TLR7激动剂Gardiquimod上调BxPC-3细胞中IL-15 mRNA表达

目的：研究TLR7在胰腺癌BxPC-3细胞中表达,并探讨TLR7激动剂激活TLR7后细胞因子白介素15( IL-15)的表达。方法通过 Western blot 和 Real-time PCR 分析TLR7在细胞内的表达水平;BxPC-3细胞经过不同时间点Gardiquimod(3μg/ml)的处理后,Real-time PCR 分析 TLR7激活后 IL-15 mRNA 水平表达变化;Western blot 分析Gardiquimod刺激细胞后,磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶( PI3K-AKT)信号通路的变化。结果 Western blot和 Real-time PCR结果显示：与外周血单核细胞( PBMC)相比, TLR7在 BxPC-3中弱表达;Real-time PCR分析显示：Gardiquimod处理细胞后能刺激细胞中IL-15的表达;TLR7激动剂能够激活 PI3K-AKT信号通路。结论 Gardiquimod激活TLR7后能够上调 IL-15的表达,并且其激活与 PI3K-AKT信号途径相关。     

IL-10对HaCaT细胞中VEGF-A表达的影响

目的 探讨白介素-10(IL-10)对皮肤角质形成(HaCaT)细胞中血管内皮生长因子A(VEGF-A)表达的影响及其可能机制.方法 培养HaCaT细胞,用不同剂量IL-10刺激后,通过荧光定量PCR(Real-time PCR)在mRNA水平上分析IL-10对HaCaT细胞中VEGF-A表达的影响;通过Western...     

IL-15对HaCaT细胞增殖的影响及机制研究

目的观察白介素-15(IL-15)对人皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖的影响及其可能机制。方法培养HaCaT细胞,不同剂量IL-15刺激不同时间后,MTT法分析IL-15对HaCaT细胞增殖的影响。Western blot分析IL-15在HaCaT细胞中激活的信号通路:丝裂原蛋白活化激酶-胞外信号调节激酶(MAPKs-ERK1/2)和磷脂酰肌醇激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT)。在IL-15刺激HaCaT细胞前1h,分别加入MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT信号传导特异性抑制剂(PD98059和LY294002)以阻断IL-15激活的相关信号通路,分析阻断剂对IL-15调控HaCaT细胞增殖的影响。结果 MTT分析结果显示:IL-15显著促进HaCaT细胞增殖,且具有时间及剂量依赖性;信号通路分析揭示IL-15能够增加pERK1/2及pAKT的水平;使用阻断剂的研究显示IL-15部分依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途径发挥其促进增殖作用。结论 IL-15部分依赖MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT信号途径促进HaCaT细胞增殖。     

Gardiquimod对HaCaT细胞增殖的影响

目的探讨Gardiquimod对HaCaT细胞增殖的影响及其可能的机制。方法培养HaCaT细胞,以不同剂量的Gardiquimod经不同的时间刺激HaCaT细胞,MTT比色法及流式细胞术分析Gardiquimod对HaCaT细胞增殖的影响。Western-blot-ting分析Gardiquimod在HaCaT细胞中激活的信号通路。结果 MTT比色法及流式细胞分析结果显示:Gardiquimod促进HaCaT细胞增殖,且具有时间及剂量依赖性;信号通路分析揭示Gardiquimod能够增加信号通路AKT的磷酸化水平。结论 Gardiquimod能够促进HaCaT细胞增殖并激活PI3K-AKT信号。