甲型副伤寒杆菌鞭毛蛋白H1a基因原核表达系统构建及其表达产物的免疫原性和保护作用

目的 构建甲型副伤寒杆菌（Salmonella paratyphi A）H1a基因原核表达系统，确定表达产物rH1a免疫原性和保护作用，检测甲型副伤寒杆菌临床菌株H1a基因携带和表达情况。方法 采用高保真PCR从甲型副伤寒杆菌临床株JH01中扩增H1a基因，T-A克隆后测序，构建H1a基因原核表达系统pET32a-H1a-E．coli B121DE3。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检查rH1a表达情况，Ni-NTA亲和层析法收集rH1a。采用Western blot鉴定其免疫反应性和免疫原性。建立PCR和ELISA检测98株甲型副伤寒杆菌临床菌株H1a基因携带和表达频率。观察rH1a对甲型副伤寒杆菌50001株感染小鼠的免疫保护作用。结果 与报道的相关序列比较，所克隆的H1a基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为99．59％。rH1a表达量为细菌总蛋白的60％左右。甲型副伤寒杆菌全菌抗血清能识别rH1a并与之结合。rH1a免疫家兔可产生抗体。100％（98／98）甲型副伤寒杆菌临床菌株均含有H1a基因并表达H1a。500μg rH1a灌喂或皮下注射免疫小鼠受甲型副伤寒杆菌50001株攻击后的存活率均为50．0％，若加入5μg rLTB，存活率分别上升至75．0％和66．7％。结论 本研究成功地从甲型副伤寒杆菌临床菌株中构建了H1a基因高效原核表达系统。rH1a有良好的免疫原性和一定的免疫保护作用。甲型副伤寒杆菌临床菌株广泛存在H1a基因并高频率表达。     

儿少心理问题筛查表的编制和信效度分析

目的：编制一个用于儿童和青少年的心理问题筛查表，检验其信度和效度。方法：用新编的心理问题筛查表测查全国12个省（市）9278名儿童或他们的父母和143名临床样本，间隔5周的重测样本87人，父母和儿童报告一致性检验样本56人，效标效度样本65人。用相关分析和因素分析考查量表的信度和效度。结果：新编筛查表具有较好的信度（重测信度为0．761、Crobacha系数为0．949、分半信度为0．868、评定者信度为0．799）；正常儿童在筛查表上的得分显著高于临床样本的得分；新编筛查表总分和分量表与儿童行为量表总分和类似分量表有显著的相关：探索性因素分析和验证性斟素分析与量表编制者的理论构想一致。结论：儿少心理健康量表具有较好的信度和效度．可以用于儿童和青少年的心理问题的筛查．     

人体血清二噁英化合物检测方法的建立

目的建立人体血清二噁英(polychlorinated dibenzo-p-dioxins and polychlorinated dibenzofurans,PCDD/Fs)化合物测定方法,为开展二噁英人体健康风险评估提供检测技术手段。方法基于国际二噁英的测定方法—同位素稀释的高分辨气相色谱/高分辨质谱联用法,血清样品经C18柱固相萃取、酸性硅胶柱和活性炭柱净化的前处理方法,用DB-5MS毛细管柱(60 m×0.25 mm×0.25μm)分离,高分辨质谱检测分析。结果本方法的检出限为0.35~3.26 pg/g脂肪计,采用血清国际标准参考物质(SRM 1958)进行方法验证,与SRM 1958给出的参考质量分数值范围对比,17个PCDD/Fs单体浓度测定值均在参考质量分数值范围内,相对标准偏差为2%~19%(n=3)。该方法进一步应用于实际人体血清分析,同位素标记的17个二噁英单体回收率为61%~135%。结论本方法灵敏度和准确度高、方法性能稳定,满足人体血清二噁英检测方法的要求。     

PARP抑制剂5-AIQ对小鼠结肠癌CT26细胞PARP/NF-κB复合物和NF-κB活性的影响

目的探讨PARP抑制剂5-AIQ对小鼠结肠癌CT26细胞核内PARP抑制后,对PARP/NF-κBP65复合物形成和NF-κB活性的影响。方法Western blot检测结肠癌CT26细胞核内PARP与NF-κBP65的表达,免疫共沉淀法分析CT26细胞核内PARP/NF-κBP65复合物形成,电泳迁移率改变分析法检测CT26细胞核转录因子NF-κB的结合活性。结果5-AIQ处理组与5-AIQ未处理组比较,前者小鼠结肠癌CT26细胞核内PARP与NF-κBP65的表达水平均明显减弱（P〈0.05）,PARP/NF-κBP65复合物形成明显减少（P〈0.05）,NF-κB的活性显著降低（P〈0.05）。结论5-AIQ可通过抑制PARP的表达,减少PARP/NF-κBP65复合物的形成,进而使NF-κB活性降低。     

