肝硬化组织转化生长因子β_1的分布研究及临床意义

目的研究转化生长因子β1(TGFβ1)、胶原纤维和网状纤维在肝硬化组织中的分布、意义及肝细胞癌变对其分布的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测30例肝硬化组织和1例大致正常肝组织TGFβ1的表达情况。用Masson染色显示胶原纤维,GordonSweet染色显示网状纤维。CMIAS-8彩色图像分     

转化生长因子β1在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨转化生长因子(TGFβ1)在肝细胞癌中可能的作用机制.方法用免疫组化SABC方法检测45份石蜡包埋人肝细胞癌标本及36例癌旁组织中TGFβ1蛋白表达的情况.结果 45例肝癌组织中TGFβ1阳性表达率和为62.2%.肝细胞癌组织中TGFβ1表达在肝细胞癌中明显升高,与癌旁组织相比较差异有显著性(P<0.05),与肝细胞癌的组织分化程度(按Edmondson-Steiner分级标准),包膜是否完整及有无癌栓有相关性(P<0.05).结论肝细胞癌组织中TGFβ1呈过表达.TGFβ1的过表达对诱发肝细胞癌及对肝细胞癌的转移都起到一定的作用,可作为肝细胞癌的预后指标.     

慢性乙型肝炎患者α干扰素治疗前后血清中TGFβ1含量测定

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清中转化生长因子(TGFβ1)的含量与α干扰素治疗的关系. 方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定36例慢性乙型肝炎患者α干扰素(IFN-α)治疗前后血清中TGFβ1含量,并和30例健康成人作对照. 结果慢性乙型肝炎患者干扰素治疗前血清TGFβ1含量为38.35±8.97ng/L,治疗6个月后下降到21.76±6.22ng/L,治疗前后比较t=9.15,P<0.01.健康对照组血清TGFβ1含量为21.32±3.81ng/L,与肝性乙型肝炎组干扰素治疗前比较t=11.97,P<0.01,差异有显著性;与干扰素治疗后比较(t=0.40,P>0.05)则无差异显著性. 结论慢性乙型肝炎患者血清中TGFβ1含量明显升高,α干扰素治疗可以有效抑制TGFβ1的表达,起到预防乙型炎肝纤维化的作用.     

转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α在门静脉高压症发病中的意义

目的研究转化生长因子β1(TGFβ1)和肿瘤坏死因子α(TNFα)在门静脉高压症(门脉高压)发病中的作用。方法应用酶联免疫分析方法对50例门脉高压患者(其中20例伴腹水形成)、50例正常对照者进行TGFβ1和TNFα的检测。结果对照组血清TGFβ1和TNFα为12.32±3.29ng/ml,94.74±49.30pg/ml,门脉高压组分别为19.21±5.87ng/ml,140.85±53.47pg/ml(P<0.05);门脉高压伴腹水者为18.44±5.89ng/ml,167.34±38.62pg/ml,不伴腹水者为20.68±6.73ng/ml,101.54±28.24pg/ml,两者比较TGFβ1差异无显著性,而有腹水者TNFα高于无腹水者(P<0.05)。结论TGFβ1和TNFα水平升高在肝硬化门脉高压发病的病理生理机制中起作用。     

慢性乙型肝炎患者血清转化生长因子β1在肝纤维化中的作用

目的 观察慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者血清TGFβ1、HA、肝功能和肝纤维化的关系.方法肝穿刺取得肝脏活体组织进行HE、网状纤维染色,了解纤维化程度.用ELISA法检测TGFβ1,用RIA法检测HA.结果(1)慢乙肝轻、中、重度及肝硬化患者血清TGFβ1水平分别为16.8±6.4pg/mL、22.7±7.2 pg/mL、30.2±8.9 pg/mL、37.9±10.7 pg/mL明显高于对照组8.2±6.8 pg/mL,且随着肝损害程度的加重逐渐升高;(2)血清TGFβ1水平与TBIL呈正相关,与ALB呈负相关;(3)血清TGFβ1、HA水平随着肝组织纤维化程度的加重而增长.结论TGFβ1是慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化形成的重要细胞因子之一.     

