西红花酸对心肌细胞氧化应激性损伤的作用

目的：探讨西红花酸对心肌细胞氧化应激性损伤的效应。方法：采用过氧化氢(H2O2)诱导法制备大鼠培养心肌细胞氧化应激损伤模型，通过观察培养心肌细胞的形态，检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性及培养细胞台盼蓝摄取率，反映西红花酸对该模型的影响。结果：在本实验使用浓度范围内，H2O2损伤培养心肌细胞的作用呈浓度依赖性地增大；西红花酸则能减少该氧化应激细胞的形态学改变、降低培养液中LDH活性和胞内MDA含量、增加胞内SOD活性及减少细胞死亡数量。结论：西红花酸对H2O2，造成的培养心肌细胞氧化应激性损伤具有明显的保护作用。     

2,3,7,8-TCDD对培养乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度影响的研究

目的 测定培养SD大鼠乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度[Ca^2＋]i,观察2,3,7,8-四氯二苯并二噁英（2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,以下略为TCDD）对心肌细胞[Ca^2＋]i的影响。方法将实验动物分为0．05、0．5、5、10μg／kg4个染毒组,采用Fluo-3／AM同时加入Pluronic F-127作为细胞内游离钙离子的荧光探针,负载培养的心肌细胞,应用共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）技术检测空白组及染毒组乳鼠心肌细胞[Ca^2＋]i。结果静息时,心肌细胞[Ca^2＋]i为（77．68-4-12．00）nmol／L。染毒组心肌细胞的[Ca^2＋]i显示不同程度的升高,且呈剂量依赖性。结论应用Fluo-3／AM和Pluronic F-127结合CLSM技术可以精确的反映细胞内游离钙离子浓度,TCDD可能通过某种机制增加心肌细胞[Ca^2＋]i从而对乳鼠心脏功能产生一定损伤。     

肿瘤坏死因子诱导内皮细胞Ca^2＋时空变化的激光共聚焦显微测定

目的：研究肿瘤坏死因子（TNFα）对培养的单个内皮细胞内游离Ca^2 浓度[(Ca2 )i]的影响,以探讨TNFα介导休克的细胞机制。方法：人脐静脉内皮细胞株（ECV304）接种于35nm含有2ml DMEM培养基的组织培养盘中培养,TNFα诱导的单个内皮细胞[Ca^2 ]i时空变化由激光扫描共聚焦显微系统（LSCM）和Fluo-3/AM荧光探剂标记技术测定。结果：TNFα使单个内皮细胞[Ca^2 ]i呈剂量依赖性升高,在60s内达到峰值,然后下降并保持在基础水平之上。共聚焦扫描图像显示细胞核区[Ca^2 ]i升高比胞浆区明显,下降比胞浆区慢。结论：TNFα显著诱导内皮细胞[Ca^2 ]i升高,可能是TNFα介导休克和组织损伤的重要机制之一。     

吗啡对大鼠培养海马神经元钙离子作用机制的研究

目的 研究吗啡对海马神经元游离子浓度([Ca^2 ]i)影响的机制，探索吗啡成瘾的神经生物学机制及对吗啡成瘾可能的治疗途径。方法 运用新型荧光探针Fluo-4 , 利用激光共聚焦显微镜研究吗啡对大鼠培养海马神经元[Ca^2 ]i作用机制。结果 10μmol/L吗啡急性刺激引起海马神经元[Ca^2 ]i升高，μ阿片受体选择性拮抗剂CTOP（1μmol/L）不能阻断吗啡引起的细胞内[Ca^2 ]i增加，δ2阿片受体选择性拮抗剂Naltrindole(1μmol/L）阻断了吗啡引起的细胞内[Ca^2 ]i反应，特异性的内质网钙泵抑制剂Thapsigargin(TG,1μmol/L）预处理海马神经元组断吗啡引起的细胞内[Ca^2 ]i增加，L－钙通道阻断剂Verapamil(20μmol/L）预处理海马神经元不能完全抑制吗啡引起的细胞内[Ca^2 ]i增加；100μmol/L吗啡长时程（24h）作用于海马神经元，细胞内[Ca^2 ]i升高，加入10μmol/L纳络酮急性戒断后，不能阻断细胞内[Ca^2 ]i升高，反而引起[Ca^2 ]i异常升高。结论 吗啡急性刺激引起的海马神经元内钙增加主要来源于δ2阿片受体介导的IP3敏感的钙库释放。     

