结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌患者中的突变热点研究

目的探讨结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌中的突变热点及对肿瘤的影响。方法通过公共数据库c Bioportal调取结肠癌突变位点结果,根据其中的一段突变热点区域,构建对应结肠腺瘤样息肉病基因过表达载体及RNAi,采用Western blot检测并证实此区域的功能。结果结肠腺瘤样息肉病基因在结肠癌中的突变率高达73.9%,显著高于其他肿瘤(P<0.05);其中3 454~4 662 bp区域突变发生率占总突变次数的56.1%;构建RNAi后在正常肠上皮细胞中发现β-catenin、CD44、Ki67出现显著上调;在结肠癌细胞中过表达野生型APC(wt-APC),缺失APC(hotdelAPC)的情况下发现,wt-APC可以有效抑制c-myc、β-catenin、CD44、Ki67等致癌基因的表达,但hotdel-APC不能。结论APC基因中3 454~4 662 bp这段区域编码的蛋白可能在结肠癌发生过程中发挥重要作用。     

腺瘤性结肠息肉（APC）蛋白截短突变对MDCK细胞中细胞-基质和细胞-细胞间黏附的影响

 目的  探讨腺瘤性结肠息肉(adenomatous polyposis coli,APC)蛋白截短突变对MDCK细胞中细胞-细胞和细胞-基质之间黏附的影响及机制。方法  应用细胞黏附测定实验检验MDCK-N2-APC及MDCK-GFP稳定表达株系的黏附率。相对于对照细胞MDCK-GFP,MDCK-N2-APC 细胞为稳定突变株,表达APC蛋白N端449-781氨基酸片段。免疫荧光染色、荧光定量PCR及Western blot 测定在细胞黏附过程中发挥重要作用的黏附分子（CD29、E-cadherin)的表达情况。结果  与对照细胞相比,N2细胞 基质之间黏附率增加,平均升高约180%,而细胞-细胞间黏附率约下降30%。在MDCK-N2-APC 细胞中CD29的表达水平增加,E-cadherin的表达水平降低。      结论    APC蛋白在细胞-基质及细胞-细胞间黏附中发挥重要作用。其截短突变片段N2可能通过改变CD29和E-cadherin等黏附分子的表达量来影响细胞黏附,进而影响细胞的侵袭和浸润。     

Livin、PTEN基因在卵巢癌中的研究进展

细胞凋亡蛋白(IAPs)家族由8个成员组成,其中包含了Livin基因,与恶性肿瘤的发生密切相关~([1])。近年来,抗凋亡抑制家族中的Livin基因是研究的热点,在细胞凋亡和细胞周期调控中发挥重要作用,与卵巢癌的关系密切。PTEN基因是第一个具有双磷酸酶活性的肿瘤抑制基因,在调节细胞生长、凋亡、黏附迁移方面发挥着重要作用,与卵巢癌也有着不可分割的联系。本综述通过查阅大量文献,介绍了Livin基因及PTEN基因,并讲述了Livin基因及PTEN基因在卵巢肿瘤中表达与预后的关系,以及Livin基因与PTEN基因的相关性。     

血浆纤溶酶原激活剂抑制物1在肿瘤血管新生中的作用及机制研究进展

肿瘤血管新生在肿瘤生长及转移过程中起重要作用。血浆纤溶酶原激活剂抑制物1(PAI-1)是由多种细胞分泌的糖化蛋白,在体内参与多种生理过程。近年研究发现,PAI-1在肿瘤血管新生过程中发挥双重作用,在生理浓度范围内PAI-1可以促进肿瘤血管新生,而在药理作用范围内高浓度的PAI-1则抑制肿瘤血管新生,其作用可能是通过对细胞外基质的降解、细胞黏附以及细胞迁移的调节而实现的。     

候选转移抑制基因（MTSS1）与肿瘤关系的研究进展

肿瘤转移抑制基因的表达产物——转移消失蛋白是一种肌动蛋白结合蛋白,广泛表达于多种组织,而在转移性肿瘤中,其表达缺失。,在细胞发生发展以及肿瘤的侵袭和转移中,MTSS1发挥着重要作用。着重从肿瘤转移抑制基因的结构、生物学功能以及其与肿瘤转移的关系做一综述。     

