用荧光染料fura-2法测定心室肌细胞内游离钙离子浓度

用fura-2荧光染料测定了静息时的酶解分离心室肌细胞内游离Ca~(2+)浓度,40mMKCI和5mM咖啡因都能使心室肌细胞内游离Ca~(2+)浓度增加,但KCI增加游离Ca~(2+)浓度需要细胞外液中存在Ca~(2+),而咖啡因则否,提示KCl增加细胞内游离Ca~(2+)浓度可能是通过细胞外Ca~(2+)内流,咖啡因则使细胞内贮存Ca~(2+)释放。     

依脉特灵对Ca^2＋所致小鼠离体子宫平滑肌收缩的拮抗作用

本文观察到IT对小鼠离体子宫平滑肌高K~+去极化后Ca~(2+)所致的收缩有显著抑制作用。CaCl_2量效曲线IT对其呈非竞争性拮抗。在无Ca~(2+)高K~+溶液中,IT10μM抑制OXY依赖细胞内Ca~(2+)引起的收缩,而IT50μM对依赖细胞内外Ca~(2+)所致子宫肌收缩均有抑制作用。Ver对小鼠离体子宫的作用,远较IT的强。但Ver较高浓度(59nM)只抑制依赖细胞内Ca~(2+)的收缩,对依赖细胞外Ca~(2+)的收缩影响甚少。IT与Vcr拮抗ca~(2+)的作用相似。IT为Ca~(2+)拮抗剂。     

肌醇磷脂代谢物与细胞功能的调控

有关细胞内第二信使系统的研究,近几年有很大进展,不但对cAMP的作用有许多新的认识,而且发现Ca~(2+)与肌醇磷脂的代谢物作为第二信使的联合体,对细胞功能的调节起重要作用。体内有许多细胞活动是依赖于Ca~(2+)的,所谓依赖于Ca(2+)的细胞反应,如内分泌、外分泌、中间代谢、细胞分化、神经传递及肌肉收缩。所有这些反应都     

钙离子与心室颤动(综述)

心室纤颤(ventricular fibrillation,VF)是导致心源性猝死的主要原因,Ca~(2+)在 VF 发生中可能起着十分重要的作用。有文献报道,高 Ca~(2+)和低 Ca~(2+)均可提高心室易颤性(ventricular vulnerability,VV)相反,又有文献报道 Ca~(2+)拮抗剂或低 Ca~(2+)具有抗 VF 作用。Ca~(2+)在 VF 发生中的作用,有人认为可能与心肌细胞内 ATP 及环核     

氨利酮治疗充血性心力衰竭时淋巴细胞内环核苷酸和Ca~(2+)含量的变化与心功能的关系

测定了20例难治性充血性心力衰竭患者应用氨利酮冶疔前后淋巴细胞内环核苷酸和Ca~(2+)含量,同时用热稀释法测定其心指数。氨利酮治疗后淋巴细胞内cAMP和Ca~(2+)含量较治疗前明显升高且与心指数增加的时程相似,治疗前后cAMP和Ca~(2+)与心指数之间均呈显著正相关。提示氨利酮可能通过增加心肌细胞内cAMP和Ca~(2+)浓度发挥正性肌力作用。淋巴细胞cAMP和Ca~(2+)的测定对估计心衰严重程度及判断药物疗效可能有一定意义。     

焦锑酸盐电镜组化显示细胞内钙离子

本文介绍焦锑酸盐法在研究细胞内Ca~(2+)的应用。采用Wistar鼠离体心脏钙矛盾模型、Wistar鼠脑缺血与再灌流模型和内毒素诱发兔脑水肿模型,在电镜下对细胞内Ca~(2+)进行定位显示,并运用x线显微分析对Ca~(2+)进行了验证。此外,本文还对该方法的优缺点,方法的改进和Ca~(2+)的鉴定进行了探讨,旨在为揭示Ca~(2+)与细胞中毒的发病机制提供新的实验手段。     

钙离子的生理与病理作用的最新认识

一、钙离子(Ca~(2+))的生理运转和作用正常细胞内Ca~(2+)浓度为10~(-7)M)100～200nM),细胞外浓度为10~(-3)M(1000000nM)。细胞内外呈1:10,000之差,即质膜内外浓度梯度相差5,000～10,000倍,细胞内的Ca~(2+)90％聚集在线粒体和内质网上。     