创伤后神经元细胞内游离钙的变化及其影响因素的研究

目的 研究液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内游离钙([Ca^2 ]i)的变化，探讨尼莫地平（Nimo-dipine)、D－2氨基戊酸（D－AP－5）和亚低温对创伤后细胞内[Ca^2 ]i的影响及其机制。方法 以Fluo-3/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂，用激光用聚焦显微镜测定液压冲击伤时体外培养的大鼠神经细胞内[Ca^2 ]i的变化。结果 液压冲击伤后脑皮质细胞内[Ca^2 ]i迅速升高，24h达高峰，随后逐渐下降，48h仍维持较高水平。Nimodip-ine、D－AP－5于各时相均降低细胞内[Ca^2 ]i，其中Nimodipine 10h内应用最佳，D－AP－5于1－10h之间应用较好，而亚低温30min内显著降低细胞内[Ca^2 ]i（P＜0.001），最佳时机在伤后15min内，伤后1h以上无效。创伤后 细胞内钙超载，Nimodipine、D－AP－5和亚低温均降低细胞内[Ca^2 ]i，但各自应用的最佳时间窗不同。结论 对创伤后神经细胞Ca^2 超载应注意综合治疗，并选定各自作用最佳时间窗。     

菊花防护晶状体上皮细胞氧化损伤及信号转导机制的实验研究

目的通过菊花影响过氧化氢（H2O2）氧化损伤的晶状体上皮细胞（LEC）内钙（Ca^2＋）、环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）信号转导的实验研究，探讨归肝经明目中药防治白内障的细胞和分子机制。方法将传代培养的牛LEC与H2O2共同孵育复制氧化损伤模型，同时加入菊花水提取液孵育后，四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测LEC活性、荧光分光光度法检测LEC内的钙离子浓度（[Ca^2＋]i）、放射免疫分析法检测LEC内cAMP和cGMP含量，探讨不同浓度菊花及孵育12h、24h和36h的影响。结果①H2O2组LEC活性下降，菊花使氧化损伤的LEC活性显著增高（P〈0．01），呈浓度依赖关系和时间依赖关系。（②H2O2组LEC的[Ca^2＋]i升高，菊花使氧化损伤所致的LEC的[Ca^2＋]i显著降低（P〈0.01），并呈时间-效应关系。③H2O2组LEC的cAMP浓度升高、cGMP浓度下降，菊花可使氧化损伤的LEC的cAMP水平显著降低（P〈0．01）、cGMP水平显著升高（P〈0．01），也呈时间-效应关系。结论通过[Ca^2＋]i、cAMP和cGMP信号转导系统及其相互作用调节生物学效应，可能是菊花防护LEC氧化损伤及减少细胞凋亡的细胞和分子生物学机制。     

蛋白酶激活受体-2介导A549细胞胞浆游离钙的释放

目的：研究蛋白酶激活受体(PAR)-2激动剂(SLIGKV和tc-LIGRLO)、胰蛋白酶及其抑制剂(SBTI、α1-AT)对A549肺上皮细胞胞浆内钙离子浓度([Ca^2 ]i)的影响。方法：用Fluo-3/AM荧光标记技术和激光扫描共聚焦显微镜检测不同因素处理的A549肺上皮细胞[Ca^2 ]i。结果：胰蛋白酶、SLIGKV、tc-LIGRIO均能引发A549肺上皮细胞[Ca^2 ]i的增加，平均荧光强度分别比加入试剂前增加92％，47％和130％。SBTI和α1-AT可抑制胰蛋白酶诱导的细胞[Ca^2 ]i的增加。结论：PAR-2可介导A549肺上皮细胞[Ca^2 ]i的释放增加，SBTI和α1-AT可抑制胰蛋白酶诱导的细胞[Ca^2 ]i的增加。     

