正常家兔小肠粘膜受体蛋白在1,25-二羟维生素D_3测定中的应用

本实验采用国产家兔(Oryctolagus cuniculus domestica中国本兔),用差速离心法从其小肠粘膜上提取出1,25-(OH)_2D_3受体蛋白。将此受体蛋白与来自佝偻病小鸡十二指肠粘膜的受体蛋白相对照,进行放射性竞争结合试验,并绘制出标准曲线。结果表明,兔小肠粘膜1,25-(OH)_2D_3受体蛋白与传统采用的佝偻病小鸡受体蛋白一样,可用于人血清1,25-(OH)_2D_3的放射性竞争结合测定,正常值为37±12pg/ml,与国外报道的结果一致。兔的受体蛋白Kd=0.054nmol/l,最大结合量为74fmol/mg蛋白质。因此,国产的正常家兔可作为受体蛋白的廉价来源用于1,25-(OH)_2D_3的研究和测定。     

人子宫肌瘤鞘糖脂的分离纯化及其薄层层析图谱

本文将手术切除的人子宫肌瘤及瘤旁正常肌组织纯化分离的神经节苷脂和中性鞘糖脂进行高效薄层层析,扫描结果发现子宫肌瘤较同一病人正常子宫肌的GD_3的%明显减少,GM_1、多唾液酸神经节苷脂有增高的趋势,而肌瘤的GM_3则有降低的趋向。子宫肌瘤及瘤旁组织的中性鞘糖脂薄层层析图谱相近似,均以红细胞糖苷脂(GbOse_4Cer)及三己糖苷神经酰胺(GbOse_3Cer)为主要成分,乳糖苷及半乳糖苷神经酰胺(Lac-Cer、Gal-Cer)二者的%都少。鉴于子宫肌瘤是激素依赖性肿瘤,这些鞘糖脂组分的改变在肿瘤发生过程中起什么作用,以及它们是否与女性激素作用有关,有待进一步研究。     

DMSO诱导的HL-60细胞分化后胞液Ca~(2+)浓度、磷酸化酶a和微粒体Ca~(2+)-ATP酶活性的改变

Ca~(2+)与肿瘤代谢有着极为密切的关系。本文测定了HL—60细胞经DMSO诱导分化前后胞液Ca~(2+)浓度、磷酸化酶a活性和微粒体Ca~(2+)—ATP酶活性。结果表明,DMSO加入HL—60细胞培养液后120h,细胞NBT染色阳性率为75％,细胞形态趋同于正常分化的细胞。同时,胞液Ca~(2+)浓度和微粒体Ca~(2+)—ATP酶活性明显降低,胞液磷酸化酶a活性则显著升高。结果提示,在DMSO作用下,HL—60细胞不仅吞噬功能增强,细胞内钙及与钙恒稳有关的酶活性也同时发生改变。     

胃液分析的进展

胃液分泌是在中枢神经系统调节下,由神经、体液和壁细胞等参与的一个非常复杂的过程。胃液为胃底、胃体及幽门窦的粘膜腺体所分泌,成份十分复杂,包括水分、盐酸、各种有机酸(如乳酸等)、氯化钠、氯化钾、粘液及各种酶类(如胃蛋白酶),以及造红细胞内因子(Castle内因子)等等。其中以游离盐酸及胃蛋白酶的消化作用最     

Scatchard图形的数学分析及其参数的电子计算机处理

Feldman 和 Buller 研究了配基-高分子互相作用的基本数学原理,而 Scatchard 图形常用来确定这种互相作用的参数。假如反应体系包括多种配基和多种结合位点,一种配基可以同 Q_1、Q_2……Q_m 等 m 种结合位点相结合,而一种结合位点又可以同 P_1、P_2……P_n 等 n 种配基相结合;每个反应假如都能独立地达到平衡,并且 P 和 Q、不同的 P 及不同的 Q 之间也是互相独立的;根据质量作用定律:     

pH对凝胶过滤分离乳酸脱氢酶的影响

Sephadex凝胶过滤是分离纯化酶的常用方法之一。人们早已知道,凝胶过滤法不能将蛋白质与其非共价结合的物质分离开。本文报道凝胶过滤分离乳酸脱氢酶时,pH所引起的蛋白质间聚合效应。材料与方法本实验所用Sephadex G-200(超     

