;基质层:细胞成分随胎龄的增加而减少;前1/4～1/3细胞成分较后1/4～1/3部为多;周边与中央细胞成分无明显差异;前1/3部纤维排列较后2/3乱;细胞核随胎龄的增长由圆形逐渐变为与角膜纤维方向一致的长梭形。     

自体移植静脉平滑肌细胞凋亡与增殖关系的实验研究

目的 :探讨移植静脉狭窄的机制。方法 :建立 10 0只 Wistar大鼠自体颈静脉移植于肾下腹主动脉模型。应用 DNA原位缺口末端标记及免疫组织化学 SP法 ,检测术后 1～ 8周移植静脉平滑肌细胞的凋亡和增殖细胞核抗原的表达。结果 :术后 1～ 8周移植静脉平滑肌细胞凋亡及增殖均高于对照静脉 (P <0 .0 1) ;术后 1～ 2周 ,凋亡低于增殖 ,术后 4～ 8周凋亡高于增殖 ,凋亡与增殖具有相关性 (r=0 .813,P <0 .0 5 )。结论 :移植静脉平滑肌细胞凋亡和增殖失衡与移植静脉的狭窄有关 ,防治移植静脉狭窄应调节增殖与凋亡的平衡。     

血管内皮生长因子在血管外支架预防移植静脉再狭窄中的作用

目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)在血管外支架预防移植静脉再狭窄中的作用及不同管径材料外支架的作用效果。方法:通过动物实验获得外支架干预下的移植静脉及其对照标本,用免疫组化及形态学方法对标本中的VEGF、增殖细胞核抗原(PCNA)及滋养血管的表达进行检测、分析。结果:与对照组相比,外支架干预的移植静脉组中膜VEGF含量显著降低(P<0.05),而外膜VEGF含量显著增高(P<0.05),中膜PCNA含量显著降低(P<0.05),外膜滋养血管密度显著增高(P<0.05)。结论:血管外支架可有效促进VEGF向外膜聚集,减少其在中膜、内膜聚集,进而促进滋养血管的生长,减少中膜增生,减轻再狭窄。     

局部缓释秋水仙素抑制移植血管内膜增殖的研究

目的 :观察局部缓释秋水仙素 (colchicine ,COL)对移植血管内膜增生的抑制程度。方法 :采用大鼠自体静脉移植模型 ,外涂含不同浓度COL的Pluronic胶 ,于术后 14d处死取材 ,行HE ,Verhoeff弹力纤维染色、增殖细胞核抗原 (proliferatingcellularnuclearantigen ,PCNA)免疫组化染色 ,测量内膜厚度、内膜与中膜面积比、PCNA阳性细胞百分比 ,用流式细胞仪计数各期细胞百分比 ,观察不同浓度COL对内膜及平滑肌细胞增殖的抑制程度。结果 :血管移植术后 14d ,对照组的内膜厚度、内膜面积与中膜面积比 ,与高浓度组、中浓度组、低浓度组相比 ,差异显著(P <0 .0 5 )。PCNA阳性细胞数在各组之间相互比较 ,差异显著 (P <0 .0 5 )。流式细胞仪分析 ,从高浓度组、中浓度组、低浓度组到对照组 ,G0 G1、S期细胞所占比例逐渐减少 ,G2 M期细胞所占比例逐渐增多 (P <0 .0 5 )。结论 :局部缓释COL具有抑制移植血管内膜及平滑肌细胞增殖的作用。COL抑制血管内膜增殖作用与其剂量呈剂量—效应关系。COL可使平滑肌细胞停止在分裂中期 ,抑制其进入下一个增殖周期 ,从而抑制移植血管内膜及平滑肌细胞增殖的作用。     