幼鼠肺炎合并心衰的分子机制研究

目的：从细胞和分子水平揭示婴幼儿肺炎合并心衰的机制。方法：健康清洁级50日龄Wistar大鼠，经气管注射金黄色葡萄球菌菌液，建立肺炎动物模型；开胸获取心脏，进行双心室灌流，测定心肌酶谱和心功能指标；酶解分离出单个右室心肌细胞后，以Fura—2／AM负载细胞并对静息和收缩状态时细胞内[Ca^2 ]i进行荧光测定；采用全细胞式膜片钳技术记录右室心肌细胞L型钙电流；采用高效液相色谱仪测定心肌组织腺苷酸含量。均采用气管内注射等量生理盐水的同龄Wistar大鼠作为对照。结果：1、肺炎组动物心肌酶谱显著增高。2、肺炎组和对照组的左、右心室功能均随前负荷升高而增强；在同一负荷下，右心室功能均低于对照组。3、静息状态下肺炎组右室心肌细胞内[Ca^2 ]i随病程显著增高；收缩时Ca^2 含量增加比率显著低于对照组。4、接种后24h的肺炎组L型钙通道电流峰值无显著变化；120h时显著高于对照组。5、接种后120h。心肌组织腺苷酸含量显著低于对照组。结论：采用气管内接种的方法所建立肺炎动物模型是有效的；肺炎可以合并心衰．尤其是右心衰竭为主；重症肺炎时心肌细胞出现能量代谢障碍；静息期心肌细胞内[Ca^2 ]i增高，而收缩状态下Ca^2 含量增加比率下降，可能是心肌细胞舒张、收缩功能障碍的重要机制；心衰后期，心肌细胞跨膜钙内流增大，可能是病变发展的重要机制。     

重组人透明带3肽段rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发顶体反应及其机制

目的探讨大肠杆菌重组表达的rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348生物学特性和功能，研究rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348能否诱发人精子顶体反应及其相关机制。方法rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发人精子顶体反应用金霉素染色法进行评价，同时研究了G特异蛋白抑制剂白日咳毒素（PTX）、钙离子螯合剂EGTA和T型钙通道抑制剂pimozide对rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发人精子顶体反应的影响；同时用荧光分光光度计监测rhuZP3a^22-176或rhuZP3b^177-348刺激获能精子胞内钙（[Ca^2＋]i）浓度的变化。结果不同浓度的rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348均能诱导人精子AR，其中rhuZP3a^22-176诱导人精子AR呈浓度依赖方式。PTX、EGTA和pimozide可以分别抑制rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发的顶体反应。rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发的顶体反应是由于刺激获能人精子[Ca^2＋]i升高所致，但rhuZP3a^22-176诱发[Ca^2＋]i升高的方式与rhuZP3b^177-348诱发[Ca^2＋]i升高方式不尽相同，rhuZP3a^22-176只能引起[Ca^2＋]i升高，而rhuZP3b^177-348既有[Ca^2＋]i升高，又伴有持续升高。上述精子[Ca^2＋]i升高可被EGTA和pimozide抑制。结论rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348通过激活G蛋白使胞外钙通过T型钙通道内流促使[Ca^2＋]i上升，从而引起精子顶体反应，这与人类天然ZP3诱导顶体反应作用相似。     