软肝冲剂对四氯化碳肝硬化大鼠P21mRNA表达的影响

目的探讨软肝冲剂对四氯化碳肝硬化大鼠P21mRNA表达及细胞周期各时相DNA含量的影响,从mRNA、DNA水平探讨软肝冲剂阻止肝硬化的作用机理.方法采用RT-PCR及流式细胞计数仪分别检测四氯化碳肝硬化大鼠P21mRNA表达、DNA含量.结果软肝冲剂能降低四氯化碳肝硬化大鼠P21mRNA 表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.01),大剂量组的疗效与小剂量组比较无明显差异(P>0.05).正常肝组织P21mRNA呈相当低水平表达,其表达相对值为(0.17±0.06)U.定量DNA图像分析发现模型组中处于G1期的细胞数要明显多于其它各组(P<0.01),软肝冲剂大剂量组中处于G1期的细胞数要明显少于软肝冲剂小剂量组(均P<0.01).结论软肝冲剂能调节P21基因表达,调节细胞周期,促进肝细胞再生,抑制肝纤维化、肝硬化的形成.     

Beclin1在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨自噬基因Beclin1在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达状况及其临床意义.方法 应用免疫组化S-P法检测原发性肝细胞癌50例、肝硬化30例、肝炎30例、正常肝组织10例中Beclin1的表达.结果 原发性肝细胞癌、肝硬化、肝炎和正常肝组织的Beclin1蛋白阳性表达率分别是78.00%(39/50)、26.67%(8/30)、53.33%(16/30)、10.00%(1/10),四者之间的差异有统计学意义(X2=28.31,P<0.05),且Beclin1在原发性肝细胞肝癌组织表达明显高于存肝硬化组织、肝炎组织、正常肝组织中的表达(X2=20.39,X2=5.31,X2=14.41,P<0.05);在肝炎组织表达明显高于在肝硬化组织和正常肝组织中的表达(X2=4.44,X2=4.12,P<0.05).结论 Beclin1异常表达与原发性肝细胞痛的发展密切相关,存原发性肝细胞痛的发展过程中起非常重要的作用.     

原位杂交法检测TGF-β1基因在肝硬化肝组织中的表达

目的：探讨转化生长因子-β1(TGFβ1)基因在肝硬化(LC)肝组织中的分布表达情况。方法：采用原位杂交技术检测LC肝组织中TGF-β1 mRNA的表达。结果：TGF-β1 mRNA在大结节性LC中，肝细胞示阳性表达主要位于肝细胞胞膜缘及胞质中，有时胞核也示阳性表达；在小结节性LC中，TGF-β1 mRNA阳性表达主要位于肝窦壁及血管纤维间隔部位。结论：TGFβ1在肝硬化的发生发展过程中起着重要作用。     

各种肝病患者血清TGFα含量与肝细胞损害的关系研究

目的 :探讨转化生长因子α(Transforminggrowthfactor aplha ,TGFα)在各种肝病患者中的变化规律及其与肝细胞损害的关系。方法 :采用非平衡竞争性放射免疫法测定 172例各种肝病患者血清中TGFα含量。结果 :慢性中度肝炎、急性黄疸肝炎、慢性重度肝炎、肝硬化失代偿期、原发性肝癌患者血清TGFα含量分别为 12 .12± 7.35pg ml、14.19± 7.30 pg ml、15 74±9 6 5pg ml、16 .0 2± 9.18pg ml、19.89± 9.0 9pg ml,逐渐升高 ,明显高于对照组 6 .86± 0 .89pg ml(P <0 .0 5)。肝硬化失代偿期与代偿期组间差异有显著性 (P <0 .0 5)。结论 :血清TGFα含量明显升高对原发性肝癌的诊断有帮助。TGFα与各种肝病肝细胞的再生、分化、增殖以及损害有一定的关系。     

