MiR-105抑制肝癌细胞增殖能力的实验研究

目的 探讨miR-105对人肝癌细胞增殖的影响及可能机制.方法 改变QGY-7703及HepG2两种细胞的miR-105表达,细胞克隆形成实验和软琼脂增殖试验检测细胞增殖能力的改变;流式细胞仪检测细胞周期改变.结果 细胞克隆形成和软琼脂增殖实验显示,过表达miR-105可抑制QGY-7703及HepG2细胞增殖,反之抑制miR-105表达则促进细胞增殖;细胞流式检测显示miR-105过表达能促进两种癌细胞G0/G1期阻滞.结论 miR-105抑制肝癌细胞增殖,其机制与引起细胞周期阻滞有关.     

乌苯美司诱导肾癌细胞死亡的作用及机制

目的 观察乌苯美司对肾癌细胞增殖及死亡的影响并探讨其可能机制。方法 利用WST-8细胞增殖实验及细胞生长曲线检测乌苯美司对肾癌细胞增殖能力的影响;LDH释放实验检测乌苯美司对肾癌细胞死亡的影响;酶活性测定法及Western blotting研究乌苯美司诱导肾癌细胞APN活性及表达;Western blotting及免疫组化染色观察乌苯美司的作用靶点氨肽酶N(APN)/CD13在肾癌组织及正常组织中的表达。结果 乌苯美司不能降低肾癌细胞中APN的表达但是可以抑制其活性;乌苯美司可抑制肾癌细胞增殖及活力,诱导细胞自噬性死亡。结论 乌苯美司可抑制肾癌细胞增殖,并可通过诱导自噬引发肾癌细胞死亡。     

细胞增殖的检测方法

细胞增殖一直是生物医学领域研究的热点之一,细胞增殖的检测方法种类繁多,目前主要分为以下几类：代谢活性检测有MTT法、XTT法、MTS法、WST-1法、CCK-8法、CFDA-SE法、AlamarBlue及PrestoBlue法;DNA合成检测有³H-TdR掺入法、BrdU法及EdU法;细胞增殖相关抗原检测有PCNA和Ki67。本文就细胞增殖的各种检测方法及各自的优缺点做一综述,以期为科研及临床工作者提供一定的参考。     

食管癌癌变过程中的细胞凋亡及其与细胞增殖的关系

目的定量检测食管癌癌变过程中细胞凋亡及细胞增殖状况、井分析两者在食管癌癌变过程中的相关性及生物学意义。材料与方法食管癌标本７１例,分别作病理组织学诊断、ＴＵＮＥＬ检测凋亡、免疫组化检测Ｋｉ－６７的表达以观察细胞增殖状况。结果食管癌癌变过程中细胞增殖指数及细胞凋亡指数均逐渐升高．两者呈正相关;在食管浸润癌中,随着癌分化程度的降低,细胞增殖指数继续增高,而细胞凋亡指数逐渐降低,两者呈负相关。结论细胞凋亡贯穿了食管癌发生发展全过程,在食管癌癌变过程中,细胞凋亡与细胞增殖密切相关。     

苦参素对成纤维细胞增殖及Ⅲ型原胶原mRNA表达的影响

目的;研究甘参素对成纤维细胞增殖及Ⅲ型原胶原ｍＲＮＡ表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法：用ＭＴＴ法及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分别检测ＮＩＨ ３Ｔ３成纤维细胞增殖及型原胶原ｍＲＮＡ的表达。结果：苦参素能明显抑制成纤维细胞增殖及Ⅲ型原胶原ｍＲＮＡ的表达,并呈剂量依赖性。     

Gardiquimod对HaCaT细胞增殖的影响

目的探讨Gardiquimod对HaCaT细胞增殖的影响及其可能的机制。方法培养HaCaT细胞,以不同剂量的Gardiquimod经不同的时间刺激HaCaT细胞,MTT比色法及流式细胞术分析Gardiquimod对HaCaT细胞增殖的影响。Western-blot-ting分析Gardiquimod在HaCaT细胞中激活的信号通路。结果 MTT比色法及流式细胞分析结果显示:Gardiquimod促进HaCaT细胞增殖,且具有时间及剂量依赖性;信号通路分析揭示Gardiquimod能够增加信号通路AKT的磷酸化水平。结论 Gardiquimod能够促进HaCaT细胞增殖并激活PI3K-AKT信号。     