牛磺酸对阿霉素中毒心肌细胞的保护作用

目的 应用阿霉素（ADR）建立心肌细胞中毒模型,观察牛磺酸（Tau）对中毒心肌细胞的保护作用并探讨其机制。方法 将培养72h后的新生大鼠心肌细胞分为对照组、ADR组和ADR Tau组,继续培养24h后,MTT法测定心肌细胞存活力,并测定细胞内丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及细胞内游离钙离子浓度([Ca^2 ]i)。结果 Tau能够增强ADR中毒心肌细胞存活力,降低心肌细胞MDA含量及[Ca^2 ]i,同时升高细胞内SOD活性。结论 Tau能够对抗氧自由基引起的脂质过氧化和逆转细胞内钙超载,从而保护ADR中毒心肌细胞。     

抗人胸腺细胞单克隆抗体2G_2B_2和2G_2C_2的制备及特性鉴定

用杂交瘤技术制备２株单克隆抗体（单抗）２Ｇ２Ｂ２、２Ｇ２Ｃ２。经研究发现,它们主要与胸腺细胞、脐血及ＰＨＡ激活的外周血单个核细胞等反应;免疫组化显示其主要作用于皮质胸腺细胞;与造血系统中分化早期的瘤细胞、骨髓瘤细胞等反应阳性率较高。生物学特性鉴定结果提示,单抗均属免疫球蛋白ＩｇＧ１亚类,腹水效价达１：１２８０００,所识别抗原分子量为４５／４６ＫＤａ,无抗原调变作用。故２Ｇ２Ｂ２、２Ｇ２Ｃ２是类似ＯＫＴ１０的抗ＣＤ３８单抗,但竞争抑制结果表明三者分别作用于不同的抗原决定簇,即２Ｇ２Ｂ２、２Ｇ２Ｃ２是两个抗ＣＤ３８新单抗。     

CHADS_2/CHA_2 DS_2-VAS_C评分的应用

临床上CHADS2评分和CHA2DS2-VASC评分主要用来对非瓣膜性心房颤动(房颤)血栓栓塞的风险进行评估。由于CHA2DS2-VASC评分系统更为全面,并能筛选出不需要抗凝治疗的"真正的低危患者",因此现多应用此评分系统。然而,两种评分系统所包含的危险因素同样适用于其他心血管疾病,两者也可以被用来对房颤风险、左心房功能进行评估,同时也可对非房颤患者进行预后评估。     

评价房颤CHADS2评分及其衍生评分对冠心病及其严重程度的预测价值

目的：探讨房颤评分系统CHADS2(欧洲)评分及其衍生评分对冠心病及其严重程度的预测价值。方法纳入2013年1月1日-2013年12月1日就诊于本院心血管内科怀疑冠心病并行冠状动脉造影检查的连续病例429例,根据其造影结果分为对照组(n=51)及冠心病组(n=378)。根据患者的临床资料计算其CHADS2、CHA2DS2-VASc和CHA2DS2-VASc-HSF评分,根据其冠状动脉造影结果计算Gensini积分评价其病变严重程度,并对3种评分的冠心病预测能力进行评价。结果 CHADS2、CHA2DS2-VASc和CHA2DS2-VASc-HSF评分与病变支数(r=0.317,P＜0.01;r=0.332,P＜0.01;r=0.330,P＜0.01)及Gensini积分均有一定相关性(r=0.240,P＜0.01;r=0.274,P＜0.01;r=0.295,P＜0.01)。截断点分析显示, CHA2DS2-VASc-HSF评分≥3对冠心病的预测价值最高,其灵敏度、特异度、曲线下面积分别为0.860、0.804、0.832(95%CI：0.766~0.898)。结论 CHADS2及其衍生评分对冠心病有一定的预测价值,尤其是CHA2DS2-VASc-HSF评分≥3对冠心病有较高的预测价值。     