HSP70与肿瘤免疫治疗

热激蛋白70（HSP70）家族是一类重要的应激蛋白，在肿瘤免疫中发挥免疫佐剂的功能，可协同抗原呈递细胞（APC）、αβT细胞、γδT细胞和NK细胞的作用。通过分子载体的作用将抗原肽呈递APC表面，激活CD8^＋T细胞，达到杀伤肿瘤细胞的目的。HSF70对开发肿瘤疫苗也有重要的意义。本文简要综述HSF70分子及其在肿瘤免疫治疗中的新进展。     

肼苯哒嗪对宫颈癌细胞系APC基因去甲基化的转录调节作用

目的:观察宫颈癌细胞系HeLa、CaSki和SiHa中APC基因的表达与甲基化修饰之间的相关性,探讨肼苯哒嗪对APC基因去甲基化的转录调节作用及其对细胞生长和凋亡的影响。方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)法分析细胞中APC的甲基化状态;采用RT-PCR及FQ-PCR检测肼苯哒嗪对APC mRNA表达的影响;MTT法及流式细胞术观察肼苯哒嗪对细胞增殖及凋亡的影响;采用免疫组化SP法检测肼苯哒嗪对APC相关蛋白β-连环蛋白表达的影响。结果:APC基因在HeLa、CaSki细胞中有甲基化修饰;肼苯哒嗪能使其甲基化的APC基因重新表达;β-连环蛋白也可重新表达于细胞膜;肼苯哒嗪能抑制细胞生长,使细胞凋亡增多。结论:APC甲基化修饰是宫颈癌发生重要机制之一,肼苯哒嗪能使甲基化的APC去除甲基化修饰重新表达,且能抑制宫颈癌细胞生长。     

Dab2/DOC-2基因的研究进展

Dab2/DOC-2是具有信号转导功能的磷蛋白,在丝裂原信号转导途径中起作用,通过蛋白质的相互作用和蛋白磷酸化发挥作用,参与控制细胞生长的信号通路而发挥生长抑制效应,Dab2/DOC-2又作为胞质衔接蛋白,参与细胞内蛋白运输。在肿瘤中纯合子基因缺失时被激活,是抑癌基因的候选成员。其在多种肿瘤中低或失表达,如卵巢癌,乳腺癌,绒毛膜癌和前列腺癌等,重新表达能抑制肿瘤的生长。Dab2也在胚胎的发生过程中发挥重要的作用。     

Bmi-1基因研究进展

Bmi-1基因是多梳基因(Pc G)家族中重要的调控基因,参与调控细胞的增殖与分化,在维持正常干细胞的自我更新及多向分化的过程中起着重要作用。作为原癌基因,在人体的许多肿瘤中Bmi-1蛋白的表达水平是上升的,它可以阻断细胞周期蛋白p16INK4a和p14ARF抑制细胞增殖的作用,从而促进细胞转化和肿瘤形成。而Bmi-1与c-myc协同则可在多种肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用。     

膜-细胞骨架连接分子Ezrin与肿瘤转移关系的研究进展

Ezrin是埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白(ERM)家族成员之一,是一种膜细胞骨架连接蛋白。近年来的研究发现,Ezrin在多种恶性肿瘤细胞中异常表达,提示其在肿瘤的浸润、转移机制中发挥着重要作用。Ezrin通过改变肿瘤细胞运动、调节细胞间黏附、参与肿瘤细胞内信号转导、抑制细胞凋亡和调理吞噬细胞的吞噬功能等方面,影响恶性肿瘤的转移。     