不同浓度β-甘油磷酸盐对人脐静脉平滑肌细胞钙化的影响

目的 探寻β-甘油磷酸盐诱导原代培养人脐静脉平滑肌细胞(HUSMC)钙化的适宜浓度.方法 采用原代培养人脐静脉平滑肌细胞,根据培养液中β-甘油磷酸盐浓度不同依次分为8组:正常对照组、10mM组、12mM组、14 mM组、16 mM组.以更换培养液当天记为第1天,培养10d,von kossa染色观察细胞钙沉积情况、显微图像分析法测量钙化阳性细胞百分比、比色法检测细胞内钙含量和碱件磷酸酶活性.结果 对照组SMC银染无钙结节,显微图像分析阳性细胞为(0.1060±0.05)%;12mM组SMC银染可见明显钙结节存在,钙化阳性细胞数为(4.7009±1.35)%,钙含量和碱性磷酸酶活性较对照组明显升高(P<0.05).10mM组、16mM组、20mM组、30mM组与对照组相比钙含量和碱性磷酸酶活性差异无统计学意义(P>0.05),但10mM组、16mM组钙化阳性细胞百分比升高明显(P<0.05),20mM组、30mM组与对照组相比钙化阳性细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05);40mM组钙含量和碱性磷酸酶活性明显降低(P<0.001),灰度扣描钙化阳性细胞随之降低.结论 12mM β-甘油磷酸盐可刺激人脐静脉平滑肌细胞出现钙盐沉积,且人脐静脉SMC钙化对β-甘油磷酸盐尤浓度依赖性.     

体外温热刺激对脐静脉血管内皮细胞线粒体及三磷酸腺苷含量影响的实验研究

目的：研究体外适宜温度刺激对人脐静脉血管内皮细胞线粒体及三磷酸腺苷（ATP）含量变化的影响,探讨灸法中温热刺激温阳作用的能量转换机制.方法：选取原代人脐静脉血管内皮细胞进行体外培养,分为体外适宜温度刺激组（40℃）和正常组（37℃）,体外适宜温度刺激组40℃持续刺激30min,每天2次,共刺激3天;第3天刺激结束4～6小时后用詹纳斯绿B活染法观察细胞线粒体变化,高效液相色谱法检测人脐静脉血管内皮细胞ATP含量.结果：适宜温度40℃组与正常组37℃比,人脐静脉血管内皮细胞线粒体数量增多,细胞内ATP含量升高（p＜0.01）.结论：体外适宜温度刺激后能够促进人脐静脉血管内皮细胞的线粒体增长,提高脐静脉血管内皮细胞代谢的能量物质,从而为灸法的温阳作用提供了实验依据.     

不同胎龄脐带动脉顺应性的变化及其临床意义

目的 :为脐带动脉的临床应用从生物力学性质上提供理论依据。方法 :采用胎龄在 2 4～42周引产及自然分娩正常胎儿脐带动脉 40例 ,测定其压力———容积关系 ,并求出其顺应性。结果 :发现脐带动脉的P—V曲线也可用抛物线来拟合。获得了脐带动脉顺应性随胎龄增加而增大 ,但 39周以后又降低的变化规律。结论 :脐带动脉是动脉移植物的良好替代材料 ,在移植时除了考虑脐带动脉与宿主动脉顺应性相匹配外 ,还应注意其顺应性与胎龄的关系 ,最好选用胎龄在 37～ 40周之间的脐带动脉作为移植材料     