Aβ诱导PC-12细胞凋亡建立阿尔茨海默病细胞模型

目的:用β-淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))诱导PC-12细胞凋亡以建立阿尔茨海默病细胞模型。方法:体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC-12细胞,以不同浓度Aβ_(25-35)诱导并于不同时间收获细胞,应用MTT法观察细胞活力,Fura-2/AM荧光分析法检测细胞内游离Ca~(2+)浓度,Hoech-st33258及碘化丙啶复染分析细胞凋亡。结果:Aβ_(25-35)作用于PC-12细胞后,细胞活力逐渐下降,并呈时间和剂量依赖性;同时细胞内Ca~(2+)浓度显著上升;不同浓度Aβ_(25-35)作用后,PC-12细胞于不同时间出现凋亡的典型形态学特征,该时间比Ca~(2+)浓度上升约晚6-12 h。结论:Aβ_(25-35)诱导PC-12细胞活力下降、细胞内Ca~(2+)浓度上升及细胞凋亡,可作为较理想的阿尔茨海默病细胞模型。     

维拉帕米对盐酸降低胃粘膜细胞外Ca~(2+)活度和跨粘膜电位效应的影响

应用钙离子选择微电极技术,观察了维拉帕米和异丙肾上腺素对由酸化蟾蜍胃窦粘膜引起的细胞外Ca~(2+)活度和跨粘膜电位下降效应的影响。实验结果表明,维拉帕米抑制盐酸降低细胞外Ca~(2+)活度和跨粘膜电位的效应,而异丙肾上腺素则增强细胞外Ca~(2+)活度的下降效果,但对跨粘膜电位的下降则无明显影响。结果提示,由盐酸刺激引起的胃窦粘膜细胞外Ca~(2+)活度的下降很可能是由于Ca~(2+)向细胞内转移的量增加所致。     

DMSO诱导的HL-60细胞分化后胞液Ca~(2+)浓度、磷酸化酶a和微粒体Ca~(2+)-ATP酶活性的改变

Ca~(2+)与肿瘤代谢有着极为密切的关系。本文测定了HL—60细胞经DMSO诱导分化前后胞液Ca~(2+)浓度、磷酸化酶a活性和微粒体Ca~(2+)—ATP酶活性。结果表明,DMSO加入HL—60细胞培养液后120h,细胞NBT染色阳性率为75％,细胞形态趋同于正常分化的细胞。同时,胞液Ca~(2+)浓度和微粒体Ca~(2+)—ATP酶活性明显降低,胞液磷酸化酶a活性则显著升高。结果提示,在DMSO作用下,HL—60细胞不仅吞噬功能增强,细胞内钙及与钙恒稳有关的酶活性也同时发生改变。     

钙离子与疼痛的关系

<正> Ca~(2+)作为第二信使,其生物学功能十分广泛。Ca~(2+)不仅参与神经介质的合成、神经元的营养和发育,降低神经元的兴奋性,在蛋白质磷酸化中起着重要作用,还与很多神经介质的活性密切相关,是神经系统中举足轻重的离子之一。 Ca~(2+)与疼痛的关系很早就受到人们的关注。早在1916年,Schiitz等将Ca~(2+)注入兔的下丘脑漏斗组织中就观察到Ca~(2+)能引起睡眠和麻醉样状态,这一发现距今已有七十年之久。但以往的研究多侧重于Ca~(2+)在吗啡     

ConA、IL-1刺激T淋巴细胞引起早期Ca~(2+)和环核苷酸含量的变化

本实验观察ConA和IL-1刺激小鼠睥脏T细胞引起的胞内早期Ca~(2+)和环核苷酸含量的变化。ConA和IL-1单独作用使T细胞内Cu~(2+)浓度增大,cAMP含量升高,cGMP含量不变。ConA和,IL-1联合作用,T细胞内Ca~(2+)浓度在10分钟内先是下降而后上升,cGMP亦呈现先下降后恢复正常,二者似有依存关系。     

