rAd—p53鼻咽部瘤内注射对鼻咽癌淋巴管生成的影响

目的探讨行重组人p53腺病毒（rAd-p53）瘤内注射前后鼻咽癌原发灶中淋巴管的表达情况。方法63例确诊中晚期鼻咽癌患者随机分为两组。治疗组32例行rAd-p53瘤内注射＋同步放化疗,对照组31例行单纯同步放化疗。分别收集两组的临床资料,采集rAd-p53瘤内注射前后鼻咽部瘤体活组织标本,采用免疫组化二步法检测鼻咽癌原发灶组织中淋巴管I）2-40的表达情况。结果两组1）2-40蛋白表达差异元统计学意义（P〉0．05）。两组治疗后D2-40蛋白表达均较治疗前升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论rAd—p53可能通过某种机制抑制鼻咽癌淋巴道转移。     

rAd-p53治疗前后鼻咽癌原发灶CD34标记的MVD差异及意义

目的 探讨重组人p53腺病毒(rAd-p53)瘤内注射前后的鼻咽癌原发灶中CD34标记的微血管密度(MVD)的差异及其意义.方法 将63例中晚期鼻咽癌患者随机分为两组,治疗组32例rAd-p53瘤内注射+同步放化疗;对照组31例同步放化疗.分别收集治疗前后鼻咽部瘤体组织标本,采用免疫组化二步法进行CD34标记的MVD检...     

rAd-p53瘤内注射前后鼻咽癌组织中podoplanin的表达及临床意义

目的 探讨行重组人p53腺病毒(rAd-p53)瘤内注射前后的鼻咽癌原发灶中淋巴管的表达情况.方法 63例确诊中晚期鼻咽癌的患者随机分为2组.治疗组(32例):rAd-p53瘤内注射+同步放化疗.对照组(31例):同步放化疗组.分别收集临床资料及rAd-p53瘤内注射前后鼻咽部瘤体活组织标本.采用免疫组化二步法检测鼻咽癌原发灶组织中淋巴管(podoplanin)的表达情况.结果治疗组podoplanin蛋白表达较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).而对照组podoplanin蛋白表达较治疗前降低不明显,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 rAd-p53可能通过某种机制抑制鼻咽癌淋巴道转移.     

p53基因治疗对鼻咽癌患者 CD34标记的微血管密度和血小板计数的影响

目的：观察放化疗联合重组人p53腺病毒注射液（ rAd-p53）治疗鼻咽癌后对原发灶中CD34标记的微血管密度（ CD34-MVD）及血小板（ PLT）计数的影响,探讨其与预后的关系。方法63例中晚期鼻咽癌患者随机分为两组,基因组32例给予rAd-p53瘤内注射＋同步放化疗;常规组31例仅给予同步放化疗。采用免疫组化二步法检测两组患者癌组织中CD34-MVD水平,并检测PLT。结果治疗后基因组鼻咽癌原发灶CD34-MVD明显低于治疗前（ P＜0．05）,而常规组治疗前后CD34-MVD比较差异无统计学意义（ P＞0．05）;治疗后两组PLT均显著下降（P均＜0．05）,并且基因组下降更明显（P＜0．05）。随访3年,基因组和常规组局部复发、远处转移率比较差异无统计学意义（ P＞0．05）;但CD34-MVD表达增加组远处转移率（38．5％）明显高于表达下降组（13．5％）（P＜0．05）,3年总生存率、无瘤生存率低于表达下降组（P＜0．05）;PLT增加组与PLT下降组的局部复发率、远处转移率、3年总生存率、无瘤生存率差异均无统计学意义（P均＞0．05）。结论放化疗联合基因治疗中晚期鼻咽癌,可使CD34-MVD、PLT计数明显下降。 CD34-MVD过度表达可作为评估远处转移和预后不良的参考指标。     

p16、p21、p53蛋白在肺癌组织中的表达及其意义

目的 探讨肺癌组织中p16、p21、p53蛋白的表达及其意义。方法 采用免疫组化方法检测30例肺癌组织中p16、p21、p53蛋白的表达情况。以上标本中有7例呼吸道合胞病毒(RSV)N基因片段扩增阳性。结果 30份肺癌标本中p16、p21、p53蛋白阳性表达率分别为36．7％(11／30)、43．3％(13／30)、53．3％(16／30)；各种蛋白阳性表达例数在鳞癌与腺癌组织间差异无显著性意义；不同临床分期的肺癌标本，其p16、p21阳性表达，差异具有显著性意义；晚期肿瘤组织较早期p53阳性表达增强。p16、p21在肿瘤Ⅲ Ⅳ期较Ⅱ期阳性表达率下降。p16、p21、p53蛋白在RSV N基因片段扩增阳性肺癌标本中的表达与扩增阴性的肺癌标本比较差异无显著性意义。结论 p16、p21可能作为判断肺癌分期及预后的参考指标。RSV感染对肺癌组织细胞癌基因无明显影响。     