Beta-Catenin,APC蛋白,C-myc及Cyclin D1在卵巢上皮肿瘤中的表达及意义

目的：探讨卵巢上皮性肿瘤的beta—catenin，APC蛋白及c—myc，cyclin D1的表达及意义。方法：采用ABC免疫组织化学染色方法检测48例卵巢上皮性肿瘤（其中包括18例良性肿瘤，13例交界性肿瘤及17例恶性肿瘤）的beta—catenin，APC蛋白，c-myc及cyclin D1的表达。结果：beta—catenin在卵巢恶性上皮肿瘤及交界性上皮肿瘤中异常表达率均明显高于其在卵巢良性上皮性肿瘤中的表达（P〈0．001）。抑癌基因APC蛋白在卵巢恶性上皮性肿瘤及交界性上皮肿瘤的表达明显低于卵巢良性上皮性肿瘤（P〈0．05）。癌基因c—myc，cyclin D1在卵巢恶性上皮肿瘤及交界性上皮肿瘤中的表达均强于卵巢良性上皮肿瘤（P〈0．05）。卵巢上皮性肿瘤中beta—catenin与APC蛋白呈负相关（P〈0．05）；beta—catenin与c—myc，cyclin D呈正相关（P〈0．05）。结论：APC—beta—catenin—Tcf-4通路异常对卵巢上皮肿瘤的发生，发展起重要作用，beta—catenin异常表达可能激活原癌基因C—myc，cyclin D1的表达。     

Beta-Cetnin和APC蛋白在卵巢上皮肿瘤中的表达及意义

目的:探讨卵巢良性上皮肿瘤,卵巢交界性上皮肿瘤及卵巢恶性上皮肿瘤中beta-Catenin和APC蛋白的表达及意义.方法:采用ABC免疫组织化学染色方法检测18例卵巢良性上皮肿瘤,13例卵巢交界性上皮肿瘤及17例卵巢恶性上皮肿瘤中beta-Catenin和肿瘤APC蛋白的表达.结果:卵巢恶性上皮肿瘤beta-Catenin异常表达率明显高于卵巢良性上皮肿瘤(P＜0.001),卵巢交界性上皮肿瘤beta Catenin异常表达率亦明显高于卵巢良性上皮肿瘤(P＜0.01);APC蛋白在卵巢良性上皮肿瘤的表达明显强于卵巢恶性上皮肿瘤,两者具有显著性差异(P＜0.05);卵巢上皮肿瘤中beta-Catenin和APC蛋白之间存在负相关,且具有统计学意义(r=-0.352,P＜0.05).结论:beta-Catenin,APC蛋白在卵巢上皮肿瘤的发生,发展过程中起重要作用.     

胃癌组织中抑癌基因APC／MCC杂合性缺失的研究

应用多聚酶链反应与限制性片段长度多态性分析法，对４５例手术切除胃癌组织腺癌性息肉基因／结直肠癌突变基因杂合性缺失进行分析。结果表明ＡＰＣ、ＭＣＣ基因ＬＯＨ率分别为２１．７％和３１．３％，ＡＰＣ／ＭＣＣ缺失率为３０．０％。     

新疆哈萨克族食管癌APC抑癌基因等位基因杂合缺失和点突变研究

目的：探讨抑癌基因在哈萨克族（简称哈族）食管癌发生、发展中的作用,阐明哈族食管癌高发的机理,从分子水平提供依据。方法：应用ＰＣＲ技术并配合限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析和银染的单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析法对４１ 例新疆地区原发性食管癌及正常组织中家族性结肠腺瘤样息肉易感基因（ＡＰＣ）第１１ 外显子杂合缺失（ＬＯＨ）及点突变进行检测。结果：３１ 例信息个体中１３ 例显示杂合缺失,杂合缺失率为４１．９％ ,其中哈族的杂合缺失率为５０．０％ （７／１４）,而汉族的杂合缺失率为３５．３％ （６／１７）。点突变率为２４．４％ （１０／４１）,其中哈族食管癌的点突变率为３０．０％ （６／２０）,汉族食管癌的点突变率为１９．０％ （４／２１）。结论：ＡＰＣ抑癌基因第１１ 外显子的ＬＯＨ 存在于食管癌的各个临床分期,ＬＯＨ不是癌症发生的结果,可能是癌症发生的早期因素,且与食管癌的恶性程度有关。     