人参皂苷Rg_1对H_2O_2诱导的HT22细胞凋亡及胞内Ca~(2+)变化的影响

目的研究人参皂苷Rg_1对H_2O_2诱导的HT22细胞凋亡及胞内Ca~(2+)浓度变化的影响。方法以0、6.25、12.5、25、50、100μg/L人参皂苷Rg_1预处理细胞24 h,采用Ca~(2+)荧光染料探针Fluo-3/AM负载细胞1 h后,50 mmol/L H_2O_2刺激细胞,多功能酶标仪测定荧光强度,激光共聚焦显微镜实时监测[Ca~(2+)]i变化,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡。结果 H_2O_2可诱导细胞内Ca~(2+)浓度增加(P0.01),并增加细胞凋亡率(P0.01)。不同浓度人参皂苷Rg_1可呈剂量依赖性的抑制H_2O_2诱导的HT22[Ca~(2+)]i增加(P0.01),抑制细胞凋亡(P0.01),以50μg/L的作用为最强(P0.01)。结论人参皂苷Rg_1可通过降低H_2O_2诱导的HT22细胞内Ca~(2+)水平的升高,抑制氧化应激引起的细胞凋亡。     

缺血及再灌注损伤中心肌组织钙调蛋白及环磷酸腺苷的变化

心肌细胞内大量Ca~(2+)聚集是心肌缺血及再灌注损伤的共同途径,是造成细胞不可逆性损伤的主要原因。钙调蛋白(CaM)和环磷酸腺苷(cAMP)均可通过增强肌浆网(SR)的Ca~(2+)摄取及加强肌膜的Ca~(2+)内流等方式调节     

广藿香和乌梅中具有Ca~(2+)拮抗活性的成分

已经证实Ca~(2+)是生物体中一种重要介质,能改变细胞Ca~(2+)水平的药物,可望产生不同的药理作用,Ca~(2+)拮抗剂广泛用于冠心病和高血压的临床用药,因此Ca~(2+)拮抗剂的研究是筛选和开发心血管药物必不可少的手段。本文报道了从134种中国生药热水提取液中筛选对K~+挛缩具有抑制活性的药物,     

原发性高血压患者红细胞膜Ca~(2+)—ATP酶活性的初步观察

细胞膜 Ca~(2+)—ATP 酶对细胞内 Ca~(2+)转运发挥泵的作用。本文观察了20例原发性高血压患者红细胞膜 Ca~(2+)-ATP 酶活性并与正常人比较,发现该酶话性明显低于正常人,提示高血压患者依赖 ATP 的 Ca~(2+)转运能力降低。并同时观察到高血压患者尿 Ca~(2+)排出量与正常人比较明显增加。     

TSH和Carbachol对甲状腺细胞内游离钙的动员作用

研究促甲状腺激素(TSH)和 Carbachol(Cch)对猪甲状腺细胞 Ca~(2+)的动员作用的结果表明,0.01～10mU/ml TSH 或10~(-5)～10~(-4)mol/L Cch 可引起甲状腺细胞[Ca~(2+)]急性升高.甲状腺细胞对 TSH 或 Cch 反应的敏感性在贴壁的单层细胞高于细胞悬液,在近汇合单层细胞高于汇合单层细胞。TSH 和 Cch 均能在无钙/EGTA 缓冲介质中刺激猪甲状腺细胞[Ca~(2+)]升高,提示此升高的[Ca~(2+)]源自细胞内储藏 Ca~(2+)的动员。     

磺脲类药物的临床选择及评价

磺脲类药物的作用机制是其对胰腺B细胞的促胰岛素分泌作用。磺脲类药物特异性结合于一接近胰腺B细胞上ATP敏感的K通道受体,从而使细胞膜去极化,导致细胞外Ca~(2+)通过电压依赖的Ca~(2+)通道进入细胞内,使胰岛素颗粒移向细胞表面,促进出胞作用。现在并不推荐将磺脲类药物用于青少年发病、易发酮症的胰岛素依赖型糖尿病,因为这类药物依赖于胰腺B细胞作用。加用磺脲类药物对胰岛素长期控     