胃癌组织中p53基因突变和p53蛋白表达

目的比较胃癌和癌旁组织中p53基因突变及p53蛋白的表达与淋巴结转移和预后的关系。方法采用PCR．SSCP技术和免疫组织化学S-P法，对石蜡包埋组织进行p53基因外显子6．7和8，9以及p53蛋白的检测。结果（1）p53蛋白的阳性表达在癌组织和癌旁组织中分别为47．6％和38．1％；有淋巴结转移的病例p53蛋白表达52．8％。（2）癌组织中p53外显子7的突变率为23．9％；癌旁组织中突变率为19．0％。癌组织中p53外显子6的突变率为10．5％；癌旁组织为8．6％。癌组织中p53外显子8，9的突变率为1．9％；癌旁组织为1．0％。结论有淋巴结转移的病例中，筇3外显子的突变率和蛋白的表达率均明显增高，提示p53外显子的突变在胃癌的发生发展中是一个重要因素，并促进肿瘤的转移。p53基因突变与p53蛋白高表达在癌组织和癌旁组织中无显著差异。     

rAd-p53瘤内注射联合放化疗前后鼻咽癌原发灶细胞凋亡的变化

目的 观察重组人p53腺病毒(rAd-p53)瘤内注射联合放化疗前后的鼻咽癌原发灶组织细胞凋亡的变化情况.方法 61例确诊中晚期鼻咽癌的患者随机分为2组.治疗组:rAd-p53瘤内注射+同步放化疗.对照组:同步放化疗组.于rAd-p53瘤内注射前及放疗至20Gy(第三次rAd-p53治疗后)时取鼻咽部瘤体活组织标本,分别进行凋亡细胞的原位检测(TUNEL法).结果 对照组治疗前后的AI分别为(4.455±1.670)%、(8.252±4.076)%,治疗组治疗前后的AI分别为(4.453±1.670)%、(13.370±6.957)%,治疗组治疗前后、对照组治疗前后、治疗组与对照组治疗后AI有统计学差异(P＜0.05).结论 rAd-p53瘤内注射联合放化疗鼻咽癌原发灶细胞凋亡指数明显增高.     

50例鼻咽癌p53蛋白的表达

运用免疫组化染色技术，对50例鼻咽癌，24例鼻咽良性病变粘膜进行p53蛋白表达的测定。结果显示：38例鼻咽癌p53蛋白阳性（76%），3例鼻咽炎性粘膜p53阳性（13%），1例鼻咽乳头状瘤p53阳性，在与临床病理指标的相关分析中发现，p53阳性程度与肿瘤分化程度有关，分化程度越低。则p53阳性程度越高。鼻咽癌淋巴结转移与否与p53蛋白异常表达无关。     

胃肠恶性肿瘤及其切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达

目的 探讨胃肠道恶性肿瘤及其切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达与手术切缘的安全性关系。方法 用PCR－SSCP和免疫组化S－P方法检测20例胃癌和10例大肠癌标本和切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达情况。结果 （1）胃肠道恶性肿瘤组织中有很高的p53基因突变率（63％）和p53蛋白阳性表达率（53．33％）。（2）肿瘤组织中p53蛋白表达是切缘组织中p53蛋白表达的前提。（3）p53基因突变和p53蛋白表达随肿瘤切缘距离的增加而呈现极显著的递减趋势。结论 就p53基因突变和p53蛋白表达而言,距离肿瘤边缘5cm可定为肿瘤的分子切缘。     

细胞周期调节因子在原发和复发鼻咽癌的表达

【目的】探讨细胞周期调节因子在鼻咽癌复发中的作用。【方法】采用LsAB法同时检测69例患者原发和复发鼻咽癌组织中p53、MDM2、p21ras和p21WAF1蛋白的表达。【结果】复发癌与原发癌相比阳性表达率方面,p53蛋白(78%和80%)或MDM2蛋白(84%和83%)很相近,p21ras蛋白(73%和93%)或p21WAF1蛋白(52%和84%)明显下降;高表达率方面,p53蛋白(42%和51%)很相近,MDM2蛋白(57%和32%)明显升高,p21ras蛋白(16%和65%)或p21WAF1蛋白(17%和46%)明显下降。其中,MDM2蛋白表达水平在复发癌明显升高主要见于复发间期<34个月患者组（P<0.05),p21ras蛋白和p21WAF1蛋白表达水平在复发癌明显下降见于复发间期<34个月和≥34个月患者组（均<0.02以下)。【结论】原发鼻咽癌临床治愈后,p53蛋白和MDM2蛋白过度表达以及p21WAF1蛋白低表达或不表达可能仍然对鼻咽癌的复发起重要作用;MDM2蛋白表达水平显著升高和p21WAF1蛋白表达水平显著下降可能进一步加促鼻咽癌的复发过程。     