慢性静脉高压促发静脉重塑的实验研究

目的研究后肢慢性静脉高压大鼠股静脉组织结构的动态变化.方法HE、Masson、弹力纤维三染色方法结合图像分析技术,研究静脉高压大鼠股静脉的组织学改变;用透射电镜技术,研究股静脉超微结构改变.结果2～16周时,实验组静脉管壁较对照组显著增厚(P＜0.05),实验组内各时间组间静脉管壁厚度差异显著(P＜0.05);实验组股静脉内中膜比值(I/M%)显著增加(P＜0.05),实验组内各时间组间I/M%差异显著(P＜0.05);实验组和对照组在各时间组的胶原含量和平滑肌含量百分比无显著差异(P＞0.05),对照组内、实验组内各时间组间均无显著差异(P＞0.05).4～16周时,实验组和对照组大鼠股静脉壁单位面积(5 000 μm2)、平滑肌细胞核数和平滑肌细胞直径均差异显著,实验组内各时间组间差异显著(P＜0.05).超微结构观察,实验组平滑肌细胞肥大,向内膜下移行,由收缩型向合成型转化,胶原纤维增生.结论后肢慢性静脉高压可促使股静脉重塑.     

胎儿脐静脉分支的解剖学观测

目的观测胎儿脐静脉的分支,探讨脐静脉血入肝及经静脉导管的流量。方法选择62例经福尔马林固定的正常胎儿肝脏,解剖显露脐静脉各分支,洲其压扁管径,并换算成各管腔的截面积;记录脐静脉各肝叶分支数及分支类型。结果胎儿脐静脉入肝分支的截面积和大于静脉导管的截面积,两者的差异有高度显著性（P＜0．001）。入肝在叶分支之截面积和占整个入肝分支截面积的69％。入肝左叶、方叶和尾状叶分支,数的分别为3支、3支和1．3支。结论胎儿脐静脉血大部分经肝脏至下腔静脉,只有一小部分经静脉导管。经肝脏的脐静脉血有2／3以上经肝左叶。     

组织块重复贴壁使用在原代细胞培养中的实验意义

目的旨在提高采用人脐静脉组织块贴壁法进行平滑肌细胞原代培养组织块的重复利用率,进而缩短采用细胞培养进行实验的培养周期。方法以改良人脐静脉平滑肌细胞贴壁培养法为基础,当原代培养细胞(对照组)进行第1次细胞传代后,将培养组织块再次接种于新培养瓶中继续培养(实验组),分别记录两组细胞爬出时间、第1次传代时间、以及第1次传代后24、48、72、96h的细胞计数,通过倒置显微镜对两组细胞进行形态学观察,采用抗α-actin免疫细胞化学方法,对两组传代细胞的类型和性质进行鉴定。结果与对照组比较,实验组细胞爬出时间及第1次传代时间均明显缩短(P<0.05);两组第1次传代后24、48、72、96h细胞计数差异均无统计学意义(P>0.05);两组细胞形态经α-actin鉴定差异无统计学意义。结论人脐静脉组织块重复贴壁培养后,经传代其细胞数量、细胞形态与原代组织块贴壁培养的细胞差别均无统计学意义。     

分娩方式对新生儿脐血儿茶酚胺水平的影响

目的 比较不同分娩方式对新生儿脐动、静脉血浆儿茶酚胺类激素水平的影响.方法 新生儿共150例,分为正常新生儿组(90名)及胎儿窘迫组(60例).再根据分娩方式的不同分为5组,各30例,分别为阴道分娩组、分娩镇痛组、择期剖宫产组、阴道助产组(施行低位产钳助产术)和急诊剖宫产组.于胎儿娩出断脐后立即采集脐动、静脉血各3 ml,分别置于抗凝管中,即刻离心,分离血浆,采用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法分别测定血浆去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素及多巴胺的水平.结果 (1)各组脐动脉血NE及肾上腺素水平差异均有统计学意义(均P＜0.01),其中阴道助产组最高[(73±6) ng/L,(37.8±1.8)ng/L],其次为急诊剖宫产组、阴道分娩组及分娩镇痛组,择期剖宫产组最低[(35±5)ng/L,(27.2±1.2) ng/L].多巴胺水平阴道助产组[(33.7±4.5) ng/L]及急诊剖宫产组[(32.9±4.5) ng/L]高于其他各组,差异均有统计学意义(均P＜0.01);(2)各组脐静脉血NE及肾上腺素水平差异均有统计学意义(均P＜0.01),且高低顺序与脐动脉一致.阴道助产组及急诊剖宫产组多巴胺水平比其他各组高,差异均有统计学意义(均P＜0.01).(3)无论脐动、静脉,胎儿窘迫组NE、肾上腺素、多巴胺水平均高于正常新生儿组,差异有统计学意义(P＜0.01),胎儿窘迫组生后1、5 及10 min Apgar评分均低于正常新生儿组,差异有统计学意义.结论 对于无剖宫产指征的个体,阴道分娩可提高新生儿脐血儿茶酚胺类激素的水平,分娩期自控硬膜外镇痛可抑制新生儿应激反应;与正常新生儿相比,胎儿窘迫者脐血儿茶酚胺水平较高,既是新生儿提高自身对缺氧耐受力的表现,也是其缺氧状态的客观反映.     