海马培养上清与海马内注入西洋参总甙对胸腺细胞的增殖效应

本研究探讨了大鼠海马培养上清、海马提取物及海马内注入 PNS对免疫细胞增殖反应的影响。结果表明,海马培养上清可显著促进胸腺细胞增殖;海马提取物对大鼠胸腺细胞增殖在一定浓度有促进效应;海马内注入PNS能促进胸腺及脾脏细胞的增殖。提示海马参与免疫调节。     

苦参碱对小鼠免疫功能的影响

目的:观察苦参碱对小鼠脾淋巴细胞增殖和释放白细胞介素-2(IL-2)及腹腔巨噬细胞释放白细胞介素-1(IL-1)的影响.方法:溴化四唑蓝比色法测定脾淋巴细胞增殖,胸腺细胞增殖法和溴化四唑蓝比色法测定IL-1、IL-2活性.结果:苦参碱可明显抑制ConA和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖及ConA诱导的小鼠脾细胞释放IL-2,对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞释放IL-1亦有一定的抑制作用.结论:苦参碱可抑制体外培养小鼠脾淋巴细胞增殖和释放IL-2及腹腔巨噬细胞释放IL-1.     

辛伐他汀对脂蛋白所致大鼠系膜细胞增殖及基质合成的影响

目的:观察辛伐他汀对脂蛋白所致肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响。方法:流式细胞术及MTT法测定不同浓度低密度脂蛋白(LDL)、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)刺激系膜细胞增殖,ELISA法测定上清中纤维连结蛋白(FN)含量。同时测定加入不同浓度辛伐他汀作用不同时间后,上述细胞增殖及FN含量。结果:(1)流式细胞术及MTT检测结果提示LDL、OX-LDL可刺激系膜细胞增生及细胞培养上清中FN的分泌。(2)辛伐他汀能明显抑制脂蛋白刺激的系膜细胞增殖及培养上清中FN的分泌,且呈时间、剂量依赖关系。结论:辛伐他汀能显著抑制脂蛋白所致的系膜细胞增殖和培养上清中FN的分泌,可能与其非降脂的肾保护作用有关。     

槲皮素联合奥曲肽对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响

目的研究槲皮素联合奥曲肽对人乳腺癌细胞增殖的影响.方法槲皮素联合奥曲肽作用于体外培养的人乳腺癌细胞株MCF-7,MTT法检测细胞增殖状况,流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率,免疫细胞化学法检测生长激素、胰岛素及端粒酶的表达.结果槲皮素与奥曲肽在较高浓度水平联用抑制MCF-7细胞增殖.结论槲皮素联合奥曲肽对MCF-7细胞增殖具有抑制作用,其机制与阻滞细胞周期,抑制生长激素、胰岛素及端粒酶的表达有关.     

玉屏风散对小鼠免疫功能的影响

目的： 探讨玉屏风散对机体免疫功能的影响及其机制。方法： 本文实验观察了不同剂量玉屏风散对小白鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能、ＰＦＣ、淋巴细胞增殖及ＡＤＣＣ的影响。结果： 玉屏风散对巨噬细胞吞噬功能、抗体生成及ＡＤＣＣ等各项指标均有较强的促进作用。结论： 玉屏风散是一广泛用于临床的免疫增强调节剂。     