晚期鼻咽癌患者基因治疗前后TS和GST-π及TopoⅡ的表达变化及其与预后的关系

目的初步探讨重组人p53腺病毒（rAd-p53）鼻咽部瘤内注射前后的鼻咽癌原发灶中胸苷酸合成酶（Ts）、谷胱甘肽S-转移酶π（GST-π）和拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）的表达变化及其临床意义。方法采用免疫组化法检测80例晚期鼻咽癌患者治疗前后肿瘤组织中TS、GST-π和TopoⅡ的表达情况。结果常规放化疗组在治疗后其TS、GST-π和TopoⅡ的表达明显升高（P分别为0．01、0．01、0．00）,基因治疗组和单纯放疗组其治疗后TS、GST-π和TopoⅡ的表达未见明显改变（P〉0．05）。三组间的复发率和转移率差异无统计学意义（P=0．95）。疗前GST-π阴性患者其复发率和转移率明显低于阳性患者（8．93％vs54．17％,P=0．00）。结论GST-π蛋白的异常表达与晚期鼻咽癌治疗后复发转移有关。基因治疗晚期鼻咽癌可能通过抑制TS、GST-π、TopoⅡ蛋白表达进而逆转鼻咽癌化疗耐药。     

重组人p53腺病毒增强肝癌放疗敏感性的实验研究

目的 观察重组人p53腺病毒(recombinant human adenovinm p53,rAd-p53)联合放疗对肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 人肝癌细胞SMMC-7721荷瘤裸鼠18只,应用随机数字表法选取2只,1只瘤内注射rAd-p53,另1只注射PBS,注射后48 h处死动物取瘤,Western blot方法检测肿瘤P53蛋白表达;其余16只分为4组:对照组、单独放疗(IR)组、重组人pS3腺病毒(rAd-p53)治疗组和重组人p53腺病毒+放疗(rAd-p53+IR)联合治疗组.实验治疗第16天处死动物,绘制肿瘤生长曲线;光镜下观察肿瘤治疗后组织形态学变化;免疫组化S-P法检测Ki-67,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡.结果 rAd-p53成功感染了肝癌裸鼠移植瘤细胞,并增强肝癌细胞P53蛋白的表达;rAd-p53+IR联合治疗组、IR组和rAd-p53治疗组的肿瘤生长抑制率分别为81.49%、30.74%和33.67%,其中rAd-p53+IR联合治疗组的肿瘤抑制最强(P<0.01).光镜下观察各治疗组的肿瘤组织均出现坏死,其中rAd-p53+IR联合治疗组肿瘤坏死较多;rAd-p53+IR联合治疗组肿瘤细胞表达Ki-67明显低于对照组、IR组和rAd-p53治疗组(P<0.01),而肿瘤细胞凋亡显著增加(P<0.01).结论 rAd-p53+IR联合治疗较单独放疗能显著抑制肝癌的生长,rAd-p53能增强肝癌对放疗敏感性.     

内镜下rAd-p53注射联合动脉灌注治疗进展期胃癌

目的观察内镜下瘤体注射重组人p53腺病毒（rAd—p53）联合区域动脉内灌注化疗药物治疗进展期胃癌的临床疗效。方法经胃镜及病理确诊的进展期胃癌、失去手术或不愿手术的胃癌患者5例应用内镜下rAd—p53瘤体注射,剂量3x1012VP,术后3天行肿瘤区域动脉药物灌注,顺铂（DDP,DDC40mg/m2）,每月1次治疗,3次为一个疗程。结果治疗组显效2例,有效3例,总有效率100.0%。结论内镜下rAd—p53瘤体注射联合胃窦肿瘤区域动脉灌注化疗对失去或不愿手术的进展期胃癌患者而言,是一种疗效满意、副作用少方法。     