Prenatal cytogenetic diagnosis study of 2782 cases of high-risk pregnant women

Background Prenatal diagnoses are extremely advantageous for pregnant women with high-risk indicators and can help prevent the birth of malformed infants. However, no large-scale statistical study analyzing the correlation between fetal chromosome disorders and abnormal indicators during pregnancy has been done in China. The objectives of this study were to diagnose and analyze fetal chromosome abnormalities, determine the feasibility of the various prenatal test methods and establish diagnostic guidelines for the early, middle, and late trimesters. Methods From January 2004 to May 2009, 2782 pregnant women at high-risk underwent prenatal diagnoses. Categorized data expressed as either actual counts or percentages were analyzed by the chi-square or Fisher＇s exact test. Chorionic villus sampling was performed in the early-trimester （10-12 weeks of gestation）, amniocentesis in mid-trimester （16-28 weeks of gestation）, and umbilical cord blood collection in mid- or late-trimester （16-37 weeks of gestation）. In 51 cases either autopsy samples from intrauterine fetal deaths or placental tissues from aborted fetuses were tested. Results Chromosomal abnormalities were observed in 3.99% （111/2782） of the samples. Overall, the success rate of cytogenetic analysis for high-risk pregnancy groups was 98.17% （2731/2782）. It was significantly less successful when used to analyze data from the chorionic villus sampling compared with that from amniocentesis and umbilical cord blood （P=-0.000）. Abnormal chromosome carriers had the highest percentage of abnormal chromosomes （67.86%） when compared with chromosomal abnormalities in patients with ultra-sonographic ＂soft markers＂ （11.81%）, advanced maternal age （4.51%） and those who had positive serum screening results （P=-0.000）. Conclusions Invasive prenatal diagnostic techniques are feasible tools for confirming fetal chromosomal abnormalities. Abnormal chromosomes detected in one of the parents carrying abnormal chromosome, ultrasound soft markers, advanced maternal age or positive serum screening results were associated with a higher frequency of fetal genetic diseases.     

大鼠自体静脉移植后内膜增生与平滑肌细胞增值

研究大鼠颈外静脉移植入颈总动脉后内膜增生（IH）的发病机制。应用组织切片的特殊染色，单克隆抗PCNA抗体及抗Dm抗体的免疫组化方法观察IH的发生过程。结果：①术后1d移植静脉的内膜消失，术后2d出现IH并逐渐增生，IH中可见大量平滑肌细胞（SMC），术后12周IH的面积与术后18周元显著差异；②IH中SMC的Dm呈阳性；③IH中SMC的PCNA指数于术后2d骤然升高，术后2周达高峰。结论：IH发生在移植术后2d，逐渐增厚至术后12周方停止，术后早期发生的IH是由中膜的SMC移行至内膜并增殖所致。SMC增殖的高峰在术后第2周。     