原发性肝癌信号转导途径相关抑癌基因

原发性肝癌(HCC)的发生发展是多基因参与、多基因相互作用的结果。抑癌基因通过信号途径发挥作用,其中包括:p53、Wnt、mTOR、RAS、Hedgehog等途径。30%～60%的肝癌中发现有p53突变,p53与p21、p27、p16等抑癌基因相互交叉,共同发挥抑癌作用。Wnt途径中,APC、Axin1及E-cadherin的编码基因在HCC中分别因高甲基化、突变、启动子超甲基化而失活。多数肝癌中都发现有mTOR的过度表达,mTOR途径受几个抑癌基因产物调控。RASSF1基因转录产物RASFF1A能与癌蛋白Ras相结合而影响细胞凋亡。     

JWA抑制人肝癌细胞的黏附和迁移侵袭潜能

探讨JWA蛋白在人肝癌细胞黏附和迁移侵袭过程中的作用?方法:应用小干扰RNA下调低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97L中JWA蛋白表达水平,MTT法检测MHCC97L增殖;应用细胞小室检测MHCC97L在JWA不同蛋白水平时的迁移及侵袭潜能变化;黏附试验检测MHCC97L细胞黏附能力变化?结果:研究发现人肝癌细胞株MHCC97L中的JWA表达水平下降后,肝癌细胞迁移及侵袭能力明显增强,细胞对细胞外基质纤维连接蛋白的黏附力增加?结论:RNA干扰JWA引起肝癌细胞的JWA蛋白表达水平下降,导致肝癌细胞的黏附?迁移及侵袭能力增强,结果提示JWA可能抑制人肝癌细胞侵袭和转移?     

养正消积方剂治疗恶性肿瘤作用机制的研究进展

养正消积方剂是由16味中草药组方而成的中药制剂,主要应用于恶性肿瘤放化疗的辅助治疗,能够减轻放化疗的不良反应。近来研究发现,养正消积方剂既可以通过各种机制抑制肿瘤细胞的增殖、黏附、迁移,还能够增加免疫细胞的数量,增强机体细胞免疫的应答能力;此外,养正消积方剂还能降低炎性因子、调节肠道菌群、降低肿瘤标志物及减少肿瘤内血管形成,从而起到抗肿瘤作用。文章对养正消积方剂治疗恶性肿瘤的作用机制进行综述。     

肝内胆管癌多基因变异表型分析

目的：探讨参与肝内胆管癌发生的多基因变异谱系,为了肝内胆管癌的发生机理提供基因水平上的依据。方法：采用显微切割术从石蜡组织切片中提取DNA、聚合酶链式反应（PCR）扩增基础上DNA测序的方法,对22例手术切除的肝内胆管癌标本进行了6种肿瘤抑制基因（APC、MCC、DCC、OGG1、p53和RB1）的杂合性缺失（LOH）和Ki-ras-2癌基因点突变的发生率检测。结果7种肿瘤基因的变异率为APC（68．8％）、DCC（46．2％）、OGG1（41．7%）、p53(37.5%)、Ki-ras-2(27．3％）、RB1（22．2％）和MCC（14．3％）。结论多基因变异的协同作用在肝内胆管癌的多阶段发展发生过程中起着重要作用,其中尤以APC、DCC、OGG1、p53和Ki-ras-2构成了肝内胆管癌相关的基本基因谱系。     

T-cadherin与肿瘤

T-cadherin主要介导同种细胞间的黏附和迁移。肿瘤细胞之间通过T-cadherin的作用而发生黏附,不易脱落。近年来大量研究发现,T-cadherin在多种人类肿瘤中表达减少,导致肿瘤细胞间黏附力减弱,从而易引起肿瘤转移。研究者将T-cadherin基因导入缺失表达T-cadherin分子的大鼠胶质母细胞瘤C6细胞,发现C6细胞的增殖及侵袭能力显著受抑,揭示其抑制机制是T-cadherin分子通过诱导p21CIP1/WAF1表达致使肿瘤细胞于细胞周期G2期阻滞,进一步证实DNA启动子区域的甲基化是肿瘤抑制基因失活的主要机制。     

抑癌基因PTEN与人类肿瘤的研究现状

PTEN基因是迄今为止发现的第一个具有双特异性磷酸酶（DPS）活性的抑癌基因,该基因在细胞的生长、增殖、迁移和细胞凋亡中具有重要的生物学功能。PTEN基因的突变及失活与肝癌、子宫内膜癌、卵巢癌、胃癌等多种肿瘤的形成密切相关。