重组人p53腺病毒联合奥沙利铂对结肠癌细胞的生长抑制作用

目的观察外源p53基因在结肠癌细胞内的表达、对肿瘤细胞生长的影响,及对结肠癌细胞化疗敏感性的作用和机制。方法用重组人p53腺病毒注射液（rAd-p53）及奥沙利铂（OXA）单独及联合作用于结肠癌细胞株SW1116不同时间后,CCK-8法检测其对体外培养细胞的抑制率,免疫组织化学S-P法检测p53蛋白的表达情况,流式细胞仪（FCM）分析其细胞凋亡蛋白caspase3的表达情况。结果rAd-p53及OXA单独作用时,随药物浓度及作用时间的增加,细胞的生长抑制率逐渐增高;二者联合作用24 h,在较低浓度时细胞生长抑制率即明显增高（P值均〈0.05）;OXA（6.25μg/ml）与rAd-p53（5×105、5×106、5×107、5×108、5×109vp/ml）联合作用24 h后,与对照组比较,结肠癌细胞caspase-3蛋白的含量升高,但p53蛋白无明显升高。结论OXA和rAd-p53单药可抑制结肠癌细胞SW1116的生长,二者联合对结肠癌细胞的抑制作用增强;rAd-p53有增强OXA化疗敏感性的作用,其机制与通过线粒体途径激活下游的caspase-3诱导细胞凋亡有关。     

重组人p53腺病毒联合奥沙利铂对结肠癌细胞的生长抑制作用

目的观察外源p53基因在结肠癌细胞内的表达、对肿瘤细胞生长的影响,及对结肠癌细胞化疗敏感性的作用和机制。方法用重组人p53腺病毒注射液（rAd-p53）及奥沙利铂（OXA）单独及联合作用于结肠癌细胞株SW1116不同时间后,CCK-8法检测其对体外培养细胞的抑制率,免疫组织化学S-P法检测p53蛋白的表达情况,流式细胞仪（FCM）分析其细胞凋亡蛋白caspase3的表达情况。结果rAd-p53及OXA单独作用时,随药物浓度及作用时间的增加,细胞的生长抑制率逐渐增高;二者联合作用24 h,在较低浓度时细胞生长抑制率即明显增高（P值均〈0.05）;OXA（6.25μg/ml）与rAd-p53（5×105、5×106、5×107、5×108、5×109vp/ml）联合作用24 h后,与对照组比较,结肠癌细胞caspase-3蛋白的含量升高,但p53蛋白无明显升高。结论OXA和rAd-p53单药可抑制结肠癌细胞SW1116的生长,二者联合对结肠癌细胞的抑制作用增强;rAd-p53有增强OXA化疗敏感性的作用,其机制与通过线粒体途径激活下游的caspase-3诱导细胞凋亡有关。     

重组人p53腺病毒注射液联合胸腔热灌注化疗治疗肺癌所致胸腔积液的临床研究

目的评价重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)联合胸腔热灌注化疗治疗肺癌合并胸腔积液的临床疗效、不良反应及对生活质量的影响。方法将43例肺癌合并胸腔积液患者随机分为2组:联合组(n=22)和单药组(n=21)。所有患者应用紫杉醇135mg/m~2静脉滴注(第1天),每3周重复1次;同时胸腔内给予顺铂注射液40mg/m~2热灌注化疗,每周重复1次,连用3次。联合组每次热灌注化疗后胸腔内灌入rAd-p53(1×10~(12)VP),每周重复1次,连用3次;对治疗前、后症状和生活质量的改变进行评价。结果联合组和单药组的有效率分别为86.4%和57.2%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合组患者功能状态(躯体、情感、认知、社会)及整体生活质量评分值均显著增加,与单药组相比差异有统计学意义(P<0.05)。联合组治疗后乏力症状评分、肺癌相关症状(咳嗽、呼吸困难)评分均降低,与单药组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。2组患者主要不良反应为发热、消化道反应及白细胞减少,联合组发热的发生率高于单药组(P<0.05),后二者无明显差异(P>0.05)。结论重组人p53腺病毒注射液联合胸腔热灌注化疗治疗肺癌所致胸腔积液疗效确切,同时可改善患者生活质量,且不良反应较少,值得临床推广应用。     

重组p53基因腺病毒注射液胸腔灌注治疗恶性胸水的临床疗效观察

目的观察重组p53基因腺病毒（rAd-p53）注射液胸腔灌注治疗恶性胸水的临床疗效。方法45例恶性胸水患者均行胸腔穿刺彻底引流后通过胸腔闭式引流管灌注rAd—p53,用量为1×1012VP×2支,4周后根据胸水量的变化进行疗效评价。结果45例患者中完全缓解（CR）20例,部分缓解（PR）19例,稳定（SD）4例,进展（PD）2例,总有效率达86．7％（39／45）。达到CR的20例病人中,有16例病人胸水在3个月内没有再出现。各肿瘤病种之间没有差异。所有患者主要副反应为自限性发热,体温在37．5℃～39．1℃之间,12h～24h后均可自行恢复正常。结论rAd-p53注射液胸腔灌注治疗恶性胸水的有效率高、疗效确切、副作用可以耐受,值得临床进一步应用观察。