KAI1基因在肝硬化和肝细胞癌组织中的表达及其意义

目的 研究转移抑制基因KAI1在肝硬化和肝细胞癌组织中的表达及该 基因与肝细胞癌患者临床资料间的关系. 方法 采用Northern blot方法研 究20例肝细胞癌组织、14例肝硬化组织和10例正常肝组织中KAI1基因mRNA的表达水平,经 mRNA的定量分析及统计处理判定KAI1基因与肝细胞癌患者临床特征的关系. 结果 肝硬化和肝细胞癌组织中KAI1 mRNA表达水平(0.113±0.110; 0.139±0.078)显著低于 正常肝组织中的表达(0.316±0.121), (P=0.0003; P=0.0000); 肝硬化和肝细胞癌 组织中KAI1基因mRNA的表达无显著差异(P=0.4152);KAI1 mRNA在不同分化程度的肝细胞 癌组织中的表达无显著差异(P=0.8261),而Ⅲ期肝细胞癌组织中的KAI1基因表达显著低 于Ⅱ期的肝细胞癌组织(P=0.0221). 结论 转移抑制基因KAI1在肝硬 化阶段亦有低表达;肝癌组织中KAI1基因的低表达与肝癌的转移有关.     

肝硬化患者外周血中TGFβ1和ET-1的表达

目的研究肝硬化患者外周血中转化生长因子β1(TGFβ1)及血浆内皮素-1(ET-1)的表达,并探讨其与肝脏贮备功能和食管静脉曲张的关系。方法采用标准生物学方法即TGFβ1对水貂肺上皮细胞生长抑制的方法及放免法分别检测72例肝硬化患者及24例正常人血清TGFβ1及血浆ET-1水平。结果肝硬化组血清TGFβ1(11.77±1.32ng/ml)及血浆ET-1(78.37±17.54pg/ml)水平明显高于正常对照组(P<0.05);ET-1水平与肝功能及食道静脉曲张程度相关分析显示ET-1水平越高则肝脏贮备功能越差(r＝0.94),食道静脉曲张程度越重(r＝0.87);TGFβ1含量与肝脏贮备功能及食道静脉曲张程度无关(r＝0.11及0.03)。结论TGFβ1和ET-1可能是参与肝硬化病理生理过程的重要神经肽。ET-1可作为反映肝硬化程度、判断预后的参考指标。     

人肝病变组织低分子量角蛋白CK19的表达

目的研究低分子量角蛋白CK19在人肝细胞癌、肝癌前病变、肝硬化组织中的表达状况及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测56例肝细胞癌、8例肝硬化及9例正常肝组织中CK19的表达。结果56例肝细胞癌组织中26例CK19表达阳性,显著高于对照组(P<0.001),癌组织CK19多分布于腺样型或梁索型肝细胞癌。癌旁不典型增生组中异型增生细胞及卵圆细胞的CK19表达率(51.9%)显著高于癌旁非不典型组中肝细胞的表达率(17.2%),但与肝癌组织的表达率差别不大。肝硬化组中CK19的表达率为37.5%(3/8),阳性细胞均为卵圆细胞及异型增生细胞。结论肝细胞癌和增生的卵圆细胞及异型增生肝细胞表达CK19,提示CK19可做为判断肝细胞异型增生的一个指标。肝细胞癌CK19表达与其组织学类型有密切关系。     

Plk1在肝癌组织中表达及意义

目的:探讨Plk1在原发性肝细胞性肝癌中的表达及其意义。方法:用半定量RT-PCR、Western blot的方法检测21例原发性肝细胞性肝癌中Plk1的表达情况,并分析其与肝癌临床病理因素的关系。同时取肝硬化及正常肝组织各7例做对照。结果:肝癌组织中Plk1mRNA表达比值(Plk1/β-actin)为0.572±0.144,明显高于肝硬化组织中的0.250±0.057和正常肝组织的0.218±0.073(P<0.01)。Plk1 mRNA表达水平在肿瘤直径大于5 cm组中为0.641±0.110,而在肿瘤直径小于5 cm组中为0.458±0.120,两组之间比较有统计学差异(P<0.01)。其在有门静脉癌栓患者中的表达为0.652±0.107,明显高于无门静脉癌栓者中的表达0.522±0.144(P<0.05)。而与有无包膜,肿瘤病理分级和AFP阳性与否无明显相关。肝癌组织Plk1蛋白表达明显高于肝硬化及正常肝组织中的Plk1蛋白表达量。结论:原发性肝癌组织中Plk1mRNA及蛋白表达均明显增加;Plk1的表达高低与原发性肝癌的肿瘤直径大小及脉管侵犯有明显相关,提示其在肝癌生长及侵袭中发挥重要作用,为进一步研究肝癌的生长侵袭机制提供了思路。     