过氧化氢对人脐静脉内皮细胞白细胞介素-37表达的影响

目的:研究过氧化氢人脐静脉内皮细胞（H₂O₂）对白细胞介素（IL）-37表达的影响。方法:用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测经系列浓度H₂O₂作用不同时间的人脐静脉内皮细胞中IL-37 mRNA和蛋白水平的变化。结果:实时荧光定量PCR结果显示:不同浓度H₂O₂作用人脐静脉内皮细胞后,IL-37 mRNA水平升高,并呈浓度依赖（P<0.01）。Western blot结果表明,H₂O₂作用人脐静脉内皮细胞20 h后,IL-37蛋白水平较对照组显著升高（P<0.01）。结论:H₂O₂能够上调人脐静脉血管内皮细胞IL-37的表达,为进一步研究IL-37在细胞氧化应激状态下的作用奠定了一定基础。     

联合应用脐动脉血流仪、无负荷试验及B超监测产前脐带缠绕

目的探讨彩色多普勒脐动脉血流仪(CDFI)、无负荷试验(NST)及B超检查3种方法联合使用,对产前脐带缠绕的预测价值.方法对1860例孕周为37～42周的孕妇于产前1～2周内联合应用CDFI、NST及B超进行监测,筛查胎儿有无脐带缠绕.结果脐带缠绕发生率为23.23%(432/1860),阳性预测值及阴性预测值分别为95.4%(412/432)及98.6%(1408/1428),准确率为97.8%(1820/1860).脐带缠绕并不增加新生儿低评分危险,脐带绕身绕四肢组胎儿宫内窘迫发生率为85.29%(29/34);剖宫产率为88.28%(30/34);而脐带绕颈组胎儿宫内窘迫发生率为13.06%(52/398),剖宫产率为44.94%(178/398).脐带绕身绕四肢组胎儿宫内窘迫及剖宫产率明显高于脐带绕颈组(X2分别为107.27、23.76,P＜0.001),脐带绕颈组脐动脉血流收缩期与舒张期峰值比值基本波动于正常范围.在胎心监护中,脐带缠绕多以变异减速波型表现,其次为早期减速(ED)、NST无反应及催产素激惹试验(OCT)出现晚期减速(LD),脐带绕身绕四肢者还出现延长减速(PD)波型.结论联合应用CDFI、NST及B超对孕妇进行监测,对脐带缠绕的诊断具有重要辅助价值,能显著提高诊断阳性率,为分娩方式的选择提供有价值的参考.     

超声血管增强技术在胎儿肺静脉检查中的应用

目的对超声血管增强技术（VET）在胎儿肺静脉检查中的应用价值进行探析和评价。方法选取2011年7月～2012年11月在我院行产前超声检查的孕妇368例,根据孕龄将368例胎儿肺静脉分为Ⅰ组（14～21周,104例）、Ⅱ组（22～29周,213例）和Ⅲ组（30～37周,51例）;对所有孕妇均进行四种方式的肺静脉检查,包括二维超声心电图（2-DE）、彩色多普勒血流显像（CDFI）、彩色多普勒能量图（CDE）和VET,对检查结果进行对比分析,同时比较四种方法在不同孕龄组中的应用效果。结果Ⅰ组104例中2-DE、CDFI、CDE和VET分别显示17例（16.3%）、35 例（33.7%）、46 例（44.2%）和 87 例（83.7%）; Ⅱ组 213 例中 2-DE、CDFI、CDE 和 VET 分别显示46 例（21.6%）、99 例（45.8%）、112 例（52.6%）和 197 例（92.5%）; Ⅲ 组 51 例中 2-DE、CDFI、CDE 和 VET 分别显示16例（31.4%）、31例（60.1%）、30例（58.8%）和32例（62.7%）。四种检查方式中VET显示率最高,且VET检查II组显示率明显增加,差异具有统计学意义（P〈 0.05）。结论VET在胎儿肺静脉的检查中具有更高的显示率,且结果表明胎儿肺静脉检查的最佳时间是中孕期。为胎儿肺静脉临床检查提供了一些可靠依据。