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1.
2.
目的 通过观察人参-三七-川芎提取物(GNC)对过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老中线粒体氧化应激的影响,探讨GNC对衰老HUVECs的治疗机制。方法 本研究以HUVECs作为研究对象,H2O2诱导内皮细胞衰老作为模型,实验分为空白组,H2O2组,H2O2+DMSO组(DMSO),白藜芦醇组(Resv)及GNC提取物低(GNC-L),中(GNC-M),高(GNC-H)质量浓度组,除空白组,H2O2组外,其余各组分别给予DMSO 1 mL·L-1,Resv 8 μmol·L-1,GNC 400,300,200 mg·L-1药物干预,24 h后除空白组外给予300 μmol·L-1 H2O2诱导HUVECs衰老,再给予正常培养基培养24 h。采用衰老特异性β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法鉴定细胞衰老程度,流式细胞仪分析细胞周期,采用Mito SOX RED荧光染色法测定细胞内线粒体活性氧(mtROS)水平,以JC-10为荧光探针检测细胞内线粒体膜电位变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测含锰超氧化物歧化酶(MnSOD)与磷酸化(p-)p66的蛋白表达。结果 SA-β-gal染色结果显示,与空白组比较,H2O2组SA-β-gal染色蓝染细胞显著增多(P<0.01);与H2O2组比较,各浓度组SA-β-gal染色蓝染细胞显著减少(P<0.01);细胞周期结果显示,与空白组比较,H2O2组G0/G1期细胞数量比例明显增多(P<0.05),G2/M期细胞比例明显减少(P<0.05);与H2O2组比较,GNC各组及Resv组G0/G1期细胞数量比例明显减少(P<0.05),GNC-H组,Resv组在G2/M期细胞比例明显增加(P<0.05)。线粒体ROS荧光结果显示,与空白组比较,H2O2组强度明显减弱(P<0.05);与H2O2组比较,GNC-H,GNC-M组强度明显增高(P<0.05);线粒体膜电位结果显示,与空白组比较,H2O2组荧光强度显著下降(P<0.01);与H2O2组比较,GNC-H,GNC-M,GNC-L组线粒体膜电位荧光强度显著增高(P<0.01),Resv组明显增高(P<0.05);Western blot结果显示,与空白组比较,H2O2组MnSOD含量明显降低(P<0.05);与H2O2组比较,GNC-H与GNC-M组表达明显增多(P<0.05);与空白组比较,H2O2组p-p66含量显著增高(P<0.01);与H2O2组比较,各用药组表达显著降低(P<0.01),表明用药后可减轻细胞内线粒体氧化应激反应。结论 中药人参-三七-川芎提取物可以延缓H2O2诱导的血管内皮细胞的衰老,药物干预后,细胞线粒体活性氧、线粒体膜电位及相关蛋白MnSOD,p-p66蛋白发生明显改善,氧化应激反应减轻,其机制可能是中药通过抑制线粒体氧化应激反应延缓血管内皮细胞衰老的进程。 相似文献
3.
目的:观察人参-三七-川芎提取物对延缓内皮微粒(EMPs)诱导的血管内皮细胞衰老的影响,并探索其作用机制。方法:以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究对象,复制性衰老10~12代细胞作为衰老模型,实验分为年轻组(2~4代细胞)、衰老组(10~12代细胞)、单纯EMPs干预组(提取衰老细胞产生的EMPs来干预年轻细胞)以及中药低、中、高剂量组(200,300,400 mg·L-1)。结合衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法和碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期来判断细胞衰老程度。采用细胞活性和细胞增殖检测(CCK-8)法筛选给药浓度,两步离心法分离出EMPs,藻红蛋白(PE)CD31抗体或异硫氰酸荧光素(FITC)Annexin V标记分离得到的EMPs,并用流式细胞术进行定量,2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFDA)染色检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果:与衰老组比较,中药给药组可显著降低衰老细胞SA-β-gal活性(P<0.01),使细胞周期S期阻滞得到恢复(P<0.01),并降低衰老细胞分泌CD31+EMPs及Annexin V+EMPs的数量(P<0.05)。与年轻组比较,单纯EMPs干预组可诱导年轻细胞SA-β-gal活性增强(P<0.01),细胞周期阻滞于S期(P<0.05),与衰老组比较,但在EMPs干预的同时给予中药干预后,可明显抑制EMPs介导增强的SA-β-gal活性(P<0.05),并使S期阻滞得到恢复。中药组还可明显抑制EMPs诱导的细胞内ROS增高(P<0.05,P<0.01)。结论:人参-三七-川芎提取物可通过影响EMPs延缓复制性血管内皮细胞衰老,其机制可能与抑制EMPs诱导的细胞内ROS水平增高有关。 相似文献
4.