原发性肝细胞癌癌组织中p33ING1b与p53基因的表达

目的研究p33ING1b与p53蛋白在原发性肝细胞癌中表达的相关性及ING1b基因在原发性肝细胞癌中的突变率.方法应用免疫组织化学SP方法检测了57例原发性肝细胞癌癌组织、51例癌旁肝组织及12例正常肝组织中p33ING1b和p53蛋白的表达,并分析了原发性肝细胞癌癌组织中乙肝病毒(HBV)的感染率;应用聚合酶链式反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测了28例配对癌及癌旁肝组织中ING1b基因两个外显子的突变情况,对有异常泳动条带的DNA片段分别克隆测序.结果在57例原发性肝细胞癌癌组织中,p33ING1b、p53蛋白的阳性率分别为42.1%和57.9%,p33ING1b、p53表达均呈阳性者有19例(33.3%),且两者在癌组织中阳性分布区域相同;p33ING1b蛋白表达与p53蛋白表达在癌组织中呈显著正相关(r=0.783, P<0.01);配对癌旁肝组织及正常肝组织中p53蛋白表达均为阴性,p33ING1b蛋白在13例癌旁肝组织及2例正常肝组织中呈弱阳性表达;在57例原发性肝癌组织中有35例(61.4%)HBV X蛋白呈阳性,其病理类型均为肝细胞肝癌,在51例癌旁肝组织中检出HBV X蛋白阳性者39例(76.47%),癌组织中HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关(P<0.01);PCR-SSCP结果表明,ING1b基因在原发性肝细胞癌中突变率较低为7.1%(2/28).结论 p33ING1b、p53蛋白在原发性肝细胞癌中的表达呈显著正相关,p33ING1b的存在可能还有其他不依赖p53蛋白的途径;HBV感染与p33ING1b、p53蛋白表达均有关;基因突变不是p33ING1b丧失抑癌功能的主要因素.     

二甲基亚硝胺致大鼠肝癌前病变TGF—βⅡR的表达及中药的调节

目的：研究二甲基亚硝胺（DMN）致大鼠肝癌前病变肝组织TGF－βⅡ的表达及中药的调节作用。方法：以DMN诱导大鼠肝硬化、肝癌前病变模型,免疫组化ABC法检测肝组织TGF－βⅡ的表达和分布。结果：DMN腹腔给药18周,致肝硬化、肝癌前病变大鼠模型,表现为血清γ-GT、AFP的增高,肝细胞异常增生,肝组织TGF－βⅡR的表达显著降低;人参鳖甲煎丸可能效阻止或延缓肝硬化及肝细胞的异型增生。结论：人参鳖甲煎丸预防组织癌变的机理可能是诱导肝细胞表达TGF－βⅡ的表达显著降低;人参鳖甲煎丸可有效阻止或延缓肝硬化及肝细胞的异型增生。结论：人参鳖甲煎丸预防肝组织癌变的机理可能是诱导肝细胞表达TGF－βⅡR,从而抑制异型肝增殖.     

肝病患者血清转化生长因子β1和HBX蛋白的检测

0　引言　转化生长因子 β1(TGFβ1)可抑制肝细胞增生 ,抑制肝细胞生长因子 (HGF)对肝细胞有丝分裂的促进作用 .肝炎患者肝组织中 TGFβ1和 HGF的 m RNA表达明显增加 ,它能表达乙型肝炎病毒 (HBV) X基因 (HBX)的转基因小鼠中HBX基因可激活 TGFβ1基因的转录 [1 ,2 ] .我们对急慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清进行 TGFβ1和 HBX蛋白测定 ,并研究它们的变化及意义 .1　对象和方法1.1　对象　急性乙型肝炎 (AHB)患者 19(男 13,女 6 )例 ,年龄 18～ 45岁 ;慢性乙型肝炎患者 2 2 (男 15 ,女 7)例 ,年龄 2 2～48岁 ;肝硬化 (L C) 2 …     