含红芪、黄芪玉屏风散对SAMP8小鼠脾淋巴细胞活化影响

目的比较研究含红芪或黄芪玉屏风散对快速老化模型(SAMP8)小鼠脾淋巴细胞活化的影响。方法体外实验分别以含黄芪玉屏风散、含红芪玉屏风散及等体积生理盐水灌胃青龄小鼠14d制备含药血清,将含药血清与SAMP8小鼠脾淋巴细胞共培养。体内实验分别以含黄芪玉屏风散、含红芪玉屏风散、胸腺肽溶液及等体积生理盐水灌胃SAMP8小鼠14 d后取血和脾脏制备成血清及脾淋巴细胞悬液。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养上清液及血清中的肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,实时荧光定量PCR检测脾淋巴细胞中CD28分子、p38MAPK mRNA表达及蛋白质印迹法(Western blot)检测其蛋白表达。结果与空白血清组及生理盐水组比较,含药血清组上清液及血清中TNF-α含量均增高,脾淋巴细胞中CD28分子、p38MAPK mRNA及其蛋白表达量均增高。其中体外实验中含红芪玉屏风散组TNF-α含量及CD28分子、p38MAPK mRNA表达均高于含黄芪玉屏风散组(P0.01),体内实验中含黄芪玉屏风散组TNF-α含量高于含红芪玉屏风散组(P0.05),含红芪玉屏风散组CD28分子、p38MAPK mRNA表达均高于含黄芪玉屏风散组(P0.05),中药组效果均不及胸腺肽组(P0.05)。结论含红芪或黄芪的玉屏风散对SAMP8小鼠脾淋巴细胞的活化均具有增强作用,起到一定的抗免疫老化作用。     

加味止嗽散治疗喉源性咳嗽临床观察

目的：观察古方止嗽散加味治疗喉源性咳嗽的疗效。方法：运用清代新安名医程钟龄之止嗽散加味治疗喉源性咳嗽62例,并设西药治疗对照组44例。结果：治疗组有效率91.94%,对照组有效率70.45%,两组比较存在显著差异（P〈0.01）。结论：加味止嗽散治疗喉源性咳嗽具有显著疗效。     

论玉屏风散对小鼠免疫功能的影响

目的：通过检测玉屏风散对实验性免疫低下小鼠的体液免疫、淋巴细胞转化率、巨噬细胞吞噬功能、ADCC活性的测定的影响,探讨玉屏风散对免疫功能的调节作用。方法：选取昆明种小鼠30只,随机分成3组,每组10只。玉屏风散组：以玉屏风水煎液灌胃（25g.kg-1.d-1）;正常对照组及氢化考的松模型组：以等量生理盐水灌胃,均连续给药10天。玉屏风散组及模型组于给药后4天,用氢化考的松（20mg.kg-1.d-1）肌肉注射,连续7天,各组均于第11天时观察各项指标。结果：玉屏风散能显著增加正常小鼠和注射氢化考的松引起的免疫低下小鼠的体液免疫、淋巴细胞转化率、巨噬细胞吞噬功能以及抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC）的活性,与正常对照组相比,P〈0.05;与HC模型组相比,P〈0.05。结论：玉屏风散对小鼠的免疫功能有明显的促进作用。     

玉屏风散及甲型链球菌预防上呼吸道感染的微生态作用机理初探

目的:观察玉屏风散和甲型链球菌防治病原菌金黄色葡萄球菌侵袭上呼吸道,调节上呼吸道微生态平衡的情况.方法:分别对上呼吸道菌群失调小鼠灌胃给玉屏风散或灌胃给玉屏风散加口咽部滴注甲型链球菌7d,再以金黄色葡萄球菌口咽部滴注攻击3d,检测小鼠上呼吸道在不同时间点的菌群密集度、甲型链球菌数量、菌群多样性.结果:服用玉屏风散可使小鼠口咽部菌群紊乱的情况有所缓解,从而起到一定的对抗有害菌攻击的作用,口咽部定植甲链可在一定程度上增强这种作用.同时玉屏风散可对甲型链球菌的生长繁殖进行调节干预,保持其优势菌地位,进而维持上呼吸道微生态平衡.结论:可考虑采用中药治疗或微生态制剂干预的方法来对抗上呼吸道有害菌感染.     