组织神经节苷脂的简易快速薄层分离纯化法

组织神经节苷脂(Gls)传统的分析方法,是用薄层层析,在分析之前要先进行操作步骤繁杂的分离纯化。Harth等于1978年报告用组织粗提液直接点样于层析薄板,再以三种不同的溶剂系统展开的方法,得清晰的薄板层析图谱。它们的展开剂为:1.氯仿;2.氯仿-甲醇-水(70:30:4,V/V/V);3.氯仿-甲醇-0.25%KCl(60:35:8,V/V/V)。此法简便,但未能推广采用。根据我们的经验它未能推广的原因是粗提液颜色较深,对唾液酸测定干扰甚大,薄板上的点样量较难掌握。我们用硅胶G层析薄板(5×20厘米),将组织的氯仿-甲醇粗提液直接点样于其上,以Harth的前两种展开剂展开后,用问苯二酚显色,参考定位,刮下含Gls部分硅胶,经洗脱、离心、氮气吹干后,溶于C:M(1:1),以唾液酸含量为参数,点样于高效层析(HPTLC)薄板上,在氯仿-甲醇-0.15%CaCl_2(60:40:9,V/V/V)展开,可得良好的图谱。这一改良可去掉呈色物质,大大减少HPTLC板的用量,降低了成本,同时本法未经Folch分配,有可能获得比传统方法更为真实的结果。     

四氯化碳中毒大鼠肝脏Ca~(2 )-ATP酶和磷酸化酶a活性的研究

本实验采用雄性S.D.大鼠,经日一次灌注2.2ml/kg 四氯化碳,于染毒后12、24、48小时测定肝微粒体Ca~2 -ATP 酶和肝细胞液磷酸化酶a 活性变化。结果发现,染毒后大鼠肝微粒体Ca~2 -ATP 酶活性显著降低,以染毒后24小时为甚;肝细胞液磷酸化酶a 活性显著增高,以染毒后24小时为最高。说明四氯化碳致肝损伤时,肝内质网隔离钙的能力降低,胞液中钙浓度升高。本实验对于阐明四氯化碳中毒性肝病发病机理有一定的意义。     

人胃癌、乳腺癌组织中神经节苷脂的提纯及其薄层层析图谱的分析

本文比较分析了人胃癌和乳腺癌与对照组织中神经节苷脂(GLS)结合型唾液酸含量和GLS高效硅胶薄层层析图谱的差别。胃癌及乳腺癌组织中GLS结合型唾液酸含量较对照组织明显升高,分别为对照组织的1.4倍和2.8倍。胃癌组织的主要GLS组分与对照组相比虽无明显改变,但在移动距离相当于GD_(1a)—Gal NAc处出现一条小带,含量仅约4.7%,而在对照组织的GLS图谱中未见此带。乳腺癌组织的GLS图谱中,位于GD_3和GD_(1a)之间的一条带较对照明显增多,由3.7%增加到13.6%,实际含量增加9.7倍。同时,在GM_3和GM_2之间出现一条对照组织中没有的带,含量甚微,仅约为1.98%。     

促分化使肿瘤细胞逆转的生化研究——Ⅲ.硫杂脯氨酸类对H_(22)肝癌细胞中环核苷酸水平的影响

作者测定了在硫杂脯氨酸类药物作用下H_(22)肝癌细胞中cAMP和cGMP水平的变化。发现在该类药物作用下,小鼠H_(22)腹水肝癌细胞中cAMP水平有增高趋势,cGMP水平有下降趋势,cAMP/cGMP比值增高。