Li_2O-Na_2O-Al_2O_3-SiO_2系玻璃中的Na~+自扩散

应用放射性同位素法,研究了xLi_2O·(31.8-x)Na_2O·5.8Al_2O_3·62.4SiO_2(mol%)系玻璃中的Na~+自扩散温度范围为250～450℃。从实测数据,用数值法与图解法求得Na~+的自扩散系数D_(Na)~*。根据玻璃的组成和扩散温度,D_(Na)~*值变化于8.8×10~(-8)～1.1×10~(-11)cm~2s~(-1)。随着玻璃中Na_2O含量的减少,D_(Na)~*逐渐降低,显示明显的双碱效应。由不同碱离子的Dietzel场强之差,讨论了这种双碱效应。D_(Na)~*随温度指数上升,符合Arrhenius方程。据此方程,应用最小二乘法,获得扩散活化能E和指数前项D_o,E值约为79～91kJ/mol。     

论互补性在医护关系中的核心作用

医生和护士无论在职业特点还是在工作内容上都是两个独立的职业,相互不能替代,在医疗过程中也都不能缺少。但医护工作分工不分家,如何处理好医护关系,则要求护士与医生之间既分工又合作,协调配合,相互帮助,相互尊重,从而体现了互补性在医护关系中的核心作用。１互...     

HgI_2-Ag_2S-As_2S_3硫系玻璃离子选择电极

研究了适合作为离子选择电极的HgI_2-Ag_2S-As_2S_3和HgS-Ag_2S-As_2S_3系统的玻璃形成区。通过对这些玻璃性质与结构分析,发现xHgI_2·(100-x)(0.5Ag_2S·0.5As_2S_3]系列玻璃是很好的传感膜材料。采用该系列玻璃制成了对Ag~+离子10~(-6)～10~(-1)mol/L浓度范围具有能斯特响应斜率60mV/mol·L~(-1)和对Hg~(2+)离子10~(-6)～10~(-1)mol/L浓度具有能斯特斜率30mV/mol·L~(-1)的电极。这些电极具有优良的电化学性能。结合非晶态固体电解质的离子迁移模型,提出了这类硫系玻璃屯极的响应机理。     

过氧化氢对人肝癌细胞株HepG2增殖的促进作用

目的:探讨低剂量过氧化氢(H2O2)对人肝癌细胞株HepG2的促增殖作用及该作用与NF-κB和细胞周期的关系. 方法: 不同剂量H2O2直接作用于培养的HepG2细胞;20 μmol/L NF-κB抑制剂(PDTC)预处理细胞2 h, 50 μmol/L的H2O2作用HepG2细胞;50 μmol/L H2O2分别作用于G1, G2/M, S期细胞,MTT法测定细胞增殖活性. 结果: 50 μmol/L的H2O2具有明显的促进HepG2细胞生长的作用,此作用可以被PDTC抑制;50 μmol/L的H2O2可以明显的促进G1期HepG2细胞生长. 结论: 低剂量H2O2可诱导HepG2细胞增殖,该过程可能包含依赖NF-κB的信号途径的参与;H2O2诱导HepG2细胞增殖在细胞周期的不同时相效应敏感性不同,主要诱导G1期细胞增殖.     

2－EHA促癌性及慢性二步致癌实验

建立了Ｓｋｈ／ＨＲ－１裸鼠皮肤慢性二步致癌实验模型。实验鼠在一次涂抹发癌剂ＤＭＢＡ之后，连续１９周涂抹阳性促癌对照物（ＴＰＡ）及试验促癌物（２－ＥＨＡ），经过４０周实验观察，ＴＰＡ促癌作用得以复制；２－ＥＨＡ在１％，５％，１０％，２０％浓度范围内，表现明显的剂量－反应关系，各组动物平均患瘤数和患瘤率显著高于阴性对照组，在高剂量组，发生皮肤小瘤恶变为鳞状上皮癌。     

吸光系数法测定二氯二茂钛原料药的含量

采用吸光系数法对二氯二茂钛原料药进行含量测定。３９１ｎｍ处测得Ｅ１％１ｃｍ＝９８．３２,平均回收率为９８．７７％～１０１．７４％。相对标准差ＲＳＤ＝０．１２％～０．６６％。测定不同温度,湿度下放置不同时间原料药的含量。与工作曲线法相比。两者之间无显著性差异。