黄芪扶正汤对免疫抑制小鼠的免疫调节功能

目的：探讨黄芪扶正汤对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法：以氢化可的松造成免疫低下小鼠模型,用黄芪扶正汤和玉屏风散水煮液进行灌胃,检测小鼠血清溶血素的生成、IL-2和INF-γ的含量以及外周血淋巴细胞CD3+,CD4+和CD8+的表达。结果：黄芪扶正汤能明显提高免疫抑制小鼠的血清溶血素、IL-2和INF-γ的水平,提高CD4+和CD8+的比值,效果比玉屏风散更显著。结论：黄芪扶正汤对免疫抑制小鼠的免疫功能有正调节作用。     

玉屏风散辅助治疗儿童咳嗽变异性哮喘临床观察

目的：探讨中药玉屏风散与糖皮质激素吸入联合治疗儿童咳嗽变异性哮喘,对复发的影响。方法：选择2006年2月—2008年12月就诊于门诊的95例咳嗽变异性哮喘患儿,随机分为观察组与对照组,两组常规治疗相同,均与糖皮质激素吸入治疗,200μg/d分2次,连用3个月。观察组加用玉屏风散的汤剂连用3个月,同时停药后观察6个月的复发情况。结果：观察组的复发率23.52%,对照组的复发率72.72%,组间比较差异具有显著性意义（P〈0.001）。结论：对咳嗽变异性哮喘的患儿,用中药玉屏风散辅助治疗,可以降低复发率。     

四逆散加味方治疗输卵管炎性阻塞疗效机制探讨

观察四逆散加味方对用苯酚制成家兔输卵管炎症模型的影响，以探讨该方临床疗效机理。实验用２１只兔，分为对照组、大剂量组、小剂量组，造模前后用插管胃饲法给药共１３ｄ。结果，肉眼观察输卵管管腔积水阳性率大剂量组为１０．０％，小剂量组为３０．０％，对照组为６４．３％（Ｐ＜０．０５）；输卵管与周围组织粘连阳性率大剂量组为２０．０％，小剂量组为５０．０％，对照组为９２．９％（Ｐ＜０．０１）。组织学观察，三组兔输卵管的上皮、皱襞、固有层、肌层等各层及输卵管总体炎变程度，大小剂量组均轻于对照组（Ｐ分别＜０．０５或＜０．０１），提示四逆散加味方具有对抗输卵管炎症的作用。     

风池 风市配穴合加味玉屏风汤治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎的临床观察

通过对68例慢性非特异性溃疡性结肠炎患者分组为对照组和治疗组。对照组：30人,治疗：（1）取穴：中脘、天枢、足三里、脾俞、大肠俞、关元中药给予常规辨证处方,每日1剂;治疗组：38人,治疗：（1）取穴：在对照组取穴的基础上加风池、风市穴,中药加服加味玉屏风汤,治疗4个疗程后,治疗组有效率为94.7%,而对照组为63.3%,两组有效率比较,P〈0.01。     

加味参苓白术散治疗腹泻型肠易激综合征的临床疗效及对脑肠肽水平的影响

目的探讨加味参苓白术散治疗腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome with predominant diarrhea,IBS-D)的临床疗效及对患者脑肠肽水平的影响。方法选取117例IBS-D患者进行研究,采用随机数字表法分为观察组和对照组。对照组58例予匹维溴铵片、酪酸梭菌活菌胶囊治疗,观察组59例在对照组治疗基础上联合加味参苓白术散治疗。比较2组患者临床疗效、中医证候积分、IBS症状严重程度量表(IBS symptom severity scale,IBS-SSS)评分、血浆脑肠肽水平以及治疗过程中不良反应发生情况。结果治疗后,观察组患者临床治疗总有效率、血浆神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)水平显著高于对照组(P<0.05)。观察组患者中医证候积分、IBS-SSS评分以及血浆5-羟色胺(serotonin,5-HT)、P物质(P substance,SP)、生长抑素(somatostatin,SS)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)水平显著低于对照组(P<0.05)。治疗过程中,2组患者不良反应发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论加味参苓白术散可显著提高IBS-D患者临床疗效,缓解临床症状,改善脑肠肽水平,且未增加不良反应发生情况。