各型肝病患者外周血转化生长因子α(TGF-α)含量测定

目的探讨各型肝病患者外周血TGF-α水平及其临床意义。方法取130例肝病患者(包括急性黄疸型肝炎20例,轻型慢性乙型肝炎29例,慢性重型肝炎22例,肝炎肝硬化32例及原发性肝癌27例)入院时血清(-30℃下保存)以RIA法作TGF-α检测。结果急性黄疸型肝炎为17.61±7.90pg/ml,轻型慢性乙型肝炎为12.66±4.43pg/ml,慢性重型肝炎为10.754.80pg/ml,肝炎肝硬化为11.45±7.07pg/ml原发性肝癌为19.42±19.12pg/ml。均明显高于对照组6.46±2.15pg/ml。而原发性肝癌组明显高于肝炎肝硬化组。急性黄疸肝炎组明显高于慢性乙型肝炎组;原发性肝癌与急性黄疸型肝炎两组间无显著性差异。慢性乙型肝炎,肝炎肝硬化及慢性重型肝炎三组间比较无显著性差异。结论血清TGF-α在肝细胞急性炎症过程及肝细胞癌的形成中明显表达,并在肝硬化向原发化性肝癌转化的过程中,TGF-α有可能成为临床监测指标之一。     

原发性肺鳞癌nm23基因mRNA表达的研究

目的探讨nm23基因表达在原发性肺鳞癌中的作用。方法采用nm23基因寡核酸探针,通过Northern印迹转移的方法,检测17例原发性肺鳞癌患者手术切除的癌组织,癌旁组织和远离癌灶的非癌肺组织中nm23基因mRNA表达水平,并分析nm23mRNA表达水平与肺癌生物特性的相关性。结果肺鳞组织nm23基因mRNA表达水平增高(8.17±3.41)与癌旁组织(4.05±1.90)及远离癌灶的非癌肺组织(3.21±1.97)比较差异有显著性(P<0.05)。有淋巴结转移者nm23基因mRNA表达水平(10.54±3.60)与无淋巴结转移者(5.72±2.51)差异有显著性(P<0.01);癌细胞低分化者(9.83±3.27)与中高分化者(5.96±2.63)差异亦有显著性(P<0.02)。结论肺鳞癌nm23基因mRNA表达水平增高,且与癌的淋巴转移和组织分化有关,但未显示nm23基因mRNA表达在肺鳞癌中的癌转移抑制作用。     

血清转化生长因子β1与酒精性肝病的关系

目的了解血清转化生长因子(TGFβ1)与酒精性肝病的关系.方法把大鼠分为正常对照组和酒精对照组,用酒精灌胃的方法建立酒精性肝病模型.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中的TGFβ1含量.结果在8周末及12周末,酒精组血清TGFβ1水平分别为(15.52±0.42)ng/ml,(17.77±0.25)ng/ml,明显高于对照组(P<0.01),而且随时间延长,酒精组TGFβ1的含量进行性增加.结论血清TGFβ1浓度随时间延长而升高.     

成纤维细胞激活蛋白与慢性乙型肝炎相关性肝病的关系

目的 通过比较乙型肝炎(乙肝)相关性肝癌、乙肝肝硬化以及慢性乙肝患者肝组织中成纤维细胞激活蛋白(FAP)水平,探讨FAP在乙肝相关性慢性肝脏疾病的表达差异及其意义.方法 收集47例乙肝相关性肝癌、29例乙肝肝硬化(S4期)、22例慢性乙肝(S1～S3期)及17例因良性病变行肝切除术的肝组织,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测其中FAP的表达情况;采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测组织及血清中FAP蛋白表达水平.结果 在肝癌、肝硬化、肝炎以及对照组肝组织中,FAP mRNA表达的差异倍数值分别是4.73±1.60、1.86±1.04、0.98±0.80及1.00±0.00,四者比较差异有统计学意义(F=7.156,P=0.000);ELISA结果显示FAP蛋白在肝癌患者组织中1μg总蛋白平均含量为(1 288.28±695.82) pg/mL,而肝硬化组织为(1 176.11±677.43) pg/mL,肝炎组织为(1 044.58±389.48) pg/mL,对照组为(848.70±540.74)pg/mL,差异有统计学意义(F=3.004,P=0.034).结论 FAP在肝炎、肝硬化、肝癌以及对照组的mRNA及蛋白表达水平存在差异,随着疾病的进展,FAP呈渐进性表达.