5.
6.
目的 观察四君子汤含药血清对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)凋亡的抑制作用,从而探讨四君子汤防治老年性白内障的机制。方法 30只SD大鼠随机分为2组,分别用四君子汤(1.725 g·kg-1·d-1)和生理盐水灌胃,用药7 d后经腹主动脉采血,离心提取四君子汤含药血清和空白血清冻存备用。细胞实验分为4组:阴性对照组、过氧化氢组(300 μmol·L-1过氧化氢作用4 h)、空白血清组(300 μmol·L-1过氧化氢作用4 h后加入体积分数20%空白血清作用12 h)和四君子汤含药血清组(300 μmol·L-1过氧化氢作用4 h后加入体积分数20%四君子汤含药血清作用12 h),流式细胞仪检测HLEC细胞周期;透射电子显微镜观察各组HLEC超微结构的改变。结果 流式细胞仪检测结果示:过氧化氢组G1期细胞比例为(67.127±2.615)%,较阴性对照组明显增加,S期细胞比例为(24.603±2.547)%、 G2期细胞比例为(8.270±1.149)%,均较阴性对照组减少,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。四君子汤含药血清组G1期细胞比例为(41.517±20.008)%,较过氧化氢组明显减少,S 期细胞比例为(38.423±10.213)%、G2期细胞比例为(20.060±11.004)%,均较过氧化氢组明显增加,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。透射电子显微镜结果显示:阴性对照组胞膜完整,各细胞器结构正常;过氧化氢组细胞表面微绒毛消失,染色质凝集成块分布于核膜下,核膜欠完整,细胞质内可见溶酶体;空白血清组细胞质内空泡增多,线粒体、内质网等细胞器结构仍可见;四君子汤含药血清组胞膜完整,细胞质内可见少许空泡,线粒体、内质网等细胞器结构清晰。结论 四君子含药血清能有效抑制过氧化氢诱导的HLEC凋亡,这可能是四君子汤防治老年性白内障的机制之一。 相似文献
7.
8.
[目的]观察细节护理应用于增强CT扫描中减少和预防碘佛醇的渗漏发生的效果。[方法]选取2014年11月—2015年4月行增强CT扫描的病人528例作为观察组,选取2014年5月—2014年10月行CT增强扫描的528例病人为对照组,在高压泵注射碘佛醇前后,对照组给予常规护理,观察组在常规护理的基础上给予细节护理,观察两组病人碘佛醇渗漏发生率。[结果]观察组、对照组碘佛醇渗漏发生率分别为1.70%和3.79%,经比较差异有统计学意义(P0.05)。[结论]对行增强CT扫描的病人给予病人常规护理的同时给予细节护理,可降低碘佛醇渗漏发生率。 相似文献
9.
目的:了解本院妇科门诊患者对宫颈癌筛查的认知状况及参与情况,分析其影响因素,探讨宫颈癌机会性筛查在门诊应用的意义。方法:选择2015年度在本院妇科门诊初诊的本地户籍患者,接受宫颈癌机会性筛查同时完成调查问卷1 208份。结果:门诊妇女对宫颈癌筛查总体知晓率为38.1%。城区妇女对宫颈癌筛查认知度高于县乡妇女,不同文化程度的妇女对宫颈癌筛查认知度不同,差异均有统计学意义。从未参加过宫颈癌筛查及不规律参加宫颈癌筛查者分别占50.3%、43.2%。结论:大多数妇女对宫颈癌筛查认知度低,应制定适合不同层次人群的健康宣教措施,提高宫颈癌筛查认知度和参与率,以早期发现宫颈癌及癌前病变,同时在医院开展宫颈癌机会性筛查可作为基层普查外的有益补充。 相似文献
10.
目的 探讨妇产康复治疗仪在产妇产后康复护理中的临床疗效.方法 将100例初产妇随机分为观察组和对照组,对照组产后常规护理,观察组在对照组的基础上使用妇产康复治疗仪,比较两组产后的恢复情况.结果 观察组产后宫缩痛持续时间、排尿时间、泌乳始动时间、恶露持续时间显著短于对照组,产后出血量显著少于对照组,宫缩痛评分、宫底高度低于对照组,睡眠质量好于对照组(P<0.05).观察组在生理、心理、社会环境、文化方面的舒适度均显著高于对照组,护理满意度显著高于对照组(P<0.05).结论 产妇康复治疗仪能显著促进产妇产后康复,减少并发症,提高住院舒适度和护理满意度. 相似文献