甘肃省围孕期女性环境毒物代谢相关基因位点多态性分析

目的 研究甘肃省围孕期女性环境毒物代谢相关基因位点多态性分布特征,筛选基因突变高危人群,制定个性化干预方案。方法 纳入1 389例于2018年6月-2019年7月行孕前咨询或孕早期初次孕检的女性,对环境毒物代谢酶基因CYP1A1、GSTM1、GSTT1、GSTP1的基因多态性进行检测,并分析甘肃省不同地区、不同民族上述环境毒物代谢相关基因的分布情况。结果 CYP1A1 Ile462Val基因位点杂合突变基因型AG频率为34.0%,纯合突变基因型GG频率为5.2%;GSTP1 A313G基因位点杂合突变基因型AG频率为34.1%,纯合突变GG基因型频率为4.6%;GSTM1和GSTT1缺失基因型的频率分别为56.5%、43.3%;同时携带GSTM1和GSTT1缺失基因型频率为23.7%。汉族和少数民族的GSTM1、GSTT1、GSTP1基因型频率分布相似（P> 0.05）,甘肃省不同地区围孕期女性的GSTM1、GSTT1、GSTP1基因型频率分布相似（P>0.05）。结论 甘肃省围孕期女性细胞色素P450基因和谷胱甘肽硫转移酶系相关基因位点突变型或缺失型略高于其他地域研究报道...     

小白菊内酯对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及机制研究

目的:探讨小白菊内酯对血管平滑肌细胞增殖的影响及作用机制。方法:培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC),Western印迹杂交法检测c-fos,c-myc,p15,p16,p18,p19蛋白表达,流式细胞仪检测VSMC周期情况,[³H]TdR参入测定VSMC的DNA合成。结果:小白菊内酯以时间依赖关系抑制c-fos,c-myc蛋白表达,但不影响p15,p16,p18,p19蛋白表达,以剂量依赖关系使VSMC周期中的G₀/G₁期细胞比例明显增多,S期细胞比例显著减少,同时抑制VSMC的[³H]TdR参入。结论:小白菊内酯可能通过抑制c-fos,c-myc蛋白表达,而不是影响p15,p16,p18,p19蛋白表达来抑制VSMC增殖。     

中药与天然药物的现代研究

本文从制剂技术、鉴定技术、药理学研究途径、有效成分与复方等方面回顾了近十几年来的中药与天然药物研究成果。提出在充分利用现代科技新成果的基础上，应发挥中医药固有的特色和优势才是天然药物发展的方向。     

羟基喜树碱腹腔内给药的药代动力学研究

目的:研究羟基喜树碱(HCPT)腹腔内给药的药代动力学特点。方法:比格犬6只,HCPT剂量2 mg.kg^-1,溶于50 mL生理盐水中,先腹腔内注入250 mL生理盐水,随后用恒速泵快速注入HCPT;随后按不同时间点抽取血液和腹腔液,各样本用高效液相色谱分析药物浓度,并用3p87软件包计算药代动力学参数。结果:腹腔液HCPT的AUC与外周静脉血及门静脉血AUC之间的比值分别为45∶1和37∶1,P值均小于0.001;腹腔液HCPT浓度明显高于外周静脉给药组的腹腔液浓度,峰值为60.4倍,AUC为21倍。P值均小于0.001。结论:腹腔内给药其药代动力学具有明显优越性,能维持腹腔液和门静脉血更高更持久的血药浓度,因而有利于化疗药物发挥更大的生物学效应,值得临床应用。     

珠海市吉大区托幼园所儿童健康状况分析

目的为了更好地了解珠海市吉大社区集体儿童健康状况的变化趋势,找出集体儿童保健工作中存在的问题,以明确集体儿童保健工作的重点取向。方法2003~2005年连续3年利用每年一度的儿童健康体检,对珠海市吉大社区15家托幼机构的集体儿童进行生长发育各项指标的检查,将其检查出的各项指标分析比较。结果体格发育2项指标(体重、身高)达标率无变化;营养不良、贫血患病率逐年下降;肥胖儿患病率逐年上升;龋齿患病率逐年下降;视力不良患病率逐年上升。结论抓好集体儿童保健管理,合理安排膳食营养,坚持进行有效的体格锻炼,改善儿童学习活动环境,加强家长学校的宣教工作,才能使每一个儿童的体格发育健康成长。