枸杞多糖对缺氧损伤PC12细胞的保护作用

目的观察枸杞多糖对化学缺氧损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤株PC12细胞的保护作用,并探讨可能的作用机制。方法建立氯化钴(CoCl_2)诱导PC12细胞化学缺氧损伤模型,通过测定不同浓度枸杞多糖处理前后细胞活力、细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞内Ca~(2+)含量的变化,探讨枸杞多糖对缺氧损伤细胞的保护作用。结果对照组、缺氧模型组和100 mg/L枸杞多糖组的细胞存活率、细胞凋亡率和细胞内Ca~(2+)含量分别为(100.00±4.23)%、(48.54±5.59)%和(83.11±6.67)%,0.7%、76.8%和11.5%,(24.2±3.94)、(75.3±6.82)和(34.3±3.05),100 mg/L枸杞多糖组的细胞存活率明显高于缺氧模型组,而细胞凋亡率和细胞内Ca~(2+)含量均低于缺氧模型组,差异均有统计学意义(P0.05)。缺氧模型组PC12线粒体膜电位显著降低,为对照组的(43.2±2.46)%,100 mg/L的枸杞多糖组为(73.3±2.85)%,明显上升,差异有统计学意义(P0.05)。结论缺氧模型可抑制PC12细胞增殖并诱导细胞凋亡,枸杞多糖对缺氧损伤PC12细胞具有明显的保护作用,可能与增加细胞线粒体膜电位及降低细胞内Ca~(2+)含量有关。     

缺氧损伤对人脐静脉内皮细胞抗氧化能力、Ca~(2+)依赖的三磷腺苷酶活性、Ca~(2+)浓度及线粒体膜电位的影响

目的探讨缺氧损伤对离体培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)抗氧化能力、Ca~(2+)依赖的三磷腺苷酶(Ca~(2+)-ATPase)活性、线粒体膜电位(MMP)和细胞内Ca~(2+)浓度等的影响。方法将ECV304细胞分为正常组和缺氧组。正常组用无血清培养基培养,缺氧组用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)孵育ECV304细胞5 h,建立缺氧损伤模型。倒置显微镜下观察2组细胞形态的变化,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,流式细胞仪测定细胞周期、细胞凋亡、细胞内Ca~(2+)浓度及MMP的变化,化学比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量、一氧化氮(NO)分泌量及Ca~(2+)-ATPase活性。结果正常组细胞贴壁良好,细胞饱满、排列紧密,透明度好;缺氧组细胞出现皱缩,细胞间排列疏松、紊乱。缺氧组细胞吸光度值为0.91±0.12,低于正常组的1.30±0.25(P<0.05)。缺氧组G0/G1期细胞所占比例为(88.53±1.36)%,高于正常组的(81.27±0.25)%(P<0.05);S期细胞所占比例为(5.17±0.21)%,低于正常组的(6.07±0.25)%(P<0.05);缺氧组细胞凋亡率为(19.75±0.81)%,高于正常组的(9.83±1.77)%(P<0.05)。正常组MDA、GSH含量,一氧化氮(NO)分泌量,SOD、Ca~(2+)-ATPase活性分别为(0.40±0.23)、(3.85±0.18)、(14.21±0.39)μmol·L-1、(64.61±0.05)×103U·L-1、(18.90±1.09)U·mgprot-1;缺氧组以上各指标分别为(1.65±0.24)、(3.34±0.13)、(78.70±5.29)μmol·L-1、(35.33±0.04)×103U·L-1、(5.80±0.31)U·mgprot-1;与正常组相比,缺氧组细胞SOD活性、GSH含量及Ca~(2+)-ATPase活性均降低,MDA含量增加,NO分泌量升高(P<0.05)。缺氧组细胞内Ca~(2+)荧光强度为(572.82±49.40)%,高于正常组的(505.97±19.40)%(P<0.05)。缺氧组细胞MMP为(182.07±6.00)%,低于正常组的(217.60±16.40)%(P<0.05)。结论 Na2S2O4作用于ECV304细胞引起细胞缺氧损伤,其机制可能与MMP降低、细胞内Ca~(2+)浓度升高和细胞抗氧化能力及Ca~(2+)-ATPase